血小板糖蛋白Ⅰbα上血管性血友病因子结合域的研究进展

血小板糖蛋白 (GP)Ⅰb Ⅸ Ⅴ复合物与其配体、血管性血友病因子 (vWf)的结合是止血和血栓形成的始动环节。GPⅠb Ⅸ Ⅴ复合物的vWf结合域存在于GPⅠb的α亚单位的N端。至少有三个区域对vWf的结合有着重要的影响 :富含亮氨酸重复序列、阴离子化的酪氨酸硫酸化序列和由Cys2 0 9和Cys2 4 8形成的二硫键环。了解vWf结合域对血小板代用品和抗血栓药的研究有着重要的意义 ,本文综述了此方面的研究进展。

血小板膜糖蛋白Ⅰbα、血管性血友病因子表达水平与深静脉血栓进展的相关性

目的 观察血液血小板膜糖蛋白Ⅰbα（GPⅠbα）、血管性血友病因子（vWF）表达水平与静脉血栓性疾病（VTE）进展的相关性。方法 SD大鼠下腔静脉（IVC）血栓造模,检测造模后2、8、24、72 h各组大鼠血液中GPⅠbα、vWF的变化情况;收集30例DVT患者、30例实验对照患者、30例健康对照者血样,ELISA法检测GPⅠbα、vWF的表达水平并进行比较分析。结果 大鼠造模后,假手术组与模型组血GPⅠbα、vWF水平均呈增高趋势。在下腔静脉受损、血栓形成的起始阶段（2 h）,GPⅠbα、vWF水平未明显增高;而在2~24 h血栓形成高峰阶段,假手术组与模型组GPⅠbα、vWF水平升高,模型组GPⅠbα、vWF升高更显著;24~72 h稳定血栓形成,GPⅠbα水平降低,模型组和假手术组vWF水平仍表现高于2 h和对照组。DVT患者组GPⅠbα、vWF表达水平高于无DVT患者组及健康人对照组（P〈0.05）。结论 血GPⅠbα、vWF表达水平随DVT发生而升高,与VTE的进展相关。

溃疡性结肠炎患者血小板膜糖蛋白Ⅰb/Ⅸ/Ⅴ复合物与疾病严重程度、血小板激活的相关性

目的探索溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)患者血小板膜糖蛋白Ⅰb/Ⅸ/Ⅴ(glycoproteinⅠb/Ⅸ/Ⅴ,GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ)复合物与疾病严重程度、血小板激活的关系。方法选取了54例活动期UC患者和35名健康志愿者,采用美国胃肠病学会制订的临床指南对活动期UC患者的疾病严重程度进行分级。用比浊法检测UC患者和志愿者血小板最大聚集率(maximum agglutination rate,MAR)。采用流式细胞仪检测血小板膜糖蛋白Ⅰb/Ⅸ/Ⅴ复合物、血小板激活标志物血小板α颗粒膜糖蛋白(CD62P)和血小板表面纤维蛋白原受体(PAC-Ⅰ)的水平。结果活动期UC患者血小板MAR、CD62P和PAC-Ⅰ的阳性表达率较正常对照组明显升高,而GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ复合物的表达显著降低。在轻、中以及重度活动期UC患者中,血小板MAR、GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ复合物的表达、CD62P和PAC-Ⅰ的阳性表达率差异具有统计学意义。相关性分析显示血小板GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ复合物的表达与血小板激活指标MAR、CD62P、PAC-Ⅰ呈负相关。结论血小板GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ复合物与血小板激活相关,可能在UC的发展中起作用并反映UC严重程度。

溃疡性结肠炎患者血浆P-选择素、血小板膜糖蛋白Ⅰb/Ⅸ/Ⅴ复合物与疾病活动性的关系

目的探索溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)患者血浆P-选择素(P-selectin)、血小板膜糖蛋白(GP)Ⅰb/Ⅸ/Ⅴ复合物与疾病活动性的关系。方法选择28例UC活动期、16例UC缓解期患者和26例健康志愿者,采用ELISA法检测血浆P-selectin,比浊法检测血小板最大聚集率(MAR),并采用流式细胞仪检测GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ复合物。结果活动期UC患者血浆P-selectin、血小板MAR较缓解期患者及健康者明显升高(P<0.01或P<0.05),而GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ复合物的表达显著降低(P<0.01或P<0.05)。结论溃疡性结肠炎患者存在血小板激活,血浆P-selectin和GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ复合物作为血小板激活的标志物,与疾病的活动程度相关,可以作为UC活动期的指标。

明胶溶液和右旋糖酐-70对血小板膜糖蛋白Ⅰb/Ⅰx和血管性假性血友病因子的影响

为探讨在硬膜外阻滞下行胆囊切除术的病人术中输注明胶溶液和右旋糖酐 70后对血小板膜糖蛋白Ⅰb /Ⅰx(GPⅠb /Ⅰx )、血管性假性血友病因子 (vWF)和血小板粘附试验 (PAdT)的影响以及相互关系 ,将10 5例病人随机分为 4组 :A组术中输注生理盐水 ;B组输注右旋糖酐 70 ;C组输注尿联明胶 ;D组输注改良明胶。于输注前、输注后 2h、3h采集静脉血 ,分别测定GPⅠb /Ⅰx、vWF及PAdT。结果显示 :B组在输注 3h后vWF明显低于其它 3组 (P <0 0 1) ,B组GPⅠb /Ⅰx输注液体 3h后比输注前也有显著降低 (P <0 0 1) ,与其它 3组比较也有非常显著的差异 (P <0 0 1)。A组和C组PAdT有显著的增高 (P <0 0 5 )。提示改良明胶和尿联明胶在临床上可能比右旋糖酐 70使用更大的量而不造成出血倾向 ,明胶类液体较晶体液在术中更能稳定血小板 ,在某些方面可能有助于止血功能的稳定。

血小板膜糖蛋白Ⅰbα VNTR基因多态性与脑梗死的相关性研究

目的探讨血小板膜糖蛋白(GP)Ⅰb基因α链变数串联重复序列(VNTR)的等位基因和基因型在中国北方人群中的分布规律,并深入研究这种多态性与脑梗死的相关性。方法共收集105例脑梗死病人和100例对照者,用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)的方法确定其基因型。结果共发现CC、DD纯合子基因型和CD、BD、BC杂合子基因型,未发现AA基因型。脑梗死组和对照组的BC基因型频率分别为0.067和0.01,B等位基因频率分别为0.057和0.01,差异均有统计学意义(P<0.05)。脑梗死组的BC基因型频率和B等位基因频率显著高于对照组(P=0.036,OR=7.071,95%CI 0.85～58.55;P=0.023,OR=3.98,95%CI 1.106～14.32)。结论血小板膜糖蛋白GPⅠbα(VNTR)基因多态性可能是脑梗死的一个危险因素。

益气活血方及其拆方对出血性血小板病患者GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ复合物及GPⅠbα表达的影响

目的观察益气活血方及其拆方对出血性血小板病患者凝血酶受体血小板膜糖蛋白(GP)Ⅰb/Ⅸ/Ⅴ复合物及其组分GPⅠbα的表达的影响来探讨其配伍规律。方法68例出血性血小板病患者及32例健康人静脉血在静息状态及体外加益气活血方及其拆方中药孵育后,采用流式细胞术检测血小板GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ及GPⅠbα的表达。结果静息状态时,患者GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ及GPⅠbα的表达明显低于健康人;益气活血方及其部分拆方组能使患者凝血酶受体GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ及GPⅠbα恢复至正常水平;而单味中药组作用不明显;方中的主药黄芪与当归配伍为用,可促进血小板膜糖蛋白的表达。结论益气活血全方及其部分拆方组在受体蛋白水平上调节GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ及GPⅠbα的表达,是其治疗出血性血小板病的疗效机制之一。

PLC对人血小板GPIb的作用

目的 应用竞争性酶联免疫定量检测磷酯酶C(PLC)对人血小板膜糖蛋白Ib(GPIb)量的变化,探讨用药后抑制血小板粘附作用的机制。方法 用竞争性酶联免疫药盒测定并绘制标准曲线图;取健康人血制备洗涤血小板,将其分为4组:①生理盐水组;②PLC 0.5 U组;③PLC 1.0U组;④PLC 2.0 U组,分别替代药盒中标准IgG(IgG-ST)进行实验,酶标仪上测OD_(492)值,共实验6人次,依据OD_(492)值在标准曲线图和Eocel软件求出GPIb的量及 用t值检测它们之间的相关性。结果 用生理盐水、PLC0.5 U、1.0 U和 2.0 U组的OD_(492)值和GPIb数量(ng)分别为0.768±0.078、1.103±0.118、1.367±0.102、2.055±0.453和134.669±13.144、101.838±9.879、82.632±5.354、73.183±14.740。PLC 1.0 U和2.0 U组与生理盐水组比差异有显著性(P<0.01),而其它各组之间比差异无显著性(P>0.05)。结论 PLC减少GPIb的量,从而抑制血小板粘附性,这也可能是PLC抗血小板聚集作用的重要原因之一。

老年PMR抗MPO抗体、GPⅠb及抗CarP抗体检测意义

目的 探讨老年风湿性多肌痛(polymyalgia rheumatica,PMR)血抗髓过氧化物酶(anti-myeloperoxidase,抗MPO)抗体、血小板糖蛋白Ⅰb(platelet glycoproteinⅠb,GPⅠb)及抗氨甲酰化蛋白(anti-carbamylated protein,抗CarP)抗体检测的临床意义。方法 选取2019年7月至2022年1月温州市人民医院风湿免疫科收治的65例老年PMR患者(年龄≥60岁)为观察组,65例非老年PMR患者(年龄<60岁)为对照组,两组均予以泼尼松15mg/d连续治疗4周,检测两组患者治疗前后PMR活动度评分(PMR activity score,PMR-AS)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)、抗MPO抗体、GPⅠb和抗CarP抗体的变化;各指标和PMR-AS间的相关性采用Pearson相关分析;绘制受试者操作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC曲线)分析各指标对疾病活动程度判断的准确性。结果 治疗后两组患者的PMR-AS、CRP、ESR、抗MPO抗体、GPⅠb和抗CarP抗体水平及病例异常率均较治疗前明显下降(P<0.05),且观察组患者下降更显著(P<0.05);老年PMR患者的CRP、ESR、抗MPO抗体、GPⅠb和抗CarP抗体水平与PMR-AS均呈正相关(r=0.580、0.808、0.755、0.739、0.811,P均<0.001);CRP、ESR、抗MPO抗体、GPⅠb和抗CarP抗体对疾病活动度准确性判断的ROC曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.753、0.811、0.830、0.856、0.887,诊断敏感度分别为62.50%、75.25%、65.50%、75.00%和79.50%,诊断特异性分别为75.25%、80.05%、82.55%、87.50%和90.05%。结论 血抗MPO抗体、GPⅠb和抗CarP抗体水平与老年PMR患者病情活动度呈正相关,泼尼松治疗后各指标水平值下降明显,有望成为老年PMR患者疾病活动情况和治疗效果的监测指标。

GP1BA、PTGS1、LTC4S、ITGB3基因多态性检测指导阿司匹林使用

目的对陕西宝鸡地区阿司匹林药物相关基因的基因型分布进行回顾性分析,明确与阿司匹林药物相关基因的突变率。方法选取2022年1月至2023年5月在宝鸡市中医医院心内科接受阿司匹林治疗并进行相关基因检测的住院患者475例,采用飞行时间质谱仪对阿司匹林药物相关的4个基因[血小板膜糖蛋白Ⅰbα多肽(GP1BA)基因、前列腺素内过氧化物合酶1(PTGS1)基因、白三烯C4合酶(LTC4S)基因、糖蛋白Ⅲa(ITGB3)基因]进行检测,然后进行基因多态性分析。结果各基因分布频率符合Hardy-Weinberg平衡定律,GP1BA c.482C>T基因型分布频率CC>CT>TT,ITGB3 c.176T>C基因型分布频率TT>TC>CC,PTGS1 c.-842A>G基因型分布频率AA>AG>GG,LTC4S c.-444A>C基因分布频率AA>AC>CC;不同性别、年龄的各基因型分布比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论对阿司匹林药物治疗患者进行阿司匹林药物相关基因检测,可以为临床医生对患者制订个体化治疗方案提供辅助性的指导,具有重要的临床价值。

血小板膜糖蛋白Ⅰbα基因多态性与脑卒中关系的研究

目的探讨血小板膜糖蛋白(GP)Ⅰbα基因多态性与脑卒中的发生关系。方法收集300例经CT和(或)MRI检查证实的脑卒中病人,其中脑梗塞200例,脑溢血100例,并收集300例与脑卒中组的年龄、性别相匹配的无脑血管疾病人群作为对照组,采用聚合酶链反应限制性片段多态性(PCRRFLP)方法检测研究对象GPⅠbα基因145Thr/Met变异。结果脑卒中组血小板GPⅠbα基因145Thr/Met突变率显著高于对照组(17.33%比14%,P=0.003,OR=3.33,95%Cl为1.29～5.38)。脑梗塞组GPⅠbα145Thr/Met突变率是21.5%,其对照组为14%,两组比较差异有显著性(P<0.01,OR=7,95%Cl为3.43～10.57)。脑溢血组GPⅠbα145Thr/Met突变率与对照组比较差异无显著性(P=0.158)。结论GPⅠbα145Thr/Met变异与脑梗塞的发生相关,但与脑溢血关系不明显。

抗血小板GPⅠbα抗体诱导建立原发免疫性血小板减少症模型的研究

目的探讨应用抗血小板膜糖蛋白GPⅠbα抗体AN51、R300建立原发免疫性血小板减少症（ITP）动物模型。方法将20只6-8周豚鼠和裸鼠分别分为对照组和3个实验组，每组5只。豚鼠对照组和实验组分别静脉注射0.2 μg/g IgG和0.05、0.1、0.2 μg/g AN51，裸鼠对照组和实验组分别腹腔注射0.2 μg/g IgG和0.05、0.1、0.2 μg/g R300。在注射后不同时间点对豚鼠和裸鼠行眼眶后静脉丛采血，应用血细胞分析仪检测血小板水平。结果①静脉注射AN51后5 min，0.05、0.1、0.2 μg/g AN51组豚鼠血小板计数分别减低0-5%、50%-60%、70%-80%，0.2 μg/g组下降最为明显，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.001）。②腹腔注射R300后6 h，0.05、0.1、0.2 μg/g R300组裸鼠血小板计数分别下降20%-30%、60%-70%、80%-90%，0.2 μg/g组下降最为明显，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.001）。每天1次持续注射0.2 μg/g R300 1-2周的裸鼠出现典型ITP出血症状（全身大量瘀点、瘀斑，多见于四肢、头部和腹部）。结论0.2 μg/g AN51静脉注射、0.2 μg/g R300腹腔注射可以分别建立豚鼠、裸鼠ITP模型。

PTGS1、LTC4S、GP1BA基因多态性与肇庆地区动脉粥样硬化型脑梗死急性期患者阿司匹林疗效的相关性研究

目的探究前列腺素内过氧化物合酶1(PTGS1)、白三烯C4合酶(LTC4S)、血小板膜糖蛋白Ⅰbα多肽(GP1BA)基因多态性与肇庆地区动脉粥样硬化型脑梗死急性期患者阿司匹林疗效的关系。方法选择118例动脉粥样硬化型脑梗死急性期患者,通过花生四烯酸诱导检测血小板聚集率,并判断患者属于阿司匹林抵抗或阿司匹林敏感。对PTGS1、LTC4S、GP1BA三种基因不同基因型下的血小板聚集率、阿司匹林抵抗占比及治疗有效率进行对比分析。结果PTGS1 AA基因型患者65例、AG基因型患者32例、GG基因型患者21例,其血小板聚集率分别为(11.58±4.29)%、(15.77±6.81)%、(18.06±6.72)%,阿司匹林抵抗患者占比分别为0(0/65)、9.38%(3/32)、14.29%(3/21),治疗有效率分别为100.00%(65/65)、90.63%(29/32)、85.71%(18/21)。PTGS1的AG基因型、GG基因型患者的血小板聚集率高于AA基因型患者,阿司匹林抵抗患者占比均高于AA基因型患者,治疗有效率低于AA基因型患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。LTC4S的AC基因型、CC基因型患者的血小板聚集率均低于AA基因型患者,阿司匹林抵抗患者占比均低于AA基因型患者,治疗有效率均高于AA基因型患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。但是PTGS1的AC基因型、CC基因型患者出现了8例哮喘和30例荨麻疹。LTC4S AA基因型患者中无哮喘和荨麻疹。GP1BA的CT基因型、TT基因型患者的血小板聚集率均低于CC基因型患者,阿司匹林抵抗患者占比均明显低于CC基因型患者,治疗有效率均显著高于CC基因型患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论PTGS1、LTC4S、GP1BA基因多态性会影响动脉粥样硬化型脑梗死急性期患者使用阿司匹林治疗的敏感性,对其疗效具有影响,临床上在应用阿司匹林治疗时应当掌握患者的基因型而合理选择药物。

前瞻性评价单克隆抗体俘获血小板抗原技术对免疫性血小板减少症的诊断价值

目的 评价单克隆抗体俘获血小板抗原技术（MAIPA）对免疫性血小板减少症（ITP）的诊断价值,以及对免疫性和非免疫性血小板减少的鉴别诊断价值.方法 以来自14家医院的321例血小板减少患者为研究对象,男118例,女203例,应用改良MAIPA试验双盲法检测患者血小板膜糖蛋白特异性自身抗体（抗-GPⅡb/Ⅲa和抗-GP Ⅰ b/Ⅸ）,客观评价该试验在ITP诊断中的敏感性和特异性,了解ITP患者血小板特异性抗体浓度与血小板数量的相关性以及地塞米松治疗后抗体浓度的变化.结果 抗-GPⅡb/Ⅲa、抗-GP Ⅰ b/Ⅸ、抗-GPⅡb/Ⅲa联合抗-GP Ⅰ b/Ⅸ诊断ITP的敏感性分别为39.75%、32.64%、55.23%,特异性分别为97.56%、93.94%、92.68%,阳性预测值分别为97.94%、93.98%、95.65%,阴性预测值分别为35.71%、32.35%、41.53%,总有效率分别为54.51%、48.29%、64.80%;ITP患者血小板特异性抗体阳性率显著高于非免疫性血小板减少患者;抗体阳性患者的血小板数量显著低于阴性患者,ITP患者血小板特异性抗体水平[吸光度（A）值]与血小板数量呈负相关;激素治疗有效的ITP患者抗-GPⅡb/Ⅲa或（和）抗-GP Ⅰ b/Ⅸ转阴或抗体水平降低.结论 MAIPA试验对ITP具有较高的诊断价值,对ITP患者的疗效也具有指导意义,可作为IFP和非免疫性血小板减少的鉴别诊断依据.