血液中N-甲基氨甲酰加合物作为二甲基甲酰胺职业接触标志物可行性探讨

目的探讨血液中N-甲基氨甲酰加合物作为二甲基甲酰胺(DMF)职业接触标志物可行性。方法选择不同生产部门、不同DMF接触水平的职业人群87人,不接触DMF等有机溶剂的人员22人作为对照。气相色谱-质谱法测定N-甲基氨甲酰加合物经过一系列降解后的产物3-甲基-异丙基乙内酸脲(MVH)浓度。结果各类DMF职业接触人员血红蛋白中均检出了不同含量的MVH,而对照人群均未检出。血液中N-甲基氨甲酰加合物水平与DMF接触情况呈正相关。结论血液中N-甲基氨甲酰加合物有望成为反映DMF长期接触的标志物。

气相色谱-质谱法测定二甲基甲酰胺职业接触者血液中N-甲基氨甲酰加合物

建立二甲基甲酰胺(DMF)职业接触者血液中N-甲基氨甲酰加合物测定方法。收集DMF职业接触人群血液,制备成粉末状血红蛋白,经降解、提取等步骤处理后,用GC/MS分析血液中N-甲基氨甲酰加合物降解产物3-甲基-异丙基乙内酸脲(MVH)水平。SIM模式检测,基体匹配标准外标法定量。结果显示,浓度为2～30μmol/L时相关系数为0.976,平均加标回收率为89%～93%,相对标准偏差为8.7%～9.2%,血红蛋白中MVH检出限为0.16μg/g。方法能很好地应用于DMF职业接触者血液中N-甲基氨甲酰加合物的测定。

UPLC-MS联用技术测定职业接触二甲基甲酰胺人群血液中N-甲基氨甲酰加合物

应用超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS)联用技术快速测定二甲基甲酰胺(DMF)职业接触者血红蛋白中N-甲基氨甲酰加合物水平,探讨DMF职业接触水平与血液N-甲基氨甲酰加合物之间的关系。选择某皮革生产企业445人为调查对象。其中以职业接触DMF的339人作为接触组,以不接触DMF及其他有机溶剂的106人作为对照组。应用UPLC-MS联用技术快速测定血液中N-甲基氨甲酰加合物的降解产物3-甲基-异丙基乙内酸脲(MVH)水平。结果显示,MVH浓度在0.01~1.0μmol/L范围内与峰面积线性关系良好,相关系数为0.999。血红蛋白中MVH检出限为10 nmol/g。随着DMF职业接触水平的增加,血液中N-甲基氨甲酰加合物浓度明显升高(P<0.01)。提示,血液中N-甲基氨甲酰加合物可作为反映DMF长期接触的标志物。UPLC-MS联用技术可应用于职业接触DMF人群血液生物标志物的快速测定。

超高效液相色谱-质谱联用技术快速检测二甲基甲酰胺职业接触者血红蛋白中新型生物标志物

建立了二甲基甲酰胺（N,N-dimethyl formamide,DMF）职业接触者血红蛋白中N-甲基氨甲酰加合物超高效液相色谱-质谱联用（UPLC/MS/MS）快速检测方法。准确称取0.1 g血红蛋白样品置于15 mL离心管中,加入40μmol/L3-甲基-异丁基海因（3-methy-5-isobutylhydantion,MIH）内标溶液250μL,再加入HCl-醋酸（2∶1,V/V）溶液4.75 mL,振荡混匀3 min。将试管置于沸水浴中加热降解1 h,取出冷却。混匀后取200μL到96孔板,加入600μL1%甲酸乙腈溶液,混匀。控制真空泵压力,使样品在2~4 min流出。将净化后样品混匀转移到样品瓶,用UPLC/MS/MS检测N-甲基氨甲酰加合物的降解产物3-甲基-异丙基乙内酸脲（3-Methyl-5-isopropylhydantoin,MVH）。质谱采集方式为多反应监测模式,内标法定量。结果表明,MVH浓度在0.01~1.0μmol/L范围内线性关系良好,相关系数为0.999。空白人群血红蛋白MVH加标回收率为97.3%,相对标准偏差为1.7%,血红蛋白中MVH检出限为0.01μmol/g。本方法能很好地应用于二甲基甲酰胺职业接触者血红蛋白中新型生物标志物N-甲基氨甲酰加合物的快速、准确测定。

血液中N-甲基氨甲酰血红蛋白加合物作为二甲基甲酰胺接触生物标志的研究

目的 探讨血液中N-甲基氨甲酰血红蛋白加合物（N-methylcarbamoylated haemoglobin,NMHb）作为N,N-二甲基甲酰胺（N,N-dimethylformamide,DMF）接触生物标志的可行性.方法 选择某合成革厂72名DMF作业工人为接触组,选择不接触DMF的某食品厂12名工人为对照组.接触组中选择有代表性45名工人进行工作场所空气长时间个体采样,同时问卷调查,并收集尿液和血液,分别用于测定尿甲基甲酰胺（N-methylformamide,NMF）、尿肌酐（Cr）和血液中NMHb.空气中的DMF和尿NMF用气相色谱进行测定,血液中的NMHb经埃德曼降解法降解为3-甲基-5-异丙基乙内酰脲（3-methyl-5-isopropylhydantoin,MVH）后,通过GC/MS进行测定.结果 工作场所空气中DMF浓度和班末尿NMF含量均与血液中NMHb含量相关,回归方程式分别为lgNMHb（nmol/g globin）=0.32×Lg DMF（mg/m3）＋1.8（r=0.60,P＜0.01）,lgNMHb（nmol/g globin）=0.47×lg NMF（mg/g Cr）＋ 1.4（r=0.56,P＜0.01）.结论 NMHb可作为反映DMF接触工人长期接触的生物标志物.

二甲基甲酰胺职业接触者血中N-甲基氨甲酰加合物的测定

目的建立二甲基甲酰胺(DMF)职业接触者血中N-甲基氨甲酰加合物(NMHb)的测定方法。方法收集DMF职业接触人群血液,用分子生物技术提取法制备成血红蛋白粉末。经降解、提取等处理后,用GCMS测定血中NMHb的降解产物3-甲基-5-异丙基乙内酰脲(MVH)的水平。结果当MVH浓度在5~300μmol/L范围内,与峰面积呈线性相关,其相关系数为0.9992,平均加标回收率为92.13%~97.44%,相对标准偏差为3.78%~4.97%,检出限和定量下限分别为0.1和0.33μmol/L。结论该方法的各项性能指标都符合GBZ/T 201.5—2008,能很好地应用于二甲基甲酰胺职业接触者血中N-甲基氨甲酰加合物的测定。

N-甲基氨甲酰血红蛋白加合物生物接触限值研究

目的探索我国职业接触二甲基甲酰胺(DMF)工人血液N-甲基氨甲酰血红蛋白加合物(NMHb)的生物接触限值。方法将某皮革生产企业168名DMF接触工人和30名不接触DMF的行政人员分别纳入同质暴露组和对照组,采用个体采样器采集空气并检测DMF浓度,采集研究对象血液检测NMHb浓度,并进行职业健康检查。比较两组肝功能异常率,分析DMF暴露浓度与血液NMHb浓度的相关性,提出我国NMHb生物接触限值。结果该皮革企业DMF暴露浓度为0.100~648 mg/m3,同质暴露组研究对象血液NMHb浓度为2.38~761 nmol/g Hb。同质暴露组肝功能异常检出率为50.60%,高于对照组的3.33%(P<0.001)。血液NMHb浓度与DMF暴露浓度呈对数线性关系,回归方程为lg(NMHb)=0.552 lg(DMF)+1.319(r=0.862,P<0.01);参考美国政府工业卫生医师协会DMF时间加权浓度30 mg/m3推算得NMHb为136.3 nmol/g Hb。低内暴露组(NMHb≤135 nmol/g Hb)肝功能异常检出率为42.39%,低于高内暴露组(NMHb>135 nmol/g Hb)的60.53%(P<0.05)。在DMF暴露浓度<20 mg/m3组中,93.5%职业接触劳动者血液NMHb浓度<135 nmol/g Hb。结论 DMF暴露与肝功能异常和血液NMHb浓度升高相关,建议我国NMHb生物接触限值设置为135 nmol/g Hb。

职业接触二甲基甲酰胺血液生物标志物研究

目的探讨二甲基甲酰胺(DMF)职业接触人群血液生物标志物。方法选择某皮革厂DMF职业接触人群99人为接触组,不接触DMF及其他有机溶剂的人员22人作为对照组。测定两组人群血液中N-甲基氨甲酰加合物、尿中甲基甲酰胺(NMF)、尿中巯基尿酸(AMCC)3个指标。对上述3个指标的相关性进行探讨。结果随着DMF职业接触浓度的增加,上述3个指标测定结果逐步升高。Spearman等级相关分析表明,3项指标间存在着明显的相关性(P<0.01)。结论血液中N-甲基氨甲酰加合物可作为反映DMF长期接触的标志物。

二甲基甲酰胺职业接触对作业工人氧化或抗氧化状态的影响

目的 探讨职业接触二甲基甲酰胺（DMF）对作业工人氧化或抗氧化状态的影响.方法 2012年5月选取某DMF生产企业104名DMF接触工人和101名对照作为研究对象,调查职业史、年龄、性别、吸烟和饮酒等信息.测定车间空气中DMF浓度.采用血红蛋白N-甲基氨甲酰加合物（NMHb）水平作为内剂量标志物,结果以NMHb降解产物3-甲基-异丙基乙内酸脲（MVH）水平表示;测定血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）水平反映肝功能;测定血清中超氧化物歧化酶（SOD）活力、谷胱甘肽-S转移酶（GST）活性、丙二醛（MDA）水平、3-硝基酪氨酸（3-NT）水平反映机体氧化或抗氧化状态.结果 工作岗位作业场所空气中DMF浓度在3.3～ 12.4 mg/m3范围内,并未超过国家标准.接触组MVH水平为（19.69±12.52） mg/kg,对照组未检出.接触组血清SOD活力为（125.30 ±21.23） U/ml,高于对照组[（118.35 ±18.48）U/ml,￡=-2.47,P=0.014].SOD活力随MVH水平的增加,表现出不同的变化趋势.当MVH≤24 mg/kg时,SOD活力随MVH水平的增加而增加（r =0.356,P=0.002）;而当MVH＞ 24 mg/kg时,SOD活力随MVH水平的增加反而出现了降低的趋势（r=-0.260,P =0.150）.两组人群MDA、GST、3-NT、ALT、AST的差异无统计学意义.结论 较低的DMF暴露浓度对机体的抗氧化系统存在一定程度的刺激作用,在机体能够代偿防御的范围内,并未造成明显的脂质/蛋白的过氧化损伤.