急诊介入治疗前后AMI患者P选择素和血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa复合物表达研究

目的观察急性心肌梗死(Acute myocardial infarction,AMI)患者急诊经皮冠状动脉介入治疗(简称介入治疗)前后血小板活化指标P选择素和血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa复合物表达的变化,探讨介入治疗对AMI患者血小板活化的影响。方法选取疑似冠心病且冠脉造影正常的21例患者为对照组,行急诊介入治疗的AMI患者24例(AMI组),应用流式细胞技术检测对照组及AMI组患者行介入治疗前后的P选择素和血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa复合物表达率。结果与对照组比较,AMI组患者P选择素和血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa复合物表达率均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);介入治疗后3dAMI组患者P选择素和血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa复合物表达率较术前下降,但与对照组比较仍有较高水平表达,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论AMI患者急诊介入治疗前后体内血小板均处于高度活化状态,AMI患者术后抗血小板聚集治疗极其重要。

急性心肌梗死伴血小板计数减少患者血小板表面膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa复合物表达观察

目的：观察急性心肌梗死伴血小板减少患者血小板表面糖蛋白（GP）Ⅱb／Ⅲa复合物表达变化并探讨其临床意义。方法选择急性心肌梗死伴血小板减少患者50例为急性心肌梗死伴血小板减少组，急性心肌梗死血小板正常或增多患者52例为急性心肌梗死伴血小板正常或增多组，健康人20例为对照组。用流式细胞术检测血小板表面CD41和CD61，二者其中之一阳性或者均阳性视为GPⅡb／Ⅲa复合物表达阳性。计算各组血小板表面GPⅡb／Ⅲa复合物阳性表达率。结果急性心肌梗死伴血小板减少组、急性心肌梗死伴血小板正常或增多组、对照组患者血小板表面GPⅡb／Ⅲa复合物阳性表达率分别89．0％±7．4％、97．0％±10．9％、79．0％±4．2％。急性心肌梗死伴血小板减少组、急性心肌梗死伴血小板正常或增多组患者血小板表面GPⅡb／Ⅲa复合物阳性表达率均高于与对照组，P均＜0．05。按照血小板计数对急性心肌梗死伴血小板减少组患者进行分层，结果血小板计数80×10^9／L～＜100×10^9／L者、50×10^9／L～＜80×10^9／L者、30×10^9／L～＜50×10^9／L者血小板表面GPⅡb／Ⅲa复合物阳性表达率分别为96．5％±18．9％、92．4％±8．0％、50．1％±4．1％。与对照组相比，血小板计数80×10^9／L～＜100×10^9／L、50×10^9／L～＜80×10^9／L的急性心肌梗死患者血小板表面GPⅡb／Ⅲa复合物阳性表达率升高（P均＜0．05），血小板计数30×10^9／L～＜50×10^9／L的急性心肌梗死患者血小板表面GPⅡb／Ⅲa复合物阳性表达率降低（P＜0．05）。结论急性心肌梗死伴血小板减少患者血小板表面GPⅡb／Ⅲa复合物阳性表达率高于健康人，血小板50×10^9／L～＜100×10^9／L的急性心肌梗死患者有必要进行抗血小板聚集治疗。

血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体复合物的分离和纯化

从机采浓缩血小板中 ,应用凝胶柱刀豆素A—琼脂糖、肝素—琼脂糖亲和层析与分子筛层析法 ,分离、纯化并得到血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体复合物。血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体复合物由α、β两个亚单位组成 ,糖蛋白Ⅱb可还原为糖蛋白Ⅱbα(分子量为 12 5kDa)和糖蛋白Ⅱbβ(分子量为 2 3kDa) ,而糖蛋白Ⅲa为一条多肽链 ,分子量为 95kDa ,还原后为 10 8kDa。经不同凝胶亲和层析、凝胶电泳分析 ,得到血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体复合物 ,为进一步筛选单克隆抗体和进行药物研发打下了基础。

房颤患者血小板膜糖蛋白Ⅱ_b/Ⅲ_a受体的变化及意义

目的 :探讨心房纤颤患者血小板膜糖蛋白 (GP)Ⅱb/Ⅲa 受体的变化及其临床意义。方法 :采用全血法流式细胞术(FCM )对 2 2例房颤患者静脉血中GPⅡb/Ⅲa 的含量进行检测 ,并与 2 6例窦性心律者对照。结果 :房颤患者血小板膜GPⅡb/Ⅲa 显著高于对照组 (P <0 .0 1) ;房颤患者中的持续房颤组高于阵发房颤组 (P <0 .0 1)。结论 :房颤引起血小板激活 ,激活程度可能与房颤持续时间有关。房颤患者处于血栓前状态。检测GPⅡb/Ⅲa 对评估房颤患者的栓塞危险性及指导抗凝、减少栓塞有重要意义。

血小板糖蛋白GPⅡb和GPⅢa在人类肾小球疾病中的变化及作用

目的：本实验观察外周血小板膜上ＧＰⅡｂ、ＧＰⅢａ在各种肾小球疾病中不同肾功能状态及透析与否中的变化，探讨 ＧＰⅡ ｂ、ＧＰⅢａ在肾小球疾病中的作用。方法：测定 ４８例血小板膜上 ＧＰ Ⅲ ｂ、ＧＰⅢａ、Ｐ－ １４０分子量及血浆 ｖＷＦ变化。 Ａ组：１８例肾功能正常组；Ｂ组：１０例肾衰竭非透析组；Ｃ组：２０例肾衰竭透析组；另设 Ｄ组：２０例无肾脏疾病正常对照。结果：外周血小板膜上ＧＰ Ⅱｂ、ＧＰⅢａ、Ｐ－１４０在Ａ组明显升高，Ｂ、Ｃ组明显下降，ｖＷＦ在Ａ、Ｂ、Ｃ组均明显增加。结论：ＧＰ Ⅱｂ、ＧＰⅢａ与肾小球疾病中凝血功能紊乱有关，可能与血小板在肾脏的致病作用相关。

脑梗死急性期患者血小板膜GPⅡb/Ⅲa复合物和P-选择素的表达

目的观察血小板膜GPⅡb/Ⅲa复合物和P-选择素在脑梗死急性期患者体内的表达。方法对比脑梗死急性期患者(脑梗组)及健康对照者(对照组)血小板膜GPⅡb/Ⅲa复合物和P-选择素的表达水平。观察脑梗组中高危组、高血压组、糖尿病组、高血脂组和无危组的血小板膜GPⅡb/Ⅲa复合物和P-选择素表达水平。结果脑梗组血小板膜GPⅡb/Ⅲa复合物及血小板膜P-选择素表达高于对照组(P<0.01);高危组、高血压组、糖尿病组、高血脂组的血小板膜GPⅡb/Ⅲa复合物和P-选择素均高于无危组(P<0.05)。结论血小板膜GPⅡb/Ⅲa复合物和P-选择素可作为表明血小板活化的敏感指标。高血压、糖尿病、高血脂等危险因素可促进血小板活化。

血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂的进展与临床评价

目的:本文介绍血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂的进展与评价。方法:采用国内、外文献综述方法。结果及结论:作为抗血小板药中的一支奇葩,血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂进展十分迅速,对膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa受体选择性高,在治疗血栓、急性心肌梗死、急性冠脉综合征、非ST段抬高心肌梗死者方面展现了良好的治疗前景。

血小板膜糖蛋白GP Ⅱb/Ⅲa及其受体拮抗剂与冠心病

血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa是血小板膜上的一种糖蛋白受体,在凝血过程中的血小板黏附和聚集中起关键作用,血小板激活导致GPⅡb/Ⅲa构型发生变化,继而使GPⅡb/Ⅲa受体与配体纤维蛋白原的结合加强,纤维蛋白原在相邻血小板分子间形成桥梁,导致血小板聚集的加速。GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂正是基于这一原理应用于冠心病的治疗中,临床实验已证实其在PTCA术后、不稳定性心绞痛、急性心肌梗死具有良好的疗效,研究GPⅡb/Ⅲa及其受体拮抗剂具有重要意义。因而,本文对GPⅡb/Ⅲa及其受体拮抗剂与冠心病作一简要阐述。

噬菌体表面展示技术筛选抗血小板GPⅡb/Ⅲa复合物单链抗体

目的 用噬菌体表面展示技术 ,直接从抗血小板表面蛋白全套单链抗体噬菌体展示文库中筛选能与糖蛋白 (GP)Ⅱb/Ⅲa复合物高亲合力结合的单链抗体克隆 ,为开发有自主知识产权的抗栓药物奠定基础。方法 从活化血小板免疫的小鼠脾淋巴细胞中提取总RNA ,反转录成cDNA后 ,用抗体可变区混合引物扩增全套轻、重链可变区基因 ,经重叠延伸反应 ,装配成单链抗体 (ScFv)基因 ,将其克隆到噬菌体载体pHEN1中 ,构建单链抗体噬菌体抗体库。对抗体库进行亲合筛选后 ,ELISA法鉴定抗GPⅡb/Ⅲa复合物单链抗体。结果 经过 4轮“吸附———竞争性洗脱———扩增”的富集过程 ,phage -ELISA得到一个ELISA活性较高的能与GPⅡb/Ⅲa结合的克隆。序列测定符合抗体可变区结构特点。结论 成功构建了全套抗血小板表面蛋白单链抗体噬菌体展示文库 。

血小板糖蛋白受体Ⅱb～Ⅲa复合体基因多态性与冠心病的相关性

目的探索血小板糖蛋白（Gp）Ⅱb～Ⅲa复合体的基因多态性在浙江地区汉族人群中的分布及其与冠心病发生、发展的关系。方法采用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性方法检测125例冠心病患者（冠心病组）和105例冠状动脉造影阴性者（对照组）GpⅡb～Ⅲa复合体基因的多态性，比较其差异并分析其相关性。结果浙江地区汉族人群中存在GPⅡb基因多态性；冠心病组ab、bb基因型的分布均显著多于对照组（P〈0.01）；b等位基因频率显著高于对照组（P〈0.01）；冠心病组病变支数越多b等位基因频率越高（P〈0．05）；ab和bb基因型在心肌梗死患者中的分布显著高于非心肌梗死患者（P〈0．01）。GpⅡb基因各基因型在冠心病危险因子中的分布并无明显差异（P〉0．05）。结论GPⅡb基因多态性可能与冠心病的病变支数及临床类型有关，b等位基因可能是冠心病发生、发展的易感基因，

血小板膜糖蛋白Ⅱb-Ⅲa复合体研究进展

运用凝胶电泳方法可将血小板膜糖蛋白(GP)分为若干个型和亚型。80年代初Kunilzi等用交叉免疫电泳技术证实GPⅡb和GPⅢa以钙依赖性二聚体(GPⅡb-Ⅲa)形式存在。以后许多实验结果提示GPⅡb-Ⅲa结构中含有纤维蛋白原(Fg)结合位点,在血小板聚集过程中发挥重要作用。近年来在GPⅡb-Ⅲa研究中广泛采用了单克隆抗体和电子显微镜等方法,进一步揭示了GPⅡb-Ⅲa的结构、性质硬变化规律。

红花注射液对急性冠状动脉综合征患者血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体影响的随机对照研究

背景:血小板表面糖蛋白(glycoprotein,GP)Ⅱb/Ⅲa受体是评价血小板活化的重要指标,具有活血化瘀作用的中成药红花注射液对该指标的影响对于探讨其抗血小板凝集作用机制及疗效有重要意义。目的:观察红花注射液对急性冠状动脉综合征患者血小板表面糖蛋白GPⅡb/Ⅲa受体的影响,探讨红花注射液在抗血小板凝集治疗中的作用及其机制。设计、场所、对象和干预措施:选择2008年9月至2009年5月在上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院心血管内科住院的急性冠状动脉综合征患者64例,用随机数字表法分为红花注射液治疗组(32例,常规西药加红花注射液)与对照组(32例,常规西药),两组疗程均为14 d。主要结局指标:采用免疫荧光标记法和流式细胞仪检测治疗前后血小板活化标志物GPⅡb/Ⅲa复合物(CD41)、P选择素(CD62p)和溶酶体膜糖蛋白(CD63)的表达,同时观察红花注射液对急性冠状动脉综合征患者心绞痛症状及近期预后的影响。结果:对照组中有4例患者因提前出院而退出试验。对照组和治疗组的CD41比例、CD41抗体荧光量治疗后比治疗前均有所降低,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);治疗后治疗组CD41比例、CD41抗体荧光量低于对照组(P<0.05);两组CD62p比例和CD63比例治疗后均呈现出一定的下降趋势,但与治疗前比较差异无统计学意义。两组患者在住院14 d中均未发生死亡、心肌梗死、脑卒中事件,红花注射液治疗组患者心绞痛症状缓解和心电图表现均明显好于对照组。结论:红花注射液具有抑制血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa受体表达的作用,对急性冠状动脉综合征患者心绞痛具有很好的缓解作用,可增强常规西药抗血小板活化的作用。

老年高血压合并2型糖尿病患者血小板表面P-选择素及糖蛋白Ⅱb/Ⅲa的变化

探讨老年高血压合并 2型糖尿病患者血小板膜上P 选择素 (CD6 2 )及糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(PAC 1 )的变化 ,采用流式细胞术 (FCM)以单克隆抗体分子作为探针检测健康老年人及高血压合并 2型糖尿病患者血小板膜上CD6 2的阳性百分率 (CD6 2 % )、CD6 2的几何荧光强度 (CD6 2MFI)、PAC 1的阳性百分率及PAC 1的几何荧光强度的表达量。结果显示 ,老年高血压合并 2型糖尿病患者血小板膜上CD6 2 %、CD6 2MFI、PAC 1 %及PAC 1MFI的表达量明显升高 ,但与当日血压、血糖及血脂无相关关系。研究表明 ,CD6 2及PAC 1是血小板活化的敏感指标 ,高血压合并 2型糖尿病患者有血小板活化现象 ,为高血压合并 2型糖尿病患者除了充分降压、降脂及降糖治疗外 。

血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂在急性冠脉综合征应用研究的进展

血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂(GPI)通过占据GP Ⅱb/Ⅲa受体的结合位点,阻碍纤维蛋白原与其结合,进而抑制血小板聚集,是迄今最强、最具应用价值的抗血小板药物。本文综述其在ACS应用的安全性和有效性研究进展。

巴曲酶对血小板膜蛋白GPⅡb/Ⅲa受体的影响及应用研究

目的:1.明确巴曲酶有无血小板膜蛋白GPⅡb/Ⅲa受体拮抗作用。2.探讨巴曲酶与阿司匹林联合治疗急性缺血性脑梗死的协同作用。方法:采用随机、开放及疗程平行组进行临床研究。将102例急性缺血性脑梗死患者随机分成单用阿司匹林组(n=23)、单用DF-521组(n=35)及两者联合治疗组(n=44),观察治疗前后血小板聚集率、GPⅡb/Ⅲa受体表达、纤维蛋白原水平、TXB2、影像学变化、生活自理能力(HBI)及3个月时功能随访。结果:3种治疗方案均有抗血小板聚集作用,联合治疗组作用最明显(P<0.05)。单用阿司匹林及联合治疗组TXB2水平明显降低,单用巴曲酶及联合治疗组治疗后GPⅡb/Ⅲa、纤维蛋白原水平降低差异有统计学意义。3个月生活自理能力随访显示联合治疗组(70.45%)优于单用巴曲酶组(45.71%)优于单用阿司匹林组(17.399%)。结论:DF-521有GPⅡb/Ⅲa受体拮抗作用,与ASA合用后从不同的作用机制发挥抗栓作用。

血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂在急性冠状动脉综合征中的应用

冠状动脉粥样硬化是一种慢性炎症性疾病,在其漫长的病程中,常会由于斑块破裂或糜烂导致局部血栓形成,从而导致冠状动脉的完全或部分阻塞,临床上表现为急性冠状动脉综合征。近年来,随着对动脉粥样硬化性疾病认识的进展,抗血小板治疗已成为冠心病治疗中的重要环节。

血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa测定在诊断血小板无力症中的应用

目的:探讨流式细胞术测定血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(CD41/CD61)及其在血小板无力症(GT)诊断中的初步应用。方法:以流式细胞术结合免疫荧光标记法检测血小板CD41和CD61的阳性百分率,观察30例正常人、1例血小板无力症疑似患者及其父母的血浆CD41和CD61的阳性表达率。结果:正常人血浆阳性表达率CD41和CD61的均值分别为93·10%和93·87%;患者、患者父亲和母亲CD41、CD61阳性表达率分别为0·02%、0·06%;97·4%、96·6%和98·1%、96·8%。结论:用流式细胞仪测定CD41和CD61的阳性表达率是检测GPⅡb/Ⅲa的可靠方法,可用于临床血小板无力症的诊断。

免疫性血小板减少患者血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa的表达及意义

目的检测免疫性血小板减少性紫癜(ITP)患者血小板表面糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa的表达情况并探讨其临床意义。方法应用流式细胞术检测ITP、非免疫性血小板减少患者及健康对照血小板表面GPⅡb/Ⅲa的阳性表达率。结果ITP、非免疫性血小板减少患者血小板数较健康对照明显减少(P<0.01),ITP组与非免疫性血小板减少患者血小板数差异无统计学意义(P>0.05);ITP、非免疫性血小板减少患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa的阳性表达率较健康对照明显减少(P<0.01),ITP较非免疫性血小板减少患者的血小板GPⅡb/Ⅲa低,且差异有统计学意义(P<0.01)。结论流式细胞术检测血小板GPⅡb/Ⅲa对ITP的诊断、鉴别诊断指导用药有一定意义。

血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂在治疗急性冠状动脉综合征中的应用

急性冠状动脉综合征的主要发病机制是冠状动脉内粥样斑块破裂，血小板活化聚集．血小板血栓形成，因此抗血小板治疗是治疗急性冠状动脉综合征的关键。血小板糖蛋白Ⅱb／Ⅲa（GPⅡb／Ⅲa）受体拮抗剂是通过抑制血小板聚集的最终共同通路发挥抗血小板作用，其抗血小板作用更彻底。国外血小板GPⅡb／Ⅲa受体拮抗剂应用于临床已经有10余年的历史，也进行了多个大规模、随机、多中心、双盲、前瞻性临床研究（PRISM、PRISMPLUS、RESTORE），