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大青龙汤抗病毒有效物质部位血清药化分析 被引量:5
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作者 周国威 张梦琳 《中国实用医药》 2018年第7期193-194,共2页
目的分析大青龙汤抗病毒有效物质部位血清药化。方法对给药大鼠进行大青龙汤抗病毒有效部位正丁醇萃取物灌胃,并应用高效液相色谱法(HPLC)对其中的含药血清指纹图谱进行分析、测定,同时还需要深入分析和研究空白血清与大青龙汤正丁醇萃... 目的分析大青龙汤抗病毒有效物质部位血清药化。方法对给药大鼠进行大青龙汤抗病毒有效部位正丁醇萃取物灌胃,并应用高效液相色谱法(HPLC)对其中的含药血清指纹图谱进行分析、测定,同时还需要深入分析和研究空白血清与大青龙汤正丁醇萃取物入血成分之间存在的差异。结果通过分析、对比大青龙汤正丁醇萃取物含药血清和空白血清色谱图可以看出,除去空白血清中所含指纹峰,在给药30 min后出现较多的含药血清指纹峰,且峰值都相对较高,共有45个峰,其中原型成分25个,2个指纹峰被分别指认为甘草苷与甘草酸单铵盐。结论通过分析比较大青龙汤抗病毒有效部位正丁醇萃取物入血成分以及相应的指纹图谱发现,其入血成分的指纹峰比较多,且两者还存在着大量的对应指纹峰,这表示其有效成分发挥作用主要是原型或代谢物进入到体内发挥出相应的药效,可据此深入分析该处方的抗病毒药效。 展开更多
关键词 大青龙汤 抗病毒有效物质部位 血清药化
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基于AMPK调控ACC/CPT1信号通路介导脂肪酸代谢探究化瘀祛痰方含药血清对HepG2细胞脂质沉积的影响
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作者 吕丹 金迪 +1 位作者 隋国媛 贾连群 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2024年第3期194-197,I0028,共5页
目的 观察化瘀祛痰方含药血清对HepG2细胞脂质沉积的影响,并探究其作用机制。方法 采用1 mmol/L油酸棕榈酸混合液诱导HepG2细胞24 h构建脂质沉积模型,分别给予化瘀祛痰方含药血清、AMP依赖的蛋白激酶[Adenosine 5’-monophosphate(AMP)-... 目的 观察化瘀祛痰方含药血清对HepG2细胞脂质沉积的影响,并探究其作用机制。方法 采用1 mmol/L油酸棕榈酸混合液诱导HepG2细胞24 h构建脂质沉积模型,分别给予化瘀祛痰方含药血清、AMP依赖的蛋白激酶[Adenosine 5’-monophosphate(AMP)-activated protein kinase, AMPK]抑制剂及抑制剂+中药联合干预,油红O染色观察脂质沉积情况,试剂盒检测细胞中甘油三酯(triglyceride, TG)含量,蛋白印迹法检测AMPK、p-AMPK、乙酰辅酶A羧化酶(Acetyl CoA Carboxylase, ACC)、p-ACC、肉碱棕榈酰基转移酶-1(Carnitine Palmitoyltransferase-1,CPT1)蛋白相对表达量,以及实时荧光定量法检测细胞中AMPK、ACC、CPT1 mRNA相对表达水平。结果 与模型组相比,化瘀祛痰方含药血清组细胞中脂滴数目减少、TG水平降低,细胞中p-AMPK、CPT1蛋白及CPT1 mRNA相对表达量升高,ACC、p-ACC蛋白及ACC mRNA相对表达量显著降低(P<0.01),AMPK蛋白及基因相对表达水平无明显差别(P>0.05);AMPK抑制剂组细胞中脂滴及TG含量升高,AMPK、CPT1蛋白及mRNA相对表达量降低,ACC、p-ACC蛋白及ACC mRNA相对表达量升高(P<0.05或P<0.01);与AMPK抑制剂相比,抑制剂+中药含药血清组细胞中脂滴数目减少、TG水平降低,AMPK、p-AMPK蛋白及AMPK mRNA相对表达水平无显著差异(P>0.05),ACC、p-ACC蛋白及ACC mRNA相对表达量降低、CPT1则相对表达升高(P<0.05或P<0.01)。结论 化瘀祛痰方含药血清可能通过激活AMPK使其磷酸化,并调控ACC/CPT1信号通路,抑制脂肪酸合成,促进脂肪酸氧化,从而降低HepG2细胞内的甘油三酯水平及脂质沉积。 展开更多
关键词 瘀祛痰方含血清 AMPK 磷酸 脂肪酸代谢 脂质沉积
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化瘀解毒方含药血清体外抑制A549肿瘤细胞作用及其机制 被引量:3
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作者 张俊萍 魏征 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2018年第16期3990-3993,共4页
目的研究化瘀解毒方提取物抗人肺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭的作用及机制。方法培养人肺癌A549细胞株,利用MTT法分析肿瘤细胞增殖抑制率,利用Transwell细胞培养系统检测细胞迁移、侵袭作用,采用实时荧光定量PCR法检测化瘀解毒方提取物... 目的研究化瘀解毒方提取物抗人肺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭的作用及机制。方法培养人肺癌A549细胞株,利用MTT法分析肿瘤细胞增殖抑制率,利用Transwell细胞培养系统检测细胞迁移、侵袭作用,采用实时荧光定量PCR法检测化瘀解毒方提取物对磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K),3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶(PDK)1和蛋白激酶B(Akt)mRNA的表达,进一步采用免疫印迹检测PI3K/Akt信号通路中蛋白及其磷酸化水平。结果化瘀解毒方提取物呈浓度依赖性抑制体外人肺癌A549肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭,与生理盐水组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。化瘀解毒方含药血清和阳性对照药环磷酰胺对PI3K,PDK1和Akt总蛋白水平无影响。然而,化瘀解毒方含药血清显著抑制A549细胞中Akt蛋白的磷酸化水平。结论化瘀解毒方含药血清抑制A549细胞增殖、黏附、迁移和侵袭与抑制Akt蛋白的磷酸化有关,其作用机制可能与抑制PI3K/Akt通路有关。 展开更多
关键词 瘀解毒方含血清 A549肿瘤细胞
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大鼠体内吸收的维药驱虫斑鸠菊化学成分研究 被引量:2
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作者 蔡良谟 霍仕霞 +2 位作者 高莉 彭晓明 闫明 《医药导报》 CAS 北大核心 2013年第12期1543-1545,共3页
目的在建立血清指纹图谱的基础上,研究驱虫斑鸠菊入血成分。方法高效液相色谱法建立药材及血清指纹图谱,确认入血成分;进一步采用硅胶柱层析及Sephadex LH-20凝胶柱层析分离得到入血成分。结果分离得到了4个化合物,其中3个化合物为入血... 目的在建立血清指纹图谱的基础上,研究驱虫斑鸠菊入血成分。方法高效液相色谱法建立药材及血清指纹图谱,确认入血成分;进一步采用硅胶柱层析及Sephadex LH-20凝胶柱层析分离得到入血成分。结果分离得到了4个化合物,其中3个化合物为入血原型成分,即:紫铆素、5,7,3',5'-四羟基二氢黄酮、3',4',7-三羟基黄酮。结论血清药化的方法可分析出驱虫斑鸠菊入血成分,为寻找体内作用的物质基础提供参考依据。 展开更多
关键词 驱虫斑鸠菊 血清药化 指纹图谱 学成分
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通脉颗粒活血通脉功效的指征药效成分研究 被引量:7
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作者 张颖 李丹 +4 位作者 韩笑 刘春旭 林成仁 杨秀伟 刘建勋 《世界科学技术-中医药现代化》 2015年第7期1398-1404,共7页
目的:通脉颗粒(Tongmai Granule,TM)由丹参、川芎和葛根组方而成,具有活血通脉的功效,在临床用于缺血性心脑血管疾病的治疗。本研究采用血清药化和血清药理相结合的方法,研究TM功效的物质基础。方法:大鼠单次和多次给药后采集不同时间... 目的:通脉颗粒(Tongmai Granule,TM)由丹参、川芎和葛根组方而成,具有活血通脉的功效,在临床用于缺血性心脑血管疾病的治疗。本研究采用血清药化和血清药理相结合的方法,研究TM功效的物质基础。方法:大鼠单次和多次给药后采集不同时间点的血清,采用LC-MS/MS定量分析血清中TM化学成分,以心肌细胞缺氧复氧模型评价TM含药血清的心肌保护作用,并对TM入血成分与心肌细胞活力进行相关性分析。结果:8种葛根黄酮成分、5种丹参酚酸成分和2种葛根成分均能快速吸收入血,大部分成分在5或30 min达到最高浓度,反复给药3次后的血药浓度均较单次给药明显升高;含药血清具有显著的保护心肌细胞缺氧复氧损伤的作用,并具有量效关系;其中大豆苷元(TMF1)、紫草酸(LA)、丹酚酸A(SAA)、丹参素(DSS)和迷迭香酸(RA)与心肌细胞活力最相关。结论:大豆苷元(TMF1)、紫草酸(LA)、丹酚酸A(SAA)、丹参素(DSS)和迷迭香酸(RA)可能是TM活血通脉功效的指征药效成分,血清药化/血清药理关联的研究为中药复方功效物质基础提供了确证。 展开更多
关键词 通脉颗粒 血清药化 血清 LC-MS/MS 心肌细胞缺氧复氧损伤
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高良姜血清药物化学研究 被引量:7
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作者 霍仕霞 高莉 +3 位作者 彭晓明 康雨彤 刘晓东 闫明 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期146-148,共3页
目的:研究高良姜的血清药物化学。方法:在建立高良姜高效液相指纹图谱的基础上,通过比较高良姜给药与未给药大鼠血清的HPLC指纹图谱,分析入血成分,进一步对原药材进行分离纯化,富集入血成分,进行结构鉴定。结果:有1个原型入血成分,确认... 目的:研究高良姜的血清药物化学。方法:在建立高良姜高效液相指纹图谱的基础上,通过比较高良姜给药与未给药大鼠血清的HPLC指纹图谱,分析入血成分,进一步对原药材进行分离纯化,富集入血成分,进行结构鉴定。结果:有1个原型入血成分,确认高良姜素为高良姜入血成分。结论:高良姜素可能为高良姜的直接作用物质和药效物质基础。 展开更多
关键词 高良姜 血清药化 分离纯
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化瘀解毒方含药血清通过JAK2/STAT3通路抑制人肺癌H1299细胞侵袭迁移 被引量:6
7
作者 魏征 徐立然 +3 位作者 徐江雁 张爱华 李亚峰 张俊萍 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期74-80,共7页
目的:探讨化瘀解毒方含药血清(HJRMS)对人肺癌细胞(H1299细胞)的增殖、侵袭与迁移的影响及其机制。方法:通过细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测化瘀解毒方含药血清对肺癌细胞增殖的抑制能力;利用划痕实验和Transwell小室法检测肺癌细胞... 目的:探讨化瘀解毒方含药血清(HJRMS)对人肺癌细胞(H1299细胞)的增殖、侵袭与迁移的影响及其机制。方法:通过细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测化瘀解毒方含药血清对肺癌细胞增殖的抑制能力;利用划痕实验和Transwell小室法检测肺癌细胞的侵袭与迁移作用;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测蛋白酪氨酸激酶2(JAK2),信号传导及转录激活因子3(STAT3),磷酸化JAK2(p-JAK2)和磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测JAK2,STAT3 mRNA表达水平。结果:(1)与空白组比较,1%~16%化瘀解毒方含药血清分别处理24,48 h,H1299细胞增殖能力受到显著抑制(P<0.01),并呈一定的浓度依赖性。(2)H1299细胞在经化瘀解毒方含药血清处理24 h,与空白组比较,4%,8%化瘀解毒方含药血清组细胞划痕愈合能力受到抑制(P<0.05,P<0.01)。(3)在侵袭实验和迁移实验中,与空白组比较,2%,4%,8%化瘀解毒方含药血清肺癌细胞透膜数均明显减少(P<0.05,P<0.01)。(4)Western blot显示,与空白组比较,4%,8%化瘀解毒方含药血清组均对肺癌H1299细胞中JAK2/STAT3信号通路相关蛋白(JAK2,p-JAK2,STAT3,p-STAT3)表达具有抑制作用(P<0.05,P<0.01)。(5)与空白组比较,使用8%化瘀解毒方含药血清处理肺癌H1299细胞24 h,JAK2,STAT3mRNA表达水平均下降(P<0.05)。结论:化瘀解毒方含药血清能够抑制肺癌H1299细胞的增殖、侵袭与迁移,其作用机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路有关。 展开更多
关键词 瘀解毒方含血清 肺癌 侵袭 迁移
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化瘀消癥复方靶向MAPK通路诱导滋养细胞自噬性死亡的机制研究
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作者 段凯旋 曹珊 +5 位作者 邓高丕 柴淑娟 严玉鸽 耿斯羽 聂兴源 王焱皙 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期2156-2160,共5页
目的基于MAPK通路,探讨化瘀消癥复方对输卵管妊娠滋养细胞自噬性死亡的调控机制。方法选用不同浓度的MAPK信号通路抑制剂SB202190干预滋养细胞,MTS法及免疫印迹法检测MAPK通路抑制对滋养细胞增殖、自噬的影响;联合化瘀消癥复方含药血清... 目的基于MAPK通路,探讨化瘀消癥复方对输卵管妊娠滋养细胞自噬性死亡的调控机制。方法选用不同浓度的MAPK信号通路抑制剂SB202190干预滋养细胞,MTS法及免疫印迹法检测MAPK通路抑制对滋养细胞增殖、自噬的影响;联合化瘀消癥复方含药血清干预滋养细胞,MTS法检测细胞增殖活力,免疫印迹法检测自噬、凋亡、MAPK通路相关蛋白的表达,流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果与0μmol/L SB202190比较,5、10、20μμmol/L的药效浓度均可抑制HTR-8/SVneo细胞增殖,并呈现浓度依赖性;5、10μμmol/L的SB202190可上调LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的表达,下调P62的表达(P<0.05)。化瘀消癥复方含药血清联合SB202190干预后,可显著抑制HTR-8/SVneo细胞增殖;诱导凋亡(P<0.05)。免疫印迹结果显示,联合用药组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Bax表达上调,P62、Bcl-2表达下降,p-MAPK、p-ERK蛋白表达下调(P<0.05)。结论化瘀消癥复方含药血清通过抑制MAPK通路,抑制HTR-8/Svneo细胞的活力,诱导妊娠滋养细胞自噬性死亡,发挥治疗异位妊娠的效果。 展开更多
关键词 瘀消癥复方含血清 MAPK通路 自噬性死亡 异位妊娠
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INHIBITORY EFFECT OF FLUVASTATIN ON AORTIC INTIMAL THICKENING IN NORMOCHOLESTEROLEMIC RABBITS 被引量:1
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作者 叶平 于岱承 +2 位作者 宋立功 邓新心 赵亚力 《Chinese Medical Sciences Journal》 CAS CSCD 2000年第3期140-144,共5页
The anti atherosclerotic effect of fluvastatin at doses insufficient to lower serum cholesterol on the catheter induced intimal thickening and possible mechanism were investigated in abdominal aorta of rabbits. Method... The anti atherosclerotic effect of fluvastatin at doses insufficient to lower serum cholesterol on the catheter induced intimal thickening and possible mechanism were investigated in abdominal aorta of rabbits. Methods.Fifty six rabbits were randomly divided into eight groups(n=7,each).Fluvastatin was given mixed with food at daily dose of8mg/kg starting 5 days before catheterization.Light microscope,immunohistochemistry,transmission electron microscope and RT PCR assay were applied to assess vascular smooth muscle cell (VSMC)proliferation and apoptosis, as well as oncogene expression in vascular wall. Results.At day 10 and day 15 after catheter induced denudation intima/media(I/M)thickness ratio was obviously higher, and also the percentage of PCNA positive cells and TUNEL positive cells in media was significantly higher compared with controls.The intimal hyperplasia was mostly composed of α SM actin positive cells.In rabbits given fluvastatin I/M ratio and the percentage of these positive cells significantly decreased compared with those without fluvastatin.The overexpression of proto oncogene H ras mRNA and decreased expression of anti oncogene p53 mRNA were found after vascular injury,whereas fluvastatin significantly reduced H ras mRNA and increased p53 mRNA expression. Conclusion.Proliferation of VSMC in the media and the migration to the intima can be inhibited,and apoptosis of VSMC be induced by short term use of fluvastatin after balloon catheter denudation,independent of serum lipid change.The underlying mechanism is presumably associated with the influence of fluvastatin on oncogene expression in the injured vascular wall. 展开更多
关键词 HMG CoA reductase inhibitor smooth muscle cells apoptosis
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