大量输血患者血小板自噬相关因子的差异表达

目的了解大量输血(MT)患者在输血前后血小板自噬相关因子的表达改变。方法采用备有EDTA-K2抗凝真空采血管采集患者大量输血前后静脉血,利用qRT-PCR检测血小板自噬相关基因Atg5和Atg7的表达,同时利用Western Blot检测血小板自噬相关蛋白Atg5、Atg7、LC3以及Akt/mTOR通路蛋白的表达。结果血常规检测输血后,患者Hct和Hb水平升高但Plt降低(P<0.05)。qRT-PCR检测输血后,患者血小板血浆Atg5(1.091±0.097 vs 4.929±0.402)和Atg7 (1.086±0.119 vs 3.771±2.113)的mRNA相对表达量均显著升高(P<0.01)。Western Blot检测输血后,患者血小板血浆Atg5(1.007±0.103 vs 3.435±1.842)、Atg7 (1.045±0.119 vs 2.682±1.570)和LC3Ⅱ/Ⅰ(1.022±0.104 vs 3.101±1.905)的蛋白表达量均显著升高(P<0.01)。大量输后患者血小板血浆及Rap处理后,LC3Ⅱ/Ⅰ表达量升高而p-Akt蛋白表达量降低(P<0.01);大量输血后血小板血浆及Tricirbine处理后,LC3Ⅱ/Ⅰ表达量升高而p-mTOR蛋白表达量降低(P<0.05)。结论大量输血能活化血小板自噬反应,这可能与抑制Akt/mTOR通路激活相关。

血小板自噬在心血管疾病中的研究进展

自噬是指细胞在自噬相关基因的调节下,利用溶酶体降解自身受损、变性或衰老的大分子物质及细胞器的自我消化过程,是细胞维持动态平衡的重要方式,广泛存在于真核细胞。无核血小板存在自噬,自噬可通过影响血小板的活化、黏附、聚集功能,从而参与动脉硬化、动脉血栓形成、心肌梗死过程。对血小板自噬的调控机制进行深入研究,有助于为心血管疾病的防治寻求更安全高效的方法,减少心血管不良事件的发生。故本文对血小板自噬在心血管疾病中的研究进展进行综述。

补阳还五汤调控急性心肌梗死大鼠血小板自噬保护缺血心肌的作用机制研究

该研究探究补阳还五汤对急性心肌梗死后血小板活化及差异基因表达的影响。将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药阿司匹林组和补阳还五汤组,预给药14 d,灌胃剂量为补阳还五汤1.6 g·kg^(-1)·d^(-1),阿司匹林0.1 g·kg^(-1)·d^(-1)。采用冠状动脉左前降支高位结扎方法构建急性心肌梗死模型,检测指标包括心肌梗死面积、心功能、心肌组织病理、末梢血流灌注量、血小板聚集率、血小板膜糖蛋白CD62p表达、血小板转录组学及差异基因表达量。结果显示与假手术组比较,模型组射血分数和心输出量显著降低,末梢血液流量减少,血小板聚集率增加,CD62p表达增多,血小板处于活化状态。同时血清TXB2含量上升,6-keto-PGF1α含量下降。与模型组比较,补阳还五汤增加射血分数和每搏输出量,改善足底和尾部血液循环和心肌细胞排列,减少心肌梗死面积和炎性浸润,降低血小板聚集率和CD62p表达,减少血清TXB2含量,增加6-keto-PGF1α含量。血小板转录组测序结果发现,补阳还五汤调控血小板mTOR-自噬通路相关基因。采用实时定量PCR实验对差异基因表达量进行检测,补阳还五汤上调mTOR,同时下调自噬相关FUNDC1、PINK,上调p62基因表达。结果表明,补阳还五汤可调控急性心肌梗死大鼠血小板活化,改善血液循环,保护缺血心肌受损,其机制与调控血小板mTOR-自噬通路有关。