高血压病肝阳上亢证血浆HPLC指纹图谱检测

目的建立高血压病肝阳上亢证血浆HPLC指纹图谱检测方法。方法通过HPLC分离,建立分析方法,比较正常与异常血浆的HPLC指纹图谱。结果高血压病肝阳上亢证与正常血浆的HPLC指纹图谱有明显差异。结论 HPLC指纹图谱可以区分正常与高血压病肝阳上亢证患者,有助于临床诊断。

引火汤冻干粉HPLC指纹图谱建立及8种成分含量测定

目的建立引火汤冻干粉HPLC指纹图谱,并测定地黄苷D、麦冬甲基黄烷酮A、毛蕊花糖苷、原儿茶酸、梓醇、五味子醇甲、五味子乙素、五味子甲素的含量。方法指纹图谱建立采用Supersil AQ18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长230 nm。UPLC-MS/MS含量测定采用Alphasil VC-C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.5μm);流动相乙腈-0.1%甲酸,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温30℃;电喷雾离子源;正负离子扫描;多反应监测模式。结果10批冻干粉指纹图谱中有17个共有峰,相似度大于0.90,指认出毛蕊花糖苷、水晶兰苷、去乙酰车叶草苷酸、五味子醇甲。8种成分在各自范围内线性关系良好(R^(2)>0.9906),平均加样回收率98.7%~101.1%,RSD 2.0%~5.2%。结论指纹图谱结合含量测定能完整表征引火汤基准样品质量,从而为其关键化学属性质量评价提供参考。

不同产地巴戟天HPLC指纹图谱及化学模式识别研究

目的:利用HPLC指纹图谱及化学模式识别对巴戟天药材进行评价。方法:采用Shodex Asahipak NH2P-504E色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-水为流动相梯度洗脱,使用蒸发光散射检测器(ELSD)。利用相似度评价、聚类分析和主成分分析等化学模式识别方法,对不同产地的巴戟天药材进行分析。结果:所建立的HPLC指纹图谱共识别了18个共有峰,经与对照品图谱比较,鉴定其中的4个共有峰分别为果糖、蔗糖、蔗果三糖和耐斯糖。6个产地巴戟天的相似度在0.861~0.995;经聚类分析和主成分分析,6个产地巴戟天共聚为3类。结论:本研究采用的巴戟天HPLC指纹图谱及化学模式识别技术可反映出不同产地的巴戟天样品的差异,可为巴戟天的质量控制提供参考。

基于HPLC指纹图谱及网络药理学探讨黑桑葚防治阿尔兹海默病潜在机制

利用HPLC构建黑桑指纹图谱并分析黑桑的主要活性成分,结合网络药理学和分子对接技术研究黑桑治疗阿尔兹海默病(Alzheimer’s disease,AD)的作用分子机制。HPLC法建立12批黑桑的指纹图谱并对共有峰进行指认识别,进一步采用相似度评价、聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘法判别分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)和理想解相似性排序法(technique for order preference by similarity to ideal solution,TOPSIS)对12批黑桑样品进行评价;通过中药系统药理学数据库与分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP)和Swiss Target Prediction平台获得黑桑的活性成分与靶点信息。使用Gene Cards数据库和AD专属数据库(Chemogenomics Database For Alzheimer’s Disease)获得AD的疾病靶点信息,得到黑桑治疗AD的潜在作用靶点。通过String(Search Tool for the Retrieval of Interacting Genes/Proteins,String)和Cytoscape3.7.2构建PPI网络图并进行拓扑分析。利用R软件对核心靶点进行GO和KEGG富集分析。通过Auto Dock软件进行模拟分子对接。黑桑HPLC指纹图谱的相似度均>0.96,并指认出3个色谱峰,通过聚类分析将12批样品聚为3类,主成分分析结果与聚类分析结果一致。网络药理学筛选后最终得到12个核心靶点,并对核心靶点进行富集分析得到1480个GO条目和104个KEGG通路。黑桑可能通过核心靶点调节PI3K-Akt信号通路、中性粒细胞外陷等信号通路,进而调控炎症等反应,多靶点-多通路-多途径达到治疗和预防AD的效果。

不同产地五脉绿绒蒿HPLC指纹图谱建立及槲皮素含量测定

目的建立不同产地五脉绿绒蒿HPLC指纹图谱,并测定槲皮素含量。方法收集6个产地14批药材,采用聚类分析、主成分分析及正交偏最小二乘法分析进行考察。结果对照指纹图谱共标定了9个共有峰,相似度均为0.80以上。14批药材聚为2类,2个主成分累积方差贡献率为75.136%,峰8、7、1、4、6是区别不同产地药材的主要成分。槲皮素含量存在显著差异,拉萨产地最高,为0.1961%;那曲产地最低,为0.0075%。结论本实验建立了稳定性强的藏药五脉绿绒蒿HPLC指纹图谱及槲皮素含量测定方法,可定性定量评价药材质量。

葛藤花HPLC指纹图谱建立及3种成分含量测定

目的建立葛藤花HPLC指纹图谱,并测定染料木苷、鸢尾苷、染料木素的含量。方法分析采用AQ-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长260 nm。再进行聚类分析和主成分分析。结果10批药材指纹图谱中有17个共有峰,相似度大于0.970。3种成分在各自范围内线性关系良好(r>0.9990),平均加样回收率100.50%~104.30%,RSD 1.93%~5.21%。各批药材聚为2类,3种主成分累积方差贡献率为84.822%。结论该方法稳定可靠,可用于葛藤花的质量控制。

不同采收时间茵陈药材HPLC指纹图谱研究

目的建立10个不同采收期批次茵陈药材的HPLC指纹图谱,考察整个生长期中主要功效成分合成累积变化规律,揭示绵茵陈和花茵陈药材的整体质量特征,为临床合理用药提供科学数据支撑。方法基于3~12月份采收的10批茵陈药材建立HPLC指纹图谱并进行相似度评价,以共有峰的相对峰面积为指标,采用SPSS22.0软件对不同采收时间茵陈药材进行聚类分析和偏最小二乘判别分析、评价。结果建立了10批不同采收时间茵陈药材指纹图谱,确定18个共有峰,共指认出5个共有成分。10批药材样品可分为3类,其中3、4、5月份采收的茵陈样品聚为第一类,6、7、8、9月份样品聚为第二类,10、11、12月份样品聚为第三类。结论不同采收时间的茵陈药材功效成分种类和含量存在不同,其中绵茵陈(采收期3、4、5月份)和花茵陈(采收期6、7、8、9月份)药材中功效成分累积量差异明显,说明《中华人民共和国药典》对绵茵陈和花茵陈进行分类临床运用的科学性,同时也表明以绿原酸和滨蒿内酯分别作为两者指标成分进行质量控制的合理性。

川西小黄菊HPLC指纹图谱建立及7种成分含量测定

目的建立川西小黄菊HPLC指纹图谱,并测定绿原酸、槲皮素-3-O-葡萄糖苷、木犀草素-7-O-葡萄糖苷、木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷、木犀草素、芹菜素的含量。方法分析采用Agilent ZORBAX Extend C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,0.5μm);流动相0.5%磷酸-乙腈,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温35℃;检测波长350 nm。再进行主成分分析、偏最小二乘法判别分析和聚类分析。结果14批样品指纹图谱中有12个共有峰,相似度0.761~0.975。7种成分在各自范围内线性关系良好(R^(2)≥0.9991),平均加样回收率84.00%~105.11%,RSD 1.28%~2.86%。各批样品聚为3类,发现7种差异成分,包括峰4(木犀草素-7-O-葡萄糖苷)、12(芹菜素)、9(芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷)、8、11(木犀草素)、5(木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷)、2。结论该方法精密稳定,专属性强,重复性好,可用于川西小黄菊的质量控制。

窄叶鲜卑花HPLC指纹图谱及含量测定研究

目的:建立窄叶鲜卑花HPLC指纹图谱和3个成分的含量测定方法。方法:采用HPLC法建立窄叶鲜卑花指纹图谱,以sibiskoside色谱峰为参照,确定共有峰,进行相似度评价,同时测定其中3个成分的含量。结果:9批窄叶鲜卑花样品确定26个共有峰,指认了16个成分,9批样品相似度为0.980~0.996。3个含量测定成分线性关系良好(r≥0.9997),平均加样回收率分别为99.17%、98.93%、101.43%,RSD分别为1.53%、2.01%、1.32%。结论:该研究建立的HPLC指纹图谱成分信息反映全面,含量测定方法稳定可靠,可为窄叶鲜卑花质量控制体系的完善提供参考。

鱼腥草芩蓝合剂HPLC指纹图谱及8种成分含量测定

目的:建立鱼腥草芩蓝合剂的HPLC指纹图谱,并同时测定其中黄芩苷、汉黄芩苷、汉黄芩素、连翘苷、连翘酯苷A、绿原酸、芦丁和槲皮苷的含量。方法:采用SHIMSEM Ankylo C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为甲醇-0.1%磷酸,梯度洗脱;检测波长210 nm;体积流量1.0 mL/min;柱温40℃;进样量10μL。以黄芩苷作为参照峰,建立17批鱼腥草芩蓝合剂的指纹图谱,综合应用相似度评价、聚类分析和主成分分析评价鱼腥草芩蓝合剂批间质量差异;并同时测定其中8种成分的含量。结果:17批样品中有27个共有峰,相似度均>0.990。聚类分析可将样品分为5类,筛选出3个主成分,累计贡献率75.804%。8种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.9995),平均加样回收率为96.17%~103.53%,RSD为0.50%~1.23%。结论:该试验方法稳定、可靠,可对鱼腥草芩蓝合剂进行质量控制。

基于HPLC指纹图谱的高酚酸耐盐金银花品种筛选

为了筛选出高酚酸含量且耐盐的金银花品种,在河北、山东、河南不同地点采集金银花品种17个,统一移植到河北省农林科学院滨海农业研究所实验基地的盐渍土(NaCl含量0.1%)上栽培繁殖,盐胁迫14 d后取枝条进行酚酸物质含量检测。采用高效液相色谱法(HPLC)与指纹图谱综合质量评价相结合的方法,以酚酸含量高为目标,对金银花品种进行筛选。结果表明:不同的金银花品种具有共同的特征色谱峰12个,特征峰中以绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸C、木犀草苷这4种酚酸物质含量表现较高;不同品种的酚酸物质含量差异较大,其中变异株的绿原酸(15.7 mg/g)以及总酚酸物质含量(20.35 mg/g)均为最高,其次是古郡红(绿叶)(绿原酸含量为11.87 mg/g,总酚酸物质含量为17.05 mg/g),二者指标值均显著>其他品种。变异株和古郡红(绿叶)为本次试验筛选出的适合在盐碱地推广种植的品种。

基于HPLC指纹图谱和化学模式识别的附子粳米汤质量分析研究

目的:建立附子粳米汤指纹图谱和化学模式识别方法,为其质量一致性研究提供参考。方法:指纹图谱采用Ultimate XB-C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈(A),0.05%乙酸-10mmol/L乙酸铵(B)梯度洗脱;检测波长:0~55min,254nm,55~100min,240nm,柱温:30℃,进样量20L。建立12个批次的附子粳米汤指纹图谱,进行相似度评价,采用SPSS软件对其进行聚类分析(HCA)和主成分分析(PCA)。结果:建立的指纹图谱共标定8个共有峰,其中1号峰为鸟苷,4号峰为甘草苷,5号峰为苯甲酰新乌头原碱,相似度0.971~1.000;HCA和PCA均将样品分为4类,PCA分析得到2个主成分,累计方差贡献率为78.268%。结论:该方法简单可行,可用于评价不同批次的附子粳米汤的稳定性和一致性。

不同部位园参HPLC指纹图谱研究

采用HPLC建立不同部位园参的指纹图谱。采用Agilent ZORBAX SB-Aq(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水为流动相梯度洗脱,通过《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012版)对样品进行相似度评价。经验证的HPLC方法精确、可重现且稳定。测定4个批次园参样品的主根和须根HPLC指纹图谱,样品之间相似度较好,初步认定15个分离度良好的共同峰,方法简单、稳定、高效,可为园参等中药材的质量评价提供分析方法。

基于HPLC指纹图谱结合化学模式识别法对黄芪不同炮制品多指标成分分析研究

本研究通过建立黄芪不同炮制品HPLC指纹图谱及多成分含量测定方法,并结合化学计量法对其进行比较分析,为黄芪炮制品的综合利用提供理论支持。采用HPLC建立黄芪炮制品指纹图谱并进行6种成分的含量测定,并通过聚类分析(hierarchical clustering analysis,HCA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘-判别分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)评价不同黄芪炮制品的差异,找寻差异性成分。结果显示,不同炮制品(各10批)共得到20个共有峰,其中指认了6个共有峰,且6个成分在各自的质量浓度范围内线性关系良好(r>0.999),平均加样回收率为100.5%~102.1%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为0.77%~2.1%;指纹图谱相似度结果显示,蜜麸黄芪、蜜炙黄芪、盐黄芪、酒黄芪各自10批的相似度均在0.900以上,但不同类型炮制品的相似度降低;聚类分析可将四种炮制品聚为3类,主成分分析与聚类分析结果一致,可相互佐证,正交偏最小二乘-判别分析能有效的将4种炮制品区分,以变量重要性投影(variable importance of projection,VIP)大于1为依据,筛选了9种主要差异成分,确认了毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、5-羟甲基糠醛是引起黄芪不同炮制品间成分差异的主要标志性成分。该研究所建立的黄芪炮制品HPLC指纹图谱结合化学计量法的方法准确可靠,可为黄芪炮制品的质量控制和品质评价提供参考依据。

清肺止咳散HPLC指纹图谱和多成分含量的测定

为了建立清肺止咳散高效液相色谱(HPLC)指纹图谱和多成分含量测定的方法,为其质量评价提供参考。本试验采用HPLC法,建立12批清肺止咳散样品的HPLC指纹图谱,以《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012版)评价指纹图谱的相似度,并结合主成分分析(PCA)和偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)筛选质量标志物,同时测定清肺止咳散中被指认的质量标志物的含量。结果显示,12批样品共确定33个共有峰,指认了绿原酸、苦杏仁苷、柚皮苷、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素和白花前胡甲素7个特征性成分;12批样品按不同厂家聚为3个组,筛选出绿原酸、苦杏仁苷、柚皮苷和黄芩苷4个质量标志物,各成分呈良好的线性关系(r>0.999),平均加样回收率为95.2%~101.2%;12批样品中绿原酸、苦杏仁苷、柚皮苷和黄芩苷含量范围分别为0.65~7.09、3.45~8.98、0.95~10.60和4.03~25.83 mg/g。本试验所建立的HPLC指纹图谱和多成分含量测定方法简便、稳定,可为清肺止咳散的质量控制和品质评价提供依据。

枸杞不同部位UV-Vis和HPLC指纹图谱研究

目的采用多维指纹图谱结合化学计量学方法,比较枸杞果实和根皮中黄酮、香豆素类和苯丙酸类等成分的整体差异,并综合多糖和总黄酮的含量比较,为枸杞不同药用部位的价值评估和质量标准的建立提供理论依据。方法建立HPLC指纹图谱进行相似度评价和共有峰确定。化学计量学方法对药材不同部位进行分类研究,建立分类模型,筛选出重要差异性标志物并进行定量分析;紫外-可见光谱(UV-Vis),反映药材化学组成的整体特征;采用2020年版《中华人民共和国药典》苯酚-硫酸法测定枸杞多糖的含量,亚硝酸钠-硝酸铝比色法测定总黄酮含量。结果HPLC指纹图谱共标定9个共有峰,指认了绿原酸、东莨菪内酯、槲皮素、芦丁4个色谱峰。相似度评价表明果实和根皮整体组成差异较大,地骨皮不同产地之间质量缺乏一致性;正交偏最小二乘法-判别分析找出芦丁是对整体差异性贡献比较大的化学成分;UV-Vis呈现明显的指纹特性;枸杞子中枸杞多糖和总黄酮的含量分别为2.74%~3.79%和1.52%~2.24%,均高于地骨皮中1.92%~2.67%和0.46%~0.58%,且含量分布具有产地差异性。结论综合多指标揭示枸杞果实和根皮中化学成分差异,为枸杞药材的质量评价和资源价值的充分利用提供重要的数据参考。

甘遂炮制前后HPLC指纹图谱及主要成分含量变化研究

目的建立甘遂炮制前后(生甘遂、醋甘遂)的HPLC指纹图谱,并对大戟二烯醇进行定量分析,为甘遂质量控制及炮制提供参考。方法采用HPLC法建立生甘遂和醋甘遂的HPLC指纹图谱。通过相似度评价对甘遂炮制前后指纹图谱进行分析,并对大戟二烯醇进行含量测定。结果建立了甘遂炮制前后的HPLC指纹图谱,生甘遂和醋甘遂分别确定了14个和12个共有峰,与各自对照指纹图谱的相似度均大于0.950。大戟二烯醇在生甘遂和醋甘遂中的质量分数分别为0.249%和0.222%。甘遂HPLC指纹图谱在炮制前后发生了显著变化,共有峰减少3个,新增加1个,大戟二烯醇的含量显著降低。结论建立的HPLC指纹图谱对甘遂及其炮制品的质量控制及整体性评价具有重要意义,能够为甘遂的炮制及药理研究提供参考。

香旱芹的HPLC指纹图谱研究及含量测定

目的:建立香旱芹HPLC指纹图谱,并测定其中2种特征成分的含量。方法:采用高效液相色谱法,Agilent Eclipse Plus C18(4.6mm×250 mm,5μm)色谱柱;流动相为乙腈-0.5%冰乙酸水溶液,梯度洗脱;流速为1.0mL·min^(-1);检测波长为321 nm;柱温30℃;进行相似度评价,测定绿原酸、木犀草素含量。结果:10批样品的HPLC指纹图谱中有14个共有峰,绿原酸与木犀草素相似度差异较小,且在进样质量分别在0.1366~0.6829 g和0.2390~1.1952 g范围内与峰面积线性关系良好(r>0.999)。结论:建立的香旱芹HPLC指纹图谱能全面反映不同产地的药材质量差异,可用于该品的质量控制。

蒙药扁蕾HPLC指纹图谱及3种成分含量测定研究

目的建立蒙药扁蕾的高效液相色谱(High performance liquid chromatography,HPLC)指纹图谱,建立其中3种成分的含量测定方法。方法采用HPLC法,选用Agilent TC-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,柱温30℃,甲醇-0.1%乙酸洗脱,紫外检测波长260 nm,流速0.8 mL/min,记录时间110 min;采用化学计量学软件建立10批扁蕾HPLC指纹图谱,进行相似度评价并测定样品中3种成分的含量。结果建立了蒙药扁蕾药材的指纹图谱,确定了16个特征峰,其中3、4、11号峰分别为当药黄素、当药醇苷和木犀草素,10批药材相似度≥0.974;含量测定结果显示,3种成分的线性关系良好(r≥0.9991),加样回收率为97.30%~100.2%。结论此研究所建立的HPLC指纹图谱和含量测定方法具有操作简便、准确、重复性好等特点,可用于蒙药扁蕾药材的质量控制。

土家药刺老苞不同极性提取物的HPLC指纹图谱方法验证研究

目的建立一种可用于不同极性刺老苞提取物的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱方法。方法采用HPLC法对色谱条件进行优化,并进行方法学验证。结果色谱条件为Agilent C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈(A)-0.1%磷酸(B)流动相梯度洗脱,检测波长280 nm,柱温30℃,进样量10μL。方法学验证显示,该HPLC指纹图谱法精密度、稳定性、重复性的相对标准偏差(RSD)符合要求。结论该HPLC指纹图谱法可同时应用于刺老苞不同极性提取物的检验,可初步比较各提取物之间的差异。