亚甲蓝光化学法灭活血浆病毒的临床应用进展

输血安全面临免疫反应和感染风险两大管控点。保障血制品的安全是血液管理的核心,也是临床用血的基本要求。选择合适的病毒灭活技术是降低经血传播病毒风险的重要手段。理想的病毒灭活方法应能有效地杀灭和去除病原体,并最大限度地减少对血制品有效成分的损伤。亚甲蓝光化学法是一种采用光敏剂与光照相结合的技术,能灭活多种病毒,保障血浆制品的安全,具有广阔的应用前景。

一次性使用血浆病毒灭活输血器材光化学照射后遗传毒性研究

目的评估一次性使用血浆病毒灭活输血器材经亚甲蓝/光照病毒灭活后是否具有遗传毒性。方法本研究将羟乙基淀粉130/0.4氯化钠注射液代替血浆通过一次性使用血浆病毒灭活输血器材模拟临床使用(经光照、吸附过滤、贮存)后,进行Ames、染色体畸变、体外小鼠淋巴瘤细胞突变试验。结果与对照组相比,3项遗传毒性试验结果均为阴性。结论光照后亚甲蓝对Ames试验菌株、CHL细胞、小鼠淋巴瘤细胞均无诱变性。

浅谈血浆病毒灭活的临床应用与安全输血

输血在临床疾病治疗和挽救生命中起着不可低估的作用，是抢救危重患者行之有效的重要手段。目前输血安全性问题越来越受到公众的重视，但由于病毒感染的窗口期以及有些病毒血液因受检测技术的影响无法检测而不能完全保证经血传播疾病的发生。血浆病毒灭活技术作为阻断经血传播病毒最有效的技术而倍受关注。我科为了保证临床输血的安全性，于2009年起开展血浆病毒灭活技术。

亚甲蓝光化学法灭活血浆病毒对血浆凝血功能的影响

目的探讨亚甲蓝光化学法(MB-P)灭活血浆病毒对血浆凝血功能的影响。方法随机抽取新鲜血浆100份,分为对照组和试验组,分别对上述两组标本进行PT,APTT,TT,TP,Fg,FⅤ,FⅧ的测定。对照组,新鲜冰冻血浆(FFP)组,不进行病毒灭活,直接进行检测;试验组,先对其进行亚甲蓝光化学法病毒灭活,再检测。结果试验组中APTT、FⅤ、FⅧ水平与对照组比较差异有显著性降低(P<0.01);PT、TT、TP、Fg较对照组无显著变化(P>0.05)。结论:MB-P法病毒灭活对于新鲜血浆中内源性凝血因子,特别是不稳定因子FⅤ、FⅧ及APTT有显著影响,对外源性凝血因子及Fg、血浆蛋白成分影响不大。

亚甲蓝灭活血浆病毒的临床应用进展

探讨亚甲蓝灭活技术的有效性和安全性及其临床应用进展。通过查询国内外亚甲蓝病毒灭活技术相关文献,进行回顾性分析与总结。现有研究认为亚甲蓝能有效灭活血浆病毒,虽有引起过敏反应的案例,但与未灭活血浆发生几率相似。总之,临床应用亚甲蓝灭活血浆病毒是安全有效的。

血浆病毒灭活的原理及必要性

长期的临床实践证实有多种病毒可经输血传播，引起输血后病毒性传染病，给社会带来了较大的危害。如何防止输血传播的病毒性疾病，是当前输血医学和临床医学乃至社会各界共同关注的问题。由于病毒检测方法学上的局限性和新病毒的不断发现，不能完全剔除携带致病病毒的血液。因此，临床输血就有一定的风险。在各种血液成份中，血浆是一种临床需求量大且病毒危险性高的血液成份制品，杜绝血浆引起的输血病毒性传染病的可靠途径是对血浆进行病毒灭活处理。亚甲蓝光化学血浆病毒灭活方法，对分离制备的血浆进行病毒灭活，并滤除血浆中的残余白细胞，该方法符合卫生部的规定，并可以安全有效地灭活血浆中的病毒，减少输血反应，确保输血安全。本文将就该技术的原理及必要性等问题综述如下。

亚甲蓝光化学法灭活血浆病毒对血浆成分的影响

目的探讨亚甲蓝光化学法灭活血浆病毒对血浆成分的影响。方法 2013年4月到2014年3月的一年间,每月随机抽取新鲜血浆5袋,共计60袋作为研究对象,分别对亚甲蓝光化学法灭活血浆病毒前后血浆中的凝血因子、血浆纤维蛋白原(Fg)、总蛋白(TP)含量进行测定,并检测亚甲蓝残留量。结果亚甲蓝光化学法病毒灭活前后,TP、Fg以及凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ等各项指标无显著变化,P>0.05,差异无统计学意义。病毒灭活血浆中亚甲蓝的残留量仅为0.06±0.01μmol/L,其滤出率可以达到94.0%。结论在单袋血浆病毒灭活的过程中,亚甲蓝光化学法对血浆质量影响相对较小,是一种有效方法,实用性强,安全性好,值得临床推广应用。

血浆病毒灭活治疗乙型慢性活动性肝炎的探讨

目的探讨自身血浆灭活对缓解期乙型慢性活动性肝炎患者血清中乙型肝炎病毒(HBV)的清除作用。方法选择69例缓解期乙型慢性活动性肝炎患者为治疗对象,每2周单采1次血浆,第1次采集血浆400ml,用亚甲蓝和光照灭活病毒,并于6h内冻存。第2次先采集400ml血浆,再回输第1次采集的400ml灭活血浆,同时采集400ml血浆。将第2次采集的800ml血浆病毒灭活后冻存,待第3次采集时回输用。这样第3次可冻存血浆1200ml,第4次可冻存血浆1600ml。共单采7次。最后1次可置换自体灭活血浆2800ml。1个疗程3个月。第1次灭活置换前和最后1次置换后分别留取血清,采用聚合酶链反应结合Taqman荧光探针技术对血清中HBV进行定量测定。结果灭活置换术前、后病毒平均浓度分别为(5.23×105±2.25×102)copy/ml和(2.95×104±1.03×102)copy/ml,灭活置换术前、后HBV含量下降显著(P<0.05)。结论自体血浆病毒灭活置换术对外周血HBV有较强的清除作用。

亚甲蓝光化学法灭活血浆病毒对凝血因子活性的影响

目的分析亚甲蓝光化学法灭活血浆病毒对凝血因子活性的影响。方法本研究随机选取100份需进行病毒灭活血浆,检测亚甲蓝光化学法灭活前后凝血因子活性的变化。结果灭活前Fib为(2.24±0.12)mg/m L、FⅧ为(0.78±0.09)IU/m L、PT为(14.02±2.63)s、APTT为(34.62±4.76)s。灭活后Fib为(2.10±0.14)mg/m L、FⅧ为(0.76±0.10)IU/m L、PT为(14.14±2.75)s、APTT为(34.88±4.86)s。经过数据统计学分析发现,采用亚甲蓝光化学法灭活血浆病毒后Fib、FⅧ、PT、APTT等指标无显著的统计学差异(P>0.05)。结论采用亚甲蓝光化学法灭活血浆病毒对凝血因子活性无明显的影响,是一种安全有效的血浆病毒灭活方法。

关于血浆病毒载量,CD_4^+细胞计数及细胞产生HIV-1病毒的讨论

关于血浆病毒载量，ＣＤ＋４细胞计数及细胞产生ＨＩＶ－１病毒的讨论最近许多文章都相继报道了在艾滋病毒感染者的血液里含有大量的ＨＩＶ－１病毒。有人估计在被感染者的全身血液中，每毫升血中至少要含有约１０６数量级的病毒颗粒。ＪｏｈｎＭ．Ｃｏｆｔｉｎ认为每毫升...

新冠病毒感染患者恢复期血浆抗体效价的相关因素分析

目的研究新冠病毒感染康复者恢复期血浆IgG、IgM、中和抗体效价与性别、年龄、采集间隔等因素的关系,从而指导新冠病毒感染康复者血浆采集。方法采集新冠恢复期患者血浆,测定抗体效价,采用SPSS统计学分析软件,分析各组数据差异性及相关性。结果不同性别与3种抗体效价(男性IgG、IgM、中和抗体效价中位数分别为484.24 AU/mL、2.13 AU/mL、1124.74 AU/mL;女性IgG、IgM、中和抗体效价中位数分别为516.04 AU/mL、1.73 AU/mL、1143.99 AU/mL)组间比较无差异(P>0.05),年龄与IgG、中和抗体有弱的正相关,Spearman相关系数为0.188(P<0.05);30名重复捐献者,首次捐献IgG、IgM、中和抗体效价中位数分别为522.3 AU/mL、2.64 AU/mL、1174.6 AU/mL,再次捐献3种抗体效价中位数为332.08 AU/mL、0.63 AU/mL、708.96AU/mL,前后浓度水平比较有差异(P<0.05)。结论不同年龄、性别的新冠病毒感染康复者恢复期血浆IgG、IgM、中和抗体效价水平无差异,其效价水平均可达到临床治疗指南要求。重复捐献者抗体水平虽有所下降,但仍具有临床价值。

血浆宏病毒组学中降低非病毒核酸方法的探索研究

目的探究常用的降低非病毒核酸方法对血浆病毒组丰度的影响。方法应用3种建库流程、5种离心条件、2种滤器、4种酶和4种含量氯仿处理定量投入伪狂犬病病毒(PRV)和猪细小病毒(PPV)各2.16 mL的模拟宏病毒组血浆标本共21.6 mL,累计54份标本,随后提取病毒核酸、用qPCR定量检测线粒体DNA(mtDNA)和病毒、构建二代测序(NGS)文库并应用NGS测序仪测序,测序数据用Kraken Py2.0软件做比对并做物种注释分析,得到每个片段对应的物种分类信息以分析降低非病毒核酸的不同方法对微生物和2种指示病毒相对丰度的影响。结果NGS测序仪测序:306.27 GB raw data,193.17 GB clean data,所有的测序数据Q20>90%、Q30>85%,碱基错误率0.03%,GC含量中位数为45.02%。DNA建库流程提高了微生物序列占比和PRV丰度[(91.8±0.5)%](P<0.05);RNA建库和合并建库提高了RNA病毒——瘟病毒(Pestivirus)的丰度,PRV丰度分别为(17.7±3.3)%和(8.1±1.5)%。5种离心条件处理后mtDNA Ct值增加、人类序列降低至占比<(89.5±1)%、微生物序列升高至占比>(2.4±0.03)%(P<0.05);在4℃、100 g离心30 min后PRV丰度提升至(40.6±6)%,再于4℃、4000 g离心45 min后PRV丰度下降至(4.1±0.01)(P<0.05)。依次使用0.22和0.45μm滤器使mtDNA增加至Ct值>25.56±0.13,人类序列降低至占比<(86.1±0.6)%,微生物序列占比升高至(3.1±0.1)%和(3.4±0.2)%,PRV Ct增加至25.77±0.20、25.56±0.13,PRV丰度下降至(1.6±0.3)%、(4.1±0.7)%(P<0.05)。DNaseⅠ和Benzonase使PPV Ct值增加至25.65±0.06、25.36±0.45,人类序列占比分别下降至(81.7±5.6)%、(72.8±6.7)%,微生物序列占比和PRV丰度分别上升至(11.0±4.1)、(16.1±4.7)%,(55.8±2.3)%、(39.0±8.9)%(P<0.05);RNase A处理后使PRV Ct值增加至25.20±0.11,人类序列占比降低至(85.4±5.6)%(P<0.05);溶菌酶无降低非病毒核酸效果。1%、5%、10%和20%氯仿使mtDNA和PRV Ct值增加至不低于27.17±0.21、25.68±0.04(P<0.05),10%氯仿处理后将微生物序列占比提升至(3.1±1.2)%(P<0.05);1%和5%氯仿分别使PRV丰度上升至(48.7±13.3)%、(42.1±5.5)%(P<0.05),10%和20%氯仿分别使PRV丰度下降至(1.0±0.5)%、(3.4±2.8)%(P<0.05),4种氯仿对PPV丰度无明显影响(P>0.05)。结论本研究中4℃、5000 g离心10 min适于提升指示病毒组整体的丰度,4℃100 g离心30 min适于提高与PRV性质相似病毒含量;0.45μm滤器、DNaseⅠ和Benzonase及低浓度氯仿均能有效降低血浆中非病毒核酸序列占比从而提升指示病毒组丰度。血浆宏病毒组中降低非病毒核酸的不同方法对病毒浓度和丰度的影响与病毒基因组种类、病毒大小和是否具有包膜等密切相关,具有病毒特异性。

血液肿瘤患者血浆EB病毒和巨细胞病毒定量检测的临床价值

探究血液肿瘤患者血浆EB病毒和巨细胞病毒定量检测的临床价值。方法 127例血液肿瘤患者临床资料取自2021年10月至2023年3月,设为观察组,选择同期接受体检的健康人群127例作为对照组,抽取两组受试者5mL静脉血液用EDTA抗凝处理后送检,对样本进行荧光PCR定量检测。结果 127例患者中,EBV阳性率为13.39%,CMV阳性率为17.32%,二者均为阳性占6.30%。观察组阳性率(17.32)显著高于对照组(0.79%),P<0.05。结论 血浆EB病毒和巨细胞病毒定量检测准确率高,时间短,临床实践效果良好,应纳入血液肿瘤患者的常规检测项目中。

抗病毒治疗后血浆病毒阴性的艾滋病患者泪液中存在HIV

为观察经过高效联合抗逆转录病毒治疗（HAART）的HIV感染者的泪液中是否存在HIV-1，我们进行了一项横断面研究。

亚甲蓝光化学法病毒灭活对血浆成分及白细胞残留量的影响

目的探讨亚甲蓝光化学法（methylene blue photochemistry,MB-P）病毒灭活前后血浆有效成分及残留白细胞含量的变化,为其临床应用提供数据参考。方法应用去白细胞四联血袋采集全血分离制备成新鲜血浆,加入1μmol/L亚甲蓝,置4℃、光照度30 000～35 000Lx的可见光下左右摆动照射30min。留取白细胞滤过前和亚甲蓝光照处理后新鲜血浆各10ml,分别计数白细胞并检测血浆中凝血因子活性、纤维蛋白原和血浆总蛋白含量,同时计算有效成分回收率。结果经MB-P病毒灭活后新鲜血浆中Ⅷ因子和Ⅴ因子活性明显降低,差异有统计学意义（P〈0.05）；但总蛋白含量无明显变化,其他凝血因子活性减少不明显（P〉0.05）；残留白细胞计数由（5.72±1.56）×106个/U下降到（1.14±0.37）×104个/U（n=30）,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论联合应用滤除白细胞和亚甲蓝光化学灭活病毒法对新鲜血浆处理前后的主要成分影响不大,可以满足临床安全输血的需求。

病毒灭活血浆的临床应用探讨

病毒灭活血浆是在严格的操作条件下通过特殊处理之后的血浆,用一些特殊的方式,比如物理化学等方式,破坏病毒的蛋白质,使其失去繁殖能力。该文从病毒灭活等离子体在输血安全性、临床应用效果,病毒灭活血浆与新鲜血浆的优势对比,病毒灭活等离子体的原理、方法等方面展开了详细的论述,确定了一条更简单、更高效,能够安全输血的途径,进一步说明了病毒灭活血浆对血浆中的病毒灭活,可有效降低病毒感染的概率,还可以通过正确的使用方式大幅度降低因输血而传染疾病的风险,可以有效预防输血传播疾病,可以指导临床安全用血。