小鼠血清补体替代途径溶血活性测定的新方法

目的针对现有补体溶血活性测定方法不适宜测定小鼠血清补体的缺点,构建一种血清用量少、灵敏度高的小鼠血清补体替代途径溶血活性测定的新方法。方法选用具有代表性的3个小鼠品系KM、BALB/c和C57BL/6小鼠的血清补体作为测定材料,以兔红细胞为溶血靶细胞,利用眼镜蛇毒因子(CVF)特异激活补体替代途径的特点,构建和优化小鼠血清补体替代途径溶血活性测定的方法,并采用该方法测定两种抗补体蛋白对小鼠体内血清补体活性的影响。结果以CVF作为激活剂成功构建了测定小鼠血清补体替代途径溶血活性的微量新方法。3个品系小鼠的血清在5～20μl的范围内即可分别达到合适的溶血度。该方法明显减少了血清用量,并能有效提高溶血度。结论基于CVF特异激活补体替代途径的特点而构建的小鼠血清补体替代途径溶血活性测定新方法,血清用量少、灵敏度高、稳定性好,适用于测定小鼠血清补体的溶血活性。

人血清的分离和保存条件对补体溶血活性的影响

我们首次用琼脂糖凝胶内溶血法研究了人血清分离和保存条件对补体溶血活性的影响。结果表明：人血离体后，在冰浴、室温和３７℃条件下凝固和分离血清，其补体溶血活性无显著性差异。血清在３７℃８ｈ、室温１２ｈ、－１０℃Ｃ１４ｄ、－４０℃９０ｄ和－８０℃３６５ｄ，其补体溶血活性与新鲜血清无显著性差异。－８０℃冻存血清可用作补体溶血活性测定的质控参考品。

生物材料静态血清接触对总补体溶血活性(CH_(50))影响的实验研究

机体在抗原的作用下产生一系列免疫反应 ,血清中总补体含量的变化可反映补体活化及免疫反应程度。本文参照有关标准方法 ,选择八种生物材料 ,与血清进行体外培养 ,在不同时间内测定总补体溶血活性(CH5 0 ) ,探讨生物材料免疫反应。试验结果表明 ,八种材料接触血清测得CH5 0 值均低于对照组 ,但每种材料降低程度有所不同 ,CA和PETF降低最明显 ,CH5 0 测定值均 <40单位·ml- 1 ,而对照组为 80单位·ml- 1 。PP和BC材料的CH5 0 值与对照组结果比基本一致。PETF和PES两种材料接触不同时间 (30min ,90min ,12 0min)随时间的延长逐渐降低 ,而PETF降低较明显。该研究初步表明CA和PETF材料具有活化补体 ,降低CH5 0 值 ,提高免疫反应的作用。

荷斯坦种公牛血清替代补体溶血活性研究(英文)

本文将国外脊椎动物血清补体溶血活性标准测定方法,运用到荷斯坦种公牛研究中,首次建立了测定荷斯坦种公牛血清补体溶血ACH50的方法。种公牛血清经相应靶红细胞吸附后,可溶解悬浮在EGTAMgGVB缓冲液中的正常的兔血红细胞、人A,B,AB,O型红细胞,小鼠、大鼠、鸡红细胞,但对绵羊、山羊、猪红细胞溶血活性较低;对奶牛红细胞无溶血活性。且发现种公牛血清的溶血活性和靶红细胞的动物种类在系统发育上和种公牛的亲缘关系远近没有直接联系。种公牛血清在EGTAMgGVB缓冲液中对兔血红细胞发生溶血的最适条件是:温度是37℃,最适pH是7.3-7.4,最适Mg2+的浓度是4mmol/L,最适孵育时间为90min。溶血活性是二价离子依赖、热敏感(溶血活性热灭活温度是56℃)。种公牛血清对兔血红细胞的溶血活性在受到酵母聚糖、甲胺、肼、EDTA、鸡抗酵母聚糖牛血清结合物抗血清处理时,溶血活性可全部或部分消失,溶血活性抑制程度与补体抑制剂浓度相关。我们运用建立的标准溶血方法并以兔血红细胞作为指示细胞检测不同年龄的53头种公牛血清补体替代途径的溶血活性,溶血值在13.2-44.3u/ml之间,还发现不同年龄组公牛之间溶血活性有随年龄增加而逐步增大趋势,但差异不显著(P>0.05),在4-5岁公牛群中达到最大值。对种公牛血清补体系统溶血水平进行系统研究,一方面可以填补国内在此领域研究空白,另一方面也利于种公牛疾病监测、控制,此外也为兽医临床诊断试剂的研制提供新的技术手段。

单相扩散法检测补体旁路溶血活性

AP-CH_(50)多管检测法比较繁锁,尽管近年来人们已将多管法改成了单管法,但AP-CH_(50)的检测仍不能作为临床常规项目开展,为了进一步简化操作,我们建立了单相扩散法,收到了满意的效果,现报告如下:

脂质体-免疫分析法测定血清总补体溶血活性及临床应用

目的：探讨血清总补体溶血活性（CH50）在临床中的应用价值。并观察宣温下放置不同时间血清CH50的变化。方法：采用脂质体-免疫分析法检测50例健康成年人、14例慢性肝病患者和26例狼疮肾病患者（其中11例为活动期）血清的CH50及C3和C4含量。结果：结果表明健康成年人LIA法血清总补体溶血活性（CH50）范围为25—57U／ml。血清在宣温下放置4h后，CH50明显降低。14例慢性肝病患者CH50及C3和C4较健康者降低，其中C3、C4与CH50的相关系数为0．857和0．807。26倒狼疮肾病患者活动期与非活动期C3、C4含量无明显差异，而活动期较非活动期CH50明显降低，有极显著差异。结论：总补体溶血活性（CH50）检测，待测血清必需新鲜，宣温放置不能超过4h。脂质体-免疫分析法（LIA）检测总补体溶血活性，主要反映补体经经典途径活化的活性。补体含量及活性联舍检测对临床诊断意义更大。

在血清学试验中抗－A（B）溶血活性的干扰及排除

在血清学试验中抗－Ａ（Ｂ）溶血活性的干扰及排除孙爱农，刘怡，章龙信（安徽省芜湖市中心血站，安徽芜湖２４１０００）本文探讨了在血型血清学试验中，抗－Ａ（Ｂ）溶血活性的干拢及排除方法，现报告如下。１材料与方法１．１材料（１）乙二胺四乙酸二钠（ＥＤＴＡ．２...

直接溶血法定量测定血清总补体活性正常值调查及方法学评价

目的建立直接溶血法定量测定血清总补体活性的正常人参考值范围，并对方法学进行评价。方法以人血清中天然所含的嗜异性抗体作补体溶血的依赖抗体，将抗原(绵羊红细胞)浓度固定，直接加被测血清与绵羊红细胞作用，根据溶血反应所释放的血红蛋白量计算出补体的活性单位。对208名正常人总补体活性进行测定，用正态D检验确定95％界值。结果208名正常人参考值范围为2．1～4．62U／mL；精密度试验CV为0．82％；线性试验r为0．9997；与50％终点溶血法相比，检测20例正常人、20例急性肾小球肾炎以及20例细菌性脑膜炎患者，经相关分析，两法所得结果均呈显著相关(P<0．01)。结论该法操作简便，经济实用；其准确性、精密度、线性均符合要求；定量检测，结果准确；适宜于基层医院推广应用。

补体旁路途径失调非典型溶血尿毒综合征的诊断和治疗

补体旁路途径失调非典型溶血尿毒综合征(aHUS)是指因补体基因致病变异或抗补体因子H(CFH)抗体所致的溶血尿毒综合征。其诊断包括临床诊断和基因诊断,全基因组测序(WGS)结合转录组测序(RNAseq)相较于靶基因测序Panel或全外显子组测序(WES)可提高致病变异检出率。人抗C5单克隆抗体依库珠单抗(eculizumab)已被用作治疗补体旁路途径失调aHUS的一线疗法,由依库珠单抗设计的长效补体C5抑制剂雷夫利珠单抗(Ravulizumab)应用于aHUS儿童和成人,均能快速改善血液学和肾脏参数,安全性好。本文对补体旁路途径失调aHUS的临床表型、发病机制、诊断和治疗进行了综述,以期为该病提供更全面的诊断和治疗方案。

定量琼脂板溶血法检测补体旁路活性

补体经旁路(alternative pathway,AP)活化时不依赖抗体和C1、C4、C2,在抗感染和免疫病理反应方面具有重要意义.免红细胞(RE)可激活B 因子,导致AP 活化.传统检测AP 活性的方法即以此为基础,根据引起RE 发生50%溶血时所用血清的量判定其AP-H_(50)活性.最近,KallestadDiagnostics 公司推出检测总补体活性(CH_(100))的定量琼脂板(Quantiplate)溶血法并制成药盒。

白血病血清溶血活性的临床意义

白血病中有血清溶血因子能使正常人红细胞膜变异,通过经典途径被补体激活,在蔗糖及低离子强度条件下引起溶血。作者利用逆蔗糖溶血试验(ISHT),观察50例白血病人血清的溶血活性,发现疾病的活动期55.6％ISHT阳性。疾病活动期溶血活性明显高于疾病完全缓解期或部分缓解期;也发现溶血活性与病情相关良好,随病情好转而降低复发而增高,而且可在其它血液参加提示复发前出现。作者认为ISHT是观察疾病活动性及治疗效果的简单、重复性好的指标。

溶血因素对鱼血清胆碱酯酶活性测定的影响

关于溶血对血清胆碱酯酶活性的影响，根据医学临床检验介绍，人类红细胞中的胆碱酯酶有一定的专一性，它只能作用于乙酰胆碱，其酶活性约占全血总活力的80％，故测定标本不可溶血。另外人类血清中，胆碱酯酶与血细胞不同，其专一性较差，除可作用于乙酰胆碱外，还可作用于其他胆碱酯类，故此，也可称之为非特异性胆碱酯酶，

高甘油三酯患者凝血纤溶活性的变化及血脂康对其的影响

近年来流行病学、临床及实验研究资料均显示，血清甘油三酯（TG）水平升高是独立的心血管疾病的危险因素。高TG患者存在纤溶活性的降低和凝血因子Ⅶ水平的升高。笔者自2004年1月-2005年3月观察了高TG患者凝血纤溶活性的变化及血脂康对其的影响。

阿托伐他汀对急性脑血栓患者血清溶血磷脂酸水平的影响

近年来研究发现，溶血磷脂酸（LPA）是具有多种生物活性的磷脂介质，在脑卒中的发生过程中起重要作用。它不仅可作为预警因子反映血小板的活化程度，也可作为致病因子促进动脉粥样硬化的发生发展，并加速血栓形成。阿托伐他汀除具有强力的调脂作用外，还具有抗炎、抗氧化及抗凝等非凋脂作用。我们旨在观察阿托伐他汀对血清LPA的影响及其对急性脑血栓患者血清LPA的干预作用。

血脂康对高脂血症患者血小板活性及纤溶活性的影响

目的 探讨高脂血症患者血小板活性及纤溶活性的改变 ,观察血脂康对血小板活性和纤溶活性的影响。方法 选择 30例混合型高脂血症患者和 2 0例健康者 ,测定其血浆血小板 α-颗粒膜蛋白 14 0 (GMP- 14 0 )含量、血浆组织型纤溶酶原激活物 (t- PA)、t- PA抑制物 (PAI)活性及血脂指标。患者口服血脂康 8周后 ,比较治疗前后血浆 GMP- 14 0含量、t- PA、PAI活性及血清血脂的变化。结果 与对照组比较 ,患者组治疗前血清 TC、TG、低密度脂蛋白胆固醇 (L DL- C)明显增高 (P均 <0 .0 1) ,高密度脂蛋白胆固醇 (HDL- C)降低 (P <0 .0 1)。血浆GMP- 14 0含量、PAI活性明显升高 (P均 <0 .0 1) ,t- PA活性降低 (P <0 .0 1)。经血脂康治疗 8周后 ,患者组血清TC、TG、L DL - C明显降低 (P均 <0 .0 1) ,HDL - C升高 (P <0 .0 5 ) ,血浆 GMP- 14 0含量明显下降 (P <0 .0 1) ,t-PA及 PAI活性无显著改善 (P >0 .0 5 )。PAI活性与血清 TG呈正相关 (r=0 .4 6 ,P <0 .0 5 )。结论 高脂血症患者血小板活性明显增加 ,GMP- 14 0含量升高 ,纤溶活性明显降低。血脂康通过降低血清 TC、TG及 L DL - C,抑制血小板活化 ,减少血小板标志物 GMP- 14 0的表达 。

普伐他汀对高胆固醇血症患者纤溶活性的影响

目的:研究高胆固醇血症患者降脂治疗后体内纤溶活性的变化并探讨其作用机制。方法:正常对照组30例。120名高胆固醇血症患者随机分成两组,普伐他汀60例,10 mg,每晚顿服;辛伐他汀60例,20 mg,每晚顿服,疗程8周。观察治疗前后血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、纤溶酶原激活抑制剂-1(PAI-1)活性、组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)和纤维蛋白原(Fib)等指标。结果:试验组治疗前后比较:①血清TC由6.58± 0.57,显著下降到4.86±1.36 mmol·L^(-1)(P<0.001);LDL-C由4.08±0.53显著下降到2.75±0.73 mmol·L^(-1)(P<0.01);②血浆PAI-1活性由0.91+0.14显著下降到0.69±0.13 AU·mL^(-1)(P<0.01);③t-PA活性由0.27±0.12显著增高到0.36±0.11 U·mL^(-1)(P<0.05);④Fib由3.91±0.22下降到3.13±0.16gL^(-1)(P<0.05)。试验组与对照组比较,治疗后各项指标的改变无显著差异(P>0.05);⑤血清TC与LDL-C水平及PAI-1活性显著正相关(P<0.001)。结论:普代他汀与辛伐他汀有相似的降脂和改善纤溶活性的作用。

溶血对乳酸脱氢酶总活性及其同工酶定量的影响

红细胞的乳酸脱氢酶(LDH)含量相当于正常人血清的100倍。本文采用正常及溶血的标本，观察其溶血对LDH总活性及同工酶的影响。

一管法测定补体C1溶血活性

本文用400.0g/L 聚乙二醇沉淀正常人新鲜血清,制备出C1缺损血清(C_1D),用一管法测定C1溶血活性。经免疫双向扩散等实验证实C_1D 血清仅去除C1,补体其它成份基本不受影响,因而能特异性测定C1溶血活性。经方阵滴定,待检血清与C_1D 最适稀释度为1∶20;本法批内CV=5.5%;与多管法测定结果比较,r=0.9155,p<0.01。用一管法检测慢性活动性肝炎等患者血清C1溶血活性,其结果明显低于正常人。本法简便,快速,适于一般实验室应用。