血清糖皮质激素调节蛋白激酶3过表达对乳腺癌细胞凋亡的影响

目的探讨血清糖皮质激素调节蛋白激酶3(SGK3)基因过表达对乳腺癌细胞凋亡的影响。方法构建pEGFP-N1-SGK3重组质粒,用载体质粒pEGFP-N1和重组质粒pEGFP-N1-SGK3转染乳腺癌MCF7细胞;MTT法观察转染细胞的增殖情况,流式细胞术分析细胞凋亡情况,RT-PCR检测凋亡相关基因表达。结果利用pEGFP-N1-SGK3质粒转染乳腺癌MCF7细胞,建立表达SGK3蛋白的细胞系;通过细胞增殖实验发现,SGK3的过表达可促进MCF7细胞增殖;流式细胞术分析显示,外源性SGK3可抑制MCF7细胞凋亡的发生,并影响凋亡相关基因bad、bcl-xl的表达。结论 SGK3的过表达可抑制乳腺癌MCF7细胞凋亡。

血清和糖皮质激素调节蛋白激酶2α过表达通过Wnt/β-Catenin信号通路抑制肝癌细胞株BEL7402增殖

血清和糖皮质激素调节蛋白激酶(SGK)家族参与调节生长因子和激素的信号转导.为了研究SGK家族成员SGK2α在细胞中的功能,构建了真核表达质粒pEGFP-N1-SGK2α并瞬时转染HEK293细胞,通过激光共聚焦显微镜观察发现融合蛋白SGK2α-GFP主要定位于细胞浆,免疫共沉淀实验发现SGK2α与糖原合成激酶3β(GSK3β)存在相互作用.利用PCDNA6-V5-HisB-SGK2α质粒转染肝癌BEL7402细胞,建立稳定表达SGK2α蛋白的细胞系,通过细胞增殖实验发现,SGK2α的过表达使BEL7402细胞生长速度减慢、细胞倍增时间延长.裸鼠成瘤实验发现,与对照组细胞相比表达SGK2α的BEL7402细胞在裸鼠中的成瘤能力明显降低.免疫印迹实验证实,SGK2α的过表达不影响GSK3β的表达,但却使β-catenin和Cyclin D1的表达下调.提示影响Wnt/β-catenin信号通路关键分子的表达可能是外源性SGK2α蛋白过表达抑制BEL7402细胞增殖的分子机制.

妊娠期接触糖皮质激素对子代大鼠心肌血清和糖皮质激素调节的蛋白激酶1表达和心脏功能的印迹效应

目的揭示妊娠期暴露于糖皮质激素(glucocorticoids,GCs)对子代大鼠心脏功能的印迹效应,探索GCs对子代心肌保护性因子的调节作用及其可能机制。方法构建妊娠后期GCs暴露大鼠模型,通过2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色观察子代心肌缺血再灌注损伤后的梗死程度;实时定量PCR检测心肌保护因子血清和糖皮质激素调节的蛋白激酶1(Sgk1)、促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)受体2(Crhr2)、CRH家族肽urocortin(Ucn)和Ucn2等基因的表达;蛋白质印迹分析检测SGK1蛋白的表达;亚硫酸氢盐处理后测序确定Sgk1基因启动子的甲基化水平。结果妊娠期GCs暴露大鼠子代出生时和成年后体质量减轻(P<0.01),子代雄性大鼠心肌对缺血再灌注损伤的耐受性下降(P<0.01);SGK1的mRNA和蛋白在子代雄性大鼠心肌中的表达降低(P<0.01或P<0.05);Ucn和Ucn2在子代雌性大鼠心肌中的表达下降(P<0.05);Sgk1基因启动子区域存在多个CpG岛,且近端CpG岛的甲基化水平在妊娠期GCs暴露的子代雄性大鼠心肌中升高(P<0.01)。结论妊娠期GCs暴露可能通过下调心肌保护因子SGK1的表达对子代雄性大鼠心肌功能产生印迹效应,而Sgk1基因启动子区域CpG岛的高甲基化改变可能是介导GCs对Sgk1的印迹效应的重要机制。

肝纤维化大鼠血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1的表达及坎地沙坦对其的影响

血清和糖皮质激素调节蛋白激酶（SGK）是一种与蛋白激酶B（PKB/Akt）具有极高的同源性的丝氨酸/苏氨酸（Ser/Thr）蛋白激酶。近来国外学者发现了SGK的亚型,因此最初克隆的SGK被命名为SGK1。SGK1参与了人体许多重要的生理过程,如离子通道活化、细胞增殖与凋亡等,在糖尿病肾病、肝硬化、纤维性胰腺炎、肺纤维化等疾病中SGKl的表达明显高于正常组织[1-4]。但SGKl与肝纤维化的关系尚不明确。

血清和糖皮质激素调节蛋白激酶3在乳腺癌干细胞中的表达☆

背景:最新研究显示,血清和糖皮质激素调节蛋白激酶3可能与某些肿瘤的发生有着密切关系,且对白细胞介素3撤退所诱导的乳腺癌细胞凋亡具有保护作用。另据相关报道显示,血清和糖皮质激素调节蛋白激酶3可能参与调节细胞内Wnt信号通路。目的:观察乳腺癌干细胞中血清和糖皮质激素调节蛋白激酶3及β-Catenin蛋白的表达。方法:采用双波段流式细胞分选仪从71例人乳腺癌组织中分选乳腺癌干细胞,并进行鉴定及传代培养,以30例正常乳腺组织作为对照。应用SP免疫法检测乳腺癌干细胞和正常乳腺组织中血清和糖皮质激素调节蛋白激酶3、β-Catenin蛋白的表达。结果与结论:乳腺癌干细胞中血清和糖皮质激素调节蛋白激酶3、β-Catenin的表达均显著高于正常乳腺组织(P<0.01)。二者在乳腺癌干细胞中的表达呈正相关(r=0.318,P<0.05)。说明血清和糖皮质激素调节蛋白激酶3可能通过调控Wnt/β-Catenin信号通路,参与乳腺癌的发生发展过程。

血清和糖皮质激素调节蛋白激酶对糖尿病视网膜病变的作用及研究进展

血清和糖皮质激素调节蛋白激酶-1(protein kinase regulation of serum and glucocorticoid,SGK1)是一个与丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶等第二信使具有极高同源性的蛋白激酶。它作为多种信号转导通路和细胞磷酸化的级联交汇点,参与离子通道调节、细胞增殖、存活的细胞转导。在糖尿病病人中,高糖诱导SGK1活化,SGK1使得上皮钠离子通道(Epithelial sodium channel,ENaC)的表达增加。近些年来各种研究发现ENaC表达于非上皮组织,且对糖尿病血管病变,尤其是糖尿病视网膜病变的发病将发挥一定的作用。ENaC通过肾素-血管紧张素-醛固酮系统(Renin-angiotensin-aldosterone system,RAAS系统)介导,血管内皮NO生成减少,血管功能障碍;NADPH氧化酶功能障碍,参与病理性血管的生成;在高血糖条件下SGK作用于下游转录调控因子核转录因子κB(Nuclear factorκB,NF-κB),使得其在细胞核中含量增加,上调凋亡基因的表达,周细胞的凋亡增加。

血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1在CNS疾病中的作用研究新进展

血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1(SGK1)是1993年在受糖皮质激素刺激的大鼠乳腺癌细胞中发现的一个丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。与多数蛋白激酶不同的是,血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1不仅受翻译后的磷酸化/去磷酸化调节,而且存在转录水平上的快速调节机制。它具有广泛的生理功能,如调节离子通道,介导细胞增殖、分化、存活及凋亡的信号转导等。它与帕金森病、阿尔茨海默病等多种中枢神经系统疾病密切相关,在神经元变性、凋亡过程中起着重要作用。本文将从血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1的结构、生理功能、与中枢神经系统疾病的关系及其抑制剂等方面的新进展作一综述。

血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1在食管癌组织中的表达及临床意义

目的探讨血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1(SGK1)在食管癌组织中的表达及临床意义。方法选择实施食管癌根治术患者60例,术后收集食管癌组织及癌旁组织标本,采用免疫组织化学法检测组织中SGK1的表达。结果 SGK1在食管癌组织中的阳性表达率为65.0%,高于癌旁组织中的36.7%(P<0.05)。SGK1的表达与患者的性别、年龄无关(P>0.05);与肿瘤浸润深度、分化程度、是否淋巴结转移及临床分期等相关(P<0.05,P<0.01)。结论SGK1高表达可能与食管癌的发生发展有关,可作为早期食管癌诊断及预警的重要参考。

血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1介导巨噬细胞在动脉粥样硬化过程中的作用

巨噬细胞募集于血管内皮下清除脂质是早期动脉粥样硬化的重要病理生理过程,目前越来越多的研究认为干预该过程对于缓解动脉粥样硬化进展能起到一定作用。血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1(SGK1)不仅参与调控机体代谢,且在巨噬细胞中大量表达,参与调控其募集与侵袭。SGK1能够激活小GTP蛋白Rho家族(Rho GTP),促进巨噬细胞的侵袭以及吞噬作用;同时参与磷酸肌醇3激酶(PI3K)通路以及核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)途径触发炎症反应,为动脉粥样硬化的炎症学说奠定了坚实的理论基础。深入了解SGK1在单核/巨噬细胞中的调控作用,可能为缓解动脉粥样硬化进展提供新的研究切入点,本文对SGK1介导巨噬细胞在动脉粥样硬化过程中的作用作一综述。

坎地沙坦对糖尿病肾病小鼠血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1表达的影响及意义

目的研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)Ⅰ型受体(AT1)拮抗剂坎地沙坦(candesartan)对糖尿病肾病(D iabetic nephrop-athy,DN)小鼠血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1(SGK1)表达的影响及意义。方法采用链脲佐菌素(STZ)单次腹腔注射诱导小鼠糖尿病肾病(DN)模型。将正常C57BL/6小鼠随机分成3组,每组12只:正常对照组(N组)、糖尿病肾病组(D组)、Candesartan治疗组(DC组)。治疗8 wk后取肾组织,观察肾脏病理改变;半定量RT-PCR法检测各组肾皮质SGK1及结缔组织生长因子(CTGF)mRNA的表达;W estern b lot检测各组肾皮质中SGK1及CTGF蛋白的表达。结果与N组相比,D组小鼠肾重/体重、24 h尿蛋白量,肾小球滤过率均明显增加;肾皮质中SGK1、CTGF mRNA及蛋白质的表达均明显升高。经Candesartan干预后(DC组),相应生化指标较D组有明显改善,SGK1、CTGF的表达水平较D组亦有明显下调。纤维化指标CTGF的表达与SGK1呈正相关。结论Candesartan可以延缓糖尿病肾病的肾脏纤维化过程,它对细胞内SGK1信号转导途径的抑制作用可能是其抗纤维化作用的主要环节,该作用与AngⅡ-AT1途径被阻断有关。

血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1在梗阻性肾病肾小球中的表达及姜黄素对其的影响

目的:探索在单侧输尿管梗阻(UUO)性肾病变进程中,血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1(SGK1)在肾小球中的表达变化及姜黄素对其的影响。方法:采用右侧输尿管接扎术诱导大鼠UUO模型,将54只大鼠随机分为假手术组、模型组、姜黄素组3组,每组18只。术后第3、7及14 d分别随机处死各组中的6只大鼠,检测血尿素氮(BUN)、血清肌酐(SCr)。应用免疫组化技术检测肾小球中SGK1蛋白的表达。结果:模型组大鼠肾小球中的SGK1蛋白的表达第3 d开始上调,第7 d和14 d继续升高。与模型组相比,姜黄素组BUN、SCr的改变不明显,但肾小球中的SGK1蛋白表达均显著下降。结论:随UUO肾病变发展,肾小球中SGK1持续高表达,进一步提示SGK1在梗阻性肾病的肾小球纤维化病变进程中起重要作用。姜黄素能抑制肾小球中SGK1的表达,从而抑制肾小球的纤维化。

血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶3在乳腺癌分子诊断与治疗中的意义

目的研究血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶(SGK)3过表达对乳腺癌细胞生物学行为的影响及检测SGK3与乳腺癌临床病理特征的关系。方法利用真核表达载体SGK3-pEGFP-N1瞬时转染乳腺癌MDA-MB-231细胞,细胞划痕实验和流式细胞术检测SGK3过表达对细胞周期、凋亡和迁移的影响;利用组织芯片,通过免疫组化法检测分析SGK3与乳腺癌临床病理特征的相关性。结果 SGK3过表达可促进MDA-MB-231细胞迁移(P<0. 05)、抑制细胞凋亡(P<0. 01),但对细胞周期无明显影响。SGK3在不同TNM分级、同一分级不同淋巴结转移及孕激素受体(PR)+和PR-的浸润性乳腺癌组织中的表达差异均无统计学意义(P>0. 05)。结论尽管SGK3过表达对乳腺癌恶性生物学行为有影响,且其表达与乳腺癌临床病理特征相关,但其在乳腺癌分子诊断与治疗中的意义尚需确定。

血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1在糖尿病小鼠肾皮质中的表达变化

目的探索在糖尿病(diabetes mellitus,DM)肾脏病变进程中,血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1(serumand glucocorticoid-inducible kinase 1,SGK1)在肾皮质中的表达变化。方法采用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)单次腹腔注射诱导小鼠DM模型,设DM组和正常对照(normal control,NC)组,在DM模型1、3、4、6和12周时,检测肾重指数、血糖和糖化血红蛋白(HbA1c),RT-PCR方法检测肾皮质SGK1 mRNA的表达,Western blot法检测肾皮质SGK1蛋白的表达,同时应用免疫组织化学技术检测肾皮质中肾小球的SGK1蛋白的表达。结果与NC组相比,从第1周末起到第12周末DM组小鼠肾重指数、血糖和HbA1c均显著增加;第1周末肾皮质SGK1 mRNA和蛋白以及肾小球中SGK1蛋白的表达即开始上调,到第4周末肾皮质SGK1 mRNA和蛋白表达达到顶峰,第6周至第12周仍有较高表达。结论随DM肾脏病变发展,肾皮质及肾小球中SGK1持续高表达,进一步提示它在DM肾脏病变进程中起重要作用。

血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1在高血压肾损害大鼠模型中的表达

目的探讨血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1（SGK1）在高血压肾损害大鼠模型中的表达及其意义。方法采用NG-硝基-L-精氨酸甲酯（L-NAME）诱导大鼠高血压模型，观察肾脏组织病理学改变；检测尿微量白蛋白（mAlb）、β2微球蛋白（β2-MG）和血肌酐（SCr）浓度；实时PCR法检测肾皮质sGK1 mRNA的表达；Western blot法检测肾皮质SGK1蛋白的表达。结果8周时高血压组大鼠肾脏组织可见小动脉中膜增厚，管腔缩小，肾小球和肾小管缺血样改变，伴有问质基质增生和炎症细胞浸润。尿mALB和β2-MG显著增加，SCr改变不明显。肾皮质SGK1 mRNA和蛋白表达显著上调，与对照组比较有统计学差异（P〈0．01）。结论高血压组大鼠肾皮质SGK1基因表达明显增加，提示SGK1可能在高血压肾损害的发病机制中发挥了重要作用。

血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1在肾脏中的研究现状及展望

血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1（SGK1）是Webster等在1993年用血清和糖皮质激素刺激大鼠乳房肿瘤细胞，筛选其表达产物后发现的。当细胞受血清或糖皮质激素刺激时，SGK1基因在30min内表达迅速升高5～10倍，故命名为血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶。它是一种与蛋白激酶B（PKB／AKT）等第二信使蛋白具有极高的同源性的丝氨酸和／或苏氨酸蛋白激酶。

血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶-1和缺氧在子痫前期发病作用的研究

目的:研究血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶-1(serum and glucocorticoids-inducible kinase-1,SGK1)在子痫前期胎盘组织中的分布和表达,以及缺氧对胎盘滋养细胞SGK1表达的影响。方法:选择2012年12月至2013年11月在重庆医科大学附属第二医院剖宫产分娩的50例子痫前期孕妇为研究对象,其中子痫前期轻度组25例,子痫前期重度组25例,以同期行择期性剖宫产术的25例正常孕妇为对照组。免疫组化检测SGK1在胎盘组织的分布及表达,Western blot检测SGK1在胎盘组织蛋白水平的表达。在常氧条件下(21%O2、5%CO2)和缺氧条件下(1%O2、5%CO2)培养HTR-8/SVneo滋养层细胞,Western blot检测SGK1蛋白的表达。结果:免疫组化结果表明子痫前期轻度组、重度组SGK1的蛋白表达量均较对照组明显增加(P=0.000),子痫前期重度组SGK1的蛋白表达量较子痫前期轻度组明显增加(P=0.028)。Western blot结果表明子痫前期轻度组、重度组SGK1的蛋白表达量均较对照组明显增加(P=0.000),子痫前期重度组SGK1的蛋白表达量较子痫前期轻度组明显增加(P=0.000)。Masson染色结果显示子痫前期轻度组、重度组的纤维化率均较对照组明显增加(P=0.000),子痫前期重度组纤维化率较子痫前期轻度组明显增加(P=0.000)。细胞实验部分:Western blot结果表明缺氧组SGK1的蛋白表达量较常氧组明显增加(P=0.000);缺氧组CTGF的蛋白表达量较常氧组明显增加(P=0.001)。Masson染色结果显示缺氧组纤维化率较常氧组明显增加(P=0.000)。结论:SGK1在子痫前期胎盘组织表达明显升高,提示SGK1可能在子痫前期的发病中发挥重要作用,缺氧通过刺激SGK1表达升高,参与子痫前期的发生。

血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶3与肿瘤发生发展关系的研究进展

血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶3(SGK3)是属于AGC(PKA/PKG/PKC)激酶家族的一个Ser/Thr双重特异性蛋白激酶。与其他蛋白激酶不同,SGK3不仅局限于磷酸化调节,而且还受细胞内定位调节及快速转录水平的调节,其于磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)信号通路的下游被激活后在真核生物的基因组中快速而广泛地表达,影响细胞内信号传导。正常情况下,SGK3在生物体内稳定地发挥保守性作用,但是在肿瘤中被异常调节,会导致肿瘤细胞迁移和侵袭。SGK3在多种肿瘤中异常表达,依赖PI3K/蛋白激酶B(AKT)信号通路调控肿瘤细胞进程。SGK3的激活可组成一个与Ⅰ类PI3K及AKT无关的通路hVPS34-SGK3,从而导致化疗耐药的发生。现基于国内外对SGK3的研究成果,针对SGK3的结构、作用机制及其对肝癌、乳腺癌、前列腺癌、多形性胶质母细胞瘤、肾癌和鼻咽癌等不同肿瘤发生发展过程的影响进行综述。

血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶-1与流产相关情况的研究进展

血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶-1(SGK1)是一种丝氨酸苏氨酸蛋白激酶,在哺乳动物几乎所有的组织中均能检测到。SGK1参与Na离子转运、T细胞活化、炎症抑制、脂肪细胞分化等多种临床生理和病理过程,并在其中起重要作用,并且参与胚胎种植和妊娠维持的生理过程,与不孕、流产等疾病密切相关。本文就SGK1与流产相关情况的研究进展及其临床意义予以综述。

血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1对肿瘤影响的研究进展

血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶(SGK)是一种AGC家族的丝氨酸苏氨酸蛋白激酶,包括SGK1、SGK2、SGK3三个亚型,三者中对SGK1的研究最为深入。它参与离子转运、脂肪细胞分化、免疫细胞活化、炎症等多种生理和病理过程。SGK1在多种肿瘤中过度表达,包括前列腺癌、结直肠癌、胶质母细胞瘤、乳腺癌和宫颈癌等,而在多形性胶质母细胞瘤中低表达。针对SGK1通过不同的信号通路促进肿瘤生长、转移、治疗抵抗性,本文关注SGK1在不同肿瘤中的表达情况以及其对肿瘤细胞增殖、凋亡、侵袭、转移、自噬等影响的最新研究进展并作一综述,旨在探讨新型SGK1抑制剂治疗恶性肿瘤的可行性及临床推广应用前景,以期为不同类型肿瘤的治疗提供创新性策略,从而提高肿瘤的临床疗效。

血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1对大鼠肾动脉平滑肌细胞增殖的作用及机制

目的探讨血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1（SGK1）对大鼠。肾动脉平滑肌细胞增殖的作用及其可能的分子学机制。方法组织块贴壁法原代培养的大鼠平滑肌细胞（VSMCs），将带有SGK1显性激活型突变体质粒（pIRES2-EGFP^-S422D SGK1 mutant SD）转染VSMCs，采用细胞计数，细胞流式技术、MTT比色法分析转染后平滑肌细胞增殖及细胞周期情况，应用Western Blot方法检测SGK1对细胞周期调控蛋白p27^kip1、p21^cip1、和增殖细胞核抗原（PCNA）的作用。结果SGK1能刺激平滑肌细胞增殖，使滞于G0／G1期细胞减少，周期调控蛋白p27^kip1、p21^cip1表达下降，PCNA表达升高。结论SGK1可能通过调节PCNA，p27^kip1和p21^cip1蛋白，参与细胞周期的调控，促进平滑肌细胞增殖。