活血利水复方对自发性高血压大鼠转化生长因子-β1/SMAD家族蛋白信号通路介导下游结缔组织生长因子及Ⅰ、Ⅲ型胶原表达及血管重塑的影响

目的:基于转化生长因子-β1/SMAD家族蛋白信号通路探讨活血利水中药复方对自发性高血压大鼠血管重塑的保护作用及机制。方法:将自发性高血压大鼠随机分为模型组、卡托普利组、活血利水复方低剂量组、活血利水复方中剂量组、活血利水复方高剂量组,Wistar大鼠作为空白组,每组10只。给予相应药物灌胃,4周后采用酶联免疫吸附试验方法检测血清中C反应蛋白、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6的含量;采用逆转录聚合酶链反应检测大鼠主动脉组织转化生长因子-β1、结缔组织生长因子及Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA表达,并取冠状动脉组织进行马松三色染色。结果:与空白组比较,模型组血清中C反应蛋白、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6的含量显著升高(P<0.01);与模型组比较,各药物组大鼠干预后血清中C反应蛋白、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6的含量不同程度降低(P<0.01)。其中,卡托普利组和活血利水复方高剂量组上述3项指标表达最低,与其他组的差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);卡托普利组和活血利水复方高剂量组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与空白组比较,模型组大鼠主动脉转化生长因子-β1、结缔组织生长因子及Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,卡托普利组及活血利水复方低剂量组、活血利水复方中剂量组、活血利水复方高剂量组大鼠主动脉组织转化生长因子-β1、结缔组织生长因子及Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA表达不同程度降低(P<0.05或P<0.01)。结论:活血利水中药复方可通过调控转化生长因子-β1/SMAD家族蛋白信号通路及下游结缔组织生长因子及Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA表达水平,降低C反应蛋白、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6等炎症因子的表达,抑制炎症反应,从而改善高血压病炎症状态及血管重塑,其机制可能与降低转化生长因子-β1、结缔组织生长因子及Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原蛋白沉积有关。

有氧运动调节转化生长因子β/Smad通路缓解db/db糖尿病小鼠的肝脏纤维化

背景:有氧运动可抑制糖尿病小鼠肝纤维化,但具体作用机制尚未阐明。目的:基于转化生长因子β/Smad信号通路探讨有氧运动改善db/db小鼠肝纤维化的作用机制。方法:将8周龄雄性db/db小鼠和年龄匹配的m/m小鼠随机分为m/m对照组、m/m+运动组、db/db对照组、db/db+运动组,每组10只,运动组小鼠接受12周有氧运动。运动结束后检测各组小鼠空腹血糖,进行葡萄糖耐量测试和胰岛素耐量测试;摘取肝脏计算肝脏指数,摘眼球取血检测生化指标;苏木精-伊红染色、油红O染色和Masson染色观察小鼠肝组织的病理变化,免疫组化检测肝组织中转化生长因子β1、p-Smad3的表达;Western blot检测肝组织中转化生长因子β1、Smad3、p-Smad3、α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原蛋白和Ⅲ型胶原蛋白表达水平。结果与结论:①与m/m组和m/m+运动组小鼠相比,db/db组小鼠体质量、肝质量、肝脏指数、空腹血糖、三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白和肌酶水平均显著升高(P<0.01);高密度脂蛋白水平显著降低(P<0.01);转化生长因子β1、p-Smad3、α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原蛋白和Ⅲ型胶原蛋白表达水平显著升高(P<0.01);葡萄糖、胰岛素耐量测试的曲线下面积显著增加(P<0.01);肝组织病理染色显示大量炎症细胞浸润,脂滴增多,明显纤维化;②与db/db组相比,db/db+运动组小鼠体质量、肝质量、肝脏指数、空腹血糖、三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白和肌酶水平显著降低(P<0.05或P<0.01);高密度脂蛋白水平显著升高(P<0.05);转化生长因子β1、p-Smad3、α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原蛋白和Ⅲ型胶原蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01);此外,糖耐量、胰岛素耐量测试的曲线下面积明显减少(P<0.01,P<0.05),肝脏病理损伤得到明显改善;③结果表明,有氧运动有效减轻了糖尿病小鼠肝纤维化,其机制可能与调控转化生长因子β/Smad信号通路有关。

微小RNA-29b通过转化生长因子-β1/Smad信号通路在间质性肺疾病A549细胞上皮-间质转化中的作用机制研究

目的 探讨微小RNA(miR)-29b通过调控转化生长因子(TGF)-β1/Smad信号通路对间质性肺疾病(ILD)A549细胞增殖、迁移、侵袭和上皮-间质转化(EMT)的影响机制。方法 将A549细胞分为空白对照组、TGF-β1诱导组(TGF-β1)、miR-29b过表达组(TGF-β1+转染miR-29b mimic)和NC组(TGF-β1+转染miR-NC)。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-29b及TGF-β1 mRNA表达水平;采用CCK-8、划痕实验与Transwell检测细胞增殖活力、迁移和侵袭能力;采用Western blot检测TGF-β/Smad通路相关蛋白表达水平。结果 与空白对照组比较,TGF-β1诱导组和NC组miR-29b表达水平、各时间点细胞增殖抑制率下降,TGF-β1 mRNA表达水平、侵袭细胞数量、划痕愈合率、TGF-β1、p-Smad2、N-cadherin、Vimentin蛋白相对表达水平均上升;与TGF-β1诱导组和NC组比较,miR-29b过表达组miR-29b表达水平、细胞增殖抑制率均升高,TGF-β1 mRNA表达水平、侵袭细胞数量和划痕愈合率、TGF-β1、p-Smad2、N-cadherin、Vimentin蛋白相对表达水平均降低(P<0.05)。结论 miR-29b可通过调节TGF-β1/Smad信号通路阻止EMT进程而抑制A549细胞增殖、迁移、侵袭。

自体动静脉内瘘狭窄与转化生长因子-β1/Smad4信号通路的关系

目的探讨自体动静脉内瘘(AVF)狭窄与转化生长因子(TGF)-β1/Smad4信号通路的关系。方法选取2017年10月至2020年2月于贵州医科大学附属医院行AVF的60例患者为观察组,选取同期50例因外周血管疾病行血管切除的患者为对照组。比较两组患者的年龄、血钙、血磷、血红蛋白、血全段甲状旁腺激素(iPTH)、β2微球蛋白、C反应蛋白(CRP)水平、Smad4及TGF-β1蛋白水平。结果两组患者年龄、血钙、血磷、血红蛋白、血iPTH、β2微球蛋白、CRP水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。观察组Smad4蛋白表达量低于对照组,TGF-β1蛋白表达量高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论TGF-β1、Smad4在透析患者AVF狭窄组织中异常表达,并在静脉内膜增生引起瘘管狭窄的过程中发挥重要作用。

右美托咪定通过调控白细胞介素-17及转化生长因子-β1/Smad蛋白3信号通路对脂多糖诱导Ⅱ型肺泡上皮细胞损伤的影响

目的探讨右美托咪定介导白细胞介素(IL)-17对脂多糖(LPS)诱导的人Ⅱ型肺泡上皮A549细胞(以下简称“A549细胞”)炎症、增殖、迁移、上皮间质转化及转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad蛋白3(Smad3)信号通路的调控作用。方法体外培养A549细胞,将其分为对照组(不做干预)、LPS组(10.00μg/ml LPS)和实验组(10.00μg/ml LPS+1.25、2.50、5.00、10.00μg/ml右美托咪定),分别采用CCK-8试剂盒和反转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)法测定细胞活力和IL-17 mRNA表达水平以筛选右美托咪定最适实验浓度;随后将细胞分为对照组、LPS组、IL-17组、右美托咪定组和IL-17+右美托咪定组,干预24 h。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测炎症因子IL-17、IL-8和IL-6的表达水平;5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(EdU)试剂盒用来检测细胞增殖率;划痕实验用来检测细胞迁移率;蛋白免疫印迹(WB)法测定肺泡上皮间质转化(EMT)相关蛋白、TGF-β1/Smad3通路相关蛋白及IL-17蛋白表达水平。结果右美托咪定逆转了LPS对A549细胞活力的抑制作用和IL-17 mRNA表达水平的促进作用,且10.00μg/ml浓度的右美托咪定组的效果最好,因此选择10.00μg/ml右美托咪定用于后续实验。LPS组细胞中IL-17、IL-8、IL-6表达水平、细胞迁移率、N-钙黏蛋白、波形蛋白、纤维粘连蛋白(FN)、Smad3的磷酸化(p-Smad3)/Smad3、TGF-β1和IL-17蛋白表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);LPS组细胞增殖率、E-钙黏蛋白和Smad7蛋白表达水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。IL-17+右美托咪定组IL-17、IL-8、IL-6表达水平、细胞迁移率、N-钙黏蛋白、波形蛋白、FN、p-Smad3/Smad3、TGF-β1和IL-17蛋白表达水平低于LPS组,差异有统计学意义(P<0.05);IL-17+右美托咪定组细胞增殖率、E-钙黏蛋白和Smad7蛋白表达水平高于LPS组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论右美托咪定通过抑制IL-17的分泌恢复LPS诱导的人Ⅱ型肺泡上皮细胞损伤,促进LPS诱导的人Ⅱ型肺泡上皮细胞增殖并抑制其迁移和EMT进程,其作用机制与抑制TGF-β1/Smad3通路的信号转导有关。

蒲公英甾醇通过调节Wnt/β-catenin信号通路抑制转化生长因子β_(1)对肺纤维化的改善作用

目的探究肺纤维化的发病机制,并验证蒲公英甾醇(TAR)抗肺纤维化作用的有效性,特别是通过调节Wnt/β-连环蛋白信号通路(Wnt/β-catenin)和转化生长因子β_(1)(TGF-β_(1))诱导的肺泡上皮细胞表型转化(EMT)过程。方法取40只小鼠分为四组,每组各10只。A组不进行任何处理;B组腹腔注射博来霉素构建肺纤维化模型;C组肺纤维化模型使用XAV-939干预;D组肺纤维化模型使用TAR干预。同时使用Wnt3a信号蛋白处理肺成纤维细胞和肺泡上皮细胞以构建细胞模型。随后利用不同浓度的TAR进行干预,采用HE染色、Masson三色染色、Western blot、实时荧光定量PCR和酶联免疫吸附试验(ELISA)等方法,分析各组小鼠及细胞模型中相关指标的表达变化。结果B组的α1(Ⅰ)型前胶原、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、Smad家族成员3(Smad3)、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、β-连环蛋白的表达水平均高于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。B组的Smad家族成员7(Smad7)的表达水平低于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。B组的TGF-β_(1)、结缔组织生长因子(CTGF)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)表达水平均高于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。D组的上述指标均低于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论TAR能有效抑制小鼠肺纤维化模型中的纤维化标志物和炎症因子的表达,其作用可能通过调节Wnt/β-catenin信号通路和抑制TGF-β_(1)诱导的EMT过程实现。

SOX9通过转化生长因子β信号通路调节角膜内皮损伤后内皮-间质转化过程

目的探究性别决定区Y框蛋白9(sex-determining region Y-box protein 9,SOX9)是否会调控角膜内皮细胞损伤后的角膜上皮-间质转化(endothelial-to-mesenchymal transition,EndMT)过程及具体机制。方法转染小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)敲低人角膜内皮细胞B4G12中SOX9的表达,使用甲萘醌构建体外B4G12细胞损伤模型,设4个分组:si-NC组(转染siRNA-阴性对照)、si-SOX9组(转染siRNA-SOX9)、si-NC+甲萘醌组(转染siRNA-阴性对照后添加外源性甲萘醌做损伤处理)、si-SOX9+甲萘醌组(转染siRNA-SOX9后添加外源性甲萘醌做损伤处理)。通过实时荧光逆转录聚合酶链反应(real-time reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)和Western blot检测各组细胞中EndMT关键因子Snail家族转录抑制因子2(snail family transcriptional repressor 2,SNAIL2)及相关信号通路关键因子表达变化,阐明SOX9调控EndMT过程的功能和机制。结果转染siRNA-SOX9敲低细胞SOX9表达后,给予甲萘醌细胞损伤处理,观察到细胞中SNAIL2的表达会随SOX9的敲低而降低,同时观察到转化生长因子β(transforming growth factor beta,TGF-β)信号通路中SNAIL2的上游关键因子Smad2/Smad3的表达也随着SOX9的敲低而降低。结论SOX9通过TGF-β信号通路调控角膜内皮损伤后EndMT过程。

扶阳强心方对慢性心力衰竭大鼠心肌纤维化及转化生长因子-β1/Smad信号通路表达的影响

目的探讨扶阳强心方对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心肌纤维化及转化生长因子(TGF)-β1/Smad信号通路表达的影响。方法将40只大鼠随机分为模型组(M组)、西药组(X组)、扶阳强心方灌胃组(Z组)、假手术对照组(K组),每组10只。除K组外,其他3组采用腹主动脉缩窄法制作CHF大鼠模型。造模成功后,Z组、X组分别给予扶阳强心方中药、卡托普利混悬液灌胃,M组与K组给予生理盐水10 mL/kg灌胃。灌胃8周后,观察4组心肌细胞形态,并检测4组大鼠心肌收缩功能,血浆脑利钠肽(BNP)、肌酸激酶水平,心肌组织TGF-β1、Smad3和Smad7蛋白的相对表达水平。结果病理学结果显示,Z组和X组大鼠的部分心肌纤维呈波浪状,心肌细胞肿胀较M组减轻。灌胃后,与M组相比,其他3组的左心室收缩末期内径、左心室舒张末期内径均减小而左心室射血分数(LVEF)升高,血浆BNP和肌酸激酶水平降低,TGF-β1蛋白相对表达水平降低而Smad7蛋白相对表达水平升高(均P<0.05);Z组的LVEF高于X组(P<0.05),而两组间其他指标差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论扶阳强心方可抑制CHF大鼠的心肌纤维化,并可改善心肌收缩功能,其作用机制可能与调节TGF-β1/Smad信号通路的表达有关。

转化生长因子β-Smad信号转导通路在肿瘤发生中的作用

转化生长因子β(TGFβ)Smad信号转导途径在肿瘤发生机制中发挥重要作用。近年来,大量研究已经揭示了TGFβ超家族配体、受体、Smad蛋白、上游和下游调节因子及多种信号通路间的交互对话在消化系统恶性肿瘤、肺癌及其他肿瘤中的作用机制。作者比较和整理近年关于TGFβSmad信号通路及Smad4在肿瘤领域的体内外研究报道,并就此作一综述。

妇炎康联合物理因子治疗慢性盆腔炎的疗效及对微小RNA-224-3P及转化生长因子β/Smad信号通路表达的影响

目的探讨妇炎康联合物理因子治疗慢性盆腔炎(CPID)的疗效及对微小RNA(miRNA)-224-3P及转化生长因子β(TGF-β)/Smad信号通路表达的影响。方法将62例CPID患者随机分为观察组和对照组,每组31例。对照组给予诺氟沙星和甲硝唑抗感染治疗,观察组在对照组治疗方案基础上,给予妇炎康联合物理因子治疗。治疗1个疗程后,比较两组患者血清miRNA-224-3P、TGF-β1、Smad-3和Smad-7水平及治疗效果。结果治疗后,两组患者血清miRNA-224-3P、TGF-β1和Smad-3水平均较治疗前降低,Smad-7水平较治疗前升高,且观察组血清miRNA-224-3P、TGF-β1和Smad-3水平低于对照组,Smad-7水平高于对照组,观察组疗效优于对照组(均P<0.05)。结论妇炎康联合物理因子治疗CPID患者的疗效优于常规抗感染治疗,可能与其通过调节miRNA-224-3P和TGF-β/Smad信号通路表达从而抑制炎症反应有关。

转化生长因子-β／Smads信号转导通路的泛素化调节在糖尿病视网膜病变中的作用

糖尿病视网膜病变（DR）是糖尿病常见和严重的并发症之一，参与的细胞因子和调节因子众多，其发病机制一直是DR防治研究的热点。研究证实，转化生长因子-β（TGF-β）参与了DR的发生和发展，Smads蛋白则能介导TGF-β／Smads信号通路的激活，进而参与DR的病理过程，而泛素一蛋白酶体途径（UPP）中的泛素连接酶Smurf则参与了TGF-β／Smads信号通路的降解调节。目前，相关研究已经取得了较大进展，就UPP对TGF-β／Smads信号转导通路的降解调节在DR中的作用进行综述。

环状RNA 42398调控转化生长因子-β1/Smad信号通路在大鼠胆道闭锁肝纤维化中的作用机制

目的探讨环状RNA(circRNA)42398调控转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad信号通路在大鼠胆道闭锁肝纤维化中的作用机制。方法取大鼠肝星状细胞株HSC-T6构建慢病毒稳定感染的细胞系,根据转染RNA的不同将细胞分为阴性对照组、circRNA过表达组和circRNA敲低组。阴性对照组细胞转染阴性对照序列,circRNA过表达组细胞转染circRNA过表达序列,circRNA敲低组细胞转染circRNA低表达序列。应用细胞计数试剂盒-8检测各组细胞活性,采用实量定量聚合酶链式反应检测各组细胞中TGF-β1、Smad2和Smad3 mRNA的表达,采用Western blot法检测各组细胞中TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白的表达。结果各组细胞活性比较差异均无统计学意义(P>0.05)。circRNA过表达组与阴性对照组细胞中TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA和蛋白的相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。circRNA敲低组细胞中TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA和蛋白的相对表达量均显著高于阴性对照组(P<0.05)。结论在大鼠细胞水平,circRNA 42398可通过调控TGF-β1/Smad信号通路而抑制肝星状细胞活化,从而抑制胆道闭锁肝纤维化,这为胆道闭锁肝纤维化的治疗和预防提供了依据。

转化生长因子-β-Smad信号通路在腭发育中的作用

腭发育过程的信号调节复杂,转化生长因子(TGF)-β家族在其中起重要作用。TGF-β-Smad通路是TGF-β信号调控的重要途径。下面就TGF-β家族在腭发育中的表达情况、其信号通路TGF-β-Smad的具体途径以及与腭裂发生的关系进行综述。

益消方经转化生长因子β1信号通路干预糖尿病合并脂肪肝的实验研究

目的:探索益消方对糖尿病合并脂肪肝的影响和作用机制。方法:观察组为12周龄雄性自发糖尿病(KKAy)小鼠,按照随机数字表法随机分为模型组、中药组(益消方干预)、西药组(氯沙坦干预);对照组为同周龄雄性近交系(C57BL/6J)小鼠。干预周期为12周。观察干预前后血糖、血脂-、肝功能变化,肝脏组织进行病理染色,检测肝脏组织转化生长因子β_(1)(TGF-β_(1))信号通路蛋白和信使核糖核酸(mRNA)的变化。结果:与模型组比较,益消方干预8周体质量、肝重指数显著降低(P<0.05,P<0.01),干预第4、8、12周空腹血糖显著降低(P<0.01),干预8周胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、谷丙转氨酶水平降低(P<0.05,P<0.01)。病理形态方面益消方干预4周脂肪变性评分下降(P<0.05)。益消方干预12周后,TGF-β_(1)及其信号蛋白、mRNA的表达均显著下调(P<0.05,P<0.01)。结论:益消方可显著改善KKAy小鼠的肥胖和糖脂代谢紊乱,调节TGF-β_(1)信号通路蛋白和基因表达,减轻肝脏脂肪变性。

转化生长因子β-Smad信号通路与肝纤维化

肝纤维化是慢性肝损伤向肝硬化进展过程中的一个关键阶段,是一种可逆的过程,其形成是由于肝内多种细胞分泌的细胞因子和炎性介质综合作用于肝星状细胞（Hepatic stellate cell,HSC）,激活HSC致使细胞外基质（extracellular matrix,ECM）各成分合成增多而在肝内过度沉积引起的。

LPS刺激对断奶仔猪肝脏形态、功能及转化生长因子β1/Smads通路的影响

本试验旨在研究脂多糖(LPS)刺激后对断奶仔猪肝脏形态、功能和转化生长因子β1(TGF-β1)以及Smads通路的影响。选取18头21日龄、体重(7.09±0.9)kg杜×长×大断奶仔猪,随机分成3个处理,每个处理6头猪。预饲14 d后,腹膜注射100μg/kg BW的LPS,分别在注射前(0 h)、注射4 h和24 h后屠宰仔猪,取血浆和肝脏样品待测。结果表明:HE切片显示,与对照组(0 h)相比,LPS刺激4 h后肝细胞损伤严重,有明显炎性细胞浸润,出现大量坏死且细胞核溶解固缩。LPS刺激24 h后肝细胞核溶解固缩,较刺激4 h后损伤有所缓解。与对照组(0 h)相比,LPS刺激4 h后血浆中谷草转氨酶(AST)、谷草转氨酶和谷丙转氨酶比值(AST/ALT)、碱性磷酸酶(AKP)活性升高(P<0.001),LPS刺激24 h后血浆中AST、AST/ALT活性升高(P<0.001),AKP活性降低(P<0.05),ALT活性均无显著变化。肝脏中TGF-β1基因表达在刺激4 h和24 h后均升高(P<0.05);TGF-βR2在LPS刺激4 h后下降(P<0.001);Smad3在LPS刺激4h后下降(P<0.05);Smad4在LPS刺激4h后有上升趋势(P<0.10)。由此可见,在LPS刺激后仔猪肝脏受损,TGF-β1/Smads信号通路被迅速激活参与肝脏的损伤修复。

转化生长因子-β_1介导的Smads和MAPKs信号通路在糖尿病肾病中的作用及其抑制剂研究进展

转化生长因子-β1(TGF-β1)参与糖尿病肾病(DN)的进程,现已作为临床慢性肾病进展的重要生物学标志物和治疗靶标。TGF-β1通过Smads和MAPKs信号通路促进肾脏纤维化、细胞外基质集聚以及足细胞损伤等。糖尿病实验动物、糖尿病肾病患者Smad3、p38MAPK表达增加,促进了肾脏的纤维化,Smad7抑制肾脏纤维化的进程,对TGF-β1/Smads通路起着负向调控作用。抑制p38MAPK信号通路可减少纤维粘连蛋白(FN)的表达。由于毒副作用等原因,TGF-β1抑制剂大多停留在临床前研究阶段。

姜黄素对急性肺损伤大鼠肺组织转化生长因子-β_1/Smads信号通路的影响

目的探讨姜黄素在大鼠急性肺损伤中早期应用对转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smads信号通路的影响。方法健康雄性Sprague Dawley大鼠36只,随机分为空白对照组、模型组和姜黄素组,每组12只。采用博来霉素气管内一次性滴注给药建立模型,造模第2天开始姜黄素组大鼠给予100 mg·kg-1·d-1姜黄素灌胃,模型组和空白对照组大鼠以等体积生理盐水灌胃,用药第3、7天分批将大鼠处死,采集肺组织标本,采用免疫组织化学法观察肺组织TGF-β1以及胞内信号转导蛋白Smads(Smad2/3、7)的表达变化。结果空白对照组大鼠第3、7天时肺组织结构未见异常。模型组大鼠第3天肺组织以肺泡急性炎症为主,毛细血管充血扩张,肺泡腔内可见大量炎性渗出;第7天部分肺泡间隔增厚,管壁增厚,肺泡间隔及肺泡腔内炎性细胞浸润增多,较第3天严重。姜黄素组大鼠第3、7天肺组织部分细支气管及肺泡腔内可见少量散在分布炎性细胞,与同期模型组比较炎症和损伤程度均有所减轻。模型组大鼠肺组织中TGF-β1、Smad2/3蛋白的表达水平与空白对照组比较均显著升高(P<0.01),姜黄素组大鼠肺组织TGF-β1、Smad2/3表达较模型组显著降低(P<0.01)。模型组和姜黄素组大鼠肺组织Smad7表达水平与空白对照组比较均显著降低(P<0.01,P<0.05),且姜黄素组显著高于模型组(P<0.01)。结论姜黄素对大鼠急性肺损伤的早期干预和治疗可能是通过下调Smad2/3蛋白和上调Smad7蛋白,进而影响TGF-β1/Smads信号通路。

大鼠正畸牙移动过程中转化生长因子-β/Smad信号通路相关蛋白质在Malassez上皮剩余细胞的表达变化

目的通过检测大鼠正畸牙移动过程中转化生长因子(TGF)-β/Smad信号通路相关蛋白质在Malassez上皮剩余细胞(ERM)中的表达情况以及ERM的功能变化,探讨TGF-β/Smad信号通路调控ERM参与正畸牙移动的作用机制。方法 30只雄性8周龄健康Sprague-Dawley(SD)大鼠,在上颌右侧第一磨牙与切牙间安装镍钛拉簧,加载50 g力,作为实验组,上颌左侧作为对照组。于加力前以及加力后1、4、7、10、14 d处死大鼠,取下双侧包括上颌第一磨牙及周围牙槽骨在内的组织块,采用免疫组织化学染色方法,通过Image-Pro plus图像分析系统软件对实验组和对照组切片进行分析,在同一光强度下测量染色阳性信号的积分光密度(IOD),观察ERM表达的TGF-β1、Smad2、Smad3、增殖细胞核抗原(PCNA)的IOD值表达变化,并且比较实验组和对照组第一磨牙牙颈部和根分叉区ERM数量以及ERM集群表面积变化。所有数据使用SPSS 17.0软件进行t检验和秩和检验统计分析。结果加力1 d后,TGF-β1、Smad2、Smad3免疫组织化学染色阳性增强,7 d后达到高峰,随后呈下降趋势;加力1、4、7、10、14 d组,TGF-β1、Smad2、Smad3的IOD值与对照组比较差异有统计学意义。加力4 d后,PCNA免疫组织化学染色阳性增强,加力7 d后明显增强,在第10 d达到高峰,随后呈下降趋势;加力4、7、10、14 d组,PCNA的IOD值与对照组比较差异有统计学意义。加力4、7、10、14 d组,ERM数量和ERM集群表面积与对照组比较差异有统计学意义。结论在力学刺激的作用下,ERM的数量增多,ERM集群表面积也增大,TGF-β/Smad信号通路相关分子TGF-β1、Smad2、Smad3在ERM内表达,并且随加力时间的增加而呈现趋势性变化,表明ERM在机械力作用下通过TGF-β/Smad信号通路来调控其在正畸牙移动过程中的作用。

大蒜素通过转化生长因子-β1/Smads信号通路减轻糖尿病大鼠心肌损伤的研究

目的 探讨大蒜素对糖尿病大鼠心肌损伤的影响及其可能的作用机制。方法 将60只实验用SD大鼠随机数字表法分为对照组、模型组、二甲双胍组和大蒜素低、中、高剂量组。对照组大鼠常规饲养,其余各组采用高糖高脂饲料喂养加腹腔注射链尿佐菌素的方法建立糖尿病大鼠模型。造模完成后,各组均1次/d灌胃给药。4周后,血糖仪测定空腹血糖(FBG)水平;生化分析法检测谷草转氨酶(AST)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白I(cTnI)水平;超声心动图检测左心室舒张末期内径(LVIDd)、左心室收缩末期内径(LVIDs)、射血分数(EF)、每搏输出量(SV);苏木精-尹红(HE)染色法观察心肌组织病理学改变,天狼猩红染色观察心肌组织纤维化状况并计算胶原容积分数(CVF),免疫蛋白印迹(Western blotting)法检测心肌组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、磷酸化Smad同源物2/3(p-Smad 2/3)、Smad同源物7(Smad 7)、胶原蛋白Ⅰ(CollagenⅠ)、胶原蛋白Ⅲ(Collagen Ⅲ)表达。结果 与对照组比较,模型组大鼠FBG水平和AST、CK-MB、cTnI水平显著升高(P <0.05),LVIDd、LVIDs显著升高而EF、SV显著降低(P <0.05);心肌组织呈现心肌纤维断裂、排列紊乱,大量炎性细胞浸润等病理学改变,心肌间质胶原纤维明显增多,CVF显著升高(P <0.05);心肌组织TGF-β1、p-Smad 2/3、CollagenⅠ、Collagen Ⅲ表达显著上调而Smad 7表达显著下调(P <0.05)。与模型组比较,大蒜素中、高剂量组和二甲双胍组大鼠FBG水平和AST、CK-MB、cTnI水平显著降低(P <0.05);LVIDd、LVIDs显著降低且EF、SV显著升高(P <0.05);心肌组织病理学改变和纤维化状况均明显改善,CVF显著降低(P <0.05);心肌组织TGF-β1、p-Smad 2/3、CollagenⅠ、Collagen Ⅲ表达显著下调且Smad 7表达显著上调(P <0.05)。与二甲双胍组比较,大蒜素高剂量组大鼠AST、CK-MB水平显著降低(P <0.05);LVIDd、LVIDs显著降低且EF、SV显著升高(P <0.05);其心肌纤维排列整齐,细胞形态正常,CVF显著降低(P <0.05);心肌组织TGF-β1、p-Smad2/3、CollagenⅠ、Collagen Ⅲ表达显著下调(P <0.05)。结论 大蒜素对糖尿病大鼠心肌损伤具有抑制作用,机制可能与通过直接或间接调控TGF-β1/Smads信号通路而抑制心肌纤维化有关。