莪术二酮抑制凝血酶诱导血小板活化和聚集的研究

目的研究莪术二酮对凝血酶诱导大鼠血小板活化和聚集的影响,来阐明莪术二酮抗血小板活化的机制。方法电阻抗法测定凝血酶诱导大鼠洗涤血小板聚集率,计算莪术二酮对其抑制率。荧光分光光度法测莪术二酮抑制血小板胞内钙离子浓度变化。流式细胞术检测血小板P-selectin(CD62p)的表达。Western blot测定磷酸化蛋白的磷酯酶C(PLC)、蛋白激酶C(PKC)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)的变化。结果 400μmol/L的莪术二酮可以有效地抑制0.3 U/ml凝血酶诱导的大鼠血小板的聚集。50、100μmol/L的莪术二酮可以显著抑制血小板活化标志物[Ca^(2+)]i上升和P-selectin(CD62p)的表达。在蛋白水平上,莪术二酮可以抑制PLCβ3、PKCθ和MAPKs蛋白的磷酸化。结论初步认为莪术二酮通过PLC-PKC-MAPKs通路抑制凝血酶诱导的血小板活化和聚集,阐明了莪术二酮抗血小板活化的部分机制。

薤白皂苷抗大鼠血小板活化及聚集的蛋白质组学研究

目的探讨薤白皂苷化合物对血小板活化和聚集作用的影响,探讨薤白皂苷化合物处理后的血小板差异表达的蛋白质。方法采用流式细胞术及血小板聚集仪测定阿司匹林及不同剂量薤白皂苷化合物对二磷酸腺苷(ADP)诱导的大鼠血小板膜糖蛋白CD62P表达水平以及血小板聚集率的影响。分离对照组及最优剂量组处理的血小板并提取蛋白质,采用二维凝胶电泳分离并行基质辅助激光解析/电离-飞行时间质谱(Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time of Flight Mass Spectrometry,MALDI-TOF-TOF)分析,采用Mascot软件搜索数据库,鉴定差异表达蛋白质。结果 (1)薤白皂苷高剂量组显著抑制ADP诱导的大鼠血小板膜糖蛋白CD62P表达和血小板聚集,且抑制作用呈一定量效趋势;(2)筛选出30个差异蛋白,并质谱成功鉴定7个:Calreticulin、Actin、LIM and SH3 domain protein 1、RCG55135、Protein phosphatase 1、Suppressor of IKBKE 1、Ribulose-5-phosphate-3-epimerase。结论薤白皂苷显著抑制ADP诱导大鼠活化及聚集,差异蛋白Calreticulin、Actin、LIM and SH3 domain protein 1、RCG55135、Protein phosphatase 1、Suppressor of IKBKE1、Ribulose-5-phosphate-3-epimerase可能在薤白皂苷抗血小板活化及聚集过程中起关键作用。

阿司匹林、氯吡格雷、西洛他唑对冠脉支架植入术后患者血小板高反应性的影响

目的探讨阿司匹林、氯吡格雷、西洛他唑对冠脉支架植入术后患者血小板高反应性的影响。方法选取2014年1月~2016年12月在我院接受冠状动脉支架术患者120例为观察对象,将患者按照随机数字表法分为观察组和对照组。对照组患者进行阿司匹林、氯吡格雷联合治疗。观察组患者在对照组的基础上联合西洛他唑进行治疗。比较两组的患者的治疗效果及血小板的活化和聚集指标。于术后6个月对两组患者进行随访,观察并统计两组患者有无临床并发症症状。结果术后第3天,观察组患者MPAR值为(45.32±13.41),对照组患者MPAR值为(51.68±11.62);观察组CD62P值为(10.09±12.32),对照组CD62P值为(13.28±9.37);观察组患者PAC-1值为(57.56±20.23),对照组患者PAC-1值为(63.17±18.60);观察组患者术后1年内发现不良心脑血管事件7例,总体发生率为11.6%,对照组患者术后1年发现不良心脑血管事件19例,总体发生率为31.7%,以上各组数据之间差异均具有统计学意义(P<0.05)。另外观察组患者术后1年内,临床并发症总体发生率于对照组相比,无明显差异。结论阿司匹林、氯吡格雷联合西洛他唑论治疗与传统阿司匹林联合氯吡格雷治疗相比抑制冠脉支架术后血小板活化和聚集效果更为显著,能够明显降低不良心脑血管事件发生率,而临床并发症发生率并未增加。