中国鄂温克族和达斡尔族人群中血小板膜糖蛋白Ib(GPIb)的多态性

研究旨在进一步探索同一人种的不同民族之间 GPIb的多态性是否存在差异。血小板从 84名健康鄂温克族、85名达斡尔族青年志愿者采血分离而获得。血小板样品经 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS- PAGE)后 ,再转移至硝酸纤维素膜上(Western blotting) ,用生物素化的麦胚凝集素 (WGA/ Bio)偶联辣根过氧化酶复合物试剂盒 (ABC kit)分步孵育 ,再以 4-氯 - 1-萘酚显影。膜上呈现的深灰色带即是 GPIbα链 ,其分子量分别为 141、 136、 132、 12 8k D,此即 A、B、C、D四型 ,此为基因型 ,其中每两型构成一个表型。本研究证明 ,在我国鄂温克族人群中 ,等位基因 A、B、C、D的频率分别为 0 .113、0 .375、0 381、 0 .131;在达斡尔族中 ,A型为 0 .12 4、B型为 0 .40 6、C型为 0 .35 9、D型为 0 .112。经统计学分析 ,在这两个民族的人群之间 ,其 GPIb各基因频率无显著性差异。两个民族人群的 GPIb表型经卡方检验也无显著性差异。由此结果说明 ,鄂温克、达斡尔两个民族的人群之间 。

蛇毒血小板膜糖蛋白Ib结合蛋白研究进展

血栓形成在动脉粥样硬化、急性心肌梗死及PTCA术后再狭窄等病理过程中起着重要作用.通过对血小板栓塞形成的机制研究表明:血浆中血管假性血友病因子(vWF)与血小板GPIb的相互作用在止血过程和血栓形成的早期阶段起着关键作用.vWF主要来源内皮和巨核细胞,作为分子桥介导血小板和内皮下胶原的粘附反应,与GIb结合位点位于vWF分子509～695残基之间A1重复区的二硫环上.

维持性血液透析患者血小板膜糖蛋白Ibα和相关标志物的表达及意义

目的研究维持性血液透析(MHD)患者外周血血小板膜糖蛋白Ibα(GPIbα)、α颗粒膜糖蛋白(CD62P)和溶酶体膜蛋白(CD63)的表达及检测血小板最大聚集率,分析其与健康对照组的差异。方法选取2015年8月至2016年12月期间在中山大学附属第八医院接受MHD的慢性肾衰竭患者49例和体检中心健康人群33例作为研究对象,采用流式细胞术检测MHD患者组和健康对照组外周血血小板膜糖蛋白GPIbα、CD62P和CD63的表达。采用电阻法检测血小板最大聚集率。结果相较于健康对照组,MHD患者组血小板膜糖蛋白GPIbα表达量降低,差异具有统计学意义(P<0.01)。CD62P表达升高,差异无统计学意义(P=0.08)。CD63的表达升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。血小板最大聚集率下降,差异具有统计学意义(P<0.01)。MHD患者与健康对照组之间的血小板膜糖蛋白GPIbα、CD63表达和血小板最大聚集率的差异明显。结论MHD患者血小板GPIbα表达下降,血小板最大聚集率降低,血小板聚集功能紊乱激活血小板,而血小板CD63表达升高,血小板进一步活化导致患者高凝状态加剧,可能增加血液透析患者动静脉内瘘血栓形成等事件的发生率。

100例脑梗死患者血小板糖蛋白Ⅰbα基因多态性测定及临床意义的研究

目的探讨血小板糖蛋白Ⅰbα基因HPA2多态性在脑梗死发病中的作用。方法以分子生物学技术采用PCR方法测定100脑梗死患者与正常对组血小板糖蛋白Ⅰbα基因HPA2多态性。结果100例脑梗死患者组、大动脉粥样硬化型脑梗死患者组及小动脉闭塞型脑梗死患者组(TOAST分型)与相应对照组之间GPⅠbαHPA2基因型频率的分布差异无显著性;大动脉粥样硬化型中杂合突变型比例(16.1%)要高于小动脉闭死型中杂合突变型比例(10.1%),但差异无显著意义。结论GPⅠbαHPA2基因杂合突变型可能并非是脑梗死的危险因素。

血小板膜糖蛋白1bα基因Kozak序列-5T/C多态性与冠心病的关系

目的探讨血小板膜糖蛋白Ibα(GPIbα)基因Kozak-5T/C多态性与冠心病及其病变程度的关系。方法应用聚合酶链反应—限制型片段长度多态性技术(PCR-RELP)检测196例浙江地区汉族人(冠心病组105例,对照组91例)Kozak-5T/C基因型及等位基因频率。结果GPIbα基因Kozak-5T/C多态性在冠心病组及对照组,单支病变组与多支病变组之间的分布差异没有显著性。结论GPIbα基因Kozak-5T/C多态性与冠心病的关系仍需进一步探讨。

龙柴降血方对原发性血小板增多症患者凝血功能及血小板活化蛋白的影响

目的观察龙柴降血方对原发性血小板增多症(ET)患者凝血功能及血小板活化蛋白的影响。方法选取2020年1月—2021年10月中国中医科学院西苑医院收治的ET患者22例,给予龙柴降血方治疗4个月,观察治疗前后血栓弹力图指标[凝血时间(R)、凝血速率(K)、纤维蛋白功能(Angle)、血栓最大振幅(MA)、血栓最大振幅时间(TMA)、即时振幅(A)、30 min振幅(A30)、从血样开始检测到曲线分叉所需时间(SP)、血凝块溶解时间(CLT)]、高凝状态发生率和积分变化。选取其中15例ET患者,采用平行反应监测(PRM)技术检测患者治疗前后血小板活化蛋白[血小板膜糖蛋白Ibα(GPIbα)、糖蛋白VI(GPVI)、选择素-P(SELP)]表达水平,分析比较血小板聚集改善患者和血小板聚集增强患者上述各蛋白表达水平的差异;取5例健康者和10例ET患者治疗前后血清,采用Western blot法检测血清GPIbα表达情况;分析15例ET患者MA与血清GPIbα表达水平的相关性。结果与治疗前比较,龙柴降血方治疗后MA、CLT、高凝状态发生率、高凝状态积分和血清GPIbα、GPVI表达水平均明显降低(P均<0.05),血清SELP表达水平无明显变化(P>0.05)。治疗后血小板聚集改善患者血清GPIbα表达水平明显低于血小板聚集增强患者(P<0.05),GPVI表达水平无明显变化(P>0.05)。与健康人相比,10例ET患者治疗前血清GPIbα相对表达量明显增高(P<0.05);10例ET患者治疗后血清GPIbα相对表达量较治疗前明显降低(P<0.05)。龙柴降血方治疗后MA下降与GPIbα表达下调呈正相关(r=0.6986,P<0.05)。结论龙柴降血方能够抑制ET患者血小板聚集,改善高凝状态,其机制可能与抑制GPIbα蛋白介导的血小板活化信号通路有关。

血小板膜糖蛋白I bα基因多态性与脑梗死关系的研究

目的:探讨血小板膜糖蛋白I bα基因HPA2多态性与脑梗死之间的关系。方法:选取按年龄、性别、有无高血压及糖尿病病史相匹配的病例组及对照组各100例,PCR扩增GPI bα基因长为588bp的片段,产物经限制性内切酶Hinl I消化后确定其基因型。结果:在总病例组、大动脉粥样硬化型脑梗死组及小动脉闭塞型脑梗死组(TOAST分型)与相应对照组之间GP I bαHPA2基因型频率的分布差异无显著性;大动脉粥样硬化型中杂合突变型比例(16.1%) 要高于小动脉闭塞型中杂合突变型比例(10.1%),但差异无显著意义。结论:GP I bαHPA2基因杂合突变型可能并非脑梗死的危险因素。

糖蛋白Ibα基因VNTR多态性与冠心病的相关性

目的探讨皖北地区汉族人群血小板糖蛋白(GP)Ibα基因的可变数目串联重复序列(VNTR)多态性与冠心病发病的相关性。方法采用病例对照研究,以多聚酶链反应(PCR)技术,结合琼脂糖凝胶电泳和溴乙锭染色,对皖北地区136例冠心病患者和与病例组年龄、性别相匹配的155例健康体检者(对照组)的血小板GPIbα基因VNTR多态性进行检测。结果实验仅观察到2种等位基因:B、C,3种基因型:BB、BC和CC。冠心病组VNTR多态性基因型与对照组相比差异有统计学意义(P【0.001),但与冠脉病变严重程度无明显相关性(P】0.05)。多因素Logistic回归分析显示,VNTR CC基因型为冠心病发病的一个独立危险因素(OR=2.744,95%CI:1.122~6.707),而BC基因型为冠心病发病的遗传保护因素(OR=0.299,95%CI:0.127~0.700)。结论皖北地区汉族人群中血小板GPIbα基因VNTR多态性与冠心病的发病明显相关,但VNTR基因型分布与冠脉病变严重程度并无明显相关性。

安菲博肽保护小鼠缺血性脑损伤的抗血小板活化机制

目的探究安菲博肽(ANF)对小鼠缺血性脑损伤的保护作用的抗血小板活化机制。方法用改良线栓法制造小鼠大脑中动脉短暂性闭塞(t MCAO)的缺血性脑损伤模型。小鼠随即分为:假手术组、模型组、脑缺血组、ANF(4、2、1μg/kg)组及阳性药替罗非班(TRF,0. 5 mg/kg)组。ANF组及TRF组在小鼠大脑中动脉短暂性闭塞至脑缺血90min后进行再灌注,1 h后给予ANF或TRF,给药方法为尾静脉注射。在小鼠脑缺血再灌注24 h后,分别使用ELISA法测定各组小鼠血清血小板球蛋白(β-TG)和可溶性P-选择素水平;免疫组化检测各组小鼠的脑组织中血管性假血友病因子(v WF)的表达;免疫荧光法检测各组小鼠脑组织v WF和血小板膜糖蛋白(GP) Ib表达。结果 ANF(4、2μg/kg)可显著降低缺血再灌注24 h后t MCAO小鼠血清中可溶性P-选择素和β-TG的浓度,降低t MCAO小鼠缺血脑组织微血管v WF和GPIb的表达丰度。结论 ANF可能通过抑制血小板的活化从而产生对脑缺血小鼠大脑的保护作用,ANF通过降低微血管GPIbα和v WF的表达丰度,抑制可溶性P-选择素和β-TG的过度释放,进而影响血小板黏附、聚集及血栓形成,从而减轻脑缺血再灌注损伤。

川崎病患儿血小板膜糖蛋白Ibα基因多态性分析

目的研究血小板膜糖蛋白Ibα（GPIbot）基因HPA-2a／b多态性与KD发病及并发冠状动脉损伤（CAL）之间的关系。方法应用聚合酶链反应-限制性内切酶片断长度多态性分析技术结合琼脂糖凝胶电泳技术，检测30例KD患儿和60例健康对照组儿童GPIbα基因HPA-2a／b多态性位点的基因型和等位基因分布。结果本组KD病例和健康对照组儿童GPIbα基因HPA-2a／b的基因型均只有TC型和CC型，而未发现TT型。KD组GPIbα基因HPA-2a／b多态性的CC、TC、TT基因型分布频率和C、T等位基因频率与健康对照组比较差异均无统计学意义（χ2=0．052、0．048，P均〉0．05），KD组中合并CAL组与无CAL组基因型分布频率和等位基因频率比较差异亦无统计学意义（χ2=2．672、2．481，P均〉0．05）。结论GPIba基因的HPA-2a／b多态性与KD及其CAL的发生均无明显相关性。

血链球菌感染与冠心病关系的研究进展

血链球菌为寄居在口腔中的有益菌群 ,能对口腔中的一些致病菌产生抑制作用。它可通过表面抗原使血小板产生粘附、聚集 ,其在血小板表面的结合位点在血小板膜糖蛋白Ib附近。在血小板聚集前有一段较长的延迟期为血链球菌致血小板聚集的特点。单核细胞在血链球菌的刺激下表达大量的组织因子 ,激活外源性凝血途径形成血栓。还存在其他机制共同参与冠心病发生。本文对有关血链球菌感染与冠心病关系的研究进展进行综述 ,提出血链球菌感染可能是冠心病的重要危险因素。