血小板衍化生长因子受体磷酸化作用抑制剂的定量构效关系研究

血小板衍化生长因子受体磷酸化作用的抑制剂是治疗增殖紊乱的一类重要药物,本文采用粒子群优化训练神经网络算法对血小板衍化生长因子受体的磷酸化作用的抑制剂进行了定量构效关系研究,对其抑制活性建立了满意的预测模型.

磷酸化血小板衍生生长因子受体-α在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的探讨磷酸化血小板衍生生长因子受体-α(P-PDGFR-α)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及与其发展、转移的关系。方法共525例NSCLC患者纳入研究。运用Envision免疫组织化学法检测各患者组织标本中P-PDGFR-α的表达情况。结果525例患者中,42例P-PDGFR-α呈阳性(阳性率8.0%)。男女患者间及各年龄组患者差异无统计学意义(P>0.05),292例鳞癌患者中21例呈阳性(阳性率7.2%),222例腺癌标本中21例呈阳性(阳性率9.5%),11例腺鳞癌组织中均无阳性表达,三者之间差异均无统计学意义(P>0.05);P-PDGFR-α在低分化NSCLC患者中的表达显著高于高分化及中分化NSCLC的表达(P<0.05);266例手术大标本中,有淋巴结转移的145例患者中26例呈阳性(阳性率18.0%),而无淋巴结转移的121例患者中8例呈阳性(阳性率6.7%),两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论(1)P-PDGFR-α可能与NSCLC的发展和转移有关;(2)P-PDGFR-α在NSCLC中的表达与年龄、性别、NSCLC病理学类型无关。

血小板衍化生长因子及其受体与疾病关系研究进展

血小板衍化生长因子(PDGF)是生长因子家族成员之一,是最早发现的原癌基因之一,被认为在间质细胞的迁移和增殖中起着重要的作用。PDGF及其受体还在胚胎形成时期的血管发生,肾脏、脑、心血管、肺泡的发育中扮演着重要的角色,现在的临床研究也显示,PDGF及其受体的异常表达与肿瘤、冠状动脉粥样硬化、肺纤维化、系膜增生性肾炎、创伤等疾病有关。

原位杂交检测胰腺癌血小板衍化生长因子及其受体的基因表达

用原位杂交（ＩＳＨ）法，采用ｃＤＮＡ探针（ＰＤＧＦＡ、Ｂ，ＰＤＧＦＲα、β）对１５例胰腺癌手术切除标本和８例正常胰腺组织标本进行检测。旨在观察胰腺组织和胰腺癌标本中血小板衍化生长因子（ＰＤＧＦ）及其受体（ＰＤＧＦＲ）的基因表达，探讨其在肿瘤侵袭和转移过程中的作用。结果表明，正常胰腺组织中ＰＤＧＦＡ较多，ＰＤＧＦＢ未检出，与胰腺癌组织相比较无明显差异。胰腺癌细胞中ＰＤＧＦ和ＰＤＧＦＲ均有表达，而ＰＤＧＦＲβ则比较多地定位于结缔组织中的纤维细胞和内皮细胞。结果提示，ＰＤＧＦ、ＰＤＧＦＲ可能通过对胰腺癌细胞外基质蛋白降解代谢的影响。

血小板衍化生长因子α受体的研究进展

血小板衍化生长因子（platelet derived growth factors，PDGF）能促进成纤维细胞、平滑肌细胞等多种组织细胞的分裂、增殖、迁移、合成并分泌细胞外基质、增加细胞黏附力，在人胚胎发育和正常生理活动中起着极其重要的作用。生成的PEGF以自分泌和／或旁分泌的方式激活血小板衍化生长因子受体（platelet derived growth factors receptor, PDGFR）而发挥作用。

血小板衍化生长因子受体在人牙髓组织中表达的分析

目的 :观察血小板衍化生长因子 (platelet-derivedgrowthfactor,PDGF)受体在人牙髓组织中的表达和分布情况 ,探讨PDGF在牙髓组织中的作用。方法 :制备人牙髓组织标本 ,采用免疫组织化学方法观察PDGFβ受体在人牙髓组织中的表达与分布情况。 结果 :在人牙髓组织中的牙髓细胞、微血管内皮细胞表达PDGFβ受体。 结论 :在正常牙髓组织中牙髓细胞、微血管内皮细胞表达PDGFβ受体 ,提示PDGF有可能在牙髓组织的生长、发育等正常生理过程和创伤修复过程中起着重要的作用。

电场干预对血管平滑肌细胞血小板衍化生长因子受体分布的影响

目的:观察电场作用下血管平滑肌细胞膜血小板衍化生长因子受体表达的变化及其与细胞迁移生长的关系。方法:①实验于2003-08/2004-08在解放军第三军医大学附属西南医院心内科及烧伤实验室完成。选用健康Wistar大鼠120只。②按常规组织块贴壁法原代培养血管平滑肌细胞。③通过外加电场干预装置(基本结构包括:观测小室和细胞培养室、电极系统、直流电源。细胞培养室的中央部分是对细胞行为进行显微镜下直接观测的地方,即观测小室。是该装置的关键部分。与细胞培养室相连的电极采用琼脂-盐桥电极。电源系统为输出电压0.1～200V,输出电流0.01～10mA,连续可调的电压电流双稳直流电源),对体外培养的大鼠主动脉血管平滑肌细胞直流电场干预,间断显微细胞图像记录和分析,观察不同强度电场、不同作用时间下血管平滑肌细胞迁移和细胞形态的变化;采用免疫荧光染色方法检测电场干预后,与血管平滑肌细胞迁移密切相关的血小板衍化生长因子受体膜表达,观察血小板衍化生长因子受体表达变化与细胞生物行为变化的关系。④两组间差异比较采用t检验。结果:①在施加150mV/mm电场干预后,血小板衍化生长因子受体表达增加(P<0.05～0.01),部分细胞血小板衍化生长因子受体表达呈不对称分布,在细胞向阴极伸展的板状突起中有明显荧光着色。血小板衍化生长因子受体在血管平滑肌细胞的重新分布在电场干预30min后出现,在6h电场干预中仍持续存在。②在150mV/mm电场干预下,培养的血管平滑肌细胞有明显的电场趋化性,细胞向阴极迁移的距离明显长于无电场作用对照组,血管平滑肌细胞在电场作用下迁移速度亦明显加快[(13.84±0.79),(4.32±0.42)μm/h,P<0.01),其电场趋化性与血小板衍化生长因子受体的不对称分布相一致。结论:外加直流电场干预下,大鼠血管平滑肌细胞的血小板衍化生长因子受体表达上调并呈极性不对称分布,这一改变可能与血管平滑肌细胞形状发生改变和向电场阴极面定向迁移有关。

血小板衍化生长因子受体在人根尖周肉芽组织中表达的意义

目的 :观察血小板衍化生长因子 (platelet derivedgrowthfactor ,PDGF)受体在人根尖周肉芽组织中的表达和分布情况 ,探讨PDGF在牙周组织中的作用。方法 :制备人根尖周肉芽组织标本 15例 ,采用免疫组织化学ABC方法观察PDGFβ受体在人根尖周肉芽组织中的表达与分布情况。 结果 :在人根尖周肉芽组织中的成纤维细胞、毛细血管内皮细胞、浆细胞和巨噬细胞中能表达PDGFβ受体。 结论 :PDGF有可能在参与慢性根尖周病变的免疫病理过程并在根尖周病的修复过程中起重要的作用。

血小板衍化生长因子及其受体在糖尿病大鼠肾皮质中的表达及苯那普利的调节作用

目的 探讨PDGF-B及其β受体在糖尿病大鼠肾皮质中的表达及苯那普利对它的调节作用。方法 Wistar大鼠随机分为3组:单侧肾切除组、糖尿病组和糖尿病苯那普利治疗组,观察4周后血糖、血清胰岛素、肌酐水平和体重、肾重变化,并测定了血浆和肾皮、髓质ACE活性,应用Northern杂交检测肾皮质PDGF-BmRNA水平,Western杂交检测肾皮质 PDGF-β受体蛋白的表达。结果 苯那普利能明显改善糖尿病大鼠的异常糖代谢并降低血肌酐水平,延缓体重下降,抑制肾重的增加,抑制肾皮质ACE活性达88.8％;Northern杂交表明糖尿病大鼠肾皮质PDGF-BmRNA表达上调达对照组4倍,苯那普利对其不产生明显影响,Western杂交表明糖尿病大鼠的肾皮质PDGF-β受体蛋白明显增高为对照组2.5倍,苯那普利可下调其表达。结论 苯那普利虽对糖尿病大鼠肾皮质PDGF-BmRNA不产生明显影响,但可显著下调其β受体蛋白的表达。

血小板衍化生长因子受体在肿瘤中的作用

肿瘤的生长、侵袭、转移是一个多因素、多阶段相互关联复杂的病理生理过程。其中，肿瘤新生血管的形成、细胞及其间质内皮细胞的增殖等因素是肿瘤获得局部侵袭和远处转移的主要方式之一。

血小板源生长因子受体的研究进展

位于质膜上的血小板源生长因子ＰＤＧＦ特异性受体是生长因子ＰＤＧＦ携带的信息跨膜向细胞内传递的关键环节。此种具酪氨酸蛋白激酶活性的受体在ＰＤＧＦ激活的生长调节中通过对多种靶蛋白磷酸化实现对增殖的调节作用。与ＰＤＧＦ相关的多种疾病的发生、发展过程中均出现相应的ＰＤＧＦ受体的改变。受体水平的调节可能有利于缓解与ＰＤＧＦ密切相关的过度增殖性疾病。

c-ABL、c-KIT、血小板衍化生长因子受体-β在卵巢浆液性癌和正常卵巢上皮的表达

c-ABL、c-KIT和血小板衍生因子受体-β(PDGFR-β)等酪氨酸激酶是重要的细胞生长调节因子。c-ABL是属SYC家族140 ku非受体酪氨酸激酶,推测有转录,DNA重组、修复的作用。参与控制细胞增生、分化、凋亡的信号通路。PDGFR-S构成和二聚体多肽家族,通过激活特异受体酪氨酸酶刺激增生和迁移反应。c-KIT是145 ku的酪氨酸酶跨膜受体。

血小板衍化生长因子受体蛋白在瘢痕疙瘩中的表达

目的探讨血小板衍化生长因子受体(PDGFR)-α和-β在瘢痕疙瘩组织和瘢痕疙瘩来源成纤维细胞中的表达及其在瘢痕疙瘩发病中的作用。方法应用免疫组化法检测15份瘢痕疙瘩和10份正常人皮肤标本PDGFR-α和-β蛋白的分布。体外原代培养成纤维细胞和蛋白质印迹法检测PDGFR蛋白的表达。结果在瘢痕疙瘩组织中PDGFR-β表达明显增高,而PDGFR-α在瘢痕疙瘩中的表达似与瘢痕疙瘩的临床生长状态有关。在边缘充血、浸润生长明显的皮损,PDGFR-α呈强烈表达;而在边缘稳定、无明显浸润态势之皮损,PDGFR-α呈低表达。体外培养的成纤维细胞中,PDGFR-α比PDGFR-β表达更为丰富。结论两种PDGFR的表达增高导致瘢痕疙瘩成纤维细胞对PDGF敏感性提高,决定了PDGF在瘢痕疙瘩发病机制中的作用。

左向右分流型先天性心脏病合并肺动脉高压患儿血清可溶性血小板衍化生长因子受体α水平及意义

目的观察先天性心脏病(CHD)合并肺动脉高压(PAH)患儿血清可溶性血小板衍化生长因子受体α(s PDGFRα)水平的变化,探讨s PDGFRα在先天性心脏病相关性肺动脉高压(PAH-CHD)病理发展中的意义。方法选取2012年9月至2013年1月期间收治于山西省儿童医院CHD患儿66例,采用三尖瓣反流压差法估算肺动脉收缩压(PASP),将CHD患儿分为无PAH组16例,轻度PAH组18例,中度PAH组17例,重度PAH组15例;另随机抽取同期山西省儿童医院门诊体检健康儿童20例作为对照组。以双抗体夹心酶联免疫吸附法(ABC-ELISA)检测血清s PDGFRα并比较。结果 CHD无PAH组患儿血清s PDGFRα水平低于健康对照组,但差异无统计学意义(P>0.05);CHD合并PAH各组患儿血清s PDGFRα水平显著低于健康对照组(P<0.05)及无PAH组(P<0.05),且随PAH程度增加而降低,与PASP呈负相关(r=-0.713,P<0.05)。结论 s PDGFRα在延缓CHD-PAH的形成中发挥重要作用,对于CHD合并PAH患儿治疗有一定指导意义。

抗血小板衍生生长因子受体β亚单位核酶的体外制备与活性鉴定

目的 研究针对血小板衍生生长因子（PDGF）受体β亚单位基因的核酶的制备与体外切割活性鉴定。 方法 将大鼠PDGF受体β亚单位基因的PCR片段克隆于T载体T7启动子下游，32P标记的体外转录物作为靶RNA；设计并合成针对大鼠PDGF受体β亚单位胞外区的核酶，将核酶基因克隆于自我切割核酶载体P1.5的5′-cis核酶和3′-cis核酶之间，并进行32P标记的转录。核酶与靶RNA按一定比例和条件进行切割反应电泳，放射自显影。 结果 核酶制备正确，在最适条件下具有切割活性。其Km＝13.20nM，Kcat＝0.28min-1。最高切割效率达78.3%。 结论 体外制备的核酶具有良好的特异催化切割活性。

骨肉瘤中胸苷磷酸化酶的表达与血管生成的关系

目的:研究胸苷磷酸化酶/血小板衍化内皮细胞生长因子(TP/PD-ECGF)在骨肉瘤组织中的表达与微血管密度(MVD)的关系及其临床病理意义。方法:应用免疫组织化学SP法,检测54例骨肉瘤组织中TP/PD-ECGF的表达,CD34单克隆抗体标记血管内皮细胞计数骨肉瘤MVD。结果:骨肉瘤TP/PD-ECGF表达程度与MVD呈正相关,骨肉瘤TP/PD-ECGF低表达组、中表达组、高表达组的MVD计数有统计学差异;骨肉瘤TP/PD-ECGF表达与骨肉瘤临床病理因素无统计学关联,但与是否肺转移显著相关。结论:TP/PD-ECGF是骨肉瘤血管形成的一种重要调节因子,在骨肉瘤肺转移中起一定作用。

启膈散及其拆方抑制原代培养食管癌细胞PDGFR-PLC-γ1酪氨酸的磷酸化

目的:观察启膈散及其活血和化痰2个拆方对原代培养的食管癌细胞血小板衍生生长因子受体(PDGFR)和磷脂酶C-γ1(PLC-γ1)酪氨酸磷酸化的影响,以探讨启膈散治疗食管癌的作用机制.方法:从外科切除的原发性食管癌组织中采集食管上皮细胞进行原代培养,加入PDGF和启膈散及其活血和化痰2个拆方的水提物,免疫印迹法(Western blotting)测定PDGFR- PLC-γ1蛋白表达和酪氨酸磷酸化水平.结果:用PDGF-BB刺激4 min和启膈散及其拆方处理15 min前后,原代培养食管癌细胞PDGFRβ和PLC-γ1蛋白表达没有变化;但PDGF-BB刺激后PDGFRβ和PLC-γ1蛋白酪氨酸磷酸化明显增强,启膈散及其拆方能不同程度地降低其蛋白磷酸化水平,其中以活血组作用最好,全方组次之.结论:食管癌病变与PDGFR-PLC-γ1蛋白酪氨酸磷酸化增强有关,启膈散及其拆方通过抑制PDGFR-PLC-γ1酪氨酸磷酸化从而抑制生长信号转导是其治疗食管癌重要机制.

^(188)Re-PDGFR-β mRNA AODN的制备及其生物分布

目的探讨188Re标记大鼠血小板衍化生长因子受体-β(PDGFR-β)mRNA反义脱氧寡核苷酸(AODN)的方法及其生物学分布。方法先使长度为18个碱基的单链PDGFR-βmRNA AODN 与双功能螯合剂巯基乙酰基三甘氨酸-N-羟基丁二酰亚胺酯(NHS-MAG3)偶联,然后进行188Re标记,测定不同条件下的标记率,分析确定最佳标记条件。常规测定放化纯和比活度,并对标记物进行稳定性和正常小鼠体内分布实验。结果①最佳标记条件下平均标记率约为70%,经Sep-Pak C18层析柱纯化后放化纯>95%,比活度(7.4-11.1)×106 MBq/g;②加入抗氧化剂Vit c后,188Re-MAG3-AODN在室温下生理盐水中及37℃下新鲜人血清中稳定性良好,与血清蛋白结合率为8%-10%;③188Re- MAG3-AODN在正常小鼠体内较为稳定,在肾、肝中摄取较高。结论188Re-MAG3-AODN具有良好的稳定性。