生肌膏中象皮替代品对血清游离氨基酸变化的影响分析

目的:探讨以牛皮替代象皮制备的生肌膏在疮疡治疗过程中对血清游离氨基酸变化的影响。方法:采用家兔制造疮疡模型,以象皮生肌膏、牛皮生肌膏和无皮生肌膏进行分组治疗,于治疗后的第3、6、9、12、15天取血分离血清,测定血清中的游离氨基酸含量,分析用药后血清游离氨基酸的变化情况。结果:以基线血清氨基酸含量为基准,发现血清中Gly、Arg、Pro等17种氨基酸均有变化。各组氨基酸含量变化幅度明显。象皮组的各氨基酸含量始终维持在最低,而牛皮组除第3天含量高于无皮组外,其余时间点含量低于无皮组。结论:在创面修复过程中生肌膏有利于促进机体组织对血液中游离氨基酸的利用,象皮促进氨基酸在组织中沉积的效果略优于牛皮。

Knockout血清替代品可提高C57BL/6J小鼠胚胎干细胞建系效率

目的:在培养液中添加knockout血清替代品(knockout serum replacement,KSR)代替胎牛血清(FBS)用于建立C57BL/6J小鼠胚胎干细胞(ESC)细胞系,以便消除血清中的不确定因子对ESC增殖的影响。方法:以C57BL/6J小鼠3.5 d的囊胚为材料分离ESC,比较KSR和FBS用于建立小鼠ESC细胞系的效率,并通过体内、外分化验证所分离获得的小鼠ESC的发育潜能。结果:培养液中添加KSR,成功从13个小鼠囊胚中分离获得一个ESC细胞系(MES-1),体外培养传代超过20代仍保持未分化状态,核型为正常XX型,碱性磷酸酶及oct-4基因高表达,悬浮培养可以生成拟胚体,接种到裸鼠皮下可形成畸胎瘤,注射到ICR小鼠3.5 d囊胚中,ESC可以参与胚胎发育并产生嵌合体小鼠。而培养液中添加FBS的对照组未能获得超过3代的ESC细胞系。结论:在培养液中添加KSR代替FBS适合于C57BL/6J小鼠ESC的分离与培养,从而可避免实验前对所用血清的筛选。

血清及血清替代品对体外受精的影响

综述了血清及血清替代品对体外受精影响的研究进展。

壳聚糖对肉仔鸡血清中免疫细胞因子水平的影响

随着人类生活水平和健康意识的提高，食品安全问题已受到全球范围日益广泛的关注。禁止抗生素添加剂在畜牧生产中应用的呼声越来越高．研究和开发天然、绿色的抗生素替代品已成为国内外研究的热点之一。壳聚糖学名为（1，4）-2-氨基-2-脱氧-β—D葡萄糖，是甲壳素脱乙酰基的产物。

复合益生菌制剂对乳鸽生长性能、脏器指数和血清生化指标的影响

为研究复合益生菌(枯草芽孢杆菌+乳酸菌)对乳鸽生长性能、脏器指数和血清生化指标的影响,选取108对健康的白羽王鸽种鸽和216羽同一天出雏且体质量相近的1日龄健康乳鸽,随机分成对照组、复合益生菌组及抗生素组,每组6个重复,每个重复6对种鸽和12羽乳鸽。对照组饲喂基础饲粮,复合益生菌组饲喂基础饲粮+复合益生菌,抗生素组饲喂基础饲粮+抗生素。结果表明:对照组、复合益生菌组和抗生素组平均日增质量差异不显著(P>0.05);复合益生菌组心脏指数显著高于抗生素组(P<0.05),脾脏指数显著高于对照组和抗生素组(P<0.05);复合益生菌组血清总蛋白、白蛋白和球蛋白含量显著高于对照组(P<0.05),总胆固醇含量显著低于对照组和抗生素组(P<0.05),甘油三酯含量显著低于抗生素组(P<0.05)。综上所述,饲粮中添加复合益生菌提高了乳鸽的脏器指数,改善了血清生化指标,其作用优于抗生素。

无血清培养山羊内细胞团的研究

对32只关中奶山羊进行超排处理,获得胚胎263枚,其中囊胚122枚。采用机械法、酶消化法和免疫外科法分离囊胚83枚,得到内细胞团(ICM)65个。将ICM培养于小鼠胎儿成纤维细胞饲养层上,研究含血清和无血清条件下ICM的增殖规律,并比较添加不同生长因子对ICM增殖的影响。结果表明,无血清培养时,ICM细胞增殖相对较慢,分化减少;添加LIF、bFGF、两种同时添加或均不添加对原代ESC样集落形成率的影响不显著(P>0.05),但添加10 ng/mL bFGF稍微有助于ICM增殖。山羊ICM适宜于无血清培养。

用KOSR优化山羊克隆胚的培养体系

体细胞核移植重构胚的体外培养一直是影响山羊克隆效率的一个重要因素,为了排除成分复杂的胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)对克隆重构胚发育的潜在抑制作用,本研究采用成分明确的血清替代品(knockout serum replacement,KOSR)进行山羊体细胞克隆重构胚胎的体外培养,并比较KOSR与FBS对重构胚的发育效率的影响。结果显示,KOSR组山羊重构胚培养体系的分裂率明显高于FBS组(80.67±0.63%.vs 49.02±4.85%,P<0.01),2组在重构胚重编程过程中的8细胞率具有显著差异(48.89±1.92%vs.28.59±3.13%,P<0.05);2组不同培养体系的受孕率也有明显不同(33.3%vs.10%,P<0.05)。研究结果表明,KOSR培养体系能有效提高山羊重构胚的发育效率,特别是有利于重构胚的早期重编程,为获得健康的转基因克隆山羊奠定了良好的基础。

甜叶菊绿原酸对蛋雏鸡血清免疫和盲肠菌群的影响

评价不同剂量甜叶菊绿原酸对蛋雏鸡血清免疫和盲肠菌群的影响,为饲用添加剂研发提供基础参数支持。选用1日龄健康海兰蛋鸡300只,随机分为5个处理组:空白对照组、阳性对照组(1.0 g/L杜仲提取物)和试验组(0.7、2.0、4.0 g/L甜叶菊绿原酸),在7、14日龄和21日龄时分别向试验组饮水投入甜叶菊绿原酸,每日1次,连续饲喂5 d后,利用ELISA检测血清免疫指标,根据平板菌落计数法检测盲肠细菌数。结果显示:①7日龄开始投服时,绿原酸不仅促进肠道益生菌的生长,还对不同种类杆菌也有影响;蛋雏鸡血清IL-1β、IL-2也有升高趋势。②14日龄开始投服时,调节肠道菌群的效果和杜仲提取物相近;对蛋雏鸡IL-1β、IL-2的影响均不显著。③21日龄开始投服时,绿原酸可显著影响肠道菌群平衡;对蛋雏鸡IL-1β、IL-2有降低趋势。给不同日龄蛋雏鸡添加甜叶菊绿原酸,可以增强其机体免疫功能,改善盲肠菌群,其中7日龄添加2 g/L甜叶菊绿原酸的效果最明显。这预示绿原酸可以作为新型抗生素替代品用于蛋雏鸡,但其作用机制需更进一步研究。

益康XP替代抗生素对断奶仔猪生长性能和血清生化指标的影响

随着中国加入WTO和广大消费者健康意识的不断提高，抗生素类饲料添加剂对动物和人类健康造成的危害日益引起人们的关注，抗生素替代品的开发已成近年研究的热点。人们在寻求有机酸、植物制剂、酶制剂、微生态制剂、寡糖类等绿色饲料添加剂，以替代或部分替代目前广泛使用的抗生素类饲料添加剂。益康XP以纯天然植物性饲料为原料，利用发酵工艺生产细胞外代谢物，属于绿色饲料添加剂。它含有肽、有机酸、寡糖、氨基酸、增味物质和芳香物质等，能够促进动物胃肠道有益微生物的生长繁殖，提高动物消化能力，增强抗病力，提升生长速度和饲料转化效率。试验研究了益康xP对断奶仔猪生产性能及血液生化指标的影响，旨在为抗生素替代品在断奶仔猪日粮中的应用提供依据，现报道如下。

不同培养体系对绵羊类胚胎干细胞分离、传代的影响

以小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)为饲养层,研究了用Knockout血清替代品(Knockout serum replacement,KSR)代替胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ES cell)培养液中的胎牛血清(FBS)和向含KSR的基础培养液中添加40%的小鼠ES细胞条件培养液(ES cell conditioned medium,ESCCM)对绵羊类ES细胞分离、克隆效率的影响。发现使用含FBS的基础培养液最多可以把绵羊类ES细胞传至3代,而使用KSR和添加ESCCM能促进绵羊类ES细胞的分离和克隆,所获得的类ES细胞分别可稳定传至第5和8代。同时对类ES细胞进行核型分析、AKP染色及体外分化能力检测,证实所分离的类ES细胞符合ES细胞的主要特征。由此认为,与FBS相比KSR更加适于绵羊类ES细胞的分离与培养;而小鼠ES细胞在生长过程中可能分泌某些重要的细胞因子,从而达到促进绵羊ES细胞增值的作用。

功能性糖生物制备关键技术研究

功能性糖是指一大类具有甜味和特殊保健功能,能作为蔗糖替代品的碳水化合物,主要包括功能性低聚糖、功能糖醇、功能性单糖及一部分功能性多糖。功能性糖具有抗龋齿、低能量值、降低血清胆固醇、降血压、保护肠道等生理活性,是健康产业的重要原料。而利用酶或微生物催化方法生物制备功能性糖是一个广受关注的研究领域。

无bFGF条件下简便有效建立C57BL/6J小鼠胚胎干细胞系

目的:在不含bFGF的Knockout血清替代品(knockout serum replacement,KSR)的培养条件下,简便、有效地建立小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cells,ES)系。方法:以C57BL/6J小鼠3.5天囊胚为材料,改良巴氏德管机械法分离内细胞团,于加或不加碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、含KSR的ES培养基中进行培养和建系,并对建立的小鼠ES系进行鉴定,包括碱性磷酸酶、表面标记分子SSEA-1和多能性相关因子(Oct4、Sox2和Nanog)的检测,核型分析,体内外分化能力等。结果:在无bFGF的ES培养条件,成功从6个小鼠囊胚中分离和建立4株ES系;而添加10 ng/ml bFGF的ES培养条件下,3个优质囊胚未见ES样克隆出现。所建立的小鼠ES可长期传代并维持未分化状态,体内外分化能形成3个胚层结构。结论:辅以改良机械法分离内细胞团,无bFGF的KSR培养条件有助于高效建立C57BL/6J小鼠ES系。

不同注射介质对ICSI后卵子受精与胚胎发育的影响

目的探讨不同注射介质对人卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)后卵子受精与胚胎发育的影响。方法据ICSI所用的注射介质不同,分为聚乙烯吡咯烷酮(PVP)组、人血清蛋白(HAS)组、血清替代品(SPS)组。比较3组受精率、正常受精率、卵裂率、优质胚胎率以及囊胚形成情况。结果 3组间受精率、正常受精率和卵裂率差异无统计学意义(P>0.05);HSA组(39.5%)和SPS组(42.4%)优质胚胎率显著高于PVP组(22.0%)(P<0.05),HSA组和SPS组之间差异无统计学意义(P>0.05);囊胚形成:PVP组2个,HSA组4个,SPS组3个。结论 HSA和SPS可获得与PVP相似的ICSI体外受精率、卵裂率和较好质量的胚胎。