坎地沙坦对糖尿病肾病小鼠血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1表达的影响及意义

目的研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)Ⅰ型受体(AT1)拮抗剂坎地沙坦(candesartan)对糖尿病肾病(D iabetic nephrop-athy,DN)小鼠血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1(SGK1)表达的影响及意义。方法采用链脲佐菌素(STZ)单次腹腔注射诱导小鼠糖尿病肾病(DN)模型。将正常C57BL/6小鼠随机分成3组,每组12只:正常对照组(N组)、糖尿病肾病组(D组)、Candesartan治疗组(DC组)。治疗8 wk后取肾组织,观察肾脏病理改变;半定量RT-PCR法检测各组肾皮质SGK1及结缔组织生长因子(CTGF)mRNA的表达;W estern b lot检测各组肾皮质中SGK1及CTGF蛋白的表达。结果与N组相比,D组小鼠肾重/体重、24 h尿蛋白量,肾小球滤过率均明显增加;肾皮质中SGK1、CTGF mRNA及蛋白质的表达均明显升高。经Candesartan干预后(DC组),相应生化指标较D组有明显改善,SGK1、CTGF的表达水平较D组亦有明显下调。纤维化指标CTGF的表达与SGK1呈正相关。结论Candesartan可以延缓糖尿病肾病的肾脏纤维化过程,它对细胞内SGK1信号转导途径的抑制作用可能是其抗纤维化作用的主要环节,该作用与AngⅡ-AT1途径被阻断有关。

血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1在梗阻性肾病肾小球中的表达及姜黄素对其的影响

目的:探索在单侧输尿管梗阻(UUO)性肾病变进程中,血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1(SGK1)在肾小球中的表达变化及姜黄素对其的影响。方法:采用右侧输尿管接扎术诱导大鼠UUO模型,将54只大鼠随机分为假手术组、模型组、姜黄素组3组,每组18只。术后第3、7及14 d分别随机处死各组中的6只大鼠,检测血尿素氮(BUN)、血清肌酐(SCr)。应用免疫组化技术检测肾小球中SGK1蛋白的表达。结果:模型组大鼠肾小球中的SGK1蛋白的表达第3 d开始上调,第7 d和14 d继续升高。与模型组相比,姜黄素组BUN、SCr的改变不明显,但肾小球中的SGK1蛋白表达均显著下降。结论:随UUO肾病变发展,肾小球中SGK1持续高表达,进一步提示SGK1在梗阻性肾病的肾小球纤维化病变进程中起重要作用。姜黄素能抑制肾小球中SGK1的表达,从而抑制肾小球的纤维化。

川崎病患者CD4^+T细胞中血清和糖皮质激素诱导的激酶1(SGK1)表达上调且与RORC及IL-17A正相关

目的检测血清和糖皮质激素诱导的激酶1(SGK1)在川崎病(KD)患者CD4^+T细胞中的表达,探讨SGK1与维甲酸相关孤儿核受体C(RORC)及白细胞介素17A的相关性。方法收集KD患者30例,正常同年龄对照30例,同年龄感染性疾病(ID)患者25例。利用流式细胞术检测Th17细胞占CD4^+T细胞的比例;实时定量PCR检测CD4^+T细胞中SGK1和RORC mRNA的表达;ELISA检测血清IL-17A和IL-6水平。结果与健康儿童和ID患者相比,KD患者中Th17细胞比例明显升高。与ID患者和健康儿童相比,KD患者血清中IL-17A和IL-6水平明显升高,SGK1和RORC mRNA水平升高。SGK1在KD冠状动脉损害(CAL)组的表达高于冠状动脉正常(CAN)组。静脉内注射免疫球蛋白(IVIG)治疗后,SGK1的表达明显下降;其中,CAL组下降高于CAN组。KD患者中,SGK1 mRNA的表达与RORC及血清IL-17A水平呈正相关,而与血清IL-6水平不相关。结论 KD患者CD4^+T细胞中SGK1 mRNA表达升高,与RORC和IL-17A正相关。

血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1在糖尿病小鼠肾皮质中的表达变化

目的探索在糖尿病(diabetes mellitus,DM)肾脏病变进程中,血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1(serumand glucocorticoid-inducible kinase 1,SGK1)在肾皮质中的表达变化。方法采用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)单次腹腔注射诱导小鼠DM模型,设DM组和正常对照(normal control,NC)组,在DM模型1、3、4、6和12周时,检测肾重指数、血糖和糖化血红蛋白(HbA1c),RT-PCR方法检测肾皮质SGK1 mRNA的表达,Western blot法检测肾皮质SGK1蛋白的表达,同时应用免疫组织化学技术检测肾皮质中肾小球的SGK1蛋白的表达。结果与NC组相比,从第1周末起到第12周末DM组小鼠肾重指数、血糖和HbA1c均显著增加;第1周末肾皮质SGK1 mRNA和蛋白以及肾小球中SGK1蛋白的表达即开始上调,到第4周末肾皮质SGK1 mRNA和蛋白表达达到顶峰,第6周至第12周仍有较高表达。结论随DM肾脏病变发展,肾皮质及肾小球中SGK1持续高表达,进一步提示它在DM肾脏病变进程中起重要作用。

血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1在高血压肾损害大鼠模型中的表达

目的探讨血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1（SGK1）在高血压肾损害大鼠模型中的表达及其意义。方法采用NG-硝基-L-精氨酸甲酯（L-NAME）诱导大鼠高血压模型，观察肾脏组织病理学改变；检测尿微量白蛋白（mAlb）、β2微球蛋白（β2-MG）和血肌酐（SCr）浓度；实时PCR法检测肾皮质sGK1 mRNA的表达；Western blot法检测肾皮质SGK1蛋白的表达。结果8周时高血压组大鼠肾脏组织可见小动脉中膜增厚，管腔缩小，肾小球和肾小管缺血样改变，伴有问质基质增生和炎症细胞浸润。尿mALB和β2-MG显著增加，SCr改变不明显。肾皮质SGK1 mRNA和蛋白表达显著上调，与对照组比较有统计学差异（P〈0．01）。结论高血压组大鼠肾皮质SGK1基因表达明显增加，提示SGK1可能在高血压肾损害的发病机制中发挥了重要作用。

血清-糖皮质激素诱导激酶1基因对少突胶质细胞分化的影响

目的:探讨血清-糖皮质激素诱导激酶1(SGK1)对少突胶质细胞分化的影响.方法:利用免疫荧光染色检测糖皮质激素对体外培养少突胶质前体细胞(OPCs)分化的影响;原位杂交检测SGK1在少突胶质细胞中的表达情况;通过构建SGK1真核表达载体和鸡胚神经管电穿孔转化,研究SGK1过表达对少突胶质细胞发生发展的影响.结果:在体外,SGK1的激活物氢化可的松能促进OPCs分化;抑制物GSK650394则会阻断OPCs分化,鸡胚神经管过表达SGK1会促进少突胶质细胞转录因子2和Sox10的提前表达.结论:SGK1能促进少突胶质前体细胞的发生及分化.

血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶-1和缺氧在子痫前期发病作用的研究

目的:研究血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶-1(serum and glucocorticoids-inducible kinase-1,SGK1)在子痫前期胎盘组织中的分布和表达,以及缺氧对胎盘滋养细胞SGK1表达的影响。方法:选择2012年12月至2013年11月在重庆医科大学附属第二医院剖宫产分娩的50例子痫前期孕妇为研究对象,其中子痫前期轻度组25例,子痫前期重度组25例,以同期行择期性剖宫产术的25例正常孕妇为对照组。免疫组化检测SGK1在胎盘组织的分布及表达,Western blot检测SGK1在胎盘组织蛋白水平的表达。在常氧条件下(21%O2、5%CO2)和缺氧条件下(1%O2、5%CO2)培养HTR-8/SVneo滋养层细胞,Western blot检测SGK1蛋白的表达。结果:免疫组化结果表明子痫前期轻度组、重度组SGK1的蛋白表达量均较对照组明显增加(P=0.000),子痫前期重度组SGK1的蛋白表达量较子痫前期轻度组明显增加(P=0.028)。Western blot结果表明子痫前期轻度组、重度组SGK1的蛋白表达量均较对照组明显增加(P=0.000),子痫前期重度组SGK1的蛋白表达量较子痫前期轻度组明显增加(P=0.000)。Masson染色结果显示子痫前期轻度组、重度组的纤维化率均较对照组明显增加(P=0.000),子痫前期重度组纤维化率较子痫前期轻度组明显增加(P=0.000)。细胞实验部分:Western blot结果表明缺氧组SGK1的蛋白表达量较常氧组明显增加(P=0.000);缺氧组CTGF的蛋白表达量较常氧组明显增加(P=0.001)。Masson染色结果显示缺氧组纤维化率较常氧组明显增加(P=0.000)。结论:SGK1在子痫前期胎盘组织表达明显升高,提示SGK1可能在子痫前期的发病中发挥重要作用,缺氧通过刺激SGK1表达升高,参与子痫前期的发生。

血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶-1与流产相关情况的研究进展

血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶-1(SGK1)是一种丝氨酸苏氨酸蛋白激酶,在哺乳动物几乎所有的组织中均能检测到。SGK1参与Na离子转运、T细胞活化、炎症抑制、脂肪细胞分化等多种临床生理和病理过程,并在其中起重要作用,并且参与胚胎种植和妊娠维持的生理过程,与不孕、流产等疾病密切相关。本文就SGK1与流产相关情况的研究进展及其临床意义予以综述。

血清和糖皮质激素诱导激酶1 rs9402571和rs72550326与复发性流产的关系

目的探讨血清和糖皮质激素诱导激酶1(SGK1)rs9402571和rs72550326与复发性流产之间的关系。方法采用病例对照研究方法,收集40例自然流产患者(自然流产组)及24例复发性流产患者(复发性流产组)抗凝血,另收集同期40例人工流产患者为对照组,利用3730XL测序仪测序研究SGK1 rs9402571和rs72550326基因多态性。结果 SGK1-rs9402571基因型:对照组为GT和TT,而自然流产组和复发性流产组均以GT为主,其次是TT和GG。3组基因型和等位基因频率分布比较差异有统计学意义(P<0.05)。SGK1-rs72550326基因型:对照组为CC和CG,而自然流产组以CC为主,其次是CG,复发性流产组以CC为主,其次是GG。3组基因型分布比较差异有统计学意义(P<0.05),而等位基因频率分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论 SGK1 rs9402571可能与复发性流产有关。

血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1对肿瘤影响的研究进展

血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶(SGK)是一种AGC家族的丝氨酸苏氨酸蛋白激酶,包括SGK1、SGK2、SGK3三个亚型,三者中对SGK1的研究最为深入。它参与离子转运、脂肪细胞分化、免疫细胞活化、炎症等多种生理和病理过程。SGK1在多种肿瘤中过度表达,包括前列腺癌、结直肠癌、胶质母细胞瘤、乳腺癌和宫颈癌等,而在多形性胶质母细胞瘤中低表达。针对SGK1通过不同的信号通路促进肿瘤生长、转移、治疗抵抗性,本文关注SGK1在不同肿瘤中的表达情况以及其对肿瘤细胞增殖、凋亡、侵袭、转移、自噬等影响的最新研究进展并作一综述,旨在探讨新型SGK1抑制剂治疗恶性肿瘤的可行性及临床推广应用前景,以期为不同类型肿瘤的治疗提供创新性策略,从而提高肿瘤的临床疗效。

血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1对大鼠肾动脉平滑肌细胞增殖的作用及机制

目的探讨血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1（SGK1）对大鼠。肾动脉平滑肌细胞增殖的作用及其可能的分子学机制。方法组织块贴壁法原代培养的大鼠平滑肌细胞（VSMCs），将带有SGK1显性激活型突变体质粒（pIRES2-EGFP^-S422D SGK1 mutant SD）转染VSMCs，采用细胞计数，细胞流式技术、MTT比色法分析转染后平滑肌细胞增殖及细胞周期情况，应用Western Blot方法检测SGK1对细胞周期调控蛋白p27^kip1、p21^cip1、和增殖细胞核抗原（PCNA）的作用。结果SGK1能刺激平滑肌细胞增殖，使滞于G0／G1期细胞减少，周期调控蛋白p27^kip1、p21^cip1表达下降，PCNA表达升高。结论SGK1可能通过调节PCNA，p27^kip1和p21^cip1蛋白，参与细胞周期的调控，促进平滑肌细胞增殖。

血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶3在小鼠不同细胞周期1-细胞期受精卵中的表达水平及其亚细胞定位

目的:检测血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶3 (SGK3)在小鼠不同细胞周期1-细胞期受精卵中的表达水平及其亚细胞定位,初步阐明SGK3对哺乳动物受精卵早期发育的调控机制。方法:通过超排卵技术和受精卵体外培养收集小鼠1-细胞期受精卵,分别采用实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)和Western blotting法检测小鼠不同细胞周期1-细胞期受精卵中SGK3 mRNA和蛋白表达水平,采用免疫荧光法观察SGK3在小鼠不同细胞周期1-细胞期受精卵中的亚细胞定位情况。结果:在小鼠不同细胞周期1-细胞期受精卵中均有SGK3 mRNA和蛋白表达;与G_(1)期、S期和M期比较,G_(2)期小鼠1-细胞期受精卵中SGK3 mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.01)。免疫荧光法检测,在G_(1)期和S期SGK3 (红色荧光)定位于小鼠1-细胞期受精卵细胞质,在G_(2)期部分SGK3进入细胞核,在M期SGK3广泛分布于小鼠1-细胞期受精卵中。结论:SGK3在小鼠不同细胞周期1-细胞期受精卵中动态表达,SGK3在受精卵细胞分裂过程中存在核浆穿梭,SGK3的定位改变可能推动小鼠1-细胞期受精卵G_(2)/M转换和有丝分裂进程。

血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶3在乳腺癌分子诊断与治疗中的意义

目的研究血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶(SGK)3过表达对乳腺癌细胞生物学行为的影响及检测SGK3与乳腺癌临床病理特征的关系。方法利用真核表达载体SGK3-pEGFP-N1瞬时转染乳腺癌MDA-MB-231细胞,细胞划痕实验和流式细胞术检测SGK3过表达对细胞周期、凋亡和迁移的影响;利用组织芯片,通过免疫组化法检测分析SGK3与乳腺癌临床病理特征的相关性。结果 SGK3过表达可促进MDA-MB-231细胞迁移(P<0. 05)、抑制细胞凋亡(P<0. 01),但对细胞周期无明显影响。SGK3在不同TNM分级、同一分级不同淋巴结转移及孕激素受体(PR)+和PR-的浸润性乳腺癌组织中的表达差异均无统计学意义(P>0. 05)。结论尽管SGK3过表达对乳腺癌恶性生物学行为有影响,且其表达与乳腺癌临床病理特征相关,但其在乳腺癌分子诊断与治疗中的意义尚需确定。

血清和糖皮质激素诱导激酶1 rs2811681和rs2758152与自然流产的关系

目的探讨血清和糖皮质激素诱导激酶1(SGK1)rs2811681和rs2758152与自然流产之间的关系。方法选取2013年1~12月我院64例自然流产患者作为病例组,同期40例人工流产患者作为对照组,采用3730XL测序仪检测血清SGK1 rs2811681和rs2758152基因多态性,χ2检验比较病例组与对照组基因型及等位基因频率分布。结果 1 SGK1-rs2811681对照组基因型是AG+GG,而病例组以AG+GG为主,其次是AA,两组基因型分布比较差异有统计学意义(P<0.05);对照组等位基因A和G频率各占50.0%,而病例组A占64.8%,G占35.2%,对照组和病例组等位基因频率比较差异具有统计学意义(P<0.05),2 SGK1-rs2758152对照组基因型GT+TT和GG各占50.0%,而病例组GT+TT占29.7%,GG占70.3%;等位基因频率对照组G占75.0%,T占25.0%,而病例组G占82.0%,T占18.0%。对照组和病例组基因型及等位基因频率比较均无统计学意义(P>0.05)。结论 SGK1 rs2811681与自然流产有关,而SGK1 rs2758152与自然流产无关。

上调糖皮质诱导型蛋白激酶-1能够保护Aβ_(1～42)诱导的细胞凋亡

目的探讨上调糖皮质诱导型蛋白激酶(SGK-1)能否保护Aβ1～42诱导的细胞毒性及其保护机制。方法在HEK293细胞中给予不同浓度Aβ1～42聚集体处理,摸索合适的诱导细胞毒性的浓度。HEK293细胞转染SGK-1质粒24 h后再给予Aβ1～42处理24 h,通过细胞活性分析以及Western印迹实验检测凋亡相关通路变化。结果过表达SGK-1能够明显改善HEK293细胞由Aβ1～42诱导的细胞毒性(P<0.05),SGK-1的上调伴随着JNK-1(P<0.01)和Caspase-3的抑制(P<0.05)。结论上调SGK-1可能通过抑制JNK-1的激活从而抑制Caspase-3的活化来保护细胞,上调SGK-1可以作为治疗阿尔茨海默病(AD)患者Aβ细胞毒性的保护靶点。

血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶3与肿瘤发生发展关系的研究进展

血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶3(SGK3)是属于AGC(PKA/PKG/PKC)激酶家族的一个Ser/Thr双重特异性蛋白激酶。与其他蛋白激酶不同,SGK3不仅局限于磷酸化调节,而且还受细胞内定位调节及快速转录水平的调节,其于磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)信号通路的下游被激活后在真核生物的基因组中快速而广泛地表达,影响细胞内信号传导。正常情况下,SGK3在生物体内稳定地发挥保守性作用,但是在肿瘤中被异常调节,会导致肿瘤细胞迁移和侵袭。SGK3在多种肿瘤中异常表达,依赖PI3K/蛋白激酶B(AKT)信号通路调控肿瘤细胞进程。SGK3的激活可组成一个与Ⅰ类PI3K及AKT无关的通路hVPS34-SGK3,从而导致化疗耐药的发生。现基于国内外对SGK3的研究成果,针对SGK3的结构、作用机制及其对肝癌、乳腺癌、前列腺癌、多形性胶质母细胞瘤、肾癌和鼻咽癌等不同肿瘤发生发展过程的影响进行综述。

血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1在食管癌组织中的表达及临床意义

目的探讨血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1(SGK1)在食管癌组织中的表达及临床意义。方法选择实施食管癌根治术患者60例,术后收集食管癌组织及癌旁组织标本,采用免疫组织化学法检测组织中SGK1的表达。结果 SGK1在食管癌组织中的阳性表达率为65.0%,高于癌旁组织中的36.7%(P<0.05)。SGK1的表达与患者的性别、年龄无关(P>0.05);与肿瘤浸润深度、分化程度、是否淋巴结转移及临床分期等相关(P<0.05,P<0.01)。结论SGK1高表达可能与食管癌的发生发展有关,可作为早期食管癌诊断及预警的重要参考。

血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1在CNS疾病中的作用研究新进展

血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1(SGK1)是1993年在受糖皮质激素刺激的大鼠乳腺癌细胞中发现的一个丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。与多数蛋白激酶不同的是,血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1不仅受翻译后的磷酸化/去磷酸化调节,而且存在转录水平上的快速调节机制。它具有广泛的生理功能,如调节离子通道,介导细胞增殖、分化、存活及凋亡的信号转导等。它与帕金森病、阿尔茨海默病等多种中枢神经系统疾病密切相关,在神经元变性、凋亡过程中起着重要作用。本文将从血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1的结构、生理功能、与中枢神经系统疾病的关系及其抑制剂等方面的新进展作一综述。

血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1介导巨噬细胞在动脉粥样硬化过程中的作用

巨噬细胞募集于血管内皮下清除脂质是早期动脉粥样硬化的重要病理生理过程,目前越来越多的研究认为干预该过程对于缓解动脉粥样硬化进展能起到一定作用。血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1(SGK1)不仅参与调控机体代谢,且在巨噬细胞中大量表达,参与调控其募集与侵袭。SGK1能够激活小GTP蛋白Rho家族(Rho GTP),促进巨噬细胞的侵袭以及吞噬作用;同时参与磷酸肌醇3激酶(PI3K)通路以及核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)途径触发炎症反应,为动脉粥样硬化的炎症学说奠定了坚实的理论基础。深入了解SGK1在单核/巨噬细胞中的调控作用,可能为缓解动脉粥样硬化进展提供新的研究切入点,本文对SGK1介导巨噬细胞在动脉粥样硬化过程中的作用作一综述。

非小细胞肺癌组织中血清和糖皮质激素调节激酶1的表达及其临床意义

目的:探讨非小细胞肺癌患者组织中血清和糖皮质激素调节激酶1(serum and glucocorticoid-induced kinase 1,SGK1)的表达及其临床意义。方法:选取2012年3月至2013年5月入住本院的70例非小细胞肺癌患者,取其肿瘤组织作为实验观察组,以35例患者癌旁的正常肺部组织作为对照组。采用免疫组织化学技术分析SGK1在两种类型组织中的表达情况,分析其表达水平与患者一般资料的相关性,采用Kaplan-Meier法对不同SGK1表达水平患者进行生存分析。结果:SGK1在非小细胞肺癌组织与正常肺部组织中的表达水平差异有统计学意义(P<0.05)。SGK1在非小细胞肺癌患者肿瘤组织中表达水平与患者临床分期和有无淋巴结转移相关(P<0.05),而与其他一般资料无关(P>0.05)。高表达SGK1患者预后显著差于低表达SGK1患者(P<0.05)。结论:SGK1与非小细胞肺癌预后有关,可作为非小细胞肺癌预后预测的重要指标。