急诊介入治疗前后AMI患者P选择素和血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa复合物表达研究

目的观察急性心肌梗死(Acute myocardial infarction,AMI)患者急诊经皮冠状动脉介入治疗(简称介入治疗)前后血小板活化指标P选择素和血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa复合物表达的变化,探讨介入治疗对AMI患者血小板活化的影响。方法选取疑似冠心病且冠脉造影正常的21例患者为对照组,行急诊介入治疗的AMI患者24例(AMI组),应用流式细胞技术检测对照组及AMI组患者行介入治疗前后的P选择素和血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa复合物表达率。结果与对照组比较,AMI组患者P选择素和血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa复合物表达率均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);介入治疗后3dAMI组患者P选择素和血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa复合物表达率较术前下降,但与对照组比较仍有较高水平表达,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论AMI患者急诊介入治疗前后体内血小板均处于高度活化状态,AMI患者术后抗血小板聚集治疗极其重要。

血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂的进展与临床评价

目的:本文介绍血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂的进展与评价。方法:采用国内、外文献综述方法。结果及结论:作为抗血小板药中的一支奇葩,血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂进展十分迅速,对膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa受体选择性高,在治疗血栓、急性心肌梗死、急性冠脉综合征、非ST段抬高心肌梗死者方面展现了良好的治疗前景。

血小板膜糖蛋白GP Ⅱb/Ⅲa及其受体拮抗剂与冠心病

血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa是血小板膜上的一种糖蛋白受体,在凝血过程中的血小板黏附和聚集中起关键作用,血小板激活导致GPⅡb/Ⅲa构型发生变化,继而使GPⅡb/Ⅲa受体与配体纤维蛋白原的结合加强,纤维蛋白原在相邻血小板分子间形成桥梁,导致血小板聚集的加速。GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂正是基于这一原理应用于冠心病的治疗中,临床实验已证实其在PTCA术后、不稳定性心绞痛、急性心肌梗死具有良好的疗效,研究GPⅡb/Ⅲa及其受体拮抗剂具有重要意义。因而,本文对GPⅡb/Ⅲa及其受体拮抗剂与冠心病作一简要阐述。

巴曲酶对血小板膜蛋白GPⅡb/Ⅲa受体的影响及应用研究

目的:1.明确巴曲酶有无血小板膜蛋白GPⅡb/Ⅲa受体拮抗作用。2.探讨巴曲酶与阿司匹林联合治疗急性缺血性脑梗死的协同作用。方法:采用随机、开放及疗程平行组进行临床研究。将102例急性缺血性脑梗死患者随机分成单用阿司匹林组(n=23)、单用DF-521组(n=35)及两者联合治疗组(n=44),观察治疗前后血小板聚集率、GPⅡb/Ⅲa受体表达、纤维蛋白原水平、TXB2、影像学变化、生活自理能力(HBI)及3个月时功能随访。结果:3种治疗方案均有抗血小板聚集作用,联合治疗组作用最明显(P<0.05)。单用阿司匹林及联合治疗组TXB2水平明显降低,单用巴曲酶及联合治疗组治疗后GPⅡb/Ⅲa、纤维蛋白原水平降低差异有统计学意义。3个月生活自理能力随访显示联合治疗组(70.45%)优于单用巴曲酶组(45.71%)优于单用阿司匹林组(17.399%)。结论:DF-521有GPⅡb/Ⅲa受体拮抗作用,与ASA合用后从不同的作用机制发挥抗栓作用。

血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa测定在诊断血小板无力症中的应用

目的:探讨流式细胞术测定血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(CD41/CD61)及其在血小板无力症(GT)诊断中的初步应用。方法:以流式细胞术结合免疫荧光标记法检测血小板CD41和CD61的阳性百分率,观察30例正常人、1例血小板无力症疑似患者及其父母的血浆CD41和CD61的阳性表达率。结果:正常人血浆阳性表达率CD41和CD61的均值分别为93·10%和93·87%;患者、患者父亲和母亲CD41、CD61阳性表达率分别为0·02%、0·06%;97·4%、96·6%和98·1%、96·8%。结论:用流式细胞仪测定CD41和CD61的阳性表达率是检测GPⅡb/Ⅲa的可靠方法,可用于临床血小板无力症的诊断。

急性脑梗死患者血小板膜糖蛋白与血小板参数的研究

目的:探讨血小板功能指标与急性脑梗死(ACI)的关系,寻找精确判断血小板功能状态的方法。方法:采用流式细胞仪(FCM)检测51例ACI患者(病例组)和29例健康体检者(对照组)全血活化血小板膜糖蛋白GP b/a复合物单克隆抗体(PAC-1)、血小板α-颗粒膜蛋白抗P-选择素单克隆抗体(CD62P)的阳性率;应用全自动血球分析仪检测血小板的参数。结果:病例组PAC-1、CD62P的阳性率和血小板平均体积(MPV)均明显高于对照组,差异均有显著性(P<0.05或P<0.01);而血小板计数(PC)、血小板分布宽度(PDW)和大血小板比率(LPR)有增高趋势,但两组间比较差异均无显著性(P均>0.05)。直线相关分析显示:PAC-1与MPV(r=0.322,P=0.004)及PAC-1与LPR(r=0.224,P=0.046)之间存在正相关关系,CD62P与MPV间亦存在正相关关系(r=0.240,P=0.032),PC、PDW与膜糖蛋白之间无相关关系(P>0.05)。结论:ACI患者体内存在血小板活化,血小板膜糖蛋白和血小板参数共同参与这一过程;活化GP b-a与MPV有非常显著的正相关关系。

血小板膜糖蛋白基因Ia C807T多态性与缺血性脑卒中关系的Meta分析

目的 运用系统评价和Meta分析评估血小板膜糖蛋白（GP）基因C807T变异和缺血性脑卒中（IS）之间的相关关系.方法 广泛检索中英文数据库中的相关研究,对符合纳入标准的每个研究提取等位基因和基因型频率,纳入研究的质量采用NOS量表评估.使用随机或固定效应模型计算比值比（OR）,使用Q检验检测各研究之间的异质性,运用Meta回归分析方法探讨异质性的可能来源,Egger＇s（埃格）测试和漏斗图评估发表偏倚.结果 总共15个研究纳入Meta分析.发现GP Ⅰa C807T多态性T等位基因或TT基因型增加了亚洲人对IS的易感性（807T等位基因：OR 1.31,95％CI为1.15～1.50,P＜0.0001;807TT基因型：OR1.44,95％CI为1.09～1.88,P=0.009）.结论 现有证据表明,GPⅠa-807 T等位基因或TT基因型增加了IS的发病风险.但该结论仍需大样本研究在不同人种中进一步验证,也应分析基因与基因、基因与环境间的交互作用.

益气活血方及其拆方对出血性血小板病患者GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ复合物及GPⅠbα表达的影响

目的观察益气活血方及其拆方对出血性血小板病患者凝血酶受体血小板膜糖蛋白(GP)Ⅰb/Ⅸ/Ⅴ复合物及其组分GPⅠbα的表达的影响来探讨其配伍规律。方法68例出血性血小板病患者及32例健康人静脉血在静息状态及体外加益气活血方及其拆方中药孵育后,采用流式细胞术检测血小板GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ及GPⅠbα的表达。结果静息状态时,患者GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ及GPⅠbα的表达明显低于健康人;益气活血方及其部分拆方组能使患者凝血酶受体GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ及GPⅠbα恢复至正常水平;而单味中药组作用不明显;方中的主药黄芪与当归配伍为用,可促进血小板膜糖蛋白的表达。结论益气活血全方及其部分拆方组在受体蛋白水平上调节GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ及GPⅠbα的表达,是其治疗出血性血小板病的疗效机制之一。

血小板GPⅡb/Ⅲa基因多态性与EDTA依赖性假性血小板减少症的相关性研究

目的通过EDTA依赖性假性血小板减少症(EDTA-dependent pseudothrombocytopenia,EDP)患者血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa基因多态性的研究,探讨其与EDTA依赖性假性血小板减少症的相关性。方法收集2017-2018年确诊EDP为实验组29例,收集健康对照组21例,应用双脱氧链终止法(sanger测序法)检测各组血小板膜糖蛋白GPⅡb HPA-3和GPⅢa HPA-6基因表型,应用2检验统计各基因多态性频率在两组之间是否有统计学差异。结果 GPⅡb HPA-3基因多态性在实验组中A/A、A/C和C/C基因型频率分别是31.0%、48.3%和20.7%,对照组分别是14.3%、52.4%和33.3%,两组之间基因多态性频率无显著差异P>0.05。GPⅢa HPA-6基因多态性在实验组中C/C和G/G基因型频率分别是6.9%和93.1%,对照组分别是19.0%和81.0%,两组之间基因多态性分布无显著差异P>0.05。GPⅢa HPA-6基因rs13306487位点后一位基因多态性在实验组中A/A、A/G和G/G基因型频率分别是3.4%、55.2%和41.4%,对照组分别是14.3%、23.8%和61.9%,两组之间基因多态性分布无显著差异P>0.05。rs13306487位点后一位纯合子基因型(A/A和G/G)与杂合子基因型A/G频率分别是44.8%和55.2%,对照组分别是76.2%和23.8%,杂合基因型A/G在实验组与对照组之间分布频率存在统计学差异(P=0.027,P<0.05)。结论 GPⅡb HPA-3和GPⅢa HPA-6不同基因表型在EDP患者与对照组两组间的分布频率无统计学差异,但膜糖蛋白GPⅢa HPA-6 rs13306487位点后一位杂合基因型A/G分布频率在两组间存在统计学差异,为后继探讨EDP遗传机制提供依据。

血小板无力症致月经过多临床诊治研究

血小板无力症是一种常染色体隐性遗传疾病,是由于先天性血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa(简称GPⅡb/Ⅲa)基因缺陷,使得GPⅡb/Ⅲa异常,引起血小板聚集功能异常而导致的出血性疾病。该病好发于青少年,临床表现主要为自幼皮肤、粘膜反复出血,在妇产科就诊的患者多以月经过多为主诉,明确诊断主要依靠实验室检查,治疗以输血和(或)输血小板对症支持治疗为主,妇科处理常以雌、孕激素止血、曼月乐环和手术切除子宫为主。为提高妇产科医师对血小板无力症的诊治认识,该文就此疾病作以综述。

血小板膜糖蛋白ⅡbHPA-3基因多态性与中国汉族人缺血性卒中的相关性

目的探讨天津市汉族人群血小板膜糖蛋白（gtycoprotein，GP）1IbHPA-3基因多态性的分布情况及其与缺血性卒中的关系。方法缺血性卒中组150例，对照组135例，应用聚合酶链反应一限制性内切酶片段长度多态性方法进行基因分型，并抽样测序验证。比较各基因型和等位基因频率分布及其与缺血性卒中的关系。结果病例组ab基因型、bb基因型和b等位基因频率均显著高于对照组（P=0．000），而aa基因型和a等位基因频率则显著低于对照组（P=0．000）。病例组不同性别和年龄组之间GPIIb基因型和b等位基因频率无显著性差异；虽然各病因学亚型之间基因型频率无显著性差异，但大动脉粥样硬化性卒中亚组b等位基因频率显著高于小血管闭塞性卒中亚组和心源性脑栓塞亚组（61．8％对46．7％对47．5％；矿=6．573，P=0．037）。多变量logistic回归分析显示，高血压（优势比7．475，95％可信区间3．700—15．003；P：0．000）和b等位基因（优势比3．678，95％可信区间1．245～10．863，P=0．018）是缺血性卒中发生的独立危险因素。结论血小板膜GPIIbHPA-3基因多态性可能与缺血性卒中发生风险相关，携带b等位基因可能是缺血性卒中的独立危险因素，尤其是大动脉粥样硬化性卒中。

血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体靶向超声造影剂的制备及体外实验研究

目的:制备血小板膜糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa受体靶向超声造影剂,探讨其体外寻靶的作用。方法:将6-氨基肽与脂质体采用交连法合成GPⅡb/Ⅲa受体靶向微泡,观察其对血小板聚集形成的微血栓的黏附效应。体外实验分2组,将靶向微泡滴加于健康人新鲜血凝块上,光镜下观察微泡与血凝块的黏附情况。对照组采用普通造影剂。结果:体外实验:靶向微泡在血凝块外围形成凝聚带,并能延伸到血凝块内部,对照组均未见微泡与血凝块的结合。结论:血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体特异性靶向微泡在体外对人新鲜血栓有趋附作用,且能特异结合。

rAAV2-GPⅡb/GPⅢa载体构建和体外表达、功能实验

为了研究rAAV载体介导的血小板无力症基因治疗的可行性,构建了由CMV启动子调控的rAAV2-Ⅱb、rAAV2-Ⅲa病毒载体,并采用多种方法验证了rAAV2-Ⅱb和rAAV2-Ⅲa病毒载体在真核细胞中的表达能力,其中包括用RT-RCR方法检测BHK-21细胞感染24小时(MOI=1×105v.g/cell)后目的基因在mRNA水平的表达,用流式细胞术的方法检测不同MOI和目的基因表达之间的量效关系,采用Westernblot的方法检测BHK-21细胞感染48小时后(MOI=1×105v.g/cell)目的基因在蛋白水平的表达,用免疫荧光法检测BHK-21细胞感染48小时后(MOI=105v.g/cell)目的基因在细胞表面的表达,以及应用PAC-I结合试验验证所表达的GPⅡb/Ⅲa蛋白功能。结果表明,在MOI=1×105v.g/cell条件下,在BHK-21细胞感染24小时后即可在mRNA水平上检测到目的基因的表达,在48小时可在蛋白水平检测到目的基因的表达;在一定剂量范围内目的基因的表达量随着MOI的增加而增加,但MOI过高反而使表达量下降,目的基因表达产物活化之后能与PAC-I结合,并具有正常的生物学活性。结论:rAAV2载体能有效地介导GPⅡb、GPⅢa基因在真核细胞内表达,所表达的产物都具有正常的生物学活性,此结果为rAAV2载体在血小板无力症基因治疗中的应用打下了基础。

汉族冠心病人GPⅢa Pl^A多态性的初步研究

目的:研究血小板膜糖蛋白GPⅢa PlA不同基因型在中国汉族人群中的分布情况,探讨PlA多态性与汉族人冠心病的遗传易感性的关系。方法:运用多聚酶链反应和限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RVLP)技术,对178例冠心病人及130例健康对照组的血小板膜糖蛋白GPⅢa plA行多态性分析,结合选择陛冠状动脉造影结果探讨两者的关系。结果:血小板膜糖蛋白GPⅢa PlA等位基因型在冠心病组均表现为PlA1／A1纯合型;正常对照组PlA的基因型亦表现为PlA1/A1型。结论:本组汉族冠心病人血小板膜糖蛋白GPⅢa PlA基因型以纯合型PlA1／A1型为主;血小板膜糖蛋白GPⅢa PlA等位基因型Pl A2／A2可能不是我国汉族人冠心病的致病因子。

血小板活化相关因子和血栓前体蛋白在严重脓毒症中的表达

目的探讨血小板活化相关因子（PAC-1、CD62P）和血栓前体蛋白（TpP）在严重脓毒症患者中的表达及其临床意义。方法前瞻性地选取2007年4月至2008年3月江苏省苏北人民医院急诊监护病房（EICU）收治的符合严重脓毒症诊断标准的患者入选严重脓毒症组（Ⅲ组），按照严重脓毒症治疗指南进行治疗，并根据28d内是否存活分为生存亚组和死亡亚组，存在感染但未发生脓毒症同期患者设为一般感染组（Ⅱ组），同期门诊体检者或健康自愿者设为正常对照组（Ⅰ组）。病例的选取均遵循随机的原则，三组的年龄、性别具有可比性；急性脑梗死、急性冠脉综合征、严重糖尿病和高脂血症者、恶性肿瘤、白血病、原发肝、肾、造血系统疾病者。长期卧床者、孕妇、近期使用过激素和免疫抑制剂者均除外。Ⅰ组和Ⅱ组均在入院第1天清晨空腹，Ⅲ组在入院第1、3、5天清晨空腹取外周静脉血，用酶联免疫吸附测定法（ELISA法）测定血栓前体蛋白（TpP），流式细胞术测定血小板膜糖蛋白（GP）Ⅱb／Ⅲa复合物纤维蛋白原受体（PAC-1）、血小板颗粒膜糖蛋白140（CD62P），并对Ⅲ组进行Marshall评分。应用SPSS 12．0软件包处理数据，多组均数间比较采用方差分析，方差齐性检验采用Levene’s法，方差齐性时采用LSD法，相关分析采用Bivariate法，以P〈0．05为差异具有统计学意义。结果共有20例纳入Ⅰ组，20例纳入Ⅱ组，30例纳入Ⅲ组，其中生存亚组19例，死亡亚组11例。入院第1天，PAC-1、CD62P、TpP在Ⅰ组与Ⅱ组之间的表达差异无统计学意义（P〉0．05），但Ⅰ组与Ⅲ组、Ⅱ组与Ⅲ组之间均差异具有统计学意义（P〈0．05）；PAC—1、CD62P，TpP在生存亚组的表达均随着病程显著下降而趋于正常，而在死亡亚组仍持续保持高值甚至显著升高，第1天时CD62P、TpP在亚组的表达差异无统计学意义（P〉0．05），但在第3天时差异具有统计学意义，分别为（2．89±1．48）％vs．（5．04±2．57）％，P〈0．01和（5．24±2．22）mg／LVS．（9．20±1．93）mg／L（P〈0．01）；而PAC-1在入院第1天亚组中的表达差异具有统计学意义（P〈0．01），为（3．15±0．42）％vs．（5．30±0．48）％。两组的Marshall评分也呈类似变化，相关性分析显示：PAC-1、CD62P、TpP与Marshall评分呈明显正相关。结论严重脓毒症的早期就存在血小板活化和微血栓形成，丽者共同参与了早期的高凝状态，在病情的发生发展过程中扮演了重要角色。动态监测CD62P和TpP有助于判断病情和预后，PAC-1具有危险分层效应，早期高表达者预后差，可尝试作为严重脓毒症的独立预警指标。

房间隔缺损封堵术患者血浆F1+2水平及血小板CD62P、CD41a表达的变化

目的:观察先天性心脏病房间隔缺损(ASD)患者置入封堵器后血浆凝血酶原片段1+2(F1+2)及血小板P选择素(CD62P)、血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体(CD41a)的变化及其意义。方法:选择40例成功进行ASD封堵术的患者,用酶联免疫吸附测定法(ELISA)及流式细胞术(FCM)分别测定其术前、术后1～2d、术后1个月、术后3个月血浆F1+2水平及血小板CD62P、CD41a的表达。结果:①ASD患者术后1～2d较术前组的F1+2水平明显增高,术后1个月降低明显,术后3个月时恢复到接近术前的水平。②ASD患者术后1～2d、术后1个月、术后3个月的CD62P及CD41a表达均较术前明显下降。结论:ASD封堵术后凝血功能一过性增强,1个月后开始明显下降,3月后大致恢复术前水平;血小板活性在术后降低。

黄芪注射液联合低分子肝素钠治疗子痫前期患者的临床研究

目的研究黄芪注射液联合低分子肝素钠对子痫前期患者的影响。方法选取本院符合入选标准的子痫前期患者64例,按随机对照原则分为2组,每组32例。对照组:25%硫酸镁20 mL+5%葡萄糖注射液20 mL,5~10 min内缓慢静脉推注,继之以25%硫酸镁40 mL+5%葡萄糖注射液500 mL,按1~2g·h^(-1)静脉滴注,硫酸镁总量25 g。试验组:在对照组基础上,皮下注射低分子肝素钠4100 U+静脉滴注黄芪注射液30 mL稀释至0.9%NaCl 250 mL,每日1次,持续治疗1周。用流式细胞仪检测糖蛋白GPⅡ/Ⅲα阳性血小板百分比,用胶体金双抗体夹心法测定血清D-二聚体值,用酶联免疫吸附试验检测血清雌激素(E_2)。结果治疗后,试验组与对照组糖蛋白GPⅡ/Ⅲα水平分别为(0.86±0.39),(1.39±0.41)%;这2组的血清D-二聚体水平分别为(1.07±0.37),(1.49±0.41)mg·L^(-1);这2组的血清E_2水平分别为(54.63±8.64),(47.82±8.21)pmol·L^(-1),试验组与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。试验组及对照组患者的妊娠终止孕周分别为(32.51±1.37),(31.26±1.24)周,这2组的新生儿体重分别为(1956.26±142.36),(1824.63±132.59)g,试验组与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。试验组与对照组药物不良反应发生率分别为31.25%(10例/32例)和40.63%(13例/32例),组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论黄芪注射液联合低分子肝素钠能安全有效的改善子痫前期孕妇的妊娠结局,且安全性较好。

依替巴肽对急性心肌梗死模型大鼠心肌一氧化氮、过氧化物及核转录因子的影响

目的:研究依替巴肽对急性心肌梗死模型大鼠心肌一氧化氮(NO)、过氧化物及核转录因子的影响。方法:将大鼠随机分为假手术组、模型组和依替巴肽低、中、高剂量(30、60、90μg/kg)组,除假手术组外其余各组大鼠建立无复流急性心肌梗死模型,于再灌注前30 min股静脉注射相应药物。检测各组大鼠心肌NO、总一氧化氮合酶(tNOS)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)水平和核转录因子-κB p65(NF-κB p65)的阳性表达。结果:与假手术组比较,模型组和依替巴肽低、中、高剂量组大鼠的NO、tNOS、iNOS、MPO、MDA水平与NF-κB p65表达均明显升高(P<0.05),eNOS活性降低(P<0.05)。与模型组比较,依替巴肽低、中、高剂量组大鼠的NO、iNOS、MPO、MDA水平与NF-κB p65表达均明显降低(P<0.05),依替巴肽中、高剂量组大鼠的tNOS水平明显降低(P<0.05)、eNOS水平明显升高(P<0.05),且与剂量呈正相关。结论:依替巴肽可通过保护血管内皮、减少中性粒细胞浸润及氧自由基释放、抑制NF-κB p65激活,从而减少急性心肌梗死模型大鼠的无复流现象。