不溶性血小板膜颗粒的制备及其功能初探

目的制备具有止血功能的不溶性血小板膜(IPM)颗粒。方法过期的浓缩血小板经过差速离心去除红细胞、白细胞和血浆,用生理盐水悬浮,经冻融破碎、离心洗涤、超声匀浆,获得大小较均一的IPM颗粒;检测其理化和功能指标:IPM颗粒大小、表面蛋白受体、聚集功能和凝血酶生成能力。结果制备得到的IPM颗粒大小为140nm左右,其表面含有糖蛋白GPⅠbα(CD42b)、糖蛋白GPⅡb-Ⅲa(CD41/CD61)、血小板内皮细胞粘附分子(CD31)、P-选择素(CD62p);体外功能试验显示:IPM颗粒在瑞斯托霉素和Ⅲ型胶原诱导下能发生聚集;凝血酶生成试验证实:IPM能为凝血因子Ⅹ酶复合物和凝血酶生成提供催化表面,参与凝血级联反应。结论应用冻融和超声相结合的方法成功制备出大小均一的IPM颗粒,其表面保留了与止血功能相关的蛋白受体;在血小板聚集诱导剂的刺激下IPM颗粒可以发生聚集反应,初步表现为止血功能。

系统性红斑狼疮患者血浆血小板膜颗粒蛋白的变化及临床意义

目的:探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者血浆血小板膜颗粒蛋白(GMP-140)的变化及其意义。方法:用ELISA法检测39例SLE患者和15名正常人血浆血小板GMP-140的含量,同时用全自动血细胞分析仪检测血常规及用魏氏法测定血沉(ESR)。结果:1.活动期SLE患者(n=27)患者血浆血小板GMP-140含量[(49.81±5.85)μg/L]明显高于缓解期SLE患者[(21.92±3.67)μg/L],(n=12)和正常对照组[(15.74±2.33)μg/L](n=15),P均<0.01。而缓解期SLE患者血浆血小板GMP-140的含量也高于正常对照组(P<0.05)。27例活动期患者中有20例进行了治疗前后的对比观察,治疗后SLE患者血浆血小板GMP-140较治疗前明显下降,但仍高于正常(P<0.05)。2.活动期SLE患者血红蛋白(Hb)、白细胞计数(WBC)、血小板计数(Bpc)均明显低于缓解期患者(P<0.01),而血沉(ESR)高于缓解期患者(P<0.01)。3.血浆血小板GMP-140的变化与ESR呈直线正相关(r=0.67,P<0.01),与血常规参数均无相关性。结论:SLE患者体内存在有血小板活化,SLE患者在活动期血浆血小扳GMP-140升高,治疗后明显下降,且与FSR呈直线正相关,说明GMP-140的变化与疾病活动性有关,可作为SLE疾病活动的指标之一;同时对部分临床表现的解释有一定的临床意义。

平均血小板体积/血小板计数、血小板α颗粒膜糖蛋白对经皮冠状动脉介入治疗即刻血流分级及预后的预测价值

目的 探讨平均血小板体积(MPV)/血小板计数(PC)、血小板α颗粒膜糖蛋白(CD62P)预测经皮冠状动脉介入治疗(PCI)即刻血流分级及预后的价值。方法 选取2018年5月至2020年2月河南省直属机关第一门诊部收治的41例PCI即刻心肌梗死溶栓治疗临床试验(TIMI)血流分级0~Ⅱ级病人(观察组)及41例PCI即刻TIMI血流分级Ⅲ级病人(对照组),比较两组及是否发生主要心血管不良事件(MACE)病人的MPV/PC、CD62P指标水平。以logistic回归方程进行多因素分析,采用受试者操作特征曲线(ROC)分析各指标对预测评估PCI即刻血流分级、预后的效能。结果 观察组MPV/PC 0.05±0.02、CD62P(52.26±14.47)%高于对照组的0.04±0.01、(38.87±12.76)%(P<0.05)。MPV/PC、CD62P仍是PCI即刻血流分级的独立相关危险因素(P<0.05);预测PCI即刻血流分级的ROC曲线下面积(AUC):MPV/PC为0.78,CD62P为0.81,MPV/PC+CD62P为0.86(P<0.05);MACE病人MPV/PC 0.06±0.02、CD62P(60.19±15.02)%高于无MACE者的0.05±0.01、(41.75±11.27)%(P<0.05);预测MACE的AUC:MPV/PC为0.76,CD62P为0.80,MPV/PC+CD62P为0.84(P<0.05)。结论 MPV/PC、CD62P均与PCI即刻TIMI血流分级有关,并能相互影响,两者联合具有较高的血流分级、MACE预测价值,有望成为预测PCI病人即刻血流分级和MACE的新方案。

佐剂性关节炎大鼠外周血血小板α颗粒膜糖蛋白的变化及新风胶囊对其影响

目的:观察佐剂性关节炎(Adjuvant arthritis,AA)血小板α颗粒膜糖蛋白(granule membrane protein 140,GMP-140)的变化及新风胶囊对其的影响。方法:将60只SD雄性大鼠随机分为正常对照组、模型对照组和甲氨喋呤、雷公藤多苷片、新风胶囊治疗组,每组12只,用弗氏完全佐剂(Freund's complete adjuvant,FCA)0.1ml分别向除正常对照组以外的其余大鼠右后足跖皮内注射诱发大鼠产生关节炎,采用流式细胞仪检测并观察各组大鼠血小板GMP-140的变化。结果:①与正常对照组相比,模型对照组大鼠血小板GMP-140及PLT、PCT、足跖肿胀度、关节炎指数显著升高(P<0.05或P<0.01)。②与模型对照组相比,治疗组均能降低GMP-140和PLT、PCT、足跖肿胀度、关节炎指数(P<0.05或P<0.01)。③AA大鼠的血小板参数GMP-140与PLT、PCT、足跖肿胀度、关节炎指数呈正相关(P<0.01或P<0.05)。结论:AA大鼠存在血小板的活化,血小板活化标志物GMP-140与足跖肿胀度、关节炎指数炎症指标及反映疾病活动性指标PLT、PCT具有相关性。GMP-140在关节炎的发生发展中起着重要作用。新风胶囊与甲氨喋呤、雷公藤多苷片一样能降低AA大鼠的足跖肿胀度、关节炎指数、PLT、PCT,而且在增加大鼠体重方面优于其他两个治疗组。新风胶囊可能通过降低血小板GMP-140,抑制血小板活化引起的炎症反应。

血浆血小板颗粒膜糖蛋白、溶血磷脂酸含量与急性脑梗死临床变化的关系

目的通过检测血浆GMP-140、LPA含量变化,观察血小板活化状态与急性脑梗死发生、病情变化及复发的关系。方法观察组为100例急性脑梗死患者,按神经功能缺损程度分为:轻度、中度、重度缺损,14天后再次评估,观察组内各个病例病情变化及发病后1、3、14天血浆GMP-140、LPA含量变化,对照组为50例健康体检者,抽取静脉血检测二者含量。结果急性脑梗死患者血浆GMP-140、LPA含量高于对照组,重度神经功能缺损脑梗死患者血浆GMP-140、LPA含量高于轻度及中度脑梗死患者,预后差患者血浆CMP-140、LPA含量持续处于高水平,有脑梗死病史患者二者含量高于无脑梗死病史患者。结论血小板的活化状态与急性脑梗死发生、病情及复发密切相关,可据血浆GMP-140、LPA含量不同采取不同的抗血小板活化治疗。

糖尿病患者血小板膜糖蛋白CD62P和CD63表达及其临床意义研究

目的探讨2型糖尿病患者血小板α-颗粒膜糖蛋白(CD62P)和血小板溶酶体膜糖蛋白(CD63)的变化及其临床意义。方法应用流式细胞仪(FCM),荧光素标记单克隆抗体技术测定68例2型糖尿病患者(血管病变35例,无血管病变33例)及31例正常人CD62P、CD63的阳性表达率。结果2型糖尿病组CD62P,CD63的阳性表达率显著高于对照组(P<0.01)。2型糖尿病并血管病变组CD62P,CD63的阳性表达率明显高于无血管病变组(P<0.01)。结论血小板膜糖蛋白CD62P,CD63表达率测定对于2型糖尿病血管病变的早期诊断具有重要的临床意义。

抗血小板药物对不同类型冠脉病变的不稳定型心绞痛患者血小板功能的影响

目的 :探讨阿司匹林联合氯吡格雷 (波立维 )对不同类型冠脉病变的不稳定型心绞痛患者经皮冠状动脉成形术(PTCA)加支架术前、术后血小板活性的抑制程度 .方法 :A型病变冠心病不稳定型心绞痛患者 32例 ,B型病变患者 30例 ,全部接受PTCA加支架术 ,术前至少 2h服用阿斯匹林 30 0mg ,继之 30 0mg d ,负荷量氯吡格雷 30 0mg ,继之 75mg,1 d .分别于服药前、服药后 2h ,术后 6h ,2 4h和 1mo肘静脉采血 .采用比浊法测定血小板最大聚集率 (MPAR) ,酶联免疫法测定血小板颗粒膜糖蛋白 (GMP14 0 )和血栓素B2 (TXB2 )浓度 .结果 :①A组、B组服药 2h后TXB2 ,GMP14 0 ,MPAR均较服药前明显下降 (P <0 .0 5 ) ;②A组、B组术后 6h ,2 4h各指标均较术前及服药后 2h明显升高 (P <0 .0 5 ) ;1mo时A组 3指标与服药后 2h无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,B组GMP14 0 ,TXB2 仍高于服药后 2h(P <0 .0 5 ) ;③在服药前 ,术后 6h,2 4h和 1mo时以上 3指标B组均明显高于A组 (P <0 .0 5 ) ;服药后 2h仅GMP14 0 ,TXB2 B组明显高于A组 .结论 :常规剂量的阿司匹林联合氯吡格雷可有效抑制A型病变患者的血小板激活 ,但对于B型病变则抗血小板作用不够充分 .

丁苯酞注射液联合双重抗血小板对急性进展性脑梗死的疗效及其机制探讨

目的探讨丁苯酞联合双重抗血小板治疗急性进展性脑梗死(APCI)的疗效及对外周血6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)、正血小板α-颗粒膜糖蛋白(CD62P)、血栓素B2(TXB2)、同型半胱氨酸(Hcy)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、血管内皮细胞钙黏蛋白(VE-cadherin)表达的影响。方法选取2018年1月—2019年10月台州市第一人民医院收治的APCI患者204例,随机分为对照组和观察组,每组102例。对照组采用规范化治疗和双重抗血小板治疗,观察组在对照组基础上加用丁苯酞氯化钠注射液治疗。治疗前、治疗后2周及治疗后30 d,进行美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)、简易精神状态检查量表(MMSE)、蒙特利尔认知功能评估量表(MoCA)、Barthel指数(BI)评分,采用改良Rankin量表(mRS)评价临床预后。治疗前后,检测外周血6-keto-PGF1α、CD62P、TXB2、Hcy、MCP-1、VE-cadherin水平并比较其变化。结果治疗后,观察组的NIHSS评分均较治疗前及对照组逐步降低,BI、MMSE、MoCA评分均较治疗前及对照组逐步升高(P<0.05)。两组治疗前后6-keto-PGF1α、CD62P、TXB2、Hcy、MCP-1、VE-cadherin差值比较,差异有统计学意义(P<0.05)。随访90 d,观察组的预后良好率高于对照组(78.57%VS 63.54%,P<0.05)。结论丁苯酞联合双重抗血小板治疗APCI能够下调患者外周血6-keto-PGF1α、CD62P、TXB2、Hcy、MCP-1、VE-cadherin水平,改善患者的神经功能并保护认知功能,提高生活活动能力及临床预后。

西洛他唑对冠心病合并2型糖尿病患者血小板活化和超敏C反应蛋白的影响

目的观察西洛他唑对冠心病(CHD)合并2型糖尿病(2-DM)患者血小板聚集率(PAG)、血小板α颗粒膜糖蛋白(CD62p)和超敏C反应蛋白(hs-CRP)的影响,探讨各项指标的相关性及预后的关系。方法80例冠心病合并糖尿病患者随机分为两组,A组:阿司匹林0.1Qd;B组:阿司匹林0.1Qd+西洛他唑50mg,Bid;并设健康对照组。分别于入院第二天及用药1周后测定二磷酸腺苷(ADP)、花生四烯酸(AA)诱导的PAG变化,以及CD62p和hs-CRP水平。结果用药前A、B两组PAG(ADP、AA诱导)、CD62p及hs-CRP水平均高于对照组,两组之间无统计学差异;治疗1周后B组的PAG、CD62p及hs-CRP水平较A组显著降低,但CD62p及hs-CRP仍高于对照组。B组用药前后hs-CRP与ADP及AA诱导的PAG、CD62p呈正相关;B组6个月临床观察终点事件的发生率显著低于A组。结论西洛他唑可抑制合并2-DM冠心病患者PAG,降低CD62p及hs-CRP水平,改善预后。

射频导管消融术对血小板活性的影响及阿司匹林的干预作用

目的：探讨射频导管消融术对血小板活性的影响及术前应用阿司匹林的干预作用。方法：选择行射频导管消融术患者168例，将其随机分为两组：阿司匹林组（n=88）：术前3天口服阿司匹林；对照组（n=80）：术前不用任何药物。分别于术前（T0）、电生理检查后（T1）、放电消融成功后30分钟（T2）、术后2天（T3）测定血浆中血小板α-颗粒膜糖蛋白和血栓烷素B2的含量，并比较两组内不同时间点各指标的变化和两组间各指标的差异。结果：对照组血浆血小板α-颗粒膜糖蛋白和血栓烷素B2含量在T1时刻较T0时刻有明显升高（均P〈0．01），T2时刻进一步升高达到峰值（均P〈0．001），T3时刻虽有所下降，但仍明显高于T0时刻（P〈0．01）；阿司匹林组血浆血小板α-颗粒膜糖蛋白和血栓烷素B2在T1、T2、T3时刻与T0时刻比较无明显升高（P〉0．05），但与对照组T1、T2、T3同时间点比较升高的幅度明显降低（P〈0．01-0．001）。结论：射频导管消融术可引起血小板激活，可能致血栓形成，术前服用阿司匹林可阻止血小板激活，有防止血栓形成的效果。

阿托伐他汀对急性冠状动脉综合征炎症及血小板因子的影响

目的探讨阿托伐他汀早期强化治疗7天后对急性冠状动脉综合征(ACS)患者高敏C反应蛋白(hs-CRP)、血小板α颗粒膜糖蛋白(CD62p)、血小板溶酶体膜糖蛋白(CD63)、血脂的影响。方法将85例ACS患者随机分为阿托伐他汀治疗组(n=45)和常规治疗组(n=40)。治疗组在常规治疗的基础上加用阿托伐他汀20mg/d每晚睡前口服,连用7天,在治疗前和治疗后分别测定hs-CRP、CD62p、CD63、血脂,并和常规治疗组进行比较。结果阿托伐他汀治疗组治疗7天后hs-CRP、CD62p、CD63均较治疗前明显下降(P<0.05);而常规治疗组治疗前后上述测定值无显著性差异;阿托伐他汀组治疗7天前后血脂指标未见明显改变(P>0.05)。结论ACS患者早期即予以阿托伐他汀强化干预,能明显减轻炎症反应,抗血小板活化,改善内皮功能,从而可以达到稳定斑块的作用。

外周血血小板膜连蛋白V及血小板α颗粒膜糖蛋白水平与颈动脉粥样硬化的关系

颈动脉粥样硬化属于心血管系统硬化病变。颈动脉接近体表，易于检测，是诊断动脉硬化的窗口。目前超声检测颈动脉为诊断动脉硬化和监测病变进展的主要方法。粥样斑块形成过程中由于血流动力学和细胞因子的相互作用，常出现斑块破裂、出血、溃疡、脱落后成为不稳定斑块，进一步发展导致血栓形成、动脉破裂等严重的心血管恶性事件。因此，检测不稳定斑块的形成、研究其发生机制成为治疗动脉粥样硬化以及预防并发症的热点。不稳定斑块形成的诱发因素是血小板活化与局部黏附能力的增强。

复方麝香注射液联合高压氧治疗急性脑梗死的临床疗效及其对血清血小板第4因子、血小板α颗粒膜糖蛋白、β-血小板球蛋白水平的影响

目的观察复方麝香注射液联合高压氧治疗急性脑梗死的临床疗效,并探讨其对血清血小板第4因子(PF4)、血小板α颗粒膜糖蛋白(CD62P)、β-血小板球蛋白(β-TG)水平的影响。方法选取2017—2018年上海中医药大学附属上海市第七人民医院收治的急性脑梗死患者112例,采用随机数字表法分为对照组和观察组,每组56例。对照组患者给予常规治疗,观察组患者在对照组基础上给予复方麝香注射液+高压氧治疗;两组患者均治疗30 d。比较两组患者临床疗效,治疗前后蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分、简易智力状态检查量表(MMSE)评分、Barthel指数评分及大脑中动脉血流动力学指标〔包括收缩期峰值流速(PSV)、血流速度(Vm)、搏动指数(PI)和阻力指数(RI)〕,治疗前和治疗后6个月血清PF4、CD62P、β-TG水平及血液黏度、血浆黏度、红细胞比容、纤维蛋白原,并观察治疗期间两组患者不良反应发生情况。结果(1)观察组患者临床疗效优于对照组(P<0.05)。(2)两组患者治疗前MoCA评分、MMSE评分和Barthel指数评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组患者治疗后MoCA评分、MMSE评分和Barthel指数评分高于对照组(P<0.05)。(3)两组患者治疗前大脑中动脉PSV、Vm、PI和RI比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后观察组患者大脑中动脉PSV、Vm快于对照组,PI高于对照组,RI低于对照组(P<0.05)。(4)两组患者治疗前血清PF4、CD62P和β-TG水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组患者治疗后6个月血清PF4、CD62P和β-TG水平低于对照组(P<0.05)。(5)两组患者治疗前血液黏度、血浆黏度、红细胞比容、纤维蛋白原比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后观察组患者血液黏度、血浆黏度、红细胞比容、纤维蛋白原低于对照组(P<0.05)。(6)两者患者治疗期间均未发生明显不良反应。结论复方麝香注射液联合高压氧治疗急性脑梗死的疗效确切,可有效提高患者认知功能及生活能力,改善患者大脑中动脉血流动力学,降低患者血栓形成风险及血清PF4、CD62P和β-TG水平。

2型糖尿病血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa、GMP-140及血小板聚集率的改变及其临床意义

目的观察 2型糖尿病患者血小板膜糖蛋白 b/ a复合物、GMP-1 40及血小板聚集率的改变及其临床意义。方法应用流式细胞术 ( F CM)观察 6 4例 2型糖尿病患者及 2 0例正常对照者血小板膜上 GP b/ a复合物及 GMP-1 40的表达阳性率 ,同时检测其血小板聚集率 ( PAg R)。结果 FCM测得的血小板膜上 GP b/ a表达阳性率糖尿病合并血管病变组为 ( 76 .2 3± 1 2 .0 4) %、无血管病变组为 ( 72 .6 8± 1 2 .6 0 ) % ,均明显高于正常对照组 ( 49.6 4± 1 0 .1 8) % ( P<0 .0 1 )。 GMP-1 40表达阳性率合并血管病变组 ( 8.86±2 .1 7) % ,明显高于无血管病变组 ( 5 .74± 2 .2 3 ) % ( P<0 .0 1 ) ,两者均明显高于正常对照组 ( 3 .2 2± 1 .6 4) % ( P<0 .0 1 )。同时合并血管病变组的 PAg R与无血管病变组及正常对照组相比 ,有显著性差异 ( P<0 .0 1 )。结论检测 GP b/ a、GMP-1 40及 PAg R能预测糖尿病患者血小板活化状态 ,对防治 2型糖尿病及其血管病变的发生。

血浆生物标志物在慢性肾脏病伴血栓栓塞患者中的表达及其近期预后评估价值

目的分析血浆生物标志物在慢性肾脏病(CKD)伴血栓栓塞患者中的表达及其在近期预后评估中的价值。方法选取2018年5月—2022年5月承德市中心医院93例CKD伴血栓栓塞患者(研究组),以93例单纯CKD患者作为对照组。检测所有患者血浆D-二聚体(DD)、生长停滞特异性蛋白6(GAS6)、血小板α颗粒膜糖蛋白(CD62P)、纤维蛋白原(Fib)水平。随访3个月以了解患者近期预后情况。采用Logistic回归分析评估近期预后影响因素,建立列线图预测模型。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血浆DD、GAS6、CD62P、Fib单独和联合检测判断CKD伴血栓栓塞患者近期预后的效能。结果研究组血浆DD、GAS6、CD62P、Fib水平均高于对照组(P<0.05);研究组预后不良发生率为24.73%。根据预后情况分为预后不良组(23例)和预后良好组(70例),2个组血栓栓塞类型和血浆DD、GAS6、CD62P、Fib差异有统计学意义(P<0.05)。血浆DD、GAS6、CD62P、Fib是CKD伴血栓栓塞患者近期预后不良的影响因素(P<0.001)。ROC曲线分析结果显示,血浆DD、GAS6、CD62P、Fib单项检测诊断CKD伴血栓栓塞患者近期预后不良的曲线下面积(AUC)[95%可信区间(CI)]分别为0.784(0.687~0.863)、0763(0.664~0.845)、0.824(0.731~0.895)、0.794(0.698~0.871),GAS6+CD62P+DD、GAS6+CD62P+Fib、CD62P+Fib+DD的AUC差异均无统计学意义(P>0.05)。根据4个危险因素建立CKD伴血栓栓塞患者近期预后列线图预测模型,结果显示,该列线图预测模型判断CKD伴血栓栓塞患者近期预后的AUC(95%CI)为0.866(0.812~0.945);校准度曲线显示,该列线图预测模型在GiViTI校准曲线带的80%~95%CI区域均未穿过45°角平分线。结论血浆DD、GAS6、CD62P、Fib在CKD伴血栓栓塞患者中呈高表达,4项指标联合检测可提高近期预后评估价值,有助于指导后续的个体化治疗。

软肝降脂胶囊对急性冠脉综合征患者血管内皮功能及血小板功能的影响

目的:研究软肝降脂胶囊对急性冠脉综合征患者血管内皮功能及血小板功能的影响。方法:收集如皋市中医院2021年7月—2022年7月收治的120例急性冠脉综合征患者,分为二级预防组(60例)和联合中药组(60例)。二级预防组采用冠心病二级预防药物治疗,联合中药组在二级预防组的基础上采用软肝降脂胶囊治疗。比较两组中医证候积分、心功能、血清血管内皮功能指标水平、血清炎性因子、脂代谢指标水平、血小板功能指标及阿司匹林抵抗、氯吡格雷抵抗情况,统计两组安全性。结果:治疗6个月后与治疗前比较,两组中医症候积分、心功能及血清血管内皮功能水平均明显改善,联合中药组改善程度优于二级预防组。治疗前及治疗1、6个月后,两组血清炎性因子水平及血小板功能指标均明显改善,联合中药组治疗1、6个月后改善程度优于二级预防组。治疗前及治疗1、3、6个月后,两组血清脂代谢指标水平均明显改善,联合中药组治疗1、3、6个月后改善程度优于二级预防组。治疗6个月后,两组阿司匹林抵抗率、氯吡格雷抵抗率较治疗1个月后均升高,但联合中药组治疗1、6个月后低于二级预防组。结论:软肝降脂胶囊可改善急性冠脉综合征患者中医证候、心功能、血管内皮功能、血小板功能,降低机体炎症反应,促进脂代谢,降低阿司匹林抵抗、氯吡格雷抵抗发生的风险,同时不会增加不良反应的发生,具有较好的治疗效果。

抗栓治疗对非瓣膜病心房颤动患者血小板活化状态的影响

心房颤动（房颤）长期治疗的重点之一是预防脑卒中。华法林和阿司匹林抗栓治疗分别使脑卒中发病率降低约60％和20％。血小板活化在血栓形成过程中起关键作用，认识血小板活化的血清标志物，包括血小板α颗粒膜糖蛋白-140（GMP-140）、血栓素B2（TXB2）以及TXB2／6-酮-前列腺F1α（6-k-PGF1α）比值等，在抗栓治疗中的变化，有助于房颤患者的血栓栓塞危险分层和判断抗栓治疗的强度。