血清胞苷尿苷鸟苷结合蛋白1在原发性肝癌中的表达及临床意义

目的:观察血清胞苷尿苷鸟苷结合蛋白(CUGBP)1在体检健康者、乙型肝炎(乙肝)、肝硬化及原发性肝癌患者血液中的表达差异,探讨CUGBP1在慢性肝病不同病理阶段表达水平及与原发性肝癌的相关性及诊断价值。方法:选取体检健康者32例、乙肝患者36例、肝硬化患者39例及肝癌患者43例。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测CUGBP1在受试者血清中的表达含量并绘制受试者工作特征(ROC)曲线;使用实时荧光定量(qRT)-PCR检测外周静脉血白细胞(PWBC)中CUGBP1基因相对表达含量,评价CUGBP1在原发性肝癌中的诊断意义。结果:①与体检健康者相比,乙肝、肝硬化及肝癌患者血清CUGBP1的含量明显降低,差异有统计学意义(P<0.001);肝癌患者血清CUGBP1的ROC曲线下面积(AUC)为0.6285,诊断肝癌的敏感度和特异度分别为72.1%和60.7%。②PWBC中CUGBP1基因在肝癌组中的表达水平明显低于体检健康组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:原发性肝癌患者血清CUGBP1及PWBC中CUGBP1基因的表达明显减低,提示CUGBP1可能是原发性肝癌的潜在标志物,对原发性肝癌的诊断具有一定参考价值。此外,结合其他肿瘤标志物进行联合诊断,亦具有运用于原发性肝癌早期筛查的潜在价值。

局灶性节段性肾小球硬化患儿尿转化生长因子-β1的临床意义

目的检测局灶性节段性肾小球硬化(FSGS)患儿不同程度蛋白尿中尿液转化生长因子(TGF-β1)水平，并与24h尿蛋白定量(TUP)及尿液系列微量蛋白作相关性分析，探讨TGF-β1与肾小球节段纤维化及尿系列蛋白的关系。方法应用酶联免疫吸附法(ELISA)测定55例FSGS患儿尿液、血清中的TGF--β1水平，同时测定尿液白蛋白(Alb)、视黄醇结合蛋白(RBP)、转铁蛋白(TRF)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、和N-乙酰-βD氨基葡萄糖苷酶(NAG)7种微量蛋白含量。比较FSGS中肾小球节段纤维化及蛋白尿程度不同组尿液、血清TGF-β1水平分别有无显著差异。尿TGF-β1水平与TUP、Alb、RBP、TRF、IgG、IgA、IgM、NAG有无相关性。结果．FSGS患儿中蛋白尿与大量蛋白尿组尿液、血清TGF-β1水平相比较分别有显著性差异(P<0．05)，两组尿液、血清TGF-β1均较对照组高。尿液、血清TGF-β1水平与肾小球节段纤维化程度相关。FSGS尿液TGF-β1水平与TUP(r=0．378，P<0．05)、Alb(r=0．532，P<0．01)、RBP(r=0．513，P<0．01)、NAG(r=0．436，P<0．01)呈正相关，与TRF、IgG、IgA、IgM无相关性(P>(0．05)。结论尿液TGF-β1可作为一种无创性反映肾小球节段纤维化程度、肾小管问质病变及病情活动的临床检测指标。

肾小管损害各种早期诊断指标的评价

目的 探讨肾小管损害最佳的早期诊断指标。方法 选择血清尿素、肌酐和尿常规检测均正常的3组病例和正常对照组,同时测定尿液视黄醇结合蛋白(RBP)、α1 微球蛋白(α1-MG)、β2 微球蛋白(β2- MG),N 乙酰β- D 氨基葡萄糖苷酶(NAG)、碱性磷酸酶(ALP)和微量白蛋白(mAlb),并对结果进行对比分析。结果 mAlb/RBP、mAlb/α1- MG和mAlb/β2 MG在3组病例中均显著低于对照组(P<0. 01或P<0. 05),但长期服药组要高于其他2组病例。NAG和ALP在长期服药组中显著高于对照组(P<0. 01),亦明显高于高血压无临床肾病组和糖尿病无临床肾病组(P<0. 05)。结论 在临床应用中,可选择RBP-NAG或α1-MG NAG作为肾小管损害的早期诊断指标。

反义MBD1基因片段真核表达载体的构建及鉴定

目的构建反义MBD1基因片段真核表达载体,为研究MBD1基因功能提供工具。方法根据MBD1基因cDNA序列中编码序列,设计PCR引物,在引物5′端分别添加Xba I和Kpn I 酶切位点,将PCR片段反向插入真核表达载体pcDNA3．1(+)的多克隆位点上,构建反义MBD1基因片段真核表达载体,并用PCR、酶切法和DNA测序鉴定。结果PCR鉴定得到322 bp特异性条带, 双酶切得到327 bp目的基因片段和5．4 kb载体片段,DNA测序说明插入片段序列是正确的。结论采用基因克隆技术,成功构建了反义MBD1基因片段真核表达载体,为研究MBD1基因在DNA甲基化和肿瘤发生中的功能提供了实验工具。