乙肝血清学标志物定量和HBV DNA定量联合检测在乙肝病毒感染诊断中的应用

目的分析乙肝患者的血清标志物和乙肝病毒(HBV)DNA联合检测在HBV感染诊断中的应用价值。方法以2013年6月-2015年6月在珠海市妇幼保健院就诊的120例乙肝患者血清样本作为研究资料,分别采用ELISA定性试验和实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测HBV血清标志物(HBs Ag、抗-HBs、HBe Ag、抗-HBe、抗-HBc)和HBV DNA含量。结果Ⅰ组HBV DNA阳性率为96.15%;Ⅱ组HBV DNA阳性率为48.08%;Ⅲ组HBV DNA阳性率为4.76%。Ⅰ组HBV DNA定量显著高于Ⅱ、Ⅲ两组(P<0.01);Ⅱ组HBV DNA定量显著高于Ⅲ组(P<0.05)。HBV DNA与HBs Ag检出符合率分别为73.33%和72.50%,两者之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论乙肝血清标志物定量与HBV DNA定量联合检测在诊断HBV感染过程中起互相补充的作用,诊断结果更加准确,可提供更有效的参考依据。

定量检测血清HBV标志物不同阳性组合模式与HBVDNA定量之间的关系

目的 探讨定量检测乙型肝炎病毒血清标志物(HBVM)与HBVDNA定量之间的关系。方法 采用实时荧光定量PCR仪检测HBVDNA ,采用时间分辨荧光免疫分析仪检测HBVM。结果 3 71例乙型肝炎患者表现12种阳性模式,除常见模式外,发现3种HBVM特殊模式,即抗 HBe与HBeAg共存,即抗 HBs与HBeAg或与HBsAg共存模式。含有HBeAg的各种模式病毒含量高,病毒复制活跃,HBVDNA阳性率多数较高。结论 时间分辨荧光免疫分析法是一种敏感、特异方法,HBVM各项指标中,抗原意义远大于抗体意义,只要有HBeAg存在的模式,就代表病毒复制活跃及传染性强。抗 HBe与HBeAg共存或抗 HBs与HBeAg或与HBsAg共存时,抗 HBs不能清除HBV ,抗 HBs及抗 HBe也不代表病毒复制减少。

应用荧光定量PCR技术测定多次冻融对血清HBV DNA含量的影响

目的研究多次冻融状态对血清HBVDNA含量的影响。方法采用荧光定量PCR技术检测25例慢性乙型肝炎血清标本第1(基线)、2、4、6、8次循环冻融时的HBVDNA含量。结果80%(20/25)的血清标本经2到8次冻融后HBVDNA含量较基线水平仅有轻度升高。线性回归方法分析显示HBVDNA含量在每次冻融循环后较基线水平增加1.9%。冻融4～8个循环后血清HBVDNA含量下降20%以上者低于10%。结论血清标本在反复冻融8次以内其HBVDNA水平稳定的。

荧光定量PCR与普通定性PCR检测乙型肝炎血清HBV DNA结果的比较

目的 探讨荧光定量聚合酶链反应 (PCR)与普通定性 PCR检测血清 HBV DNA结果的差异。方法 同时采用荧光标记 (Ampli Sensor)定量 PCR方法及普通定性 PCR方法对 10 0例乙型肝炎血清样品进行 HBV DNA检测 ,并分析其相关性 ,比较其差异。结果 10 0例荧光定量 PCR方法检测 HBV DNA阳性率为 74.0 % (74/ 10 0 ) ,定性 PCR方法检测 HBV DNA阳性率为 5 2 .0 % (5 2 / 10 0 ) ,两种方法的 HBV DNA检出率比较具有显著性差异 (P<0 .0 1)。结论 荧光定量 PCR与普通定性 PCR相比具有一定的优势 ,完全可以取代定性 PCR方法 。

慢性乙型肝炎血清HBV DNA定量检测的临床意义

本文采用荧光定量PCR法对49例慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA作定量检测,分析血清HBV DNA水平与疾病程度和HBV血清标志物(HBVM)的关系,探讨血清HBV DNA定量检测的临床意义。 资料与方法 一、检测对象 参照1995年北京第五次全国传染病寄生虫病学术会议修订的诊断标准。慢性乙型肝炎49例,均存在肝功能异常,其中轻度19例、中度13例、重度17例。男42例,女7例。年龄18～78岁。

乙肝血清标志物与HBV-DNA定量检测结果分析

目的:对乙肝血清标志物与HBV-DNA定量检测结果进行分析。方法:对489例乙型肝炎患者依据乙肝血清标志物分为1组150例,2组239例,3组100例,并进行HBV-DNA定量检测。结果:乙肝血清标志物HBsAg、HBeAg、抗-HBc阳性组阳性率为100%,HBsAg、抗-HBe、抗-HBc阳性组阳性率为84.10%,HBsAg、抗-HBe阳性组阳性率为52.00%。结论:乙型肝炎患者仅仅采用ELISA方法检测5项乙肝血清标志物对乙肝患者传染性强弱判断和乙肝病毒复制和是否需要治疗是远远不够的,易造成部分慢性乙型病毒性肝炎的漏诊。应用定量PCR检测HBV-DNA对监测乙型肝炎病毒感染的病情发展优于乙肝血清标志物血清学检测指标。

血清HBV DNA定量检测的临床应用价值

目的了解慢性乙肝患者 HBV DNA 定量检测结果与 HbsAg,抗 HbsAg,HbeAg,抗 HbeAg 和抗 HBc 检测以及肝穿免疫组化 HbsAg 和 HbcAg 检测结果的相互关系。方法临床确诊的慢性乙肝患者173例,经 ELISA 测定 HBV—M(HBsAg,抗Hbs,HbeAg,抗 Hbe 和抗 HBc)后,采用 HBV DNA PCR 分子杂交定量检测技术,测定患者血清 HBV DNA 含量,并对部分患者进行了肝穿免疫组化 HbsAg 和 HbcAg 测定。结果 173例慢性乙肝患者 HBV DNA 定量结果,阳性率为83.24%。其中:(1)HbsAg(+),HbeAg(+),抗 HbcAg(+)患者78例,HBV DNA 定量检1测结果>10E4拷贝/L 76例,总阳性率97.44%。(2)HbsAg(+),抗 HbeAg(+)和抗 Hbc(+)27例,HBV DNA 定量检测结果,>10E4拷贝/L 16例,总阳性率59.25%。(3)HbsAg(+),抗Hbc(+)16例,HBV DNA 定量检测结果>10E4拷贝/L 8例,总阳性率50.0%。(4)HbsAg(-),其他均阳性10例,HBV DNA 定量检测结果总阳性率100%。(5)HbsAg(+),抗 Hbs(+),和抗 HBc(+)26例,HBV DNA 定量检测结果,>10E4拷贝/L 22例,总阳性率84.62%。(6)抗 Hbs(+),其余均阴性11例,HBV DNA 定量检测结果,>10E4拷贝/L 7例,总阳性率63.64%。(7)其他5例。其中共20例患者进行了肝穿免疫组化 HbsAg 和 HbcAg 检测,结果阳性率为90%,与 HBV DNA 定量结果吻合率90%。结论乙肝患者 HBV DNA 定量检测结果可以直观的反应患者血清中 HBV DNA 含量,可以作为慢性乙肝患者发病情况和治疗效果观察的良好指标。

实时荧光定量PCR法检测乙型肝炎患者血清HBVDNA含量512例分析

目的探讨实时荧光定量PCR检测不同血清标志物模式的乙型肝炎患者的血清HBVDNA含量的特点。方法应用ELISA对512例病人血清中乙型肝炎血清标志物进行检测，同时用实时荧光定量PCR检测标本中HBVDNA的含量，分别统计每组的HBVDNA阳性例数及其阳性率，用u检验进行统计学处理。结果HBsAg（＋）／HBeAg（＋）／抗HBc㈩组168例，HBVDNA阳性161例，占95．8％；HBsAg（＋）／抗HBe（＋）／抗HBc（＋）组163例，HBVDNA阳性51例，占31．3％；HBsAg（＋）／抗HBc（＋）组181例，HBVDNA阳性94例占51．9％；三组之间互相比较差异均有显著性（P〈0．001）。结论HBsAg（＋）／HBeAg（＋）／抗HBc（＋）组中HBV复制最活跃，实时荧光定量PCR检测HBVDNA比血清标志更能反映乙型肝炎病毒存在与复制情况。

慢性乙型肝炎肝组织学分级与血清HBV DNA及HBeAg定量的关系

目的 探讨慢性乙型肝炎肝内炎性变化与HBVDNA定量及HBeAg定量的关系 ,为临床正确判断病期和治疗提供依据。方法 应用荧光定量PCR法和放免法 ,分别对 10 2例慢性乙肝患者血清中HBVDNA和HBeAg含量进行定量检测 ,同时采用常规 1s肝穿刺活检法行肝穿病理组织学检查。结果 10 2例乙型肝炎患者肝内炎症组织学分级与HBVDNA定量无相关性。 4 5例HBeAb阳性患者的肝内炎症组织学分级与HBVDNA定量呈明显的相关。 5 7例HBeAg阳性患者肝内炎症组织学分级与HBVDNA无明显的相关 ,但有降低的趋势 ,肝内炎症组织学分级与HBeAg定量显著相关。结论 在非免疫耐受期的慢性乙肝患者 ,血清HBVDNA复制水平与肝内炎症活动程度相关 ,肝内炎症患者与血清HBeAg含量密切相关 ,提示检测慢性乙型肝炎患者血清HBV

慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞凋亡与血清HBVDNA定量关系的研究

探讨慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞凋亡与血清HBVDNA定量的关系。分别采用流式细胞计数仪和荧光定量PCR法检测慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞凋亡率与血清HBVDNA。慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞凋亡率明显高于正常对照组 ,且与血清HBVDNA水平呈正相关。

荧光定量PCR法检测HBV DNA同血清标志物关系的探讨

目的 探讨荧光定量PCR法 (FQ PCR)检测HBVDNA同血清标志物的关系。方法 将FQ PCR法检测HBVDNA的标本用ELISA法重新测定HBV血清标志物前S1抗原 (PreS1 )及乙型肝炎病毒标志物。结果 1 86份HBVDNA阳性标本中 ,HBsAg阳性率 98.92 % ,抗 HBc阳性率 94 .0 9 % ,有 2例HBsAg阴性 ,其中 1例为抗 HBc单独阳性。PreS1阳性率为 6 1 .83% ,HBeAg阳性率为6 6 .6 7% ,后二者同时检出率 4 2 .4 7% ,联合检出率 86 .0 2 % ,PreS1和HBeAg阳性率无显著性差异 (P>0 .0 5 ) ;HBVDNA阴性而HBsAg阳性标本 1 1 4例 ,抗 HBc阳性率为 96 .4 9% ,PreS1阳性率为 2 2 .81 % ,HBeAg阳性率为 5 .2 6 % ,后二者同时检出率 3.5 1 % ,PreS1和HBeAg阳性率差异非常显著 (P<0 .0 0 1 ) ;HBV低水平和高水平复制标本PreS1和HBeAg检出率无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;HBVDNA阳性标本中 ,对于PreS1和HBeAg而言 ,PreS1单独阳性者HBVDNA对数值为 6 .6 5 4± 2 .2 0 3(x±s) ,HBeAg单独阳性者为 6 .892± 1 .5 79,同时阳性者 6 .70 6± 1 .6 4 3,均阴者为6 .32 1± 1 .76 3,四组间无显著性差异。结论 血清PreS1和HBeAg与HBVDNA关系密切 ,可作为HBV复制的标志物 ,尤其二者联合检测效果更好 ,但以HBeAg特异性较高。

孕妇血清HBV DNA定量检测的临床意义

目的:探讨HBV DNA定量检测在乙型肝炎病毒宫内感染监测中的临床意义。方法:将134例HBsAg(+)孕妇及其所生婴儿作为研究对象,按孕妇HBsAg定性结果分为阳性组和阴性组。孕妇产时取血;新生儿出生2小时内取血,并注射高效价乙肝免疫球蛋白(HBIG)及乙肝疫苗,于7、12月龄时再分别取血留检。采用英国罗氏公司生产的Light Cycler Quantification直接进行ABV DNA定量测定,同时与HBsAg和HBV DNA定性检测结果比较。结果:HBsAg阴性组中依然有17.0％的病例HBV DNA定性阳性,且HBV DNA定量均值与阳性组比较无统计学差异(P>0.05);新生儿血清HBV DNA阳性病例的母亲血清HBV DNA定量均值明显高于阴性病例(P<0.01);HBVDNA阳性的新生儿母婴阻断成功率明显降低(P<0.01)。结论:用分子生物学技术证明孕期HBV DNA定量检测是监测HBV宫内感染程度的可靠方法。

不同慢性肝病患者血清HBV DNA定量检测及临床意义

乙型肝炎病毒(HBV)持续感染与肝细胞癌的发生存在密切联系已被证实,近年来国内外学者已注意到肝细胞内HBV DNA水平与肝癌发生的关系,观察到血清HBeAg阴性患者有高滴度的HBV DNA,且部分血清HBeAg阴转与慢性肝炎恶化、重型肝炎发生和慢性肝炎癌变密切相关[1,2].为探讨不同慢性肝病患者血清HBV DNA水平与肝脏病变程度关系,应用定量PCR法检测164例单纯感染HBV的慢性乙型肝炎、肝硬化、肝癌患者血清HBV DNA水平,应用ELISA法检测52例肝癌患者血清HBV M并进行分析.

微流芯片定量检测血清HBV DNA

目的 选择一种能进行HBVDNA准确定量的检测方法。方法 比较内对照竞争PCR -微流芯片分析法与内对照竞争PCR -微孔板杂交法及PCR -微孔板杂交法在血清HBVDNA检测上的优劣。结果 微流芯片分析的线性范围高于两种微孔板杂交 ,前者标本稀释试验线性相关较好 ,后者则存在滞现象。结论 内对照竞争PCR

定量聚合酶链反应检测327例肝病患者血清HBV DNA及其临床意义

乙型肝炎的诊断既往主要依赖于血清学指标(乙肝3对)和HBV DNA斑点检测。随着聚合酶链反应(PCR)日趋成熟,HBV DNA目前被认为是检测乙型肝炎病毒的最敏感、最直接的指标。定量PCR使PCR技术更趋于敏感稳定,国外已有此方面报道。我们应用定量PCR技术检测各种肝炎及肝癌患者血清HBV DNA含量。