电泳法检测肝和血清中醇脱氢酶同工酶

目的:建立琼脂糖凝胶电泳法检测人血清醇脱氢酶(alcoholdehydrogenase isoenzymes ADH EC 1.1.1.1)同工酶。方法:采用自制琼脂糖凝胶板,摸索实验条件,在pH8.6,74mmol/L巴比妥电泳缓冲系统中进行20mA、20min电泳,可清晰地分离出ADH同工酶三条区带。结果:检测了67例患者血清ADH总活性0.013-0.021Kat/L,同工酶ADHⅠ占ADH总活性0.0l-0.30,ADHⅡ占ADH总活性0.12-0.31,ADHⅢ占ADH总活性0.39-0.80。检测了10例人健康肝组织匀浆的ADH总活性为0.136-0.196Kat/L,同工酶ADHⅠ占总活性的0.07-0.25,同工酶ADHⅡ占总活性的0.19-0.27和同工酶ADHⅢ占总活性0.56-0.73。结论:正常人血清中ADH酶活性很低,为0-1.8×10^(-3)Kat/L,其同工酶不易被检测出。而肝脏组织中含有大量ADH酶活性,当肝脏受到严重损伤时,ADH即从肝细胞内逸出,进入血液,使血清中ADH酶活性明显升高,同时通过琼脂糖电泳对其同工酶的检测可测出三条区带,帮助临床进一步了解肝细胞损伤程度,对患者预后和病程的监测具有一定的临床意义。