血清8-羟基脱氧鸟苷、星形胶质源性蛋白B表达与颅内动脉瘤夹闭术后血管痉挛的相关性分析

目的分析颅内动脉瘤夹闭术后病人血清8-羟基脱氧鸟苷(8OHdG)、星形胶质源性蛋白B(S100B)表达情况,并分析二者与术后血管痉挛(CVS)的关系。方法回顾性分析2017年5月至2019年5月承德医学院附属医院收治的颅内动脉瘤病人190例为研究对象,根据CVS评定方法将病人分为无CVS组、轻度CVS组、中度CVS组、重度CVS组。收集比较病人一般资料,采用酶联免疫吸附法(ELISA)法测定并比较受试者血清8OHdG、S100B水平,采用二元logistic回归分析影响颅内动脉瘤病人夹闭术后CVS的危险因素,绘制受试者工作特征曲线(ROC)曲线评价血清8OHdG、S100B水平对颅内动脉瘤病人夹闭术后CVS的诊断价值。结果术后不同程度CVS计147例。CVS组病人血清8OHdG、S100B水平均明显低于术前(P<0.05),无CVS组、轻度CVS组、中度CVS组、重度CVS组颅内动脉瘤夹闭术病人术后血清8OHdG、S100B水平均依次升高[(223.78±33.66)ng/L比(328.37±67.75)ng/L比(436.53±119.21)ng/L比(499.39±152.67)ng/L、(0.76±0.21)µg/L比(1.01±0.39)µg/L比(1.30±0.45)µg/L比(1.55±0.52)µg/L,P<0.05]。不同程度CVS组病人Hunt-Hess分级Ⅲ~Ⅳ级病人比例差异有统计学意义(P<0.05)。二元lo‐gistic回归分析显示,Hunt-Hess分级Ⅲ~Ⅳ级、血清8OHdG、S100B水平高表达是颅内动脉瘤夹闭术后病人发生CVS的危险因素(P<0.05)。血清8OHdG、S100B水平诊断颅内动脉瘤夹闭术后病人发生CVS的ROC曲线下面积AUC分别为0.87、0.86,二者联合检测诊断AUC为0.95。结论血清8OHdG、S100B水平异常高表达可能与颅内动脉瘤夹闭术后CVS发生发展有关,且二者联合检测对是否发生CVS有较高诊断价值,可为临床寻求可靠生物学指标早期诊断颅内动脉瘤夹闭术后病人是否发生CVS提供一定参考。

不同病情严重性癫痫患者与血清B细胞活化因子、血清脑源性神经营养因子、胶质纤维酸性蛋白水平的相关性

目的 研究不同病情严重性癫痫患者与血清B细胞活化因子(B cell activation factor, BAFF)、血清脑源性神经营养因子神经营养因子(brain derived neurotrophic factor, BDNF)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)水平的相关性。方法 选择惠州市中心人民医院于2020年12月—2022年12月收治的癫痫患者74例作为癫痫组。按照国立癫痫严重程度评分量表(National Epilepsy Severity Scale, NHS3)分级标准,将74例癫痫患者分成全身强直阵挛发作组(30例)和部分性发作组(44例),以45例同期体检健康者为对照组。分别测定其BDNF、BAFF、GFAP的水平,分析癫痫患者BDNF、BAFF、GFAP水平与病情严重性的相关性。结果 癫痫组BDNF水平(6.35±2.26)ng/mL低于对照组,而BAFF水平(9.05±2.14)ng/mL和GFAP水平(3.43±0.57)ng/L均高于对照组,差异有统计学意义(t=7.485、15.174、15.094,P<0.05);全身强直阵挛发作组中BDNF的水平与部分性发作组比较,明显降低,而BAFF水平、GFAP水平较部分性发作组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);BDNF与癫痫患者病情严重程度成负相关(r=-0.250,P=0.032);BAFF、GFAP与癫痫患者病情严重程度成正相关(r=0.395、0.584,P<0.05)。结论 癫痫患者的血清BDNF、BAFF和GFAP的检测结果均与正常人群的检测结果的有差异,并与患者的疾病严重性有明显的相关性。

血清星形胶质源性蛋白、神经元特异性烯醇化酶对颅脑损伤患者病情及预后的评估价值

目的探讨血清星形胶质源性蛋白(S100β)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)联合检测对颅脑损伤患者病情及预后的评估价值。方法选取2018年2月—2021年6月齐齐哈尔医学院附属第二医院收治的颅脑损伤患者103例作为研究对象。收集所有患者临床资料,治疗后随访3个月观察其预后情况。比较治疗前不同病情严重程度患者血清S100β、NSE水平及影响患者预后的因素,分析血清S100β、NSE对颅脑损伤患者预后的预测价值。结果103例颅脑损伤患者中,轻度28例,中度41例,重度34例。轻度组S100β、NSE低于中、重度组(P<0.05),中度组S100β、NSE低于重度组(P<0.05)。103例颅脑损伤患者中,20例预后不良,83例预后良好。预后不良组格拉斯哥昏迷评分(GCS)低于预后良好组(P<0.05),APACHEⅡ评分、SOFA评分、颅内压、乳酸、S100β、NSE高于预后良好组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,GCS评分[OR=5.463(95%CI:2.402,12.427)]、乳酸[OR=3.846(95%CI:1.691,8.749)]、S100β[OR=3.408(95%CI:1.498,7.752)]、NSE[OR=4.063(95%CI:1.786,9.243)]是影响颅脑损伤患者预后的独立因素(P<0.05)。血清S100β、NSE及两者联合预测颅脑损伤患者预后的敏感性分别为70.00%、75.00%和70.00%,特异性分别为75.90%、72.29%和90.36%,AUC分别为0.764、0.742和0.908。结论血清S100β、NSE水平与颅脑损伤患者病情及预后有关,两者联合预测颅脑损伤患者预后效能良好。

血清星形胶质源性蛋白和神经元特异性烯醇化酶水平与重症手足口病的相关性研究

目的探讨血清星形胶质源性蛋白(S100B)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平与重症手足口病(HFMD)患儿病情的关联性。方法收集手足口病普通病例52例(普通组),重症病例42例(重症组),普通组和重症组患儿在入院当日和治疗后取血样,另取健康对照组60例血样,均采用酶联免疫吸附法测定血清S100B、NSE水平。结果与对照组相比,重症组入院日S100B、NSE水平均显著升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。与普通组入院日相比,重症组入院日S100B、NSE水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.01)。与入院日相比,重症组治疗后S100B、NSE水平均显著下降,差异有统计学意义(P<0.01)。在重症组患儿中,入院日S100B水平与入院日NSE水平呈显著正相关(r=0.842,P<0.01);治疗后S100B水平与治疗后NSE水平也呈显著正相关(r=0.865,P<0.01)。结论动态检测血清S100B、NSE水平有可能为HFMD重型或危重型的早期识别提供一种有效的辅助诊断方法。

新疆阿魏干预神经源性疼痛模型大鼠痛阈及脊髓Fos蛋白和星形胶质细胞的表达（英文）

背景:新疆阿魏主要由挥发油、树脂和树胶组成,具有抗炎、抗过敏及解痉镇痛作用。但其镇痛作用机制尚不明确,目的:观察新疆阿魏对神经病理性疼痛大鼠热痛及机械痛及脊髓Fos蛋白和星形胶质细胞表达的影响。方法:成年SD大鼠80只制备慢性坐骨神经松结扎大鼠模型后随机分为5组:分别灌胃低、中、高剂量阿魏0.075,0.15,0.30 g/kg,赛来昔布和生理盐水。各组分别在术前1 d及术后1,2,3,5,7,14 d进行热痛及机械痛测定,并取S4-5脊髓组织,并采用免疫组织化学染色的方法观察脊髓Fos蛋白和星形胶质细胞表达变化。结果与结论:给药后1,5 d,低、中、高剂量阿魏组均高于生理盐水组(P<0.01),中剂量阿魏组热痛阈值下降幅度最小(P<0.05),高剂量阿魏组机械痛阈值减小幅度最小(P<0.01)。术后各时间点低、中、高剂量阿魏组及赛来昔布组在的Fos蛋白阳性细胞数均小于生理盐水组(P<0.05),中、高剂量阿魏组各时间点Fos蛋白阳性细胞数均高于赛来昔布组(P<0.05)。高剂量阿魏组及赛来昔布组在术后各个时间点的脊髓组织星形胶质细胞阳性细胞数均明显少于生理盐水组(P<0.05);中、高剂量阿魏组与赛来昔布组各时间点的星形胶质细胞阳性细胞数比较差异有显著性意义(P<0.05)。结果证实,新疆阿魏可以有效缓解大鼠神经病理性疼痛,其机制可能与脊髓Fos蛋白和星形胶质细胞的激活有关。

成人病毒性脑炎患者血清和脑脊液GFAP CPK-BB NSES-100B表达在病情监测中的作用

目的 探究成人病毒性脑炎(VE)患者血清和脑脊液胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、肌酸激酶脑型同工酶(CPK-BB)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、星形胶质源性蛋白(S-100B)表达在病情监测中的作用。方法 选取2021-02—2022-10河北中石油中心医院收治的102例成人VE患者(VE组)为研究对象,其中轻度感染39例,中度34例,重度29例。选取同期头痛入院有腰椎穿刺指征,最终确诊为偏头痛、上呼吸道感染的患者50例为对照组,比较VE组与对照组、不同病情程度患者血清和脑脊液GFAP、CPK-BB、NSE、S-100B水平,应用Pearson分析血清GFAP、CPK-BB、NSE、S-100B水平与脑脊液对应指标的相关性,应用Spearman分析血清和脑脊液GFAP、CPK-BB、NSE、S-100B与病情程度的相关性。结果 VE组急性期、恢复期血清和脑脊液GFAP、CPK-BB、NSE、S-100B水平高于对照组(P<0.05),急性期血清和脑脊液GFAP、CPK-BB、NSE、S-100B水平高于恢复期(P<0.05)。VE组急性期血清GFAP、CPK-BB、NSE、S-100B水平与脑脊液对应指标呈正相关(r=0.806、0.728、0.819、0.781,均P<0.001),恢复期血清GFAP、CPK-BB、NSE、S-100B水平与脑脊液对应指标呈正相关(r=0.746、0.807、0.728、0.769,均P<0.001)。VE患者急性期、恢复期重度感染患者血清和脑脊液GFAP、CPK-BB、NSE、S-100B水平高于中度和轻度,中度患者高于轻度(P<0.05)。与恢复期对应感染程度比较,急性期轻度、中度、重度患者血清和脑脊液GFAP、CPK-BB、NSE、S-100B水平升高(P<0.05),急性期、恢复期血清和脑脊液GFAP、CPK-BB、NSE、S-100B水平均与感染程度呈正相关(P<0.05)。结论 成人VE患者血清和脑脊液GFAP、CPK-BB、NSE、S-100B表达升高,与病情严重程度、所处的病程阶段有关,且血清GFAP、CPK-BB、NSE、S-100B表达与脑脊液显著相关,有望作为VE病情监测的便捷、无创标志物。

血小板源性生长因子(PDGF)、血清反应因子(SRF)和波形蛋白在人脑胶质瘤中表达的临床意义

目的研究血小板源性生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)、血清反应因子(serum response factor,SRF)和波形蛋白(vimentin)在人脑胶质瘤中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化染色法检测13例正常脑组织和70例人脑胶质瘤组织中PDGF-B、SRF和波形蛋白的表达并分析其临床意义。结果 PDGF-B、SRF和波形蛋白在人脑胶质瘤组织中高表达,阳性表达率分别为67.14%、48.57%和81.43%,差异有统计学意义(P<0.05);三者在脑胶质瘤中的表达与患者性别、年龄、肿瘤发生部位、肿瘤大小无关(P>0.05)。随着胶质瘤恶性程度增加,三者表达逐渐上调,其中PDGF-B、波形蛋白在脑胶质瘤中的表达与肿瘤分级相关;相关性分析显示PDGFB与SRF、波形蛋白在脑胶质瘤中的表达有相关性(P<0.05)。结论PDGF-B、SRF和波形蛋白在脑胶质瘤的发生、发展中可能起到重要的调节作用,与肿瘤恶性程度具有一定的相关性。

孤独症儿童血清中胶质细胞源性神经营养因子和S100B蛋白的水平

目的探讨胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)和S100B蛋白血清浓度与儿童孤独症的关系。方法依据《精神疾病诊断与统计手册——第4版(DSM-Ⅳ)》选择已明确诊断的孤独症儿童65例,并按照儿童期孤独症评定量表(CARS)标准对孤独症儿童进行病情分级;另选72例健康儿童作为对照。采用酶联免疫吸附试验检测所有受试儿童血清中GDNF和S100B蛋白水平。用SPSS20.0统计软件做两组样本t检验和方差分析。结果病例组儿童血清GDNF水平显著高于对照组儿童,差异有显著性(P<0.05),而病例组儿童血清S100B蛋白水平明显高于对照组儿童,但差异无显著性(P>0.05)。按病情分级后,轻度孤独症儿童血清GDNF水平与对照组儿童相比显著升高,差异有显著性(P<0.05),随着病情加重GDNF水平呈下降趋势,重度孤独症儿童与对照组儿童相比,差异无显著性(P>0.05),轻、重度孤独症儿童之间的GDNF水平差异无显著性(P>0.05)。轻、重度孤独症儿童血清S100B蛋白水平与对照组儿童相比均有升高趋势,但差异无显著性(P>0.05),轻、重度孤独症儿童之间差异无显著性(P>0.05)。无论是对照组还是病例组均未发现GDNF和S100B蛋白水平存在性别差异(P>0.05)。结论孤独症儿童血清GDNF水平明显升高,而S100B蛋白水平有升高趋势,推测两者在孤独症的发病过程中均可能具有重要作用。

首发重性抑郁症患者抗抑郁治疗前星形胶质源性蛋白(S100B)水平与短期疗效的关系

目的:研究重性抑郁症患者抗抑郁治疗前S100B(星形胶质源性蛋白)水平与短期疗效的关系。方法:按照入组标准和排除标准纳入首发重性抑郁症患者36例,并对抑郁症患者在入组时通过ELISA方法检测血清S100B水平。并应用汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评估抗抑郁治疗4周的疗效(短期疗效)。结果:1短期治疗有效的患者组入组时S100B(1.64±0.77)ng/mL,与短期治疗无效的患者组(1.04±0.31)ng/mL相比有显著差异性(t=-3.276,P<0.05);2重性抑郁症患者血清S100B与ΔHAMD变化值成正比(r=0.389,P<0.05)。结论:首发重性抑郁症患者抗抑郁治疗前的S100B水平能够预测不同的短期疗效。

颅脑损伤患者脑脊液神经元特异性烯醇化酶、星形胶质源性蛋白水平变化及其临床意义

颅脑损伤是一种由外力引起的大脑功能改变,在车祸、跌倒或其他事故后发生。中国颅脑损伤年发生率为(55~64)/10万,导致每年近10万人死亡,数十万人伤残,是严重的公共安全问题[1]。由于颅脑损伤经常部位多发,而且存在个体差异,导致其病理生理机制复杂,因此对伤情严重程度的判断存在较大难度。以往临床评估颅脑损伤严重程度的指标主要包括颅内压(ICP)监测、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)以及格拉斯哥昏迷评分(GCS)等,但此类指标无法呈现患者颅内分子水平的变化情况,对患者病情反馈不甚全面[2-3]。有研究显示,神经元特异性烯醇化酶(NSE)和星形胶质源性蛋白(S100β)具有作为中枢神经系统损伤标志物的潜力[4-5]。因此,分析颅脑损伤后患者的脑脊液NSE和S100β水平变化,有助于更好地评估患者疾病严重程度,现报道如下。

自身免疫性胶质纤维酸性蛋白星形细胞病血清尿酸水平的研究

目的探讨自身免疫性胶质纤维酸性蛋白星形细胞病(GFAP-A)血清尿酸的水平和临床意义。方法回顾性收集2013年6月至2021年11月广州医科大学附属第二医院的63例GFAP-A患者的临床资料,并分析其尿酸水平。结果63例GFAP-A患者中,治疗前中位血清尿酸水平为280μmol/L(61~567μmol/L)。GFAP-A组的血清尿酸水平低于体检对照组(P=0.005)和BPPV组(P=0.008)。男性组中,GFAP-A组的血清尿酸水平低于BPPV组(P=0.0004)。女性组中,GFAP-A组的血清尿酸水平低于BPPV组(P=0.028)和体检对照组(P=0.014)。结论GFAP-A患者发病期间血清尿酸水平低于健康者,但尿酸在GFAP-A的意义仍需要进一步阐述。

血清脑源性神经营养因子、B细胞活化因子、胶质酸性纤维蛋白与癫痫患者病情及认知功能的相关性分析

目的 探讨血清脑源性神经营养因子(BDNF)、B细胞活化因子(BAFF)、胶质酸性纤维蛋白(GFAP)与癫痫患者病情严重程度及认知功能的相关性。方法 2018年12月至2020年12月我院收治的74例癫痫患者,根据国立癫痫严重程度评分量表(NHS3)分为全身强直阵挛发作组(n=30)与部分性发作组(n=44);收集同一时期体检的40例健康者作为对照组,检测各组血清BDNF、BAFF、GFAP水平,并采用简易智能精神状态检查量表(MMSE)评估认知功能,分析血清BDNF、BAFF、GFAP与NHS3评分及MMSE评分的相关性,分析癫痫患者病情加重、认知异常的影响因素。结果 癫痫组BDNF低于对照组(P<0.05),BAFF、GFAP高于对照组(P<0.05);全身强直阵挛发作组与部分性发作组BDNF、BAFF、GFAP及NHS3评分比较差异有统计学意义(P<0.05);BDNF与NHS3评分呈负相关(P<0.05),BAFF、GFAP与NHS3评分呈正相关(P<0.05);高水平BDNF、BAFF、GFAP是癫痫患者病情加重的影响因素(P<0.05)。癫痫组MMSE评分低于对照组(P<0.05),其中有55例MMSE总评分<27分;BDNF与MMSE评分呈正相关(P<0.05),BAFF、GFAP与MMSE评分呈负相关(P<0.05)。高龄、高水平BDNF、BAFF、GFAP是癫痫患者发生认知异常的影响因素。结论 癫痫患者血清BDNF、BAFF、GFAP与正常人相比具有显著性差异,且与其病情严重程度及认知功能存在密切相关性。

中脑星形胶质源性神经营养因子的结构、分泌调控和功能研究进展

神经营养因子(NTFs)保护神经元免受应激损伤或促进神经元的再生,参与神经元迁移、分化、成熟以及生存。中脑星形胶质源性神经营养因子(MANF)是NTFs家族新成员,结构与典型NTFs不同,由两个结构独立的域构成,即N-末端域(脂激活蛋白样结构域)和C-末端域(SAP结构域)。MANF的分泌受到内质网相关蛋白和Ca2+的调控。MANF不仅具有典型NTFs的功能,而且参与了内质网应激和炎症反应过程。

蛋白激酶B受体在大鼠脑星形胶质细胞的表达及其磷酸化

目的：研究大鼠脑星形胶质细胞蛋白激酶B受体（TrkB）的表达及其信号转导通路。方法：用生后2-3dSD大鼠,在无菌条件下取脑,制备细胞悬液,以胶质纤维酸性蛋白（GFAP）鉴定星形胶质细胞;以RT-PCR法研究星形胶质细胞TrkB、ERK1、ERK2 mRNA表达,用蛋白印迹和免疫细胞化学法研究星形胶质细胞TrkB、ERK1、ERK2蛋白表达。用蛋白印迹法检测脑源性神经营养因子（BDNF）作用后的星形胶质细胞p-TrkB。结果：星形胶质细胞的纯度达95%以上,RT-PCR结果显示星形胶质细胞表达TrkB、ERK1、ERK2 mRNA,蛋白印迹及免疫细胞化学法显示星形胶质细胞表达TrkB、ERK1、ERK2蛋白。BDNF作用1h后TrkB磷酸化,K252a可阻止TrkB磷酸化。结论：培养的大鼠星形胶质细胞表达TrkB、ERK1、ERK2;BDNF可使TrkB磷酸化,TrkB与星形胶质细胞信号转导有关。

右美托咪定对行膝关节置换术老年患者的神经、认知功能及炎性因子表达的影响

目的探讨右美托咪定对行膝关节置换术老年患者神经、认知功能及炎性因子表达的影响。方法选取2022年3月至2023年3月择期行人工单侧全膝关节置换术的老年患者120例,按随机数字表法分为A、B、C、D组,每组30例。A组予以腰硬联合麻醉,B、C、D组在腰硬联合麻醉基础上于麻醉平面固定后先给予0.50μg/kg负荷剂量右美托咪定,后分别以0.30、0.50、0.80μg/(kg·h)速度持续静脉泵注。比较4组手术前后血清炎性因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)]、脑组织损伤标志物[细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、星形胶质源性蛋白(S-100β)]水平、蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分。记录4组术后认知障碍(POCD)发生率及不良反应发生率。结果4组术后1 h、1 d、3 d血清TNF-α、IL-6、IL-10水平均较术前升高,且D组低于A、B、C组,C组低于A、B组(P<0.05)。术后1 h、1 d、3 d,4组血清S-100β、ICAM-1水平均较术前升高,且D组低于A、B、C组,C组低于A、B组(P<0.05)。术后1、3、7 d,A、B组MoCA评分均较术前降低(P<0.05);术后1、3 d,C、D组MoCA评分较术前降低(P<0.05),术后7 d C、D组均恢复至术前水平;术后1、3、7 d D组MoCA评分高于A、B、C组,且C组高于A、B组(P<0.05)。术后3 d,D组POCD发生率低于A、B组,C组POCD发生率低于A组(P<0.05);4组术后低血压、心动过缓发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论老年膝关节置换患者术中以每小时0.80μg/kg速率持续泵入右美托咪定在减轻术后炎症损伤、神经功能损伤、认知功能损伤的效果更为显著,并能保障麻醉安全性。

人胶质细胞源性神经营养因子和血管内皮生长因子165双基因真核表达载体的构建与鉴定（英文）

背景:人胶质细胞源性神经营养因子(glialcell line-derived neurotrophic factor,GDNF)和血管内皮生长因子165(vascular endothelial growth factor 165,VEGF165)在细胞分化过程中有重要作用。目的:构建双基因共表达载体pIRES2-GDNF-VEGF165并对其进行鉴定。方法:采用PCR法从人外周血单个核细胞的基因组DNA中获取人胶质细胞源性神经营养因子基因,然后将人胶质细胞源性神经营养因子的cDNA片段插入到pIRES2-EGFP多克隆位点构建成为pIRES2-GDNF-EGFP。人血管内皮生长因子165 cDNA片段是通过双PCR的方法从pIRES2-VEGF165-EGFP质粒中获取,接着将血管内皮生长因子165 cDNA片段以替换EGFP的方式插入pIRES2-BDNF-EGFP中,最后构建成为含有内部核糖体进入位点(IRES)的pIRES2-GDNF-VEGF165双基因共表达载体。通过双酶切和DNA测序方法对其鉴定,将重组的双基因共表达载体感染HEK293细胞,利用RT-PCR与Western-blot方法检测双基因的表达。结果与结论:DNA测序显示,提取的人胶质细胞源性神经营养因子和血管内皮生长因子165均与基因库报道序列一致,相对分子质量分别为636 bp和576 bp。构建的pIRES2-GDNF-VEGF165双基因共表达载体经Bgl II/Bam HI切出GDNF条带,经Bam HI/Not I双酶切后切出IRES-VEGF165片段,经Bgl II/Not I双酶切后切出GDNF-IRES-VEGF165片段。RT-PCR与Western-blot方法检测显示,此载体转染后,HEK293细胞均能表达人胶质细胞源性神经营养因子和血管内皮生长因子165 mRNA和蛋白。说明实验成功构建了能表达人胶质细胞源性神经营养因子和血管内皮生长因子165的双基因真核表达载体。

脑源性神经生长因子对缺糖缺氧小鼠伏隔核胶质纤维酸性蛋白的影响

目的探讨脑源性神经生长因子(BDNF)在缺糖缺氧复灌条件下对小鼠伏隔核(nucleus accumbens,NAc)脑区胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的影响。方法 18只小鼠随机均分为正常组(NAc脑片低糖DMEM培养基培养)、缺糖缺氧复灌组(NAc脑片EBSS培养基培养15min后复灌1h)、缺糖缺氧复灌给药组(NAc脑片EBSS培养基中加入BDNF培养15min后复灌1h)。给予相应的处理后,对GFAP蛋白表达量进行测定。结果正常组GFAP蛋白的相对表达量为0.544±0.053,缺糖缺氧复灌组GFAP蛋白的相对表达量为1.439±0.325,缺糖缺氧复灌给药组GFAP蛋白的相对表达量为0.739±0.121。与正常组相比,缺糖缺氧复灌组GFAP蛋白的相对表达量升高,差异有统计学意义(P<0.01);与缺糖缺氧复灌组相比,缺糖缺氧复灌给药组GFAP的蛋白相对表达量降低,差异有统计学意义(P<0.05);与正常组相比,缺糖缺氧复灌给药组GFAP的蛋白相对表达量升高,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 NAc脑区中的胶质纤维酸性蛋白GFAP在缺糖缺氧条件下明显升高,BDNF对星形胶质细胞起抑制作用。

星形胶质细胞影响神经干细胞突触表达的神经营养家族基因表达机制探讨

目的探讨1甲基4苯基-吡啶离子(MPP+)和星形胶质细胞对神经干细胞突触素和生长相关蛋白43(GAP 43)表达的影响,以及星形胶质细胞神经营养素家族基因表达变化,包括脑源性神经营养因子(BDNF),神经生长因子(NGF),神经营养素3(NT 3)。方法实验分为两步骤,第一步骤:PC12细胞分别经MPP+诱导不同时间点(0 h、24 h、48 h、72 h、96 h)后分为两部分,一部分应用流式细胞技术检测不同时间点PC12细胞凋亡率;另一部分与星形胶质细胞共育2 d,然后收集各组细胞和各组细胞条件培养液,应用RT PCR检测各组细胞BDNF mRNA、NGF mRNA和NT 3 mRNA表达变化;将各组细胞条件培养液对神经干细胞(NSC)进行诱导分化,免疫荧光检测神经干细胞(NSC)突触素(SYN)和GAP 43表达。结果在MPP+作用48 h时间点,PC12细胞凋亡率达高峰(P<0.05);与各组比较,与MPP+诱导48 h后的PC12细胞共育48 h后的星形胶质细胞(C3组)BDNF mRNA表达(A=93.96±4.89)明显增高(P<0.05),差异有统计学意义(P<0.05),并且C3组星形胶质细胞条件培养液诱导的神经干细胞(NSC)突触素(SYN)(A=34.09±2.69)、GAP 43(A=49.36±5.98)表达明显升高,与其他组比较,差异有统计学意义(P<0.05);NGF mRNA与各组比较差异无统计学意义(P>0.05);NT 3 mRNA在各组中均未见到表达。结论星形胶质细胞与MPP+诱导凋亡的PC12细胞共育后,星形胶质细胞BDNF基因表达明显增高,星形胶质细胞促进神经干细胞(NSC)突触素(SYN)和GAP 43表达,BDNF可能参与了这一过程。

胶质细胞系源性神经营养因子保护帕金森模型大鼠黑质多巴胺能神经元机制的研究

目的探讨胶质细胞系源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)在保护黑质多巴胺(dopamine,DA)能神经元过程中,钙结合蛋白D28K(calbindin 28K,CB)和星形胶质细胞的可能作用。方法采用大鼠右侧纹状体内注射6-羟多巴胺(6-OHDA)制备帕金森病(Parkinson disease,PD)模型。注射后第7天,根据行为学分析筛选模型鼠,将模型鼠随机分为3组:空白对照组,PBS组(右侧黑质注射PBS)和GDNF组(右侧黑质注射GDNF)。空白对照组动物分别于6-OHDA注射后第7天1、4天2、1天和28天时,PBS组和GDNF组动物分别于6-OHDA注射后第14天、21天和28天时,行黑质节段连续冠状石蜡切片,以酪氨酸羟化酶(tyrosinehydroxylase,TH)、CB和胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrous acid protein,GFAP)免疫组织化学染色,分别显示DA能神经元、含CB神经元和星形胶质细胞,光镜观察以及细胞计数,统计学处理。结果①TH免疫组织化学染色结果:6-OHDA注射后第28天,GDNF组大鼠右侧黑质TH表达阳性神经元数量显著多于空白对照组和PBS组;②CB免疫组织化学染色结果:6-OHDA注射后第7天,空白对照组大鼠右侧黑质尚可观察到CB表达阳性神经元,之后的时间点空白对照组和PBS组均观察不到,而GDNF组大鼠右册黑质处在所检测的各时间点均可观察到CB表达阳性神经元;③GFAP免疫组织化学染色结果:空白对照组在6-OHDA注射后第7天时有少量的GFAP表达阳性细胞,于注射后第14天时GFAP表达阳性细胞数达高峰,之后逐渐减少,注射后第28天时已基本检测不到;PBS组GFAP表达阳性细胞数量与空白对照组的表现一致,而GDNF组大鼠黑质在所检测的各时间点均可观察到大量反应性增生的星形胶质细胞。结论CB和(或)星形胶质细胞可能参与GDNF保护并促进PD模型大鼠黑质DA能神经元存活的过程。