口腔鳞癌患者血清可溶性MHC-I类链相关蛋白A的检测及其临床病理意义

目的：探讨口腔鳞癌患者血清中可溶性MHC-I类链相关蛋白A（soluble major histocompatibility complex classI-related chain A,sMICA）的表达水平及其临床意义。方法：选用口腔鳞癌患者78例作为实验组,19例健康成年人作为正常对照组,应用酶联免疫吸附定量分析法检测实验组和正常对照组血清中sMICA的含量。结果：实验组血清sMICA检出率为98.7%（77/78）,其含量的95%可信区间为74.30~93.95 pg/mL,中位数为82.17 pg/mL;对照组血清sMICA检出率为94.7%（18/19）,其含量的95%可信区间为29.48~50.30 pg/mL,中位数为37.54 pg/mL,实验组血清sMICA含量显著高于对照组（P〈0.01）。实验组血清sMICA含量在不同肿瘤大小、临床分期及颈部淋巴结是否转移与正常对照组比较,差异具有统计学意义（P〈0.05）;而不同性别、年龄及肿瘤分化程度两组间比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：口腔鳞癌患者血清sMICA表达水平增高,且与肿瘤大小、临床分期及颈部淋巴结转移相关,检测血清sMICA的含量有助于判断口腔鳞癌患者的免疫功能状态。

肾癌患者血清中可溶性人类主要组织相容性复合体Ⅰ类链相关基因A蛋白的表达和临床意义

目的探讨血清中可溶性人类主要组织相容性复合体Ⅰ类链相关基因A蛋白(sMICA)检测对肾癌患者的临床诊断价值。方法应用酶联免疫吸附试验测定40例肾癌患者(肾癌组)手术前后和40名健康者(对照组)的血清sMICA水平,并对血清sMICA水平与临床特征的关系进行分析。结果肾癌组术前的血清sMICA水平为(366.15±27.89)pg/mL,显著高于对照组的(214.03±22.15)pg/mL(P<0.01)。肾癌组术后的血清sMICA水平为(229.18±45.54)pg/mL,显著低于术前水平(P<0.01),与对照组的差异无统计学意义(P>0.05)。肿瘤TNM分期中Ⅲ期和Ⅳ期肾癌患者的血清sMICA水平为(443.79±27.21)pg/mL,显著高于Ⅰ期和Ⅱ期患者的(310.68±40.93)pg/mL(P<0.05),而男性与女性患者间、<65岁与≥65岁患者间血清sMlCA水平的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。结论血清sMICA水平可作为肾癌的一个辅助诊断指标,且其与肾癌患者的免疫功能状态和临床分期有一定的关系。

血清sMICA、PCNA、GASP-1、TIMP-1在非小细胞肺癌患者中的表达及相关性分析

目的探讨血清可溶性MHC-I类链相关蛋白A(sMICA)、增殖细胞核抗原(PCNA)、G蛋白偶联受体相关分选蛋白1(GASP-1)、组织金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者中的表达及与病理分型的相关性。方法2020年7月至2022年8月诊治的86例NSCLC患者作为研究对象,并设立为观察组,同期选取43例健康体检者设立为对照组;并根据不同病理分型将观察组分为腺癌组(n=33)和鳞癌组(n=53),对比血清sMICA、PCNA、GASP-1、TIMP-1;并采用Logistic回归模型分析sMICA、PCNA、GASP-1、TIMP-1对非小细胞肺癌的影响;采用ROC曲线模型分析sMICA、PCNA、GASP-1、TIMP-1诊断非小细胞肺癌的AUC、敏感度及特异度。结果观察组的sMICA、PCNA、GASP-1、TIMP-1均高于对照组(P<0.05)。腺癌组的sMICA、PCNA、GASP-1、TIMP-1均高于鳞癌组(P<0.05)。二元Logistic回归模型分析显示,sMICA、PCNA、GASP-1、TIMP-1高表达会对非小细胞肺癌的发生产生影响(P<0.05)。ROC曲线分析显示,sMICA、PCNA、GASP-1、TIMP-1及四项联合诊断NSCLC的AUC值分别为(0.750、0.654、0.819、0.788、0.843,P均<0.05),敏感度分别为57.00%、46.50%、67.40%、90.70%、79.10%;特异度分别为93.00%、93.00%、88.40%、58.10%、86.00%。结论sMICA、PCNA、GASP-1、TIMP-1在NSCLC患者中呈高表达趋势,其表达水平会随病理分型而升高。

血清Ⅰ类MHC链相关蛋白A、C-反应蛋白、α1-酸性糖蛋白对恶性妇科肿瘤诊断的临床检测

随着分子生物学的进展,当前血清Ⅰ类MHC链相关蛋白A、C-反应蛋白、α1-酸性糖蛋白是用于妇科肿瘤诊断的可行方法。本研究将构建受试者工作特征ROC曲线模型,综合评价血清Ⅰ类MHC链相关蛋白A(MICA)、C-反应蛋白(CRP)、α1-酸性糖蛋白(α1-AG)三种方法诊断恶性妇科肿瘤的效果并进行对比分析,以期为我国恶性妇科肿瘤寻找最佳的实验诊断方法。通过平均值的显著性t检验,可以看出在1%的显著性水平下,恶性妇科肿瘤患者的MICA、CRP、α1-AG指标均显著大于对照组的数值。经过ROC分析,MICA监测AR灵敏度、特异度和AUROC为97.8%、76.2%、0.810;CRP为97.8%、57.1%、0.918;α1-AG为93.5%、95.2%、0.835。ROC曲线下面积反映诊断试验的准确性,实验结果提示AUROC:CRP>α1-AG>MICA。可以认为,相比于其他两种监测方法,CRP的诊断准确性最好,更有助于指导临床的恶性妇科肿瘤的诊断。

外源性抗原对内皮细胞MHC-I类链相关基因A表达的影响(英文)

背景:研究表明部分肾移植受者在移植前就产生了MHC-I类链相关基因A(MICA)抗体,包括部分自身抗体,其急性排斥反应发生率明显高于抗体阴性者。目的:探讨外源性抗原对内皮细胞MICA表达的影响。方法:分别以5,10和25μg/L3个剂量,将MICA重组蛋白分为M5,M10,M25组,将热休克蛋白分为H5,H10,H25组,对人脐静脉内皮细胞予以诱导培养48h,对照组加入等量的磷酸盐缓冲液。结果与结论:用MICA重组蛋白诱导48h后,各实验组(M5,M10,M25)内皮细胞MICA mRNA和MICA蛋白的表达量与对照组比较均有显著增加(P<0.05)。M5组和M10组MICA mRNA和MICA蛋白均高于M25组(P<0.05)。MICA膜蛋白表达以M10组最高,并与M5组、M25组之间差异有显著性意义(P<0.05)。各实验组(M5,M10,M25)可溶性MICA水平较对照组显著下降(P<0.05)。热休克蛋白组内皮细胞MICA基因的表达和可溶性MICA水平均无明显改变。结果表明外源性MICA抗原能够诱导内皮细胞自身MICA mRNA和蛋白表达上调,尤其是细胞膜蛋白增加明显,但可溶性MICA水平显著下降。

基质金属蛋白酶-9对骨肉瘤细胞可溶性MICA蛋白形成的影响

目的:探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)对骨肉瘤细胞可溶性MICA(s MICA)蛋白形成的影响,为骨肉瘤免疫治疗提供新靶点。方法:脂质体法转染MMP-9反义寡核苷酸到骨肉瘤细胞U2OS,应用RT-PCR、明胶酶谱法和ELISA检测转染寡核苷酸后U2OS细胞MMP-9 m RNA表达,以及培养上清液中MMP-9的酶活性和s MICA蛋白浓度变化。结果:U2OS细胞转染MMP-9反义寡核苷酸后,MMP-9 m RNA表达及酶活性受到抑制;培养上清液中s MICA蛋白浓度下降(P=0.011)。结论:MMP-9可能参与骨肉瘤细胞s MICA蛋白形成,MMP-9可作为骨肉瘤免疫治疗的侯选靶点。

非小细胞肺癌血清sMICA、microRNA-99a、DJ-1表达及临床意义

目的 分析血清可溶性MHCⅠ类链相关分子A(sMICA)、microRNA-99a、DJ-1蛋白(DJ-1)对非小细胞肺癌(NSCLC)诊断及预后评估价值。方法 收集2019年6月至2022年6月本院收治的NSCLC患者90例(NSCLC组),另选取本院同期健康体检志愿者90例(对照组)。对患者进行为期6个月随访,随访截止至2023年1月。采用ROC曲线评估sMICA、microRNA-99a、DJ-1对NSCLC诊断价值。采用多元Logistic回归分析影响NSCLC患者预后的关系。结果 NSCLC组sMIC、DJ-1表达水平高于对照组,microRNA-99a表达水平低于对照组(P<0.05);ROC曲线结果显示:sMICA、microRNA-99a、DJ-1对NSCLC诊断AUC值分别为0.742(95%CI:0.642~0.842)、0.759(95%CI:0.660~0.859)、0.789(95%CI:0.698~0.901)。90例患者中预后良好69例,预后不良21例。预后不良者sMIC、DJ-1表达水平高于预后良好组,microRNA-99a表达水平低于预后良好组(P<0.05);预后不良者TNM分期(III-IV期)、低分化占比高于预后良好组(P<0.05);两组在年龄、性别、肿瘤直径、病理类型中比较差异无统计学意义(P>0.05)。经多元Logistic回归分析:临床分期、分化程度、sMICA、microRNA-99a、DJ-1为影响NSCLC患者预后不良的危险因素(P<0.05)。结论 相对健康人群,NSCLC患者sMICA、DJ-1水平高,microRNA-99a水平低;三指标水平与患者预后密切相关,通过检测血清三者水平可为患者后续诊疗、预后评估提供参考资料。

青海高原地区胃癌患者MICA基因在mRNA及其蛋白水平表达

目的:研究青海高原地区胃癌组织中MICA基因在mRNA水平与其蛋白表达及相关关系.方法:采用RT-PCR技术检测41例高原地区胃癌组织和相应的癌旁粘膜组织中MICAmRNA表达,采用免疫组化SP法检测MICA蛋白在胃癌和癌旁组织中的表达,Spearman相关关系检验分析它们之间的相关性.结果:青海高原地区胃癌组织MICAmRNA的表达水平高于癌旁组织(P<0.05).胃癌组织MICA蛋白表达在癌旁组织中为(26.9%,11/41)与胃癌组织阳性率为87.8%(36/41),高分化组(75.0%,6/8),中分化组(83.3%,10/12),低分化组(95.2%,20/21),之间差异有统计学意义(P<0.05),而与肿瘤发生的性别、年龄、淋巴结转移无关(P>0.05).Spearman相关分析显示,MICA蛋白表达水平与mRNA的表达水平呈正相关(P<0.01).结论:MICA的过度表达在青海高原地区胃癌的发生发展过程中起着重要作用,胃癌组织中MICAmRNA以及蛋白水平的升高之间存在密切正相关.

血清CA125、HE4、SMRP联合检测对卵巢癌的诊断价值研究

目的评估糖链抗原125（CA125）、人附睾蛋白4（HE4）、可溶性间皮素相关肽（SMRP）联合检测在卵巢癌早期诊断中的价值及卵巢癌的高风险因素。方法选择43例卵巢恶性肿瘤患者作为恶性组,54例卵巢良性肿瘤患者作为良性组,45例健康妇女作为对照组。采用Roche Cobas 6000全自动电化学发光免疫分析仪,酶联免疫吸附测定（ELISA）检测血清CA125、HE4、SMRP水平,并对卵巢癌高风险因素进行Logistic回归分析。结果恶性组患者血清CA125、HE4及SMRP水平显著高于良性组及对照组（P〈0.01）。CA125、HE4及SMRP单独检测诊断卵巢恶性肿瘤的敏感性分别为73.3%、82.8%及70.8%,特异性分别为79.1%、87.4%及83.3%。CA125与HE4、SMRP三者联合诊断卵巢恶性肿瘤的敏感性为90.2%,特异性为79.3%。Logistic回归分析发现,初潮年龄小于13岁、月经周期小于30d、月经不规则为卵巢恶性肿瘤高危因素,其比值比（OR）分别为2.11[95%可信区间（CI）：1.09~4.10]、1.91（95%CI：1.21~3.10）、1.57（95%CI：0.83~2.94）。结论 CA125联合HE4或SMRP检测可明显提高诊断卵巢癌的敏感性。

非小细胞肺癌患者血清DJ-1、sMICA水平与临床病理特征及预后的关系研究

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清DJ-1蛋白(DJ-1)、可溶性MHC-I类链相关蛋白A(sMICA)水平与临床病理特征及预后的关系。方法选取2015年1月-2017年1月沧州市中心医院收治的77例NSCLC患者为NSCLC组,同期选取该院50例体检健康者为对照组。采用酶链免疫吸附试验检测血清DJ-1、sMICA水平,分析血清DJ-1、sMICA水平与NSCLC患者临床病理特征的关系。绘制Kaplan-Meier生存曲线分析血清DJ-1、sMICA水平与NSCLC患者生存预后的关系,以随访期间肿瘤复发、转移、死亡为预后不良,分析NSCLC患者预后不良的影响因素。结果NSCLC组患者血清DJ-1、sMICA水平高于对照组(P<0.05)。低中度分化、淋巴转移、远处转移患者血清DJ-1水平高于高度分化、无淋巴转移、无远处转移患者(P<0.05)。TNM分期Ⅲ和Ⅳ期、低中度分化、淋巴转移患者血清sMICA水平高于TNM分期Ⅰ和Ⅱ期、高度分化、无淋巴转移患者(P<0.05)。高DJ-1水平或高sMICA水平的NSCLC患者无疾病进展生存率和整体生存率低于低DJ-1水平或低sMICA水平的NSCLC患者(P<0.05)。多因素Cox回归分析结果显示:淋巴结转移[RR=1.697(95%CI:1.421,1.953)]、分化程度[RR=1.344(95%CI:1.194,1.648)]、DJ-1水平[RR=1.831(95%CI:1.652,2.354)]及sMICA水平[RR=2.164(95%CI:2.012,3.956)]是NSCLC患者预后不良的影响因素(P<0.05)。结论NSCLC患者血清DJ-1、sMICA水平均升高,高水平DJ-1、sMICA与NSCLC患者侵袭、转移及不良预后有关。DJ-1、sMICA可以作为辅助评估NSCLC患者预后的血清生物学指标。

NK细胞对不同人肝癌细胞株的杀伤作用

目的:观察自然杀伤(NK)细胞对不同肝癌细胞株的体内外抑瘤作用,并检测肝癌细胞MHC-I类链相关蛋白(MIC蛋白)的表达。方法:抽取志愿者外周血50 mL,分离单个核细胞,置入NK细胞试剂盒行孵化及逐级扩增。计算NK细胞对人白血病细胞株K562及人肝癌细胞株BEL7402、HepG2、SMMC7721的杀伤率。接种建立人肝癌细胞株裸鼠移植瘤,进行NK细胞瘤内及瘤周注射;计算各组裸鼠移植瘤的体积,绘制各组肿瘤生长曲线;处死裸鼠,称瘤重,计算NK细胞对各组肿瘤抑制率。检测人肝癌细胞表面MIC蛋白表达。结果:NK细胞对K562细胞杀伤最强,BEL-7402次之,SMMC-7721细胞株杀伤敏感性最低。裸鼠抑瘤实验结果显示NK细胞对于BEL-7402细胞株的抑瘤效果最好,而对于SMMC-7721细胞株的抑瘤效果较差。BEL-7402及HepG2细胞株表面表达MIC,而SMMC-7721则很少表达。结论:NK细胞对于不同人肝癌细胞株体内外抑瘤作用不同,其差异可能和不同肝癌细胞株MIC的表达有关。

结直肠癌患者围手术期NK细胞受体CD69、NKG2D及其配体MICA/B的表达

目的研究结直肠癌(CRC)逃避抗肿瘤免疫监视的机制以及手术对NK细胞免疫功能的影响。方法流式细胞术检测外周血NK细胞受体CD69、NKG2D的阳性细胞百分数,组织MICA/B的阳性细胞百分数。ELISA检测血清sMICA的浓度。结果 CRC患者术前CD69、NKG2D的阳性细胞百分数均低于对照组,sMICA浓度值高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01);CRC患者术后CD69的阳性细胞百分数显著高于术前和对照组,术后NKG2D的阳性细胞百分数显著低于对照组,sMICA浓度值显著高于对照,差异均有统计学意义(P<0.01);术后NKG2D的阳性细胞百分数、sMICA浓度值与术前比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。而CRC组MICA/B的阳性细胞百分数明显低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 CRC患者血清高水平的sMICA,抑制了NKG2D-MIC介导的抗肿瘤免疫,导致其NK细胞抗肿瘤免疫低下。手术去瘤可以提高CRC患者NK细胞CD69的表达,但NKG2D低表达、sMICA高浓度的情况术后短期内不能迅速逆转。

敲低TFAM通过上调ROS/ADAM17促进可溶型MICA生成抑制NK细胞杀伤人肝癌细胞的作用

目的探索线粒体转录因子A(TFAM)表达下调促进肝癌细胞逃避自然杀伤(NK)细胞的作用及机制。方法免疫组织化学染色法检测肝癌及癌旁组织中TFAM的表达,分析肝癌组织中TFAM表达水平与肝癌患者临床参数及预后的相关性。利用慢病毒载体构建TFAM稳定干涉及过表达的肝癌细胞株,与NKL细胞共培养,ELISA检测培养上清中可溶性MHCⅠ类链相关分子A(sMICA)水平及NK细胞活化相关细胞因子的变化;流式细胞术检测肝癌细胞膜MICA的水平;乳酸脱氢酶(LDH)释放试验检测共培养的NKL细胞杀伤活性。调控共培养上清中sMICA的含量后,ELISA及LDH试验检测细胞因子及NKL细胞杀伤功能是否受到影响。调控TFAM干涉或过表达肝癌细胞内的活性氧(ROS)水平和解整合素金属蛋白酶17(ADAM17)表达,ELISA检测sMICA变化。结果与癌旁组织相比,TFAM在肝癌组织中显著低表达,且TFAM低表达肝癌患者其总生存期和无病生存期均显著低于TFAM高表达肝癌患者。敲低肝癌细胞TFAM后,细胞膜型MICA水平显著降低,而培养上清中的sMICA显著增加,细胞内ROS水平及ADAM17的表达均显著增强;肝癌细胞过表达TFAM后则相反。将TFAM稳定干涉的肝癌细胞与NKL细胞共培养后可显著降低NKL细胞活化细胞因子的分泌及杀伤功能,反之,与TFAM过表达的肝癌细胞与NKL细胞共培养后其活化相关细胞因子的表达及杀伤功能均显著增强。在肝癌细胞与NKL细胞共培养上清中加入MICA中和抗体,可显著恢复肝癌细胞TFAM干涉所导致的NKL细胞活性抑制及杀伤功能减弱;在共培养上清中加入重组MICA后,TFAM过表达所致的NK细胞活化及杀伤功能增强被显著抑制。敲低TFAM引起sMICA生成增加,但中和ROS或者敲低ADAM17后,可显著抑制sMICA生成;TFAM过表达导致sMICA生成减少,加入过氧化氢(H2O2)或者过表达ADAM17后,可显著增加sMICA生成。结论敲低TFAM上调ROS/ADAM17通路促进sMICA生成,抑制NK细胞的杀伤力。

结肠直肠癌患者围手术期NK细胞活化性受体NKG2D与其配体MICA/B的表达

目的观察结肠直肠癌(CRC)患者手术前后自然杀伤细胞(NK细胞)活化性受体NKG2D与其配体MICA/B的表达,探讨NKG2D-MIC系统与肿瘤逃避免疫监视的关系。方法流式细胞术检测45例CRC患者和35例健康体检者(对照组)外周血NK细胞活化性受体NKG2D的表达,组织MICA/B的表达;ELISA检测血清MICA(sMICA)的浓度。结果 CRC组术前NKG2D、MICA/B的表达均降低,sMICA浓度增高,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。术后NKG2D的表达无显著增高,sMICA浓度无显著降低,与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 CRC患者血清高水平的sMICA,抑制了NKG2D-MIC介导的抗肿瘤免疫,导致CRC患者NK细胞抗肿瘤免疫低下。NKG2D低表达,sMICA高浓度的情况术后短期内不能迅速逆转。

射波刀联合替吉奥治疗原发性肝癌疗效观察

目的:观察射波刀联合替吉奥治疗原发性肝癌(PHC)的临床疗效。方法:选取我院74例PHC患者,按照治疗方法分组,各37例。对照组行射波刀治疗,观察组在对照组基础上予以替吉奥治疗。对比两组临床疗效、治疗前、治疗3个周期后血清可溶性人类MHC-Ⅰ类分子链相关基因A蛋白(sMICA)、组织多肽特异性抗原(TPS)水平、毒副反应发生情况、无进展生存期、2年生存率。结果:观察组客观有效率81.08%(30/37)高于对照组59.46%(22/37)(P<0.05);治疗3个周期后两组血清sMICA、TPS水平均低于治疗前,观察组低于对照组(P<0.05);观察组无进展中位生存期为10.8个月长于对照组的7.4个月,观察组2年生存率71.43%(25/35)高于对照组38.24%(13/34)(P<0.05);两组骨髓抑制、消化道反应、发热发生率对比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:射波刀联合替吉奥治疗PHC患者,可提高治疗效果,降低血清sMICA、TPS水平,抑制肿瘤细胞增殖,从而延长患者生存时间,且毒副反应较轻。

替吉奥治疗中晚期非小细胞肺癌临床疗效对TPS及sMICA指标的影响

目的 :探讨替吉奥对中晚期非小细胞肺癌患者1~3年生存率及组织多肽特异性抗原(TPS)、可溶性人类MHC-I类分子链相关基因A蛋白(sMICA)指标的影响。方法:选择我院2016年5月-2017年6月收治的40例中晚期非小细胞肺癌患者为研究对象,按随机数字表法分为观察组和对照组,各20例。对照组给予抗肿瘤及常规支持治疗(艾迪注射液50~70 mL加入250 mL氯化钠注射液静脉滴注,qd),观察组在抗肿瘤及常规支持治疗基础上采用替吉奥(40 mg,bid)化疗,比较两组疗效及预后情况。结果 :观察组治疗总有效率为85.0%,高于对照组的50.0%,差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗后TPS和sMICA水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组不良反应发生率无统计学差异(P>0.05)。观察组3年生存率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 :替吉奥药物化疗能降低TPS及a MICA水平,提高中晚期非小细胞肺癌患者临床疗效与生存率,且不良反应轻微,值得推广。

放射治疗对肺癌患者IL-18、sMICA及NK细胞的影响

为探讨肺癌患者放射治疗(简称放疗)前及放疗不同阶段NK细胞存活率及IL-18、可溶性MHC-Ⅰ类链相关蛋白A(soluble MHC class Ⅰ-related chain A, sMICA)浓度变化,对肿瘤科收治的30例肺癌放疗患者,通过ELISA检测IL-18、sMICA浓度,应用磁珠分选检测NK细胞存活率。结果显示,sMICA浓度在放疗前最低,而在放疗后,随着放疗剂量的增加逐渐降低(P < 0.05);IL-18浓度随着放疗剂量的增加并无明显变化,且与放疗前无显著差异(P > 0.05);NK细胞活性在放疗后与放疗前无显著差异,且不随剂量增加而明显变化(P > 0.05)。由此,放疗对肺癌患者外周血中NK细胞的存活率和IL-18浓度无明显影响;放疗可降低患者外周血中肿瘤抗原sMICA浓度,表明肿瘤免疫逃逸功能被抑制,放疗可间接增强机体的免疫功能。