胰岛素与血小板L-精氨酸/一氧化氮系统

胰岛素抵抗在2型糖尿病和代谢综合征中占有核心地位。大多数研究认为胰岛素有直接抑制血小板活化的作用,且主要是通过L-精氨酸/一氧化氮系统增加血小板内cGMP水平来抑制血小板聚集的。目前已经发现血小板也会发生胰岛素抵抗。而且血小板发生胰岛素抵抗可能存在多个环节。本文主要探讨胰岛素和血小板L-Arg/NO系统间的关系及胰岛素抵抗时血小板L-Arg/NO系统的改变。

氮甲基左旋精氨酸对大鼠油酸型急性肺损伤时一氧化氮与丙二醛的影响及其保护作用的实验研究

目的 研究氮甲基左旋精氨酸 (N -momonethyi -L -arginine ,L -NMMA)对大鼠油酸型急性肺损伤 (ALI)时一氧化氮 (NitricOxide ,NO)与丙二醛 (Malondialdehyde ,MDA)的影响及其保护作用。方法 以 30只Wistar大鼠为实验动物 ,用油酸建立ALI的动物模型。把实验动物随机分为 3组 :正常组、损伤组和L -NMMA组 (以下简称为用药组 )。观察肺组织病理组织学改变、动脉血氧分压 (PaO2 )、肺水含量及动脉血浆中NO与MDA的变化。结果 用药组与损伤组比较 ,肺间质充血、出血、炎症、肺泡水肿明显减轻 ,而且未见透明膜形成 ;用药组与损伤组比较 ,动脉PaO2 明显提高 (P <0 0 1) ,而肺水含量明显减少(P <0 0 5 ) ;血浆中NO与MDA水平用药组与损伤组比较明显降低 (P <0 0 1)。结论 L -NMMA是通过抑制大量的NO和氧自由基的产生而对油酸型ALI起保护作用。

^ωN—硝基左旋精氨酸对大鼠脑缺血后脑区一氧化氮生成的影响

用荧光法研究ωN－硝基左旋精氨酸（L－NNA）对大鼠脑缺血后大脑皮层、海马、纹状体和小脑中一氧化氮（NO）的变化，结果显示L－NNA可明显减少缺血10min不同脑区NO的含量（P＜0．05或P＜0．01）；左旋精氨酸可部分逆转L－NNA的作用，使NO的含量增加（P＜0．05或P＜0．01）。提示L－NNA可减少脑缺血时NO的过量生成而具有潜在的治疗作用。

左旋精氨酸/一氧化氮_(L-ARG/NO)对胃肠道功能的调节作用

一氧化氮(NO)是一氧化氮合成酶(NOS)作用于底物左旋精氨酸(L—ARG)所合成,化学性质极不稳定。在体内它主要产生于血管内皮细胞、血管平滑肌细胞、枯否氏细胞及巨噬细胞。NOS可分为结构型(cNOS)和诱导型(iNOS)两类。左旋精氨酸甲酯(1—NAME)、N—甲基左旋精氨酸(L—NMMA)

长期低剂量微波辐照对大鼠血小板的L-精氨酸/NO系统的影响

目的:研究长期低剂量微波对大鼠血小板左旋精氨酸/一氧化氮(L-arginine nitric oxide pathway,L-Arg/NO)系统的影响,为长期暴露于低剂微波下血小板功能的影响提供实验依据。方法:采用峰值功率为5W/cm2的微波辐照健康成年雄性SD大鼠,1小时/天,连续40天,而后检测辐照后大鼠尾部出血时间、血清NO(nitric oxide)含量、血小板源性NO(platelet-derived nitric oxide,PDNO)含量及血小板一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)活性的变化。结果微波辐照组与对照组相比,尾部出血时间显著缩短(P<0.01),血清NO含量、PDNO含量及血小板NOS活性均有非常显著的降低(P<0.01)。结论:长期低剂量微波辐照后NO的抗血小板聚集作用减弱,血小板活化与血小板L-Arg/NO系统功能紊乱有关。

硝基左旋精氨酸甲脂对碱烧伤后角膜新生血管作用的实验研究

目的:探讨碱烧伤后角膜新生血管形成过程中诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)的表达及作用;观察局部应用硝基左旋精氨酸甲脂(LNAME)对角膜新生血管形成的影响。方法:采用碱烧伤诱导角膜新生血管模型,将50只SD大鼠随机分成5组:A组为治疗I组,B组为治疗Ⅱ组,C组为治疗Ⅲ组,D组为对照组和E组为正常组。治疗组(A、B、C组)碱烧伤后分别滴用0.3%,1%,3%的硝基左旋精氨酸甲脂滴眼液,对照组(D组)滴赋形剂,E组滴用30g·L-1的硝基左旋精氨酸甲脂滴眼液。采用裂隙灯照相,免疫组化染色,多媒体彩色图像病理分析系统分别计算8h、1,4,7,14,28d共6个不同时间点的角膜新生血管面积和诱导型一氧化氮合成酶免组染色的平均光密度值。并观察局部用药的毒副反应。结果:碱烧伤后大鼠角膜上诱导型一氧化氮合成酶主要表达于基质层中浸润的炎性细胞和新生血管内皮细胞。iNOS的表达与角膜新生血管面积在治疗组B、C组与治疗组A和对照组之间在统计学上的差异有显著意义(P<0.05)。重复局部给药良好耐受。结论:局部应用LNAME对炎性角膜新生血管有一定的治疗作用;iNOS表达水平与炎性角膜新生血管明显相关;局部应用LNAME无明显毒副作用,是安全有效的给药方式。

左旋精氨酸及硝基左旋精氨酸对内毒素休克大鼠转归的影响

目的 一氧化氮 (NitricOxide ,NO)在感染性休克中具有多种作用 ,但其对休克转归的影响目前仍不清楚。本研究用NO产生的前体物质L arg和其抑制剂NNLA从正反两个方面探讨其对内毒休克大鼠转归的影响。方法 实验大鼠分为生理盐水对照组 (NS)、内毒素 (10mg/kg ,ip)组 (ETX)、内毒素 +NNLA(4mg/kg ,ip)组、内毒素 +L arg(40mg/kg ,ip)组和内毒素 +NNLA +L arg组。上述处理后 ,测定大鼠不同时间的平均动脉压 (meanarterialpressure ,MAP)、血浆NO水平 (NO-2 /NO-3 )以及 2 4小时存活率。结果 内毒素休克大鼠 ,血浆NO-2 /NO-3 明显增加 ,同时MAP降低 ,NNLA虽可抑制NO产生 ,升高MAP ,但显著降低12小时和 2 4小时存活率 ;而L arg虽不能升高MAP ,但可使其维持稳定 ,且 2 4小时存活率明显提高。 结论 在本实验条件下 ,NO对内毒素休克可能有有利作用 ,抑制NO合成则对休克的转归不利。

N^ω硝基左旋精氨酸甲酯对大鼠海马CA1区毛细血管的影响

目的探讨Nω硝基左旋精氨酸甲酯(Nω-nitro-左旋精氨酸methyl ester,L-NAME)对大鼠空间学习、记忆能力和海马CA1区毛细血管的影响。方法内导管成功埋植后,阻断剂组(L-NAME组)大鼠每日给予5μL的1μmol/μL L-NAME侧脑室注射,对照组(Sham组)每日给予5μL生理盐水侧脑室注射,持续4周。然后用Morris水迷宫测试大鼠空间学习和记忆能力,用试剂盒检测海马组织中NOS活性及NO含量,用体视学方法测定海马和海马CA1区总体积、海马CA1区毛细血管总长度、总表面积和总体积。结果水迷宫实验中L-NAME组的潜伏期显著长于Sham组(P=0.006);L-NAME组海马组织中的NOS活性及NO含量均显著低于Sham组(P<0.01);L-NAME组海马体积、CA1区体积与Sham组比较差异无统计学意义(P>0.05);L-NAME组CA1区毛细血管总长度、毛细血管总表积、毛细血管总体积均较Sham组显著减少(P<0.05)。结论 L-NAME可以导致大鼠空间学习、记忆能力下降和大鼠海马CA1区毛细血管总长度、总表面积以及总体积减少。

非对称二甲基精氨酸、N-单甲基左旋精氨酸与慢性肾脏疾病并发心血管疾病关系的研究进展

综述非对称二甲基精氨酸(ADMA)和N-单甲基左旋精氨酸(L-NMMA)与慢性肾脏疾病(CKD)并发心血管疾病(CVD)的关系,以及血浆ADMA和L-NMMA的生成,降解代谢过程。ADMA和L-NMMA是内源性一氧化氮合酶的抑制剂,可以减少一氧化氮的生成,同时增加活性氧的生成,血浆ADMA和L-NMMA浓度可以作为CKD以及高血压、冠心病、心力衰竭等疾病的独立危险预测因子,体内ADMA和L-NMMA可以通过二甲基精氨酸二甲胺基水解酶降解或者肾脏排泄。

氨氯地平对高胆固醇大鼠心肌缺血再灌注时一氧化氮合酶的影响

目的 :探讨高胆固醇血症大鼠心肌缺血 再灌注损伤时氨氯地平对内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)和诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)在冠脉血管内皮表达的影响。方法 :雄性Wistar大鼠分 4组 :单纯高胆固醇血症组 ;氨氯地平组 ;氨氯地平 +N 甲基亚硝基左旋精氨酸甲酯组 ;氨氯地平 +假手术组。大鼠经高胆固醇喂养 6周后 ,开胸结扎左冠状动脉 ,缺血30min后 ,行再灌注 2 0min、2h。分别用免疫组织化学ABC法检测冠脉血管内皮eNOS和iNOS的表达水平。结果 :缺血前 ,氨氯地平可显著降低冠脉血管内皮iNOS表达 (P <0 .0 1)。缺血 30min ,高胆固醇血症组eNOS、iNOS表达明显减少 (P <0 .0 1) ,氨氯地平组eNOS表达上调 (P <0 .0 1) ,iNOS下调 ;再灌注 2 0min时 ,高胆固醇血症组冠脉血管内皮表达iNOS增多 ,氨氯地平组eNOS、iNOS表达明显下调 ;再灌注 2h时 ,氨氯地平组NO水平及eNOS、iNOS表达较高胆固醇血症组轻度降低。各时相点L NAME均可部分阻断氨氯地平对eNOS、iNOS的效应。结论 :在高胆固醇血症时、缺血期及再灌注早期 ,氨氯地平可调节eNOS、iNOS表达 ,减少心肌缺血 再灌注损伤。

一氧化氮合酶抑制剂在噪声性听力损伤中的保护作用

目的本实验探讨一氧化氮合酶抑制剂 N-硝基左旋精氨酸甲酯(N^G-nitro-L-arginine methyl ester,L-NAME)在噪声损伤中的作用。方法将豚鼠(体重350～400 g)随机分为无噪声对照组(n=20)、噪声+生理盐水组(n=20)、噪声+L-NAME 组(n=20)。噪声刺激(4 kHz 倍频程,115 dB SPL 5 h)结束72 h 后,测试脑干诱发电位(auditory brainstem responses,ABRs),制备耳蜗组织匀浆测 NO 的水平,用免疫组化观察诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide,iNOS)在耳蜗的活性。结果无噪声组动物听阈无明显变化;噪声刺激后生理盐水组听阈上升的幅度明显高于 L-NAME 组(P<0.05);噪声+生理盐水组耳蜗 NO 含量明显高于对照组(P<0.05)与噪声+生理盐水组相比,噪声+L-NAME 组耳蜗 NO 含量明显减少(P<0.05)。噪声刺激后,噪声+L-NAME 组iNOS 活性强度弱于生理盐水组。结论 iNOS 催化合成的 NO 参与噪声对耳蜗组织的损伤;L-NAME 可通过抑制 iNOS 活性对噪声性听力损伤(noise induced hearing loss,NIHL)发挥保护作用。

一氧化氮合酶抑制剂对小鼠肺癌血管形成的影响

将Lew is肺癌细胞接种于雄性C57小黑鼠前肢腋下,皮下成瘤后,将小鼠随机分成对照组和治疗组,两组分别腹腔注射生理盐水及硝基左旋精氨酸甲基酯(L-NAME),持续14 d。接种第15天检测血清NO含量;处死小鼠,剥离肿瘤称取瘤组织质量、光镜下观察肺内转移灶、测微血管密度(MVD)。结果对照组与治疗组瘤组织质量分别为(2.59±0.31)、(1.80±0.33)g,MVD分别为24.06±5.42、16.97±2.86,NO含量分别为(33.26±12.53)、(14.56±7.14)μmol/L,两组比较均有统计学差异(P均(0.05)。光镜下观察两组肺内转移情况无明显差异。认为L-NAME对小鼠肺癌血管形成有抑制作用,进而抑制肿瘤生长;Lew is肺癌可能转移较少或出现较晚。

大鼠脑缺血再灌流时L-NNA对脑区一氧化氮生成的影响

４０只ＳＤ大鼠随机分为假手术组，脑缺血１０ｍｉｎ组，脑缺血１０ｍｉｎ再灌流１５ｍｉｎ组和脑缺血１０ｍｉｎ再灌注１５ｍｉｎ＋Ｎ－硝基左旋精氨酸（Ｌ－ＮＮＡ）组，采用荧光法测定大鼠４个脑区（大脑皮质，海马，纹状体和小脑）ＮＯ２的变化。结果显示，脑缺血１０ｍｉｎ组，各脑区ＮＯ２的含量明显高于假手术组（Ｐ〈０．０１），脑缺血１０ｍｉｎ再灌流１５ｍｉｎ组，各脑区ＮＯ２的含量高于脑缺血１０ｍｉｎ组（Ｐ〈０．

生殖领域一氧化氮研究的近期进展

NO是一种具有多种生物学潜能的简单化学分子。NO由NO合成酶催化精氨酸合成,N—氮—L—精氨酸可以抑制NO合成酶的活性。NO合成受细胞因子影响,除作为免疫反应中的效应分子外,它还可能参与睾丸微循环血管运动的调节,精子的获能过程,卵巢颗粒—黄体细胞和卵泡壁细胞类固醇激素的合成调节,以及绝经期妇女心血管病的发生。

胃肠舒对盐酸左旋精氨酸致大鼠胃肠动力障碍的影响

目的:探讨胃肠舒促胃肠动力的作用机制。方法:选择SD大白鼠随机分为正常对照组、左旋精氨酸(L-Arg)对照组、L-Arg加西沙比利组、L-Arg加胃肠舒组。除正常对照组外,其余3组ip盐酸左旋精氨酸,各组分别给等容积的受试药物ig,眼底球后静脉采血,放射免疫法测定血浆胃动素(MTL),硝酸还原酶法测定血清一氧化氮(NO)。结果:L-Arg加胃肠舒组较L-Arg对照组血浆MTL显著升高(P<0.05),血清NO显著降低(P<0.01)。结论:胃肠舒促胃肠动力的作用机制可能是通过升高血浆MTL和降低血清NO含量,使胃肠平滑机细胞内Ca2+浓度增加,Ca2+信号系统引发一系列生理功能,而促进胃肠平滑肌收缩效应。

灵芝孢子对妊娠高血压致胎鼠及幼鼠海马NOS表达和学习记忆功能异常的干预作用

【目的】探讨妊娠高血压对胎鼠及其生后幼鼠大脑海马NOS表达和学习记忆功能的影响以及灵芝孢子的干预作用。【方法】将40只SD妊娠大鼠分为正常对照组、L-NAME+蒸馏水组、L-NAME+精氨酸组、L-NAME+灵芝孢子8g组、L-NAME+灵芝孢子4g组和生理盐水+灵芝孢子8g组,采用血清NO检测、尾动脉血压检测、NADPH酶组织化学染色和Morris水迷宫等技术对孕鼠及其胎鼠和生后幼鼠进行分析。【结果】应用L-NAME后,孕鼠血清NO水平下降和血压上升,其胎鼠和幼鼠的体质量减轻,大脑海马的NOS阳性神经元和NOS阳性微血管先减少后增加,以及其生后幼鼠的空间学习记忆和运动能力下降。应用高剂量灵芝孢子治疗后,孕鼠血清NO水平和血压恢复到正常对照组水平,其胎鼠和幼鼠体质量恢复性增加,大脑海马的NOS阳性神经元和NOS阳性微血管恢复到正常对照组水平,以及其生后幼鼠的空间学习记忆和运动能力恢复性增强。【结论】高剂量灵芝孢子能够干预妊娠高血压引起的胚鼠及其生后幼鼠大脑海马神经元和微血管异常表达NOS,保护出生后幼鼠的学习记忆和运动能力。