可溶性肿瘤坏死因子样凋亡弱诱导因子在斑秃病人血清及皮损中的表达及临床意义

目的检测可溶性肿瘤坏死因子样凋亡弱诱导因子(sTWEAK)在斑秃病人血清及皮损中的表达水平,并探讨其在斑秃发病过程中的作用及临床意义。方法以2017年10月至2018年11月在首都医科大学附属北京友谊医院确诊并治疗的斑秃病人70例为斑秃组,依据病情分为轻症组(44例)、重症组(26例)。同期该院因色素痣或皮肤良性肿瘤进行头皮手术的人群65例作为对照组。比较各组sTWEAK及相关细胞因子白细胞介素(IL)-4、IL-12、γ干扰素(IFN-γ)蛋白及mRNA表达水平;采用Pearson法分析两指标间相关性。多元线性回归分析各指标与sTWEAK或脱发严重度工具(SALT)评分的关系。结果斑秃组血清及皮损中sTWEAK表达水平[(196.73±32.48)ng/L,(2.35±0.62)ng/L]高于对照组[(121.75±19.62)ng/L,(1.49±0.45)ng/L](P<0.05)。斑秃组血清及皮损中细胞因子IL-12、IFN-γ表达水平高于对照组(P<0.05),IL-4表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。斑秃病人血清及皮损中sTWEAK表达水平与IL-12及IFN-γ呈正相关,与IL-4表达水平无明显相关性。轻症组血清及皮损中sTWEAK[(173.25±26.84)ng/L,(2.04±0.57)ng/L]、IL-12及IFN-γ表达水平低于重症组[(236.47±42.02)ng/L,(2.87±0.70)ng/L](P<0.05);轻症组、重症组血清及皮损中IL-4表达水平差异无统计学意义(P>0.05);斑秃病人血清、皮损处sTWEAK、IL-12、IFN-γ与SALT评分均呈正相关(P<0.05)。多元线性回归分析显示,IL-12、IFN-γ与血清和皮损处sTWEAK呈显著正相关;血清及皮损处sTWEAK、IL-12、IFN-γ与SALT评分存在正相关性(P<0.05)。结论斑秃病人血清及皮损中sTWEAK表达水平增加,与IL-12及IFN-γ呈正相关,sTWEAK、IL-12及IFN-γ均与斑秃病情严重程度密切相关,sTWEAK可能参与斑秃炎症反应过程。

丁苯酞对血管性痴呆患者血清中细胞因子、可溶性凋亡因子、抗氧化分子的影响

目的:探讨丁苯酞对血管性痴呆患者血清中细胞因子、可溶性凋亡因子、抗氧化分子的影响。方法:收集本院收治的血管性痴呆患者86例作回顾性研究,按照双盲随机对照法分为观察组、对照组各43例。观察组在常规治疗基础上加入丁苯酞胶囊(0.2g/次,3次/d)治疗,对照组仅接受常规治疗,均持续24周。治疗24周后,采用ELISA法测定两组的血清血管修复因子、可溶性凋亡因子含量,采用放射免疫法测定血清抗氧化分子含量。结果:治疗24周后,观察组的血清血管修复因子血红素氧化酶-1(HO-1)、血管生成素Ⅰ(AngⅠ)、血管内皮生长因子(VEGF)含量高于对照组,基质金属蛋白酶-9(MMP-9)含量低于对照组,组间差异有统计学意义(P<0.05);血清可溶性凋亡相关因子(sFas)、可溶性凋亡相关因子配体(sFasL)含量低于对照组;血清抗氧化分子超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化力(TAC)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽硫转移酶(GST)、谷胱甘肽还原酶(GR)含量高于对照组。结论:丁苯酞可促使血管性痴呆患者的血管修复,同时抑制细胞凋亡进程、平衡机体氧化/抗氧化系统功能。

雷射针刺治疗血管性痴呆的临床疗效及对血清抗凋亡因子的影响

目的:观察雷射针刺治疗血管性痴呆(VD)的临床疗效及对VD患者血清抗凋亡因子(Livin)的影响。方法:192名VD患者随机分为雷射针刺治疗组、普通体针对照组和药物对照组三组,每组分别64例,共治疗3个疗程,对长谷川痴呆修改量表(HDS)、社会活动能力调查表(FAQ)评分以及血清Livin的水平分别于治疗前后进行对比。结果:总有效率雷射针刺治疗组为71. 88%,普通体针对照组为70. 31%,药物对照组为56. 25%,三组疗效相比,雷射针刺治疗组与药物对照组两组差异有统计学意义(P<0. 05);三组患者治疗前后比较,治疗后HDS评分上升,FAQ评分降低,Livin水平上升,具有显著性差异(P<0. 05);三组间治疗后比较,雷射针刺治疗组的HDS、FAQ评分以及血清Livin水平的改善较药物组更为显著(P<0. 05),与普通体针对照组相当(P>0. 05)。结论:雷射针刺治疗VD患者疗效显著,其作用机制与改善VD患者血清Livin水平相关。

可溶性凋亡因子及抗氧化分子在血管性痴呆患者血清中的表达及价值

目的观察可溶性凋亡因子及抗氧化分子在血管性痴呆(VD)患者血清中的表达,并探讨其检测临床价值。方法 76例VD患者根据简易智能状态量表(MMSE)分为轻度(26例,21~26分),中度(26例,10~20分)和重度(24例,0~9分),同期选择30例门诊健康体检者作为对照组。比较各组血清可溶性Fas(s Fas)、可溶性Fas L(s Fas L)等可溶性凋亡因子表达水平及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化力(TAC)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽硫转移酶(GST)、谷胱甘肽还原酶(GR)等抗氧化分子表达水平。结果 VD组血清s Fas、s Fas L表达水平均明显高于对照组(P<0.05),且随着患者痴呆程度加重,血清s Fas、s Fas L表达水平呈明显升高趋势(P<0.05);VD组血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化力(TAC)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽硫转移酶(GST)、谷胱甘肽还原酶(GR)等抗氧化分子表达水平均明显低于对照组(P<0.05),且随着患者痴呆程度加重,血清抗氧化分子表达水平呈明显降低趋势(P<0.05)。结论 VD患者血清可溶性凋亡因子水平明显升高,而抗氧化分子水平明显降低,对早期诊断和判断病情严重程度有较高的临床价值。

scAAV9-IGF-1对SOD1-G93A小鼠抗凋亡通路的作用

目的 探索以自我互补双链腺相关病毒9为载体介导的人胰岛素样生长因子-1 (scAAV9-IGF-1)对SOD1-G93A转基因小鼠抗凋亡通路的作用。方法 采用肌萎缩侧索硬化(ALS)的动物模型即转基因SOD1-G93A突变型及野生型(wild type-SOD1,WT-SOD1)小鼠,在其出生后60 d龄时,雌性同窝阳性SOD1-G93A转基因小鼠采用随机的方法分配到治疗组及溶剂对照组,治疗组全身多点肌肉注射scAAV9-IGF-1,溶剂对照组多点肌肉注射AAV9-GFP,同年龄WT-SOD1作为阴性对照组。在肌肉注射40~50 d后,利用PCR技术检测腰髓中IGF-1含量的变化,同时检测抗凋亡通路因子Bcl-xl、Bcl-2的mRNA含量变化,通过免疫组化染色观察抗凋亡通路因子Bcl-xl、Bcl-2在小鼠腰髓前角神经元中的表达。结果 PCR技术检测显示scAAV9-IGF-1处理后,腰髓中IGF-1的mRNA含量显著高于GFP对照组,抗凋亡通路因子Bclxl、Bcl-2的mRNA含量均高于溶剂对照组(均P<0.05),而与WT组差异无统计学意义。免疫组化染色结果显示,治疗组中抗凋亡通路蛋白Bcl-xl,Bcl-2在小鼠腰髓前角神经元中的表达多于溶剂对照组,并且与WT阴性对照组相当。结论 scAAV9-IGF-1可以激活SOD1-G93A转基因小鼠模型中的抗凋亡通路,其通过上调Bcl-xl,Bcl-2的mRNA水平,进而增加Bcl-xl、Bcl-2的蛋白表达,从而产生抗凋亡的作用。

天麻钩藤饮含药血清对脑出血大鼠血清炎症因子和血肿周围脑组织细胞凋亡相关因子表达的影响

目的探讨天麻钩藤饮含药血清对脑出血大鼠血清炎症因子和血肿周围脑组织细胞凋亡相关因子表达的影响。方法选自SPF级健康SD大鼠60只,按照随机表法分为对照组、模型组、低剂量组和高剂量组,每组15只。其中正常组和模型组含10%空白血清的DMEM培养液,低剂量组和高剂量组含10%低、高剂量天麻钩藤饮含药血清。对照组和模型组给予等剂量生理盐水灌胃,每日1次;低剂量组给予5.7 g/kg天麻钩藤饮含药血清灌胃,高剂量组给予22.8 g/kg天麻钩藤饮含药血清灌胃,每日1次。各组连续给药14 d。比较各组大鼠术后1 d、术后7 d和术后14 d神经功能评分变化;给予14 d后血清炎症因子[白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]及血肿周围脑组织凋亡相关因子表达。结果模型组、低剂量组和高剂量组神经功能评分高于对照组(P<0.05);低剂量组和高剂量组神经功能评分低于模型组(P<0.05),且高剂量组低于低剂量组(P<0.05)。模型组、低剂量组和高剂量组血清IL-6和TNF-α水平高于对照组(P<0.05);低剂量组和高剂量组血清IL-6和TNF-α水平低于模型组(P<0.05),且高剂量组低于低剂量组(P<0.05)。模型组、低剂量组和高剂量组Bax蛋白表达高于对照组,Bcl-2蛋白表达低于对照组(P<0.05);低剂量组和高剂量组Bax蛋白表达低于模型组,而Bcl-2蛋白表达高于模型组(P<0.05);高剂量组Bax蛋白表达低于低剂量组,而Bcl-2蛋白表达高于低剂量组(P<0.05)。结论天麻钩藤饮含药血清可减轻脑出血大鼠神经功能缺损,其机制可能与减轻炎症因子,下调Bax蛋白表达及上调Bcl-2蛋白表达有关。

抗凋亡基因livin在急性非淋巴细胞白血病细胞中的表达及临床意义

为了探讨急性非淋巴细胞白血病(ANLL)原代细胞livin基因表达及临床意义,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测46例急性非淋巴细胞白血病患者livin基因mRNA表达水平,以10名健康人为正常对照,以HL-60细胞株为阳性对照。结果表明,livin mRNA在初治ANLL患者中的表达较正常对照组明显升高(p<0.05);治疗缓解后表达明显下降(p<0.05);复发后其表达又升高。在初治ANLL患者中,livin mRNA表达阳性的患者完全缓解率(CR)低于表达阴性的患者(p<0.05)。结论:livin基因过度表达和ANLL的发病呈正相关;livin基因高表达的患者完全缓解率低,预后不良;livin可作为急性非淋巴细胞白血病的发病、复发及预后判断的指标之一。

凋亡抑制因子Livin在喉鳞癌中的表达及临床意义

目的探讨凋亡抑制因子L ivin在喉鳞癌中的表达及临床意义。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测40例喉癌患者喉鳞癌组织及外周血细胞中L ivin的表达,并以声带息肉患者和正常人外周血作对照。结果在40例喉鳞癌标本中,L ivinα在26例(65%)癌组织中表达阳性,在17例(42.5%)外周血细胞中表达阳性;L ivinβ在喉癌组织及外周血细胞和声带患者中均不表达。L ivinα的阳性表达率与喉癌患者的年龄、性别、肿瘤部位、分化程度无相关性(P>0.05),与临床分期、淋巴结转移呈正相关(P<0.05)。结论凋亡抑制因子L ivinα在喉鳞癌组织和血液中高表达且与喉癌淋巴结转移、临床分期密切相关。

内毒素性肝衰竭大鼠TLR4mRNA表达、血清肿瘤坏死因子-α及肝细胞凋亡的动态变化

目的观察急性内毒素性肝衰竭大鼠肝组织中TLR4mRNA表达变化规律及其与血清肿瘤坏死因子-α水平、肝细胞凋亡的关系。方法雌性Wistar大鼠给予D-氨基半乳糖/脂多糖同时腹腔注射,计算动物死亡率及生存时间,动态观察给药后4、8、12h肝功能、血清肿瘤坏死因子-α、肝组织TLR4mRNA表达及病理变化,以TUNEL法检测原位细胞凋亡,计算凋亡指数。结果80%大鼠死于急性肝衰竭,平均生存时间15.6h±1.8h,病理表现为肝脏大块或亚大块坏死。给药后4、8、12h血清TNF-α增高含量及肝细胞凋亡均增加,血清TNF-α变化早于肝细胞凋亡指数的增加,肝组织TLR4mRNA的表达与血清TNF-α含量呈正相关(r=0.709,P=0.000)。结论内毒素通过单核吞噬系统TLR4介导TNF-α大量产生,激活炎症级联反应并诱导肝细胞凋亡是内毒素性肝衰竭的重要病理机制之一,阻断肝内外单核吞噬系统TLR4介导的的生理学作用,可能会对内毒素性肝衰竭起到一定防治作用。

凋亡抑制因子Livin在口腔鳞癌及癌前病变中的表达及意义

目的探讨凋亡抑制蛋白家族(IAP家族)新的凋亡抑制因子Livin在人口腔鳞癌及癌前病变中的表达及意义。方法运用组织芯片技术和免疫组织化学SABC法检测Livin在正常黏膜组织(5例)、癌前病变(49例)、鳞癌(36例)的表达情况。结果Livin在正常口腔黏膜组织中呈弱阳性表达,癌前病变中呈阳性表达(89.8%),而在口腔鳞癌呈强阳性表达(92.2%);其表达程度随癌病变程度加重而增加。结论凋亡抑制因子Livin在口腔鳞癌表达与肿瘤分化程度密切相关。

脊尾白虾抗细胞凋亡因子DAD1基因的克隆及其组织表达分析

取健康脊尾白虾（Exopalaemoncarinicauda）成体，体长（5．81±0．32）cm，体质量（1．18±0．35）g。根据本实验室已构建的脊尾白虾血细胞全长CDNA文库进行EST测序分析，获得脊尾白虾抗细胞凋亡因子DADl基因的cDNA全长并命名为EcDADl基因。该序列全长645bp，包括5非编码区184bp，开放阅读框345bp和3非编码区116bp，共编码114个氨基酸，预测分子量为12．85kD，理论等电点为8．75。同源性分析表明，脊尾白虾抗细胞凋亡因子EcDAD1氨基酸序列与其他物种DAD1有高度同源性，与斑节对虾（Penaeusmonodon）的相似性最高，为92％；与其他无脊椎动物的相似性为73％～80％。系统进化分析表明，脊尾白虾EcDAD1与斑节对虾的DAD1紧密聚为一支。荧光定量PCR分析结果表明，EcDAD1基因在脊尾白虾血细胞、鳃、肝胰腺、肌肉、卵巢、肠、胃和眼柄中均有表达，其中卵巢中的相对表达量最高。感染鳗弧菌（Vibrioanguillarum）和WSSV后6h和12h，脊尾白虾血细胞和肝胰腺中EcDAD1的表达量较对照组均显著增加（P〈0．01），且不同时间点间差异显著，表明EcDAD1基因可能在脊尾白虾抵抗病原体入侵机体的过程中具有重要作用。

凋亡抑制因子Livin和细胞周期蛋白D1在外鼻基底细胞癌的表达及意义

目的检测凋亡抑制因子Livin和细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)在外鼻基底细胞癌中的表达,探讨两者在外鼻基底细胞癌发生、发展过程中的作用及其相关性。方法采用免疫组织化学技术检测凋亡抑制因子Livin和Cyclin D1在30例外鼻基底细胞癌和18例外鼻正常组织中的表达,并观察两者在外鼻基底细胞癌表达的相关性。结果 Livin和Cyclin Dl在外鼻基底细胞癌组织中阳性表达率53.33%(16/30)和63.33%(19/30),明显高于外鼻正常组织11.11%(2/18)和16.67%(3/18),差异均有显著性(P<0.01)。两者在外鼻基底细胞癌中的表达呈正相关。结论凋亡抑制因子Livin和Cyclin D1均参与外鼻基底细胞癌的发生、发展过程,并且两者之间存在反馈调节机制,在外鼻基底细胞癌的形成中起协同作用。

新的凋亡抑制因子Livin

Livin是新近发现的一个凋亡抑制因子 ,属于抑制细胞凋亡蛋白 (inhibitorofapoptosisprotein ,IAP)家族的新成员 ,主要通过抑制胱天蛋白酶 3/ 7/ 9(caspase 3/ 7/ 9)的活性来阻断细胞凋亡过程。Livin特异地表达于胚胎发育组织和大多数实体瘤 ,正常成人的绝大多数组织中也有表达。Livin抑制细胞凋亡 ,与肿瘤的发生、发展及预后相关 ,有望成为肿瘤治疗的新靶点。

抗氧化剂阻抑肿瘤坏死因子诱导的U937细胞凋亡

近几年来，细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）的研究日益深入，凋亡的调控可能与细胞类型及诱发因素有关，某些因素具有普遍性。研究表明，活性氧中间体（ｒｅａｃ－ｔｉｖｅｏｘｙｇｅｎｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅｓ，ＲＯＩ）是细胞凋亡的媒介之一，许多理化因素诱导的细胞...

抗凋亡因子Bcl-2和血管内皮细胞生长因子(VEGF)在急性白血病中表达及意义

目的探讨抗凋亡因子Bcl_2及血管内皮细胞生长因子 (VEGF)在急性白血病患儿的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学法检测40例急性白血病患儿治疗前后Bcl_2及VEGF的表达。结果Bcl_2及VEGF在急性白血病患儿中表达明显高于对照组 (P均<0.05) ,治疗后完全缓解组两者表达水平均明显下降 ,与对照组差异无显著性 (P均>0.05)。结论急性白血病中存在Bcl_2及VEGF高表达 ,可能与急性白血病的发病、发展及疾病的预后有关。

肿瘤坏死因子相关凋亡配体抗肿瘤作用研究进展

肿瘤坏死因子相关凋亡配体(TNFrelatedapoptosisinducingligand,TRAIL)是肿瘤坏死因子(TNF)超家族成员。TRAIL与其受体结合后能选择性诱导肿瘤细胞凋亡,而对正常组织细胞没有明显的伤害。以TRAIL为靶点的肿瘤治疗方法受到众多学者的关注。

青石斑鱼抗细胞凋亡因子DAD1的克隆及表达特征分析

抗细胞凋亡因子(Defender against cell death 1,DAD1)是一种重要的内源性细胞凋亡抑制因子.采用RACE-PCR方法,结合SMART cDNA合成方法、抑制性差减杂交技术,从青石斑鱼脾脏中克隆DAD1并研究其在正常的青石斑鱼和注射了脂多糖的青石斑鱼各组织中的表达模式.结果表明:DAD1基因cDNA全长721 bp,包含一个342 bp的完整阅读框,编码一个由113个氨基酸组成的蛋白.RT-PCR半定量分析显示DAD1在正常的青石斑鱼和注射了脂多糖的青石斑鱼的脾、心、头肾、肾、肝中都有转录,在脾、肝中表达水平较高,而在肌肉中未见明显表达.DAD1在注射了脂多糖的青石斑鱼各组织中的表达量均高于正常的青石斑鱼.

自拟抑癌汤联合辅助化疗对胃癌术后血清肿瘤标志物、凋亡相关因子表达水平和T淋巴细胞亚群的影响

目的探讨自拟抑癌汤联合辅助化疗对胃癌术后血清肿瘤标志物、凋亡相关因子表达水平和T淋巴细胞亚群的影响。方法收集常州市中医医院2014年10月-2016年9月收治的60例行手术治疗的胃癌患者为对象,采用随机数字表法将其分为对照组及干预组各30例,对照组患者术后实施常规辅助化疗方案治疗,干预组在对照组基础上另联合自拟抑癌汤治疗。观察治疗前后2组血清肿瘤标志物[糖类抗原125(CA125)、糖类抗原199(CA199)、癌胚抗原(CEA)、组织多肽特异性抗原(TPS)]、凋亡相关因子[胃癌细胞原癌蛋白(Bax)、凋亡调控基因蛋白(Bcl-2)]、T淋巴细胞亚群(CD3、CD4、CD8)、生活质量[卡氏评分量表(KPS)]的变化及毒副反应发生率。结果治疗前2组CA125、CA199、CEA、TPS、Bax、Bcl-2、CD3、CD4、CD8、KPS评分相较无明显差异(P>0.05);治疗后2组CA125、CA199、CEA、TPS、Bcl-2较治疗前明显降低(P<0.05),Bax、CD3、CD4、CD8、KPS评分明显升高(P<0.05),而干预组的各项指标变化较对照组明显,差异有统计学意义(P<0.05);且干预组毒副反应总发生率明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论自拟抑癌汤联合辅助化疗应用于胃癌术后患者,可有效调节机体血清肿瘤标志物、凋亡相关因子及T淋巴细胞亚群表达,明显提高患者生活质量,且毒副反应更少,适于推广应用。

虹鳟抗细胞凋亡因子(DAD1)基因全长cDNA克隆与进化分析

抗细胞凋亡因子1(Defender against cell death 1,DAD1)是内质网内膜上糖基转移酶复合体亚基之一。本文通过RT-PCR及RACE技术从虹鳟脑组织中克隆到DAD1基因cDNA全长序列(GenBank登录号:FJ849061)。该基因包括88 bp 5'-UTR、292 bp 3'-UTR以及342 bp开放阅读框(ORF)。该基因编码113个氨基酸,存在三个明显跨膜区,无信号肽序列。通过蛋白序列比对显示虹鳟DAD1蛋白序列与大西洋鲑、白斑狗鱼、斑马鱼以及裸盖鱼同源性均在90%以上。系统发育分析显示DAD1蛋白主要聚成两个群:脊椎动物DAD1群与无脊椎动物DAD1群。虹鳟DAD1与大西洋鲑DAD1蛋白亲源关系最近。