血浆可溶性血小板膜糖蛋白Ⅴ与冠心病的相关性分析

目的:检测冠心病(coronary heart disease,CHD)患者血浆可溶性血小板糖蛋白Ⅴ(soluble platelet glycoproteinⅤ,sGPⅤ)的变化,探讨其与CHD的相关性。方法:用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbnent assay,ELISA)法分别测37例行冠脉造影患者的sGPⅤ水平,Gensini积分评价冠脉病变程度,进行统计学分析。结果:随着Gensini积分的增高,sGPⅤ质量浓度逐渐增高,两者呈正相关(r=0.948,P<0.01)。结论:sGPⅤ在冠脉病变患者中增高,对冠脉的严重程度有预测作用。

溃疡性结肠炎患者血小板膜糖蛋白Ⅰb/Ⅸ/Ⅴ复合物与疾病严重程度、血小板激活的相关性

目的探索溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)患者血小板膜糖蛋白Ⅰb/Ⅸ/Ⅴ(glycoproteinⅠb/Ⅸ/Ⅴ,GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ)复合物与疾病严重程度、血小板激活的关系。方法选取了54例活动期UC患者和35名健康志愿者,采用美国胃肠病学会制订的临床指南对活动期UC患者的疾病严重程度进行分级。用比浊法检测UC患者和志愿者血小板最大聚集率(maximum agglutination rate,MAR)。采用流式细胞仪检测血小板膜糖蛋白Ⅰb/Ⅸ/Ⅴ复合物、血小板激活标志物血小板α颗粒膜糖蛋白(CD62P)和血小板表面纤维蛋白原受体(PAC-Ⅰ)的水平。结果活动期UC患者血小板MAR、CD62P和PAC-Ⅰ的阳性表达率较正常对照组明显升高,而GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ复合物的表达显著降低。在轻、中以及重度活动期UC患者中,血小板MAR、GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ复合物的表达、CD62P和PAC-Ⅰ的阳性表达率差异具有统计学意义。相关性分析显示血小板GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ复合物的表达与血小板激活指标MAR、CD62P、PAC-Ⅰ呈负相关。结论血小板GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ复合物与血小板激活相关,可能在UC的发展中起作用并反映UC严重程度。

溃疡性结肠炎患者血浆P-选择素、血小板膜糖蛋白Ⅰb/Ⅸ/Ⅴ复合物与疾病活动性的关系

目的探索溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)患者血浆P-选择素(P-selectin)、血小板膜糖蛋白(GP)Ⅰb/Ⅸ/Ⅴ复合物与疾病活动性的关系。方法选择28例UC活动期、16例UC缓解期患者和26例健康志愿者,采用ELISA法检测血浆P-selectin,比浊法检测血小板最大聚集率(MAR),并采用流式细胞仪检测GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ复合物。结果活动期UC患者血浆P-selectin、血小板MAR较缓解期患者及健康者明显升高(P<0.01或P<0.05),而GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ复合物的表达显著降低(P<0.01或P<0.05)。结论溃疡性结肠炎患者存在血小板激活,血浆P-selectin和GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ复合物作为血小板激活的标志物,与疾病的活动程度相关,可以作为UC活动期的指标。

益气活血方及其拆方对出血性血小板病患者GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ复合物及GPⅠbα表达的影响

目的观察益气活血方及其拆方对出血性血小板病患者凝血酶受体血小板膜糖蛋白(GP)Ⅰb/Ⅸ/Ⅴ复合物及其组分GPⅠbα的表达的影响来探讨其配伍规律。方法68例出血性血小板病患者及32例健康人静脉血在静息状态及体外加益气活血方及其拆方中药孵育后,采用流式细胞术检测血小板GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ及GPⅠbα的表达。结果静息状态时,患者GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ及GPⅠbα的表达明显低于健康人;益气活血方及其部分拆方组能使患者凝血酶受体GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ及GPⅠbα恢复至正常水平;而单味中药组作用不明显;方中的主药黄芪与当归配伍为用,可促进血小板膜糖蛋白的表达。结论益气活血全方及其部分拆方组在受体蛋白水平上调节GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ及GPⅠbα的表达,是其治疗出血性血小板病的疗效机制之一。

益气活血方及其拆方对出血性血小板病患者静脉血iRhom2及GPⅤ表达的影响

目的观察益气活血方及其拆方对出血性血小板病患者静脉血非活性的菱形蛋白(inactive rhomboid-like protein,iRhom)2及血小板膜糖蛋白(platelet membrane glycoprotein,GP)Ⅴ表达的影响。方法选取33例出血性血小板病患者及30例血小板聚集检测无异常发现的健康献血员的静脉血,体外加益气活血方及其拆方进行中药孵育后,采用Real-time PCR法检测iRhom2 mRNA的相对表达水平,采用ELISA法检测GPⅤ蛋白表达水平。结果阴性对照组iRhom2 mRNA相对表达水平明显高于正常对照组,GPⅤ蛋白表达水平明显低于正常对照组(P<0.05)。全方组、益气活血组iRhom2 mRNA相对表达水平明显低于阴性对照组,GPⅤ蛋白表达水平明显高于阴性对照组(P<0.05)。结论益气活血方全方及其部分拆方治疗出血性血小板病的机制可能与下调iRhom2 mRNA表达及上调GPⅤ蛋白表达有关。

益气活血方对脾虚型出血性血小板病患者microRNA-126表达的影响

[目的]研究脾虚型出血性血小板病患者microRNA(miR-126)表达变化及益气活血方的疗效及可能机制。[方法]将72例脾虚型出血性血小板病患者随机分为中药组与西药组,每组各36例。另选50例健康体检者作为正常对照组。中药组用益气活血方治疗,西药组用肾上腺色腙片治疗,2组治疗周期均为8周。观察治疗后的止血疗效及血小板聚集恢复率;采用Real-time PCR法检测2组治疗前后及正常对照组的血小板miR-126表达水平;ELISA法检测血浆可溶性血小板膜糖蛋白Ⅴ(GPⅤ)的含量。[结果]中药组脾虚证倦怠乏力有效率为86.67%,西药组为72.41%(P<0.05);中药组止血总有效率为84.37%,西药组为51.52%(P<0.05);中药组血小板聚集功能恢复率为71.88%,西药组仅为9.09%,2组间差异有统计学意义(P<0.05)。2组患者治疗前miR-126表达水平及GPⅤ的含量明显低于正常对照组(P<0.05);中药组治疗8周后,miR-126表达及GPⅤ的含量升高,与西药组治疗后比较,差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]miR-126参与了出血性血小板病的病理过程;调控miR-126的表达水平、增加GPⅤ的含量可能是益气活血方治疗出血性血小板病的作用靶点之一。

通阳中药葱白提取物抑制低压低氧诱导促凝血反应的机制研究

目的研究通阳中药葱白提取物(AYMOE)对低压低氧诱导的血小板激活和促凝状态的影响。方法将42只成年雄性SD大鼠随机分为对照组(暴露于常压常氧环境)、低压低氧组(Hyp组,暴露于低压低氧环境)、Hyp+AYMOE-100组(暴露于低压低氧环境并口服AYMOE 100 mg/kg)、Hyp+AYMOE-200组(暴露于低压低氧环境并口服AYMOE 200 mg/kg)、Hyp+AYMOE-300组(暴露于低压低氧环境并口服AYMOE 300 mg/kg)、Hyp+anti-CD42c组(暴露于低压低氧环境并尾静脉注射antiCD42c 5 mg/kg)、Hyp+AYMOE-200+rh Lyn组[暴露于低压低氧环境并口服AYMOE 200 mg/kg联合尾静脉注射重组人酪氨酸蛋白激酶Lyn(rh Lyn) 4.8 mg/kg],每组6只。低压低氧暴露7 d后,ELISA检测各组大鼠血清血栓素A2(TXA2)以及血小板激活因子(PAF)含量,检测大鼠血小板的凝集率,HE染色观察大鼠肺组织病理变化,Western blot检测GPIb-Ⅸ-Ⅴ、Lyn、磷酸化的Lyn(p-Lyn)的表达。结果与对照组比较,暴露于低压低氧的各组大鼠血清TXA2、PAF水平及血小板凝集率升高,GPIb-Ⅸ-Ⅴ、Lyn、p-Lyn蛋白表达上调(P <0.05)。与Hyp组相比,Hyp+AYMOE-100组、Hyp+AYMOE-200组、Hyp+AYMOE-300组的血小板凝集率、血清TXA2、PAF的水平降低,差异均有统计学意义(P <0.05),其中以Hyp+AYMOE-200组抑制效果最明显(P <0.05)。与对照组比较,Hyp组大鼠因低氧而发生血管堵塞,肺静脉血管腔空间狭小;与Hyp组相比,Hyp+AYMOE-200组大鼠肺静脉血管栓塞明显缓解。与Hyp组相比,Hyp+anti-CD42c组和Hyp+AYMOE-200组GPIb-Ⅸ-Ⅴ、Lyn、p-Lyn蛋白表达下调,差异均有统计学意义(P <0.05)。与Hyp+AYMOE-200组比较,Hyp+AYMOE-200+rh Lyn组血小板凝集率、血清TXA2和PAF水平均较高,Lyn和p-Lyn蛋白表达均增加,差异均有统计学意义(P <0.05)。结论 AYMOE可通过抑制GPIb-Ⅸ-Ⅴ和Lyn减少低压低氧诱导的血小板激活并改善促凝状态。