脑梗塞患者血小板颗粒膜糖蛋白的测定及临床意义

采用单克隆抗体，经流式细胞术测定了５３例脑梗塞患者周围血中血小板活化分子标记物颗粒膜蛋白（ＧＭＰ）ＣＤ６２Ｐ和ＣＤ６３。结果脑梗塞患者的两种ＧＭＰ检出率均显著高于健康对照组（Ｐ＜０．００１）．腔隙性梗塞与大面积梗塞组发病３天以内者的ＣＤ６２Ｐ和ＣＤ６３检出率较发病４～１０天、１１～３０天和３１天以上者为高（Ｐ＜０．０５～０．０２）．但后三组仍高于对照组（Ｐ＜０．０１）。表明脑梗塞患者的血小板活化程度明显增高，甚至在脑梗塞恢复期，其血小板亦处于高活化状态，提示探索能阻止或抑制血小板活化的药物和疗法将是预防和治疗脑梗塞的重要手段之一。

外周血血小板膜连蛋白V及血小板α颗粒膜糖蛋白水平与颈动脉粥样硬化的关系

颈动脉粥样硬化属于心血管系统硬化病变。颈动脉接近体表，易于检测，是诊断动脉硬化的窗口。目前超声检测颈动脉为诊断动脉硬化和监测病变进展的主要方法。粥样斑块形成过程中由于血流动力学和细胞因子的相互作用，常出现斑块破裂、出血、溃疡、脱落后成为不稳定斑块，进一步发展导致血栓形成、动脉破裂等严重的心血管恶性事件。因此，检测不稳定斑块的形成、研究其发生机制成为治疗动脉粥样硬化以及预防并发症的热点。不稳定斑块形成的诱发因素是血小板活化与局部黏附能力的增强。

血栓性脑血管疾病患者治疗前后血小板活化膜表面糖蛋白检测及临床意义

目的 :探讨血栓性脑血管疾病患者治疗前后血小板活化标记物CD62 P,GPⅡb/Ⅲa的表达及其临床应用价值。方法 :采用流式细胞仪 (FCM )检测治疗前后血小板活化标记物CD62 P、GPⅡb/Ⅲa的表达。结果 :血栓性脑血管疾病患者治疗前血小板活化标志物CD62 P、GPⅡb/Ⅲa分别为CD62 P5 2 .19± 12 .3 7% ,GPⅡb/Ⅲa 77.98± 14 .2 2 % ,较正常对照组有显著性升高 (P <0 .0 1) ;治疗后CD62 P3 1.16± 17.43 % ,GPⅡb/Ⅲa 40 .71± 11.64 %较治疗前有显著性下降 (P<0 .0 1) ,但仍高于正常对照组 (P <0 .0 1)。结论 :血小板活化标志物CD62 P、GPⅡb/Ⅲa对血栓性脑血管疾病的诊断具有重要价值 。

佐剂性关节炎大鼠外周血血小板α颗粒膜糖蛋白的变化及新风胶囊对其影响

目的:观察佐剂性关节炎(Adjuvant arthritis,AA)血小板α颗粒膜糖蛋白(granule membrane protein 140,GMP-140)的变化及新风胶囊对其的影响。方法:将60只SD雄性大鼠随机分为正常对照组、模型对照组和甲氨喋呤、雷公藤多苷片、新风胶囊治疗组,每组12只,用弗氏完全佐剂(Freund's complete adjuvant,FCA)0.1ml分别向除正常对照组以外的其余大鼠右后足跖皮内注射诱发大鼠产生关节炎,采用流式细胞仪检测并观察各组大鼠血小板GMP-140的变化。结果:①与正常对照组相比,模型对照组大鼠血小板GMP-140及PLT、PCT、足跖肿胀度、关节炎指数显著升高(P<0.05或P<0.01)。②与模型对照组相比,治疗组均能降低GMP-140和PLT、PCT、足跖肿胀度、关节炎指数(P<0.05或P<0.01)。③AA大鼠的血小板参数GMP-140与PLT、PCT、足跖肿胀度、关节炎指数呈正相关(P<0.01或P<0.05)。结论:AA大鼠存在血小板的活化,血小板活化标志物GMP-140与足跖肿胀度、关节炎指数炎症指标及反映疾病活动性指标PLT、PCT具有相关性。GMP-140在关节炎的发生发展中起着重要作用。新风胶囊与甲氨喋呤、雷公藤多苷片一样能降低AA大鼠的足跖肿胀度、关节炎指数、PLT、PCT,而且在增加大鼠体重方面优于其他两个治疗组。新风胶囊可能通过降低血小板GMP-140,抑制血小板活化引起的炎症反应。

利用抗人血小板膜糖蛋白Ⅲa单克隆抗体SZ—21测定生物材料表面粘附血小板数的新方法

本课题对三种血小板膜糖蛋白单克隆抗体进行了筛选.研究了由单克隆抗体SZ—21,用固相放射免疫技术测定生物材料表面粘附血小板的新方法.对聚氨酯、聚乙烯醇、聚甲基丙烯酸乙酯、聚酰胺-胺等47种医用高分子材料进行了定量测定。

血小板颗粒膜糖蛋白在椎基动脉缺血性眩晕中的临床意义

目的探讨血小板在椎基动脉缺血性眩晕 (VBI)发病中起的作用及血小板颗粒膜糖蛋白 (GMP140)的临床意义。方法对40例VBI病人进行血浆GMP140 浓度及血小板表面GMP140 分子数测定 ,并同时行TCD检查。结果VBI病人血浆GMP140水平显著高于对照组 (P<0.01) ,血浆GMP140的异常率为70 % ;TCD异常率为67% ;血浆GMP140测定结合TCD检测 ,异常率85%。结论VBI发病过程中存在着血小板的激活及血栓形成倾向 ;血浆GMP140 测定可以作为诊断VBI的一个客观指标 ,结合TCD检查 ,可提高对VBI的诊断水平。

2型糖尿病脑梗塞与血小板α-颗粒膜糖蛋白水平

在许多血栓性疾病中，血小板活化起着非常关键的作用。活化血小板与静止血小板相比，质膜糖蛋白常发生显著变化，尤其存在于a颗粒膜上的GMP-140在血小板表面大量表达。GMP-140是由内皮细胞和血小板合成的一种粘附分子(P选择素)，能介导血小板和内皮细胞、白细胞和内皮细胞之间的粘附，在血小板和内皮细胞受到刺激时表达增加。

α-颗粒膜糖蛋白及血小板聚集功能在2型糖尿病和缺血性心脑血管疾病中的作用

目的探讨α -颗粒膜糖蛋白 (GMP-140)及血小板聚集率在2型糖尿病及其并发缺血性心脑血管病中的作用。方法采用美国Coulter公司提供的EPICSELITEESP型流式细胞仪检测对照组 (A组 )及2型糖尿病组 (B组 )GMP-140阳性率及平均荧光强度 ,两组间比较采用t检验。以腺苷二磷酸钠(终浓度0.2μmol/L) ,肾上腺素 (终浓度1μg/L)、胶原(终浓度0.1μg/L)作诱聚剂 ,采用武汉华中ZNX -D2型多功能血凝检测仪检测不同诱聚剂1min聚集率 (M1) ,4min聚集率(M4)和最大聚集率(Ma) ,组间比较采用方差分析及t′检验。以P<0.05认为统计学有显著性。结果①B组、C组GMP-140平均荧光强度较A组显著增强 (P<0.01) ,并发症组 (C组)较无并发症组 (D组 )显著增强 ,(P<0.01) ;阳性率各组间比较无显著差异。②三种不同诱聚剂作用下B组及C组较A组M1、M4、Ma均有不同程度升高 ,C组较D组更显著。结论2型糖尿病血小板活化增强 ,血小板聚集亢进 ,这是并发缺血性心脑血管病的重要因素之一。

平均血小板体积/血小板计数、血小板α颗粒膜糖蛋白对经皮冠状动脉介入治疗即刻血流分级及预后的预测价值

目的 探讨平均血小板体积(MPV)/血小板计数(PC)、血小板α颗粒膜糖蛋白(CD62P)预测经皮冠状动脉介入治疗(PCI)即刻血流分级及预后的价值。方法 选取2018年5月至2020年2月河南省直属机关第一门诊部收治的41例PCI即刻心肌梗死溶栓治疗临床试验(TIMI)血流分级0~Ⅱ级病人(观察组)及41例PCI即刻TIMI血流分级Ⅲ级病人(对照组),比较两组及是否发生主要心血管不良事件(MACE)病人的MPV/PC、CD62P指标水平。以logistic回归方程进行多因素分析,采用受试者操作特征曲线(ROC)分析各指标对预测评估PCI即刻血流分级、预后的效能。结果 观察组MPV/PC 0.05±0.02、CD62P(52.26±14.47)%高于对照组的0.04±0.01、(38.87±12.76)%(P<0.05)。MPV/PC、CD62P仍是PCI即刻血流分级的独立相关危险因素(P<0.05);预测PCI即刻血流分级的ROC曲线下面积(AUC):MPV/PC为0.78,CD62P为0.81,MPV/PC+CD62P为0.86(P<0.05);MACE病人MPV/PC 0.06±0.02、CD62P(60.19±15.02)%高于无MACE者的0.05±0.01、(41.75±11.27)%(P<0.05);预测MACE的AUC:MPV/PC为0.76,CD62P为0.80,MPV/PC+CD62P为0.84(P<0.05)。结论 MPV/PC、CD62P均与PCI即刻TIMI血流分级有关,并能相互影响,两者联合具有较高的血流分级、MACE预测价值,有望成为预测PCI病人即刻血流分级和MACE的新方案。

血浆血小板颗粒膜糖蛋白、溶血磷脂酸含量与急性脑梗死临床变化的关系

目的通过检测血浆GMP-140、LPA含量变化,观察血小板活化状态与急性脑梗死发生、病情变化及复发的关系。方法观察组为100例急性脑梗死患者,按神经功能缺损程度分为:轻度、中度、重度缺损,14天后再次评估,观察组内各个病例病情变化及发病后1、3、14天血浆GMP-140、LPA含量变化,对照组为50例健康体检者,抽取静脉血检测二者含量。结果急性脑梗死患者血浆GMP-140、LPA含量高于对照组,重度神经功能缺损脑梗死患者血浆GMP-140、LPA含量高于轻度及中度脑梗死患者,预后差患者血浆CMP-140、LPA含量持续处于高水平,有脑梗死病史患者二者含量高于无脑梗死病史患者。结论血小板的活化状态与急性脑梗死发生、病情及复发密切相关,可据血浆GMP-140、LPA含量不同采取不同的抗血小板活化治疗。

羟乙基淀粉急性高容量血液稀释对老年癌症患者硬膜外阻滞复合全麻下血小板膜表面糖蛋白的影响

羟乙基淀粉急性高容量血液稀释（acute hypervolemic hemodiliution，AHH）作为一种血液保护、减少异体输血的方法之一，具有操作简便、省时、费用低廉、减少血液污染机会等特点而被推广应用^[1]。但不同种类的羟乙基淀粉（HES）由于相对分子质量、分子结构及体内降解速度的不同，对凝血功能的影响也不同^[2]。本文通过流式细胞术行血小板CD42b、CD41／CD61、CD62p、CD63检测，旨在观察HES130／0．4急性高容量血液稀释对老年癌症患者硬膜外神经阻滞复合全麻下的血小板功能的影响。

人源性抗血小板膜糖蛋白IIb/IIIa Fab噬菌体抗体库的构建

目的:构建人源性Fab噬菌体抗体库,为进一步从抗体库中筛选人源性抗GPIIb/IIIaFab抗体奠定基础。方法:利用RT-PCR和噬菌体表面展示技术,直接从血小板膜糖蛋白抗体(抗-GPIIb/IIIa)阳性的特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者脾细胞中提取总RNA,逆转录合成cDNA,扩增抗体轻链和重链Fd基因。经SacI/XbaI和XhoI/SpeI双酶切,依次将PCR产物插入噬粒载体pComb3H相应位点,电转化大肠杆菌XL1-blue,以辅助噬菌体VCSM13进行超感染,构建成人源性Fab噬菌体抗体库。结果:成功地构建库容量达6.2×106的抗血小板膜糖蛋白GPIIb/IIIaFab噬菌体抗体库。结论:构建了人源性Fab抗体库,并达到建库标准,可进一步从中筛选人源性Fab抗体。

缺血性脑卒中发病早期血小板膜糖蛋白Ⅵ和血清白介素-6水平变化

目的:探讨血小板膜糖蛋白Ⅵ(GPVI)和白介素-6(IL-6)在急性缺血性脑卒中早期诊断中的意义。方法:分别采用流式细胞术和ELISA检测缺血性脑卒中患者和健康对照人群GPVI和IL-6水平。通过受试者工作曲线评估GPVI和IL-6的灵敏度、特异度及界值。结果:缺血性脑卒中病人血小板GPVI和血清IL-6水平显著高于对照组,差异有非常显著性(P<0.01)。缺血性脑卒中病人GPVI与IL-6水平呈正相关(P<0.01)。缺血性脑卒中病人GPVI的ROC曲线下面积为0.984,在最适诊断参考值17.76荧光强度(FI)时,诊断的灵敏度为90.00%,特异度为93.33%。IL-6的ROC曲线下面积为0.918,在最适诊断参考值0.55ng/L时,诊断的灵敏度为66.67%,特异度为86.67%。结论:血小板GPVI含量和血清IL-6水平升高与缺血性脑卒中有关。GPVI对缺血性脑卒中具有较高的诊断价值和准确度。

糖尿病患者血小板膜糖蛋白CD62P和CD63表达及其临床意义研究

目的探讨2型糖尿病患者血小板α-颗粒膜糖蛋白(CD62P)和血小板溶酶体膜糖蛋白(CD63)的变化及其临床意义。方法应用流式细胞仪(FCM),荧光素标记单克隆抗体技术测定68例2型糖尿病患者(血管病变35例,无血管病变33例)及31例正常人CD62P、CD63的阳性表达率。结果2型糖尿病组CD62P,CD63的阳性表达率显著高于对照组(P<0.01)。2型糖尿病并血管病变组CD62P,CD63的阳性表达率明显高于无血管病变组(P<0.01)。结论血小板膜糖蛋白CD62P,CD63表达率测定对于2型糖尿病血管病变的早期诊断具有重要的临床意义。

急性心肌梗死患者血小板膜糖蛋白动态变化的研究

目的:观察急性心肌梗死(AMI)患者血浆中血小板膜糖蛋白的动态变化,并与稳定型心绞痛(SAP)患者进行比较。方法:采用酶联免疫法测定17例AMI 5个时限、30例SAP、30例正常人的血小板α颗粒膜蛋白(GMP-140)和血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(GP Ⅱb/Ⅲa)。结果:AMI组各时间的GMP-140与GP Ⅱb/Ⅲa,均高于对照组(P<0.01)及SAP组(P<0.01)。AMI组与SAP组比较,GMP-140、GP Ⅱb/Ⅲa在24h、48h、72h均有显著性差异(均P<0.01);1周、2周时无显著性差异(P>0.05)。AMI组自身的GMP-140和GP Ⅱb/Ⅲa有显著的动态变化(F=34.31,F=21.71均P<0.01);24h、48h、72h与1周和2周比较均有显著性差异(均P<0.05)。24h与48h、72h相比,48h与72h相比,及第1周与第2周相比则均无显著性差异(均P>0.05)。结论;AMI时血小板功能明显活化,持续3天增高,提示血小板膜糖蛋白参与了AMI冠脉内血栓形成的过程。

P-选择素、溶酶体颗粒糖蛋白、血小板活化因子和血浆D-二聚体水平与下肢深静脉血栓形成的关系

目的探讨血小板表面P-选择素(CD62P)、溶酶体颗粒糖蛋白(CD63)、血小板活化因子(PAF)、血浆D-二聚体(D-D)与下肢深静脉血栓形成的关系。方法 171例下肢深静脉血栓形成患者为病例组,并给予常规治疗,采用流式细胞仪检测治疗前、治疗后7 d的血浆CD62P和CD63的阳性率,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定治疗前、治疗后7 d血清PAF和血浆D-D水平,分析CD62P、CD63、PAF、D-D与双下肢周径差的关系,并与同期随机选取60例无血管相关疾病的对照组患者进行比较。结果病例组治疗前CD62P、CD63阳性率及PAF、D-D水平高于对照组(P<0.05);治疗后均降低,且仍高于对照组(P<0.05)。与治疗前相比,病例组治疗后7 d膝上15 cm、膝下10 cm患肢与健肢周径差均降低(P<0.05)。经Pearson积矩相关分析,病例组治疗前CD62P、CD63、PAF、D-D与膝上15 cm、膝下10 cm患肢与健肢周径差均呈正相关关系(P<0.05)。结论CD62P、CD63、PAF和血浆D-D与下肢深静脉血栓形成有密切关系,联合检测可作为早期诊断和早期预测下肢深静脉血栓形成的重要指标。

急性脑梗死患者血小板膜糖蛋白与血小板参数的研究

目的:探讨血小板功能指标与急性脑梗死(ACI)的关系,寻找精确判断血小板功能状态的方法。方法:采用流式细胞仪(FCM)检测51例ACI患者(病例组)和29例健康体检者(对照组)全血活化血小板膜糖蛋白GP b/a复合物单克隆抗体(PAC-1)、血小板α-颗粒膜蛋白抗P-选择素单克隆抗体(CD62P)的阳性率;应用全自动血球分析仪检测血小板的参数。结果:病例组PAC-1、CD62P的阳性率和血小板平均体积(MPV)均明显高于对照组,差异均有显著性(P<0.05或P<0.01);而血小板计数(PC)、血小板分布宽度(PDW)和大血小板比率(LPR)有增高趋势,但两组间比较差异均无显著性(P均>0.05)。直线相关分析显示:PAC-1与MPV(r=0.322,P=0.004)及PAC-1与LPR(r=0.224,P=0.046)之间存在正相关关系,CD62P与MPV间亦存在正相关关系(r=0.240,P=0.032),PC、PDW与膜糖蛋白之间无相关关系(P>0.05)。结论:ACI患者体内存在血小板活化,血小板膜糖蛋白和血小板参数共同参与这一过程;活化GP b-a与MPV有非常显著的正相关关系。