杨梅多酚对大、小鼠血小板损伤的保护作用

目的 :研究杨梅多酚对大、小白鼠在化学和辐射损伤中血小板减少的影响。方法 :采用环磷酰胺和 60Co-γ射线致大、小白鼠血小板下降动物模型。结果 :杨梅多酚能提高血小板计数 ,在杨梅多酚组和病理模型对照组之间有显著性差异 (P<0.01) ;并能保护血液的止血功能。结论 :杨梅多酚对血小板损伤可起到治疗作用。

人红细胞膜CD59的分离及对依赖补体血小板损伤的保护

目的研究补体调节蛋白ＣＤ５９通过阻止补体攻膜复合物（ＭＡＣ）的形成发挥其对依赖补体血小板损伤的保护作用。方法用连续柱层析从眼镜蛇粗毒中分离纯化出眼镜蛇毒因子（ＣＶＦ）。人红细胞膜经低渗破膜、超滤、木瓜蛋白酶消化、正丁醇抽提和连续柱层析分离纯化出补体调节蛋白ＣＤ５９。用ＣｈｒｏｎｏＬｏｇ型血小板聚集仪测定血小板变形、聚集和ＡＴＰ释放反应。结果预先加入ＣＤ５９可抑制ＣＶＦ引起的大白鼠血小板变形和ＡＴＰ释放，不影响ＣＶＦ引起的血小板聚集及粘附性增加。结论血小板膜表面形成的ＭＡＣ是补体激活引起血小板变形和ＡＴＰ释放的关键。

2.5—5.5Gy中子辐射对小鼠白细胞和血小板损伤的实验研究

目的 探讨不同剂量（2.5-5.5Gy)中子辐射对小鼠血细胞参数的影响。方法 采用二级BALB/C小鼠作为实验动物，所有BALB/C小鼠均为雄性，共计278只，将上述278只小鼠分为5组。包括1个对照组和4个实验组，分别对各动物组进行90%中子照射，照射剂量分别为2.5Gy(80只），3.0Gy(60只），4.0Gy(60只）及5.5Gy(60只），对照组18只，分别在照射动物后6h,12h,1d,3d,4d,5d,7d,10d,14d,21d及28d采取静脉血，利用SYSMEXKX-21多项目血细胞分析仪进行血细胞分析。结果 （1）中子照射后外周血白细胞的变化：2.5-5.5Gy中子照射可使小鼠外周血WBC于照射后6h均明显降低，12h呈现一过性升高，之后又进行性降低，4.0-5.5Gy组未见恢复；而2.5Gy于照射后21d恢复至正常状态。（2）中子照射后外周血血小板的变化；在照射2.5Gy后6h-12h与对照组相比无显著变化。照射后1-3d，小鼠外周血PLT开始降低，于第5d进一步降低，至第10d血小板降至最低值，与对照组相比，差别非常显著（P<0.01)。在照射14-28d后血小板开始恢复，逐步恢复至正常状态，在照射3.0-4.0Gy后6h即开始明显降低。于第10d外周血PLT降至最低值，与对照组相比，差别非常显著（P<0.01)。结论 2.5-5.5Gy中子辐射可以引起小鼠重度骨髓型放射病和极重度骨髓型放射病；破坏小鼠骨髓的造血功能，引起外周血白细胞和血小板数质量参数的显著变化。

体外循环引起血小板损伤的相关因素分析

体外循环是心内直视手术重要的辅助手段,非外科性出血是体外循环心内直视手术后的常见并发症,可危及患者生命。体外循环造成的血小板功能损伤被认为是体外循环心内直视手术后非外科性出血的主要原因。体外循环引起血小板损伤的因素主要包括低温、血液与气体接触、生物相容性、剪切力、鱼精蛋白、肝素、麻醉药物的使用、机血回输、血液稀释、体外循环流转时间等。

体外循环与血小板损伤

体外循环是一种非生理性灌注,多种因素的综合作用可以引起血小板的激活与聚集及其结构与功能严重损伤,从而导致术后非外科性失血。本文对体外循环期间引起血小板损伤的原因、血小板激活与聚集的过程及血小板功能与结构的损伤和防治作一综述。

LncRNA SNHG9在正常机采血小板储存中表达变化及意义

目的探讨正常机采血小板储存过程中伴随储存时间延长长链非编码RNA(lncRNA)小核仁RNA宿主基因9(SNHG9)的表达变化及意义。方法收集符合临床血小板输注治疗标准的正常机采血小板32份,保存于专用(22±2)℃恒温振荡保存箱内,在不同储存时间(1、3、5、7、9 d)通过外观、血小板计数、红细胞残留量计数、白细胞残余量计数、pH值及细菌培养检测血小板质量;用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测SNHG9在同一机采血小板样本不同储存时间的表达量,分析其对血小板储存损伤(PSL)的影响及意义。结果在第1、3、5、7、9天SNHG9表达量伴随储存时间延长逐渐增高,数据总体存在统计学差异(H=93.073,P<0.001),差异有统计学意义(P<0.05)。进一步对不同天数之间SNHG9表达量进行两两多重比较,第1天与第3天校正后的P值是0.144,差异无统计学意义(P>0.05);第1天和第5天,第1天和第7天,第1天和第9天校正后的P值均小于0.001,差异有统计学意义(P<0.05);第3天和第5天(P=0.031),第3天和第7天,第3天和第9天(P<0.001)校正后差异有统计学意义。结论用于临床治疗的正常机采血小板伴随储存时间延长,第5、7、9天样本中SNHG9表达量比第1天明显增高,SNHG9对血小板储存条件敏感,有可能成为PSL潜在的生物学标记物。

血小板损伤与中暑发病机制的研究进展

血小板来源于骨髓成熟巨核细胞的细胞质,主要生理功能是止血和参与血栓形成。研究表明,血小板数量和功能异常与很多疾病密切相关。近年来,对中暑的研究发现,血小板计数下降预示病死率增加,可作为重症中暑预后预测指标[1],提示血小板可能参与了重症中暑发病机制。本文就血小板和中暑关系作一综述。1血小板参与中暑发病机制血小板具有高度有序的细胞骨架、内膜系统、特化的分泌颗粒、独特的受体和灵敏的信号通路。

储存损伤对血小板超微结构、磷脂及聚集功能的影响

目的对保存期间血小板脂质、超微结构及功能的改变进行观察分析，探讨储存损伤对血小板的影响。方法２０名健康献血者，常规采血，经二次离心获得浓缩血小板，将每单位浓缩血小板分装成两份，分别编为甲、乙两组，每组２０个样本。甲组于２２℃水平振摇保存，分别在３天、５天时取样检测；乙组采用ＤＭＳＯ作为防冻剂，终浓度为５％，－８０℃保存，分别在１月、３月、６月时取样测定；采血当天的新鲜血小板为对照组。采用高效液相色谱法（ＨＰＬＣ－ＵＶ）分析血小板磷脂的变化，电镜观察血小板超微结构的改变。结果正常人新鲜血小板中四种主要磷脂：磷脂酰胆碱（ＰＣ），磷脂酰乙醇胺（ＰＥ），磷脂酰丝氨酸（ＰＳ），磷脂酰肌醇（ＰＩ）的含量依次为ＰＣ＞ＰＥ＞ＰＳ＞ＰＩ，各占总磷脂含量的３７％，２７％，１２％，７％左右。血小板在２２℃水平振摇保存３天、５天，磷脂丢失率为５．８％，３１．８％；－８０℃冷冻保存（防冻剂为ＤＭＳＯ）１～６月，磷脂丢失率约为３３～３６％左右，且不随冷冻时间延长而增加。透射电镜观察血小板超微结构，发现血小板出现激活信号，如由盘状向球形转变，伪足延伸，开放小管系统（ＯＣＳ）肿胀，储存颗粒丧失，空地形成等。血小板聚集实验显示：血小板对聚集?

机采血小板储存损伤对临床疗效的影响

目的探讨机采血小板储存损伤与血小板输注临床疗效的关系。方法检测64份机采血小板的血小板聚集功能和P-选择素,对56例血液病患者给予64治疗量机采血小板输注,输注后24h进行外周血血小板计数,根据血小板增高指数(CCI)、血小板回收率(PPR)和出血好转情况判定输注效果,分析血小板储存损伤对其影响的相关性。结果 64治疗量机采血小板输注后,40例输注有效的CCI值为(16.0±5.5),24例无效的CCI值为(3.4±1.0);输注血小板最大聚集率在有效期内第2天～第5天的平均值±标准差(Mean%±SD%)、最小值(min%)～最大值(max%)为48.1±4.7(41.1～56.2)、38.1±3.5(31.2～43.1)、17.4±2.4(14.5～20.9)、9.6±3.3(5.8～19.9);血浆可溶性P-选择素在有效期内第2天～第5天含量(Mean±SD)ng/mL为(11.4±5.8)、(28.9±7.5)、(55.5±8.4)、(89.2±5.6)ng/mL;血小板聚集功能与血小板输注疗效呈正相关(r=0.892,P <0.01),血浆可溶性P-选择素浓度与血小板输注疗效呈负相关(r=-0.836,P <0.01),均有统计学意义。结论机采血小板保存期内的血小板损伤会影响血小板输注无效的发生率,医疗机构可结合临床输注效果制定血小板功能标准和规范,提升本地区的输血水平。

健康献血者机采血小板储存中LncRNA LIPCAR的表达及初步研究

目的探讨健康献血者机采血小板伴随储存时间延长长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)中预测心脏重塑的基因间长链非编码RNA(long intergenic noncoding RNA predicting cardiac remodeling,LIPCAR)的表达变化及意义。方法收集陕西省血液中心2021年11月~2022年7月正常捐献者机采血小板32份,于血小板专用22±2℃恒温振荡保存箱内保存,针对同一机采血小板样本通过延长储存时间(1,3,5,7和9天)检测血小板质量,使用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)检测LIPCAR在不同储存时间的表达量,并分析其表达水平变化与捐献者性别和血型的关联性。结果经检测血小板质量合格,在储存的第1,3,5,7和9天,伴随储存时间延长LIPCAR表达量逐渐增高,数据总体差异有统计学意义(H=89.46,P<0.001)。对不同天数之间进行两两多重比较,第1天和第5,7,9天,第3天和第7,9天校正后的P值均小于0.001;第5天和第9天校正后的P=0.016,差异均有统计学意义。不同储存天数LIPCAR表达量根据性别分析,发现在第5天和第1天(t=2.189,P=0.038)、第7天和第1天(t=2.320,P=0.028)、第9天和第1天(t=2.264,P=0.032)男性表达量高于女性,差异具有统计学意义;不同血型之间总体存在同质性差异(F=3.160,P=0.043),差异具有统计学意义。结论经检测合格用于临床输血的机采血小板随着储存时间延长,第5,7和9天样本中LIPCAR含量比第1天明显增高,LIPCAR对血小板储存条件敏感,有可能成为血小板储存损伤(platelet storage lesion,PSL)潜在的生物学标志物。

机采血小板保存期内血小板损伤与输注效果的相关性

目的探讨机采血小板保存期内的血小板损伤与输注效果的相关性。方法选取2018年8月至2020年8月于兴宁市人民医院接受治疗的61例血液疾病患者的临床资料,所有患者均接受血小板输注治疗,根据输注效果分为有效组与无效组。比较两组机采血小板保存期内血小板损伤情况,并分析机采血小板保存期内的血小板损伤与输注效果的相关性。结果61例血液疾病患者中,无效组16例,占26.23%,其中绝对血小板增加值(API)为(6.37±1.20)×10^(9)/L,血小板回收率(PPR)为(11.52±1.30)%,血小板计数增高指数(CCI)为(2.98±0.73);有效组45例,占73.77%,其中API为(18.89±2.04)×10^(9)/L,PPR为(46.78±3.97)%,CCI为(17.20±2.38);无效组血浆可溶性P-选择素水平高于有效组,差异有统计学意义(P<0.05);采用双变量Pearson直线相关性分析发现,血浆可溶性P-选择素与输注效果呈负相关(r<0,P<0.05)。结论机采血小板保存期内的血小板损伤与输注效果密切相关,临床可通过及时监测血浆可溶性P-选择素浓度评估血小板损伤程度,指导血小板输注治疗,以期提升治疗效果。

一氧化氮抑制血小板保存损伤的研究进展

血小板在制备和保存过程中容易被激活而丧失生理活性,造成血小板保存损伤(platelet storage lesion,PSL),这使得血小板保存质量的提高较为困难。改善血小板保存质量的关键之一就是最大可能降低其在保存过程中的活化。近年开展的一氧化氮(nitric oxide,NO)研究表明,NO在体内外都能抑制血小板的活化,为血小板体外保存提供了新思路。目前国内外的相关研究主要是用NO气体或者NO供体作为血小板的外源性NO。主要总结了目前血小板制剂的保存现状以及NO抑制血小板活化的机制,讨论NO供体改善血小板保存质量的可行性。

rhIL-6对辐射小鼠的保护及其对血小板损伤作用的拮抗效应

目的研究国产ｒｈＩＬ－６对造血系统的作用及其抗辐射效应。方法选用Ｃ５７ＢＬ／６小鼠，分别腹腔注射生理盐水（ＨＢＳＳ）或ｒｈＩＬ－６，然后致死全身照射或先致死全身照射后腹腔注射ＨＢＳＳ或ｒｈＩＬ－６。结果ｒｈＩＬ－６在辐射后对小鼠具有治疗效果，平均生存期由９．３天延长至１２．７天，对ＲＢＣ、ＨＧＢ、ＨＣＴ、ＰＬＴ均有明显的促再生作用，ｒｈＩＬ－６预防注射亦可拮抗辐射的致死效应，平均生存期由９．３天延长至１１．５天。结论ｒｈＩＬ－６在体内具有促进血细胞再生作用，从而延缓致死辐射所致死亡。

血小板保存相关添加剂研究现状

血小板在止血、炎症、肿瘤转移、伤口愈合及防御反应中起到了重要作用,然而其常规保存需要特定温度且保存时间一般为5~7 d,同时,血小板储存损伤和细菌滋生会影响其保存时间及保存质量。此外,常规输注后会产生非溶血性发热、过敏、循环超负荷及输血相关急性肺损伤等严重不良反应。这些都限制了血小板制品在临床中的应用。但是,与血小板保存相关的添加剂可以降低它们发生的可能性。因此,我们就近年来血小板保存相关添加剂的研究现状,以及改善血小板储存损伤、提高血小板保存特性等方面进行了综述。

1-磷酸鞘氨醇对血小板贮存损伤的影响

目的探讨1-磷酸鞘氨醇对手工浓缩血小板的贮存损伤(活化率、凋亡率和细胞内游离Ca2+)的影响。方法向手工浓缩血小板中分别加入0.1、0.5和1.0μmol/L 3个浓度的S1P,采用流式细胞术检测血小板22℃保存2、3、5、7 d的活化率、凋亡率和细胞内游离Ca2+。结果 0.5和1.0μmol/L的外源性S1P可以降低血小板内游离Ca2+的浓度,降低其活化率和凋亡率。结论 1-磷酸鞘氨醇对血小板的贮存损伤起到一定的抑制作用。

血小板贮存损伤研究进展

血小板贮存损伤(PSL)导致输注体内后的血小板回收率及存活率下降,主要表现在血小板形态改变、代谢失常及提前活化等方面。血液采集、制备方法及贮存条件均可导致PSL。根据贮存时间、贮存温度、振摇方式、重悬液以及贮存袋气体交换能力的不同将对PSL产生不同程度的影响。本文介绍了PSL产生的原因、现行的PSL检测手段以及导致血小板输注体内后被清除的分子机制研究现状。

血小板储存损伤的蛋白质组学研究进展

近年来,蛋白质组学作为分析特定状态下一种细胞或一个生物体上所有蛋白质的方法,其在输血医学上的应用越来越深入[1]。很多研究利用蛋白质组学技术对血浆、红细胞和血小板等血液制品的蛋白质水平进行了系统深入的分析[2-4]。血小板在血栓形成和止血过程中起着关键作用。输注血小板对于进行外科手术、患有癌症或血小板减少症的患者来说,

血小板保存前添加饱和氢气的作用研究

目的探索氢气在22℃保存血小板中的作用。方法将12份浓缩血小板(40 mL/份)和10份单采血小板(40 mL/份)每份平分为2等份(20 mL/份),随机取1半作为浓缩血小板实验组(n=12)和单采血小板实验组(n=10):加入氢气至饱和;另1半相应作为2个对照组。室温保存5 d后,检测2组血小板计数(Plt)、血小板平均体积(MPV)、血小板体积分布宽度(PDW)、pH值、葡萄糖、乳酸和CD62p表达水平。结果单采或者浓缩血小板22℃保存5 d后,输注氢气组与对照组比较pH:单采血小板7.17±0.26 vs 7.03±0.35(P<0.05),浓缩血小板7.07±0.15vs 6.85±0.34(P<0.05);CD62p:单采血小板17.39±2.88 vs 21.49±4.2(P<0.01),浓缩血小板17.84±2.54 vs21.73±4.14(P<0.01)。结论氢气作为1种选择性抗氧化剂,可减少22℃保存血小板活化,降低血小板保存损伤,提高保存血小板的质量。

储存血小板差异性长链非编码RNA表达谱研究

目的探讨机采血小板储存过程中差异性lncRNA表达谱变化及其差异表达的lncRNA在血小板储存损伤中潜在的生物学功能。方法收集13（人）份O型健康男性机采血小板各50 m L,于（22±2）℃下震荡储存,应用lncRNA芯片技术检测储存2、5、8 d机采血小板中lncRNA和mRNA表达谱变化;运用GO分析及KEGG分析预测差异表达的lncRNA功能分布,通过顺式调控分析预测lncRNA调控邻近蛋白编码基因表达的分子机制;采用实时PCR（RT-PCR）技术,验证8条lncRNA（MARCH2-2∶1、SLC2A2-1∶1、WBSCR16-3∶6、WEE1-2∶1、ENTPD6-2∶1、NKD2-1∶1、FOXS1-2∶1、MAPK13-3∶1）和4条mRNA（BCL2L1、CAPN2、MAPK14、VAMP8）的表达。结果芯片检测：血小板储存5与2 d相比,有162种lncRNA的表达量发生明显变化,表达升高的4种、降低的158种;8与2 d相比,有691种lncRNA表达量发生明显变化,表达升高的20种、降低的671种;8与5 d相比,246种lncRNA表达量发生明显变化,升高的2种,降低的244种。GO和KEGG分析：差异表达的lncRNA可能参与的生理过程有血小板激活、血小板聚集、内吞、凋亡、肌动蛋白纤维聚集、肌动蛋白骨架的调节;顺式调控分析：lncRNA具有调控血小板相关mRNA表达的功能,USP39-1调控VAMP8的表达、TMEM86B-2调控GP6的表达、FOXS1-2调控BCL2L1的表达等。RT-PCR验证：与芯片检测结果一致,其中lncRNA MARCH2-2∶1、WEE1-2∶1和NKD2-1∶1表达量升高,WBSCR16-3∶6、SLC2A2-1∶1、ENTPD6-2∶1、FOXS1-2∶1和MAPK13-3∶1表达量下降,BCL2L1,CAPN2,MAPK14和VAMP8的表达量也下降。结论血小板中含有大量的lncRNA,其表达量随着血小板储存时间延长而呈不同的变化趋势,总体来讲下调的lncRNA数量较多,且下调的幅度较大。部分变化的lncRNA可能与血小板生理功能密切相关,并且在血小板储存损伤中发挥作用。