理气活血方剂对球囊损伤后实验性大耳白兔低密度脂蛋白胆固醇及血小板源性生长因子B水平的影响

目的观察理气活血方剂对球囊损伤后实验性大耳白兔低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及血小板源性生长因子B(PDGF-B)的影响。方法将32只健康新西兰大耳白兔(雌雄不限)以抽签的方法随机分为正常对照组、模型组、西药组、中药组4组,每组8只,分别给予普通饲料、高脂饲料、高脂饲料加氟伐他汀胶囊、高脂饲料加理气活血方剂以灌胃喂饲。实验第5周,模型组、西药组、中药组均行右侧腹-髂动脉内膜球囊损伤术。第8周给予采血,化验血脂,比较LDL-C的水平。8周后处死所有动物,用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法观察PDGF-B的表达。结果实验动物在第8周实验结束时测定LDL-C,正常组(1.181±0.005)mmol/L,西药组(33.202±7.112)mmol/L,中药组(31.504±9.611)mmol/L,模型组(34.732±6.413)mmol/L,模型组的LDL-C水平高于正常组,中药组和西药组则低于模型组而高于正常组(P<0.05),而中药组和西药组之间的差异无统计学意义;PDGF-B正常组为(0.38±0.09)mg/L,西药组为(1.22±0.09)mg/L,中药组为(1.12±0.07)mg/L,模型组为(1.67±0.16)mg/L,中药组的PDGF-B的表达低于模型组(P<0.05),具有统计学意义。结论理气活血中药方剂可以改善LDL-C的水平,抑制PDGF-B的表达,可以更好地阻断血管平滑肌细胞增殖的关键环节,阻止动脉粥样硬化的发生、发展。

散血明目片对外伤性增生性玻璃体视网膜病变兔眼血小板源性生长因子表达的影响

目的探讨散血明目片对外伤性增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)增殖膜上血小板源性生长因子(platelet derived growth factor,PDGF)表达的影响以及防治PVR的作用机制。方法将40只成年青紫蓝兔兔眼造成外伤性PVR模型,随机分为空白组(A组)、模型组(B组)、利水明目组(C组)、活血化瘀组(D组)、活血利水组(E组),每组8眼。并利用改良免疫组织化学方法对PVR实验兔眼中增殖膜上PDGF的表达进行检测。结果给药后第7天,B、C、D、E组的PVR分级比较差异无统计学意义(P>0.05);给药后第28天,E组与其他各组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。各用药组玻璃体腔增生膜PDGF阳性细胞数明显少于B组,差异有统计学意义(P<0.05)或非常显著的统计学意义(P<0.01);E组与C组、D组之间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论散血明目片能通过抑制玻璃体腔中PDGF对视网膜色素上皮细胞的刺激作用,从而抑制增殖细胞的过度增生,防止PVR形成和发展。

活血利水法对外伤性实验性PVR模型兔眼玻璃体中生长因子浓度影响的研究

目的探讨活血利水之散血明目片对外伤性增生性玻璃体视网膜病变 (traumaticProliferativeVit reoretinopathy,tPVR)玻璃体中生长因子浓度的影响及防治PVR的作用机理。方法将 5 0只家兔随机抽取 40只 ,造成外伤性PVR模型 ,随机分成活血利水组、活血化瘀组、利水明目组、模型组 ,另 1 0只为空白组。连续灌胃 1月后 ,观察眼底PVR分级情况 ,检测玻璃体中碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)、表皮生长因子 (EGF)的含量及病理组织学改变。结果活血利水组中玻璃体碱性纤维细胞生长因子 (bFGF)、表皮生长因子(EGF)、浓度低于模型组 ,差异有非常显著性 (P <0 .0 1 ) ;活血利水治疗组EGF含量与空白组比较差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,bFGF含量高于空白组 (P <0 .0 5 ) ;活血化瘀组与利水明目组也能降低bFGF及EGF浓度 ,与模型组相比有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ;活血利水组bFGF及EGF浓度低于另两个治疗组 ,有显著性差异 (P<0 .0 5 )。结论活血利水法能明显降低玻璃体中碱性成纤维细胞生长因子和表皮生长因子的浓度 。

活血利水法对外伤性增生性玻璃体视网膜病变模型兔眼IGF-1表达的影响

目的:观察活血利水之散血明目片对外伤性增生性玻璃体视网膜病变(traumatic Proliferrative Vitreo-retinopathy,tPVR)增殖膜(ERM)中胰岛素样生长因子-1(insulinlike growth factor-1,IGF-1)表达的影响。方法:将40只家兔随机抽取32只,造成外伤性PVR模型,随机分成活血利水组、活血化瘀组、利水明目组、模型组,另8只为空白组。连续灌胃28天后,观察眼底PVR分级情况,免疫组织化学方法检测胰岛素样生长因子-1(IGF-1)在各组的表现及病理组织学改变。结果:在活血利水组,ERM中胰岛素样生长因子-1(IGF-1)阳性程度低于模型组,差异有非常显著性(P<0.01)。活血化瘀组与利水明目组也能降低IGF-1的阳性程度,与模型组相比有显著性意义(P<0.05)。活血利水组IGF-1阳性程度低于活血化瘀和利水明目两个治疗组,有显著性差异(P<0.05)。结论:活血利水法能通过抑制玻璃体腔中胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的作用,从而抑制增殖细胞的过度增生,防治PVR形成和发展。

补肾活血调周法联合中药封包治疗宫腔粘连疗效观察及对PDGF-BB、TGF-β1、bFGF的影响

目的:观察补肾活血调周法联合中药封包治疗宫腔粘连(IUA)的临床疗效,以及对血小板源性生长因子(PDGF)-BB、转化生长因子-β1 (TGF-β1)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的影响。方法:选取40例行宫腔镜下宫腔粘连分离术治疗的IUA患者,采用随机数字表法分为对照组(应用补肾活血调周法治疗)及试验组(采用补肾活血调周法联合中药封包治疗),每组20例。2组均治疗3个月经周期,随访1年。比较2组临床疗效,子宫内膜厚度,子宫动脉血流参数[搏动指数(PI)、阻力指数(RI)],血清PDGF-BB、TGF-β1、bFGF水平,宫腔再粘连发生率及妊娠率。结果:治疗后,试验组总有效率85.00%,高于对照组55.00%(P<0.05)。2组子宫内膜厚度均较治疗前增加(P<0.05),PI、RI均较治疗前降低(P<0.05);试验组子宫内膜厚度大于对照组(P<0.05),PI、RI均低于对照组(P<0.05)。2组血清PDGF-BB、TGF-β1、bFGF水平均较治疗前降低(P<0.05),试验组血清PDGF-BB、TGF-β1、bFGF水平均低于对照组(P<0.05)。随访3个月,试验组再粘连发生率5.88%,低于对照组27.27%(P<0.05)。随访1年,试验组妊娠率40.00%,高于对照组5.00%(P<0.05)。结论:补肾活血调周法联合中药封包治疗IUA,可增加子宫内膜厚度,改善子宫动脉血流及临床症状,有效调节PDGF-BB、TGF-β1、bFGF水平,减少宫腔再粘连发生,提高妊娠率。

活血散结方药物血浆对PDGF干预下兔视网膜色素上皮细胞增殖相关因子及ERK1/2信号转导通路的影响

目的观察活血散结方对血小板源性生长因子(PDGF)干预下兔视网膜色素上皮(RPE)细胞增殖的影响,探讨其分子机制。方法以RPE细胞为研究对象,体外进行RPE细胞原代培养及传代,建立PDGF干预下兔RPE细胞增殖模型,并选取PDGF最佳干预浓度。制备活血散结方药物血浆,对兔RPE细胞增殖与毒性的影响进行测定,选取最佳的实验浓度。实验分为空白对照组(DMEM)、正常血浆组、PDGF(10μg/L)组、PDGF(10μg/L)+AG1296(10μmol/L)组、PDGF(10μg/L)+10%药物血浆组、PDGF(10μg/L)+20%药物血浆组。分别加入相应处理因素干预48 h,Transwell流式细胞仪检测细胞周期变化;Western blot检测兔RPE细胞cyclinD1蛋白、pERK1/2及ERK1/2蛋白表达。结果 10%、20%活血散结方药物血浆对RPE细胞周期、cyclin D1蛋白及p ERK1/2、ERK1/2蛋白有抑制作用,与AG1296抑制剂作用相当(P>0.05),与其他组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论活血散结方药物血浆可能通过影响ERK信号通路及对周期蛋白的调控,抑制PDGF干预下兔RPE细胞增殖。

补肾宣肺活血方对肺纤维化大鼠肺组织TGF-β、Smad3蛋白和PDGF表达的影响

目的探讨补肾宣肺活血方对博莱霉素致肺间质纤维化大鼠肺组织中TGF-β、Smad3蛋白和血小板源性生长因子(PDGF)表达的影响。方法将56只大鼠随机分为空白组、模型组、激素组和补肾宣肺活血方组,除空白组外,以气管内注入博莱霉素制作动物模型,于实验当天每天给药,第142、8天取肺组织行HE染色观察病理变化情况;免疫组化法测定肺组织中TGF-β、Smad3、PDGF的表达情况。结果激素组和补肾宣肺活血方组TGF-β、Smad3蛋白、PDGF在肺组织中的表达均弱于模型组,但高于空白组;第14天激素组和补肾宣肺活血方组无统计学差异,但第28天补肾宣肺活血方组TGF-β、Smad3蛋白、PDGF表达弱于激素组,P<0.05。结论补肾宣肺活血方可明显减低大鼠肺内促纤维化的细胞因子TGF-β、Smad3蛋白、PDGF的水平,可延缓博莱霉素诱发的肺间质纤维化的病程甚至抑制纤维化的程度。

活血散结中药复方含药血浆对PDGF干预下兔RPE细胞增殖的影响

目的:观察活血散结中药复方含药血浆对血小板源性生长因子(platelet derived growth factor,PDGF)干预下兔RPE细胞增殖的影响。方法:酶消化法获取RPE原代细胞,进行RPE细胞的原代培养和传代;制备活血散结中药复方含药血浆;选取第4代兔RPE细胞为实验细胞,PDGF低、中、高剂量(5、10、20μg/L)干预48h后,CCK-8法检测并选取适宜细胞实验干预浓度;建立PDGF干预下RPE细胞增殖模型。实验分组为空白对照组(DMEM)、正常血浆组、PDGF(10μg/L)组、PDGF(10μg/L)+AG1296(10μmol/L)组、PDGF(10μg/L)+10%含药血浆组,PDGF(10μg/L)+20%含药血浆组,分别加入相应处理因素干预24h后,Transwell法测定兔RPE细胞迁移力;而干预48h后,CCK-8法测定兔RPE细胞的细胞活力OD值。结果:10%和20%浓度的活血散结中药复方含药血浆能有效抑制PDGF干预下RPE细胞的细胞活力、细胞迁移。结论:活血散结中药复方含药血浆能够抑制PDGF干预下兔RPE细胞增殖,这可能是其有效治疗增殖性玻璃体视网膜病变的机制之一。

益肾活血方对UUO大鼠肾脏HIF-1α、PDGF-BB、ICAM-1及VCAM-1表达的影响

目的:观察益肾活血方对单侧输尿管结扎(UUO)大鼠中低氧诱导因子(HIF-1α)、血小板源性生长因子(PDGF-BB)、细胞间黏附因子1(ICAM-1)以及血管细胞黏附分子1(VCAM-1)表达的影响。方法:实验采用UUO大鼠造成肾纤维化动物模型,并以益肾活血方、氯沙坦灌胃治疗,分别在术后第7天、第14天、第21天采集肾脏标本,运用免疫组化法检测HIF-1α、PDGF-BB、ICAM-1、VCAM-1在肾脏中的表达。结果:假手术组大鼠各时间点内,肾组织HIF-1α、PDGF-BB、ICAM-1、VCAM-1蛋白表达均在正常范围内;模型组大鼠随时间延长,肾组织HIF-1α、PDGF-BB、VCAM-1蛋白表达逐渐增加,给药组大鼠肾组织HIF-1α、PDGF-BB、ICAM-1、VCAM-1蛋白的表达有所降低(P<0.01或P<0.05),益肾活血方组降低优于氯沙坦组。结论:益肾活血方能明显改善肾纤维化过程中的内源性低氧状态、减轻大鼠肾间质的炎症反应,从而达到延缓肾间质纤维进展的作用。

活血散结方对PDGF干预下兔RPE细胞凋亡及caspase-3、P53表达的影响

目的:观察活血散结方含药血浆对血小板源性生长因子(platelet derived growth factor,PDGF)干预下兔视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞凋亡的影响以及对caspase-3、P53蛋白表达的干预作用。方法:采用高效液相色谱法检测活血散结方主要成分,选取第四代兔RPE细胞为实验细胞,分为空白对照组、正常血浆组、PDGF(10μg·L^(-1))组、PDGF(10μg·L^(-1))+AG1296(10μmol·L^(-1))组、PDGF(10μg·L^(-1))+10%含药血浆组、PDGF(10μg·L^(-1))+20%含药血浆组,分别加入相应处理因素干预48 h后,流式细胞仪检测兔RPE细胞凋亡情况,western blot检测兔RPE细胞caspase-3及P53蛋白表达情况。结果:活血散结方含药血浆中三七皂苷R1与丹参酮的含量均在线性范围之内,含药浓度较理想,活血散结含药血浆能促进PDGF干预下的兔RPE细胞凋亡(P<0.01),对caspase-3及P53蛋白表达亦有促进作用(P<0.01)。结论:活血散结中药复方含药血浆可能通过促进RPE细胞凋亡,达到抑制增殖性玻璃体视网膜病变发生发展的作用。