晚期胃肠道肿瘤患者血浆游离DNA片段的检测、定量

目的探讨肿瘤患者循环血液中DNA改变，及对提高肿瘤患者治愈率和生存率的临床实际意义。方法随机采集了2004年10月-12月大连医科大学附属二院经病理确诊的初治晚期胃、大肠癌患者的血标本18份，门诊健康体检者血标本16份，通过酚／氯仿提取法定量检测两组的血浆DNA片段，进行对照比较，分析健康人与晚期胃肠道肿瘤患者血浆游离DNA片段水平的差异、晚期胃肠道肿瘤患者血浆游离DNA片段水平与预后相关指标的相关性。结果晚期胃肠道肿瘤组血浆游离DNA片段水平高于正常健康对照组，其血浆游离DNA片段的均值分别为（346．3±81．62）μg/ml与（27．6±6．91）μg／ml．差异有显著性；胃癌、大肠癌患者两组间的血浆游离DNA片段差异无显著性，均值分别为：（350．8±110．92）μg／ml与（357．1±126．26）μg/ml；在预后相关指标的各因素中，晚期胃肠道肿瘤患者的血浆游离DNA片段水平与免疫状态、是否存在远处转移有明显相关性，其中与免疫状态呈负相关，与远处转移呈正相关。结论晚期胃肠道肿瘤患者血中的游离DNA片段水平较健康人高，可能与患者自身状态、病理分型、疾病状态有关；游离DNA片段可以作为检测晚期胃肠道肿瘤的特异性指标，还可以替代免疫状态及是否存在远处转移等指标评价远期预后，并有取材方便、检测时间短、可以定量分析的优点，对临床有一定的指导意义和应用价值。

母体血浆游离DNA分子浓度和片段完整性分析

目的应用荧光定量PCR技术研究母体血浆游离DNA分子的浓度和片段的完整性的分子生物学特性。方法提取本院2011年8月42例门诊16～20周妊娠女性和40例进行体检的非妊娠女性的血浆游离DNA,靶基因为lep-tin基因和SRY基因,用荧光定量PCR技术分别对其不同片段进行特异性扩增。leptin基因的扩增片段长度为80、202 bp,SRY基因为83、206 bp,观察其片段完整性和DNA浓度的变化。结果妊娠组和对照组leptin基因80 bp片段长度的DNA浓度平均值分别为681、439拷贝/ml(P<0.01);在片段长度为202 bp的DNA浓度平均值分别为157、91拷贝/ml,中位数为134、85拷贝/ml,表明均有显著性差异(P<0.01)。妊娠组胎儿SRY基因83 bp和206 bp的DNA浓度的平均值为94(38～369)拷贝/ml、80(71～88)拷贝/ml,与妊娠组leptin基因比较,有显著性差异。结论妊娠女性血浆DNA分子浓度明显高于非妊娠正常女性和胎儿游离DNA分子浓度。