双抗体夹心ELISA测定人血浆可溶性血管内皮钙粘蛋白方法的建立及其应用研究

目的:建立测定人血浆可溶性血管内皮钙粘蛋白(sVE-cadherin)浓度的双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,并探讨其临床应用价值。方法:应用原核表达的人VE-cadherin重组蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体,采用棋盘格滴定法筛选出最佳双抗体组合,其中检测抗体采用辣根过氧化物酶(HRP)标记,建立检测人血浆sVE-cadherin双抗体夹心ELISA方法,并进行方法学评价。同时采用该法检测28名健康体检者和60例肿瘤患者的血浆sVE-cadherin浓度。结果:经筛选共获得6株单克隆抗体,通过筛查配对,成功建立检测人血浆可溶性VE-cadherin的双抗体夹心ELISA方法。该方法的检测限为24.7 pg/ml,批内变异系数(CV)为4.1%-7.7%,批间CV为8.7%-10.8%,平均回收率为96.7%。用该法检测28名健康体检者血浆VE-cadherin浓度为262.1±11.75 pg/ml,而用该方法检测24例白血病患者血浆VE-cadherin浓度为173.9±17.98 pg/ml,显著低于正常人(P<0.01),14例胃癌患者血浆VE-cadherin浓度为311.7±25.24 pg/ml(P>0.05),11例肺癌患者血浆VEcadherin浓度为206.8±25.01 pg/ml,均低于正常人(P<0.05),11例其他肿瘤(9例乳腺癌,1例胶质瘤,1例肝癌)患者血浆VE-cadherin浓度为310.7±11.82 pg/ml(P>0.05)。结论:建立的双抗体夹心ELISA试剂盒有较好的灵敏度及特异性,可用于人血浆中可溶性VE-cadherin含量的检测,并可作为肿瘤诊断的一种新检测指标。

血浆可溶性血管内皮生长因子受体1在重症肺炎患者中的诊断与预测价值

目的:探讨血浆可溶性血管内皮生长因子受体1(s FLT-1)在重症肺炎患者中的变化及预测价值。方法:选取2013年10月至2016年4月入住郑州大学附属郑州中心医院呼吸重症医学科的重症肺炎患者60例(A组)、重症肺炎合并感染性休克患者60例(B组)、重症肺炎合并MODS患者60例(C组),选取同期入住呼吸内科的社区获得性肺炎患者60例作为对照组(D组)。比较各组患者入院第1、3、7天以及存活组(n=96)和死亡组(n=84)s FLT-1水平变化,分析血浆s FLT-1在重症肺炎中的预测价值及与APACHEⅡ评分的相关性。结果:4组患者PCT和APACHEⅡ评分比较,差异有统计学意义(P均<0.05)。A、B、C 3组患者血浆s FLT-1水平比较,差异有统计学意义,且A、B、C 3组第7天均低于第1天(P均<0.05)。重症肺炎死亡组s FLT-1水平高于存活组(P<0.001)。重症肺炎患者s FLT-1水平和APACHEⅡ评分有关(r=0.647,P<0.001)。s FLT-1预测重症肺炎和28 d病死率的敏感度及特异度分别为77.8%、75.0%和69.7%、80.1%,AUC分别为0.787(95%CI=72.6%~84.8%,P<0.001)和0.775(95%CI=70.5%~84.5%,P<0.001)。结论:血浆s FLT-1水平可以预测重症肺炎和28 d病死率。

血浆可溶性选择素与急性冠脉综合征的关系

血浆可溶性选择素可反映体内血管内皮和血小板的功能状态,间接反映体内血管炎症及免疫状态。而炎症与免疫可能是导致斑块不稳定的主要因素。观察及干预选择素可能对急性冠脉综合征的预测和防治有帮助。本文就选择素与急性冠脉综合征的关系作一综述。

系统性红斑狼疮患者血管内皮细胞损伤标志物检测及其临床意义

目的探讨血管内皮细胞损伤与系统性红斑狼疮(SLE)疾病活动、肾脏损伤的关系。方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测31例SLE患者和10例健康对照者血浆可溶性血栓调节蛋白(sTM)、血管假性血友病因子(vWF)水平。结果SLE组血浆sTM、vWF水平明显高于对照组;SLE组血浆sTM、vWF水平均与疾病活动指数(SLEDAI)呈显著正相关,与24小时尿蛋白定量呈正相关。结论血管内皮损伤可能在SLE发病机制中起重要作用,血浆sTM、vWF水平可作为判断SLE疾病活动性及肾脏损伤程度的指标。

高血压合并糖尿病患者血管内皮因子受体与超氧化物歧化酶水平的观察

目的分析高血压合并糖尿病患者血浆可溶性血管内皮生长因子受体2(soluble VEGF receptor-2,s VEGFR2)与超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)水平的变化相关性。方法选取我院45例高血压患者作为高血压组,45例高血压合并糖尿病患者作为合并组,另选择同时期收治的来我院体检的健康人员40例作为对照组,比较三组人员的基础指标,采用酶联免疫吸附法对三组人员的血浆s VEGFR2与SOD水平进行测量,分析血浆s VEGFR2与SOD水平的变化相关性。结果高血压组与合并组比对照组血浆s VEGFR2及SOD水平低,合并组比高血压组血浆s VEGFR2及SOD水平更低,差异具有统计学意义(P<0.05)。在进行相关性分析时,血浆s VEGFR2与空腹血糖、糖化血红蛋白、收缩压及舒张压之间呈负相关性(P<0.05),但血浆s VEGFR2与SOD之间呈正相关性(P<0.05)。血浆s VEGFR2与年龄、体质量指数、血脂指标等均无相关性(P>0.05)。另外还发现,SOD与空腹血糖、糖化血红蛋白及收缩压之间呈负相关性(P<0.05),但SOD与舒张压、年龄、体质量指数以及血脂指标等无明显的相关性(P>0.05)。结论高血压合并糖尿病患者比单纯高血压以及健康人血浆s VEGFR2的水平明显降低,且血浆s VEGFR2下降的同时可能对SOD水平降低带来影响,具有一定的关联。

子痫前期患者血浆中可溶性内皮细胞蛋白C受体与血管性血友病因子及可溶性血栓调节蛋白的水平变化

子痫前期（pre—eclampsia，PE）是妊娠期高血压疾病的一种，属于妊娠期妇女所特有，发病率约2％-8％，一般发生于妊娠20周以后，临床表现为高血压、蛋白尿、浮肿，严重时出现抽搐、昏迷、甚至母婴死亡，是孕产妇及围生儿死亡的重要原因。

自拟开痹通脉汤对稳定型心绞痛患者血管内皮功能及凝血-纤溶系统的影响

目的探讨自拟开痹通脉汤对稳定型心绞痛患者血管内皮功能及凝血-纤溶系统相关指标血清组织纤维蛋白溶解酶原激活物抑制剂1(tPAI-1)含量、血清可溶性细胞间黏附分子1(sICAM-1)水平的影响。方法根据随机数字表法将本院收治的75例稳定型心绞痛患者分为研究组和对照组。2组均给予相同的基础干预措施和常规西药治疗,研究组在此基础上服用自拟开痹通脉汤,2组均连续治疗2个月。治疗结束后分析2组的治疗效果。治疗前后分别检测2组患者tPAI-1含量、sICAM-1含量、血浆一氧化氮(NO)含量和血清内皮素-1(ET-1)含量。结果研究组中医证候积分显著低于对照组(P<0.05),疗效分级情况显著优于对照组(P<0.05);治疗后,研究组血清tPAI-1、sICAM-1及ET-1含量显著低于对照组(P<0.05),血浆NO含量显著高于对照组(P<0.05)。结论自拟开痹通脉汤对稳定型心绞痛患者的疗效较好,可改善其血清tPAI-1、sICAM-1水平,增强血管内皮功能。

依那普利和叶酸联合治疗H型高血压对血管内皮功能的影响

目的探讨依那普利联用叶酸治疗H型高血压的临床效果,并分析其对患者血管内皮功能的影响。方法选择我院2014年3月—2016年8月所收治的64例H型高血压患者作为本次研究病例对象,按照计算机表法将其分为研究组和对照组,每组32例,对照组行依那普利治疗,研究组在此基础上加用叶酸治疗,对比分析两组治疗后的NO、ET-1、sICAM-1、Hcy、IMT、SBPV与DBPV。结果研究组治疗后24小时SBPV与DBPV显著低于对照组,且研究组NO、ET-1、Hcy等临床指标均优于对照组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论依那普利与叶酸联合治疗H型高血压的效果显著,能够有效改善患者的临床症状。

sFlt-1、PLGF及PAPP-A在子痫前期临床诊断及预后判断中的应用

目的 研究可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFlt-1)、胎盘生长因子(PLGF)及妊娠相关血浆蛋白-A(PAPP-A)在子痫前期临床诊断及预后判断中的应用效果。方法 选取2021年6月至2023年1月北京市大兴区人民医院收治的子痫前期孕妇151例为观察组,另选取同期进行孕检且结果正常的149名孕妇为对照组。比较两组孕妇sFlt-1、PLGF、PAPP-A水平;根据子痫前期严重程度不同将孕妇分为子痫前期轻度组和子痫前期重度组,比较子痫前期不同严重程度孕妇的sFlt-1、PLGF、PAPP-A水平;对比观察组患者不同妊娠结局一般资料、血清sFlt-1、PLGF、PAPP-A变化;进一步纳入多因素二元回归Logistic回归方程,分析影响子痫前期预后的危险因素。结果 观察组血清PLGF与PAPP-A水平均低于对照组,sFlt-1水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);子痫前期轻度组95例、子痫前期重度组56例,子痫前期重度组PLGF与PAPP-A水平低于子痫前期轻度组,sFlt-1高于子痫前期轻度组,差异均有统计学意义(P<0.05);正常妊娠组117例,不良妊娠组34例,两组糖尿病史、高血压史、sFlt-1、PLGF、PAPP-A比较,差异具有统计学意义(P<0.05),两组年龄、BMI、孕周比较,差异无统计学意义(P>0.05);Logistic结果显示,有糖尿病史、有高血压史、sFlt-1水平升高、PAPP-A水平降低、PLGF水平降低是影响子痫前期患者预后的危险因素(P<0.05)。结论 子痫前期孕妇血清sFlt-1、PLGF、PAPP-A表达呈异常状态,三指标可用于子痫前期的早期诊断。

不稳定型心绞痛患者血浆P-选择素、vWF的变化及意义

目的探讨血浆可溶性P-选择素、血管性血友病因子(vonWillbrandfactor,vWF)在不稳定型心绞痛(Unstableangina,UA)发生、发展中的作用。方法ELISA法检测28例UA患者及21例健康成人的血浆可溶性P-选择素、vWF水平。结果血浆可溶性P-选择素、vWF水平在UA组均明显高于正常组。结论UA患者血浆可溶性P-选择素及vWF水平升高,说明其发病过程与血小板激活及内皮功能受损有关。

血浆TM、sVCAM-1检测在妊娠高血压综合征的应用

目的探讨妊娠高血压综合征(妊高征)患者血浆凝血酶调节蛋白(TM)和血清可溶性血管内皮细胞黏附分子-1(sVCAM-1)水平的变化及其在妊高征发病机制中的作用。方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测59例妊高征患者和65例正常晚期妊娠妇女的血浆TM和血清sVCAM-1水平,并进行统计分析。结果妊高征患者血浆TM含量和血清sVCAM-1水平均明显高于正常妊娠组(P<0.01),且与病情的严重程度正相关。结论血浆TM和血清sVCAM-1可能参与了妊高征患者血管内皮损伤的过程,二者联合检测可作为妊高征诊断和病情严重程度观察的实验室辅助指标。

肝移植急性排斥患者血浆可溶性血栓调节蛋白和可溶性P-选择素检测的意义

血栓调节蛋白（TM）在移植物内皮细胞中表达，在内皮受损伤时其以可溶性形式快速释放人血，可溶性TM（sTM）可作为内皮细胞损伤的重要标志物。P-选择素（P-sel）主要分布于血小板α颗粒及内皮细胞weibel-Palade小体中。可溶性P—se（sP—sel）是血小板／血管内皮细胞活化的标志。本研究通过检测sTM、sP—sel以及凝血指标的变化，以探讨其在肝脏移植排斥中的应用价值。

通腑清浊舒心方加减联合盐酸地尔硫[艹卓]片治疗冠心病心绞痛临床研究

目的:观察通腑清浊舒心方加减联合盐酸地尔硫[艹卓]片治疗冠心病心绞痛的临床疗效。方法:选取100例冠心病心绞痛患者,按随机数字表法分为对照组和观察组各50例。对照组采用盐酸地尔硫[艹卓]片治疗,观察组在对照组基础上给予通腑清浊舒心方加减治疗。评价2组临床疗效,比较2组治疗前后全身血管阻力(SVR)、血浆可溶性CD105(sCD105)、内皮素-1(ET-1)水平。结果:观察组总有效率为96.00%,高于对照组84.00%(P<0.05)。治疗前,2组SVR、sCD105、ET-1水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,2组SVR、s CD105、ET-1水平较治疗前降低(P<0.05),且观察组SVR、sCD105、ET-1水平低于对照组(P<0.05)。结论:通腑清浊舒心方加减联合盐酸地尔硫[艹卓]片治疗冠心病心绞痛能有效改善患者的心血管功能,降低炎症反应,提高临床疗效。

拉贝洛尔联合尼莫地平治疗妊娠期高血压疾病及对PAPPA、PLGF、sFIt 1影响

目的:研究拉贝洛尔联合尼莫地平治疗妊娠期高血压疗效及对血清妊娠关联血浆蛋白A(PAPPA)、胎盘生长因子(PLGF)、人可溶性血管内皮生长因子1(sFIt 1)影响。方法:收集2016年2月-2018年2月本院治疗的妊娠期高血压患者82例,按随机数字表法分为观察组和对照组各41例,两组均采取尼莫地平治疗,观察组同时联合采用拉贝洛尔治疗,治疗4周。比较血压控制情况、血清PAPPA、PLGF、sFIt 1水平、妊娠结局、分娩方式及不良反应。结果:治疗后,两组收缩压和舒张压均有明显改善,且观察组改善程度优于对照组;两组血清PAPPA水平下降,PLGF、sFIt 1上升,且观察组改善幅度高于对照组;观察组顺产率(85.4%)高于对照组(65.9%),不良妊娠结局发生率(7.3%)低于对照组(46.3%)(均P<0.05)。结论:拉贝洛尔联合尼莫地平治疗妊娠期高血压孕妇可提高疗效,通过对患者血清PAPPA水平下调,PLGF、sFIt 1水平上调发挥药效作用。

原发性肝癌患者介入治疗前后SE-CAD,CA19-9和VEGF水平的变化

为探讨原发性肝癌患者介入治疗前后,血清可溶性上皮钙粘蛋白(SE-CAD),糖类抗原19-9(CA19-9)和血管内皮生长因子(VEGF)水平的变化,本文应用RIA测定了32例患者血清CA19-9的水平,ELASA测定SE-CAD和VEGF水平,并与35名健康人相比较。患者介入治疗前后SE-CAD,CA19-9和VEGF水平明显高于正常组(P<0.01)。介入治疗后30例中,有20例在6个月以后没有复发,患者血清三项指标回落至正常范围,介入治疗后6个月,10例复发患者血清SE-CAD,CA19-9和VEGF水平的变化与患者的病情和愈后密切相关,有一定的实用价值。

PAPP-A、sICAM-1和sVCAM-1变化与子痫前期的关系

目的探讨子痫前期患者血浆中妊娠相关血浆蛋白-A(PAPP-A)与可溶性细胞黏附分子-1(sICAM-1)和可溶性血管细胞黏附分子-1(sVCAM-1)相关性对妊娠高血压疾病的预测价值。方法选择产前检查的子痫前期患者115例,采用双抗体夹心酶联免疫方法测定PAPP-A蛋白含量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测sICAM-1和sVCAM。结果子痫前期组PAPP-A水平明显高于正常对照组(P<0.05);子痫前期组sICAM-1和sVCAM-1水平明显高于正常对照组(P<0.05)。子痫前期组血清中PAPP-A水平与sVCAM-1水平呈正相关(r=0.56,P<0.05)。子痫前期组学血清中PAPP-A与sICAM-1水平无相关性。结论子痫前期发病与广泛的血管内皮细胞激活关系密切。

妊高症产褥感染孕妇sFlt-1/PLGF与PLGF和PAPP-A水平及其危险因素

目的探讨妊高症孕妇溶性血管内皮生长因子受体1(sFlt-1)/胎盘生长因子(PLGF)和PLGF及妊娠相关血浆蛋白-A(PAPP-A)及其产褥感染的危险因素.方法选取2020年3月—2023年3月西南医科大学附属医院及崇州市妇幼保健计划生育服务中心收治的妊高症孕妇产褥感染患者121例作为研究组,另选同期121例妊高症孕妇未发生产褥感染的临床资料作为对照组,并根据妊高症产褥感染患者妊娠结局分为良好组(93例)和不良组(28例);统计妊高症孕妇产褥感染的病原菌情况;比较两组临床资料,分析妊高症孕妇产褥感染的危险因素;比较不同妊娠结局产褥感染孕妇sFlt-1/PLGF、PLGF、PAPP-A水平;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析sFlt-1/PLGF、PLGF、PAPP-A对妊高症产褥感染孕妇不良妊娠结局的预测价值.结果妊高症孕妇产褥感染病原菌以革兰阳性菌较多;产程、产后大出血、剖宫产、产前贫血、胎膜早破是妊高症孕妇产褥感染的危险因素(P<0.05);不良组血浆sFlt-1/PLGF、血清PAPP-A水平较良好组高(P<0.05),血浆PLGF较良好组低(P<0.05);绘制ROC曲线获得sFlt-1/PLGF、PLGF、PAPP-A单独及联合检测诊断妊高症产褥感染孕妇不良妊娠结局的曲线下面积(AUC)分别为0.775、0.751、0.724和0.820,联合诊断的AUC高于各项单独检测(P<0.05),且联合检测的敏感度和特异度为75.00%,78.50%.结论妊高症孕妇产褥感染病原菌以革兰阳性菌为主;sFlt-1/PLGF、PAPP-A在妊高症孕妇产褥感染不良妊娠结局患者中呈高表达,PLGF呈低表达;联合检测sFlt-1/PLGF、PLGF、PAPP-A有助于诊断产褥感染孕妇不良妊娠结局;产程、产后大出血、剖宫产、产前贫血、胎膜早破均是妊高症孕妇产褥感染的危险因素;临床可据此予患者针对性治疗及预防措施.

血浆TM、hs-CRP和sVCAM-1联检在妊娠高血压综合征的意义

目的探讨妊娠高血压综合征(妊高征)患者血浆凝血酶调节蛋白(TM)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)和血清可溶性血管内皮细胞黏附分子-1(sVCAM-1)在妊高征病情变化中的应用价值。方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测59例妊高征患者和65例正常晚期妊娠妇女的血浆TM和血清sVCAM-1水平,免疫透射比浊法检测超敏C反应蛋白(hs-CRP)的含量变化,并进行统计分析。结果妊高征患者血浆TM、hs-CRP含量和血清sVCAM-1水平均明显高于正常妊娠组(P<0.01),且随病情的加重而增高。结论血浆TM、hs-CRP和血清sVCAM-1三者联合检测可作为妊高征诊断和病情严重程度观察的实验室辅助指标。

血清PAPP-A、PP13和sFlt-1/PlGF比值检测对子痫前期高危孕妇患病的预测价值

目的分析血清妊娠相关α血浆蛋白(PAPP-A)、胎盘蛋白13(PP13)和可溶性胎盘血管内皮生长因子受体-1(sFlt-1)/胎盘生长因子(PlGF)比值检测对子痫前期(PE)高危因素孕妇PE发生的预测价值。方法选取2021年3月至2023年3月合肥市第二人民医院收治的187例具有PE高危因素的孕妇,根据妊娠20周后是否发生PE分为患病组(28例)和未患病组(159例)。收集所有孕妇一般资料,并采用酶联免疫吸附试验检测所有孕妇血清PAPP-A、PP13、sFlt-1、PlGF水平,采用Pearson相关分析各指标的关系,绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估各项指标对PE发生的预测价值。结果妊娠16周及分娩前患病组血清PAPP-A水平均低于未患病组,血清PP13水平均高于未患病组,sFlt-1/PlGF比值均高于未患病组,差异有统计学意义(t值介于4.198~8.173之间,P<0.05);患病组孕妇经干预治疗后血清PAPP-A水平升高,血清PP13水平降低,sFlt-1/PlGF比值降低,差异有统计学意义(t值介于2.024~3.671之间,P<0.05);血清PAPP-A水平与PP13、sFlt-1/PlGF比值均呈负相关性(r值分别为-0.836、-0.775,P<0.05),血清PP13水平与sFlt-1/PlGF比值呈正相关性(r=0.670,P<0.05);ROC分析结果显示,血清PAPP-A、PP13、sFlt-1/PlGF预测PE发生的曲线下面积(AUC)分别为0.810、0.805、0.798,均有一定的预测价值(P<0.05)。结论血清PAPP-A、PP13和sFlt-1/PlGF比值对PE高危因素孕妇发生PE有较高的预测价值。