几株b型流感嗜血杆菌多糖结合物的免疫原性检定

目的从分子水平检定b型流感嗜血杆菌，研究不同菌株荚膜多糖结合物的免疫原性。方法提取基因组，通过型特异和荚膜型基因特异引物，利用PCR检定b型流感嗜血杆菌；不同纯化多糖分别与破伤风类毒素（TT）进行耦联结合，结合物原液经稀释免疫小鼠，通过两针免疫，采血进行免疫效力测定。结果5株b型流感嗜血杆菌通过PCR法均能获得预期大小的型特异（482bp）和荚膜型（343bp）基因片段，BLAST分析显示，各菌之间型特异和荚膜型序列比对，其同源性均为100％，各菌型特异和荚膜型序列分别与GenBank X78559．1和M19995．1序列比对，同源性分别为99％和100％；ELISA检测显示，4株不同菌株来源的荚膜多糖结合物（PRP-TT）的小鼠免疫效力差异无统计学意义。结论通过PCR法从分子水平检定b型流感嗜血杆菌，纯化的不同荚膜多糖结合物小鼠免疫原性基本一致。可供不同Hib多糖结合物免疫原性的研究参考数据。