血清AMA-M2亚型、调节性T细胞与IL在PBC患者中的表达及临床意义

目的 研究原发性胆汁性肝硬化（PBC）患者血清抗线粒体抗体亚型M2（autimitochondria antibody typeⅡ,AMA-M2）、调节性T细胞和相关白介素（IL）的表达及相关性,以探讨其诊断价值.方法 分别收集PBC确诊患者组（42例）、疾病对照组（36例）和健康对照组（50例）的血清样本,采用免疫印迹法检测AMA-M2;流式细胞术检测CD4±CD25＋调节性T细胞和CD4＋、CD8＋、CD4＋、CD8＋水平;IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10采用ELISA定量方法测定.结果 PBC组、健康对照组和疾病对照组AMA-M2阳性率差异有统计学意义（P＜0.05）.与AMA-M2阴性组比较,阳性组CD4＋、CD4＋/CD8＋分别增加11.57％和72.79％,CD4＋CD25＋、CD8＋水平分别降低61.50％和35.97％,IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10分别升高189.65％、24.29％、2184.54％、230.33％和1281.37％,且差异均有统计学意义（P＜0.05）;但与弱阳性组相比,阳性组血清中只有CD4＋、CD8＋、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 PBC患者免疫功能异常与IL-2、IL-6、IL-8、IL-10高水平表达相关,血清AMA-M2阳性检测、外周血调节性T细胞比例及细胞因子浓度的检测可为临床诊断PBC提供依据.

2009～2013年广西H1N1和H3N2亚型猪流感病毒血清学调查

摘要：【目的】了解广西H1N1和H3N2亚型猪流感病毒（SIV）的存在形势及其流行规律，为下一步有效监测和防控猪流感（SI）提供理论依据和原始溯源。【方法】对2009～2013年于广西11个地级市的屠宰场、规模化养猪场和个体养殖户采集的1170份猪血清进行血凝抑制（Hr）试验检测，统计欧洲禽源H1N1（EA．H1N1）亚型和新型人源重组H3N2（Hu．H3N2）亚型4株毒株（LB144和BB2、NNXD和JGB4）的抗体阳性率，并分析H1N1和H3N2亚型毒株的存在形势及其流行规律。【结果】2009-2013年，EA．H1N1亚型LB144毒株的平均抗体阳性率高达20．68％，且保持稳定，是广西地区主要的流行毒株；Hu．H3N2亚型JGB4毒株从2010年开始流行，且呈逐渐蔓延的趋势，平均抗体阳性率为19．96％。广西北海、南宁、玉林、贺州、桂林、贵港和柳州市受到EA—H1N1和Hu—H3N2亚型毒株多重感染，且感染程度较严重；百色、河池和防城港市的感染程度相对较低。育肥猪最易感染SIV，尤其是BB2和JGB4毒株，其抗体阳性率分别达66．00％和40．00％。EA—H1N1亚型毒株间的交叉感染阳性率（21．52％）略低于Hu—H3N2亚型毒株间的交叉感染阳性率（27．45％），而两株不同亚型毒株交叉感染时以BB2与JGB4毒株的交叉感染阳性率最高（16．23％），3株交叉感染时以BB2、NNXD和JGB4毒株间的交叉感染阳性率最高（11．60％），4株同时交叉感染阳性率也有6．96％。【结论】广西猪群已普遍存在EA-H1N1和Hu．H3N2亚型毒株混合感染的现象，尤其是地处两省边界上的地级市感染更严重，并以育肥猪和保育猪较易感。因此在sI防控工作中，除做好哺乳仔猪和种猪的日常管理外，还应减少保育猪的外来应激，适当调整育肥猪的饲养密度，以减少新型SIV重组毒株的产生。

广西猪流感病毒H1N2亚型的血清学调查

【目的】了解广西猪群中猪流感(SI)的流行情况,为科学防控广西SI提供参考依据。【方法】以猪流感病毒(SIV)H1N2亚型毒株为抗原,采用微量血凝抑制试验(HI)方法,对2009年7月～2011年3月在广西12个市采集的997份猪血清进行SIV的血清学调查。【结果】2009年的H1N2亚型抗体阳性率为33.4%,比2010年和2011年1～3月的高;广西各市的H1N2亚型抗体阳性率为0～83.1%,其中河池和百色两市的H1N2亚型抗体阳性率较高,分别为83.1%和51.1%,崇左市为零,其他市的H1N2亚型抗体阳性为4.0%～32.1%。【结论】广西地区猪群在2009～2011年均受到猪源H1N2亚型不同程度的感染。

3种方法纯化兔抗H9N2亚型禽流感病毒血清的比较

本试验分别用蛋白G亲和层析法、饱和硫酸铵法和辛酸-硫酸铵法纯化兔抗H9N2亚型禽流感病毒血清,发现蛋白G亲和层析法纯化得到的抗体纯度最高,回收率较低,抗体活性未变,操作简便,但成本较高,适合实验室研究及小量样品的纯化;饱和硫酸铵法纯化得到的抗体纯度较蛋白G亲和层析法低一些,抗体活性不变,可通过多次盐析来提高抗体纯度,多作为蛋白G亲和层析法纯化前的初步纯化;辛酸-硫酸铵法纯化得到的抗体纯度不及前两种方法,回收率较高,抗体活性亦无改变,纯化时对pH的精确性和辛酸的浓度要求较高,多用于样品的粗提和单抗的纯化。

H9N2亚型禽流感病毒HA基因的表达及其单因子血清的制备

为了制备特异性识别H9N2亚型禽流感病毒(AIV)的单因子血清,本试验提取H9N2亚型AIV RNA,RT-PCR后,分别扩增上段HA1、中段HA2和下段HA3 3段基因。将他们插入原核表达载体pET-32a(+)中,转化BL21(Rosetta)菌株中表达。将表达的蛋白常规免疫昆明白小鼠,以制备抗血清。结果显示,成功获得3段重组融合蛋白,且均具有良好的免疫原性。间接免疫荧光试验(IFA)结果显示,上段HA1、中段HA2制备的单因子血清均可与H9N2亚型AIV反应,而下段HA3则不能。重组马立克氏病病毒(MDV)MZC12 HA/NA同样证明HA1、HA2两段制备的单因子血清能识别HA基因的表达。本试验成功制备了识别H9N2亚型AIV HA的单因子血清,为H9N2亚型AIV的鉴别诊断及研究奠定了基础。

1例AB_2亚型血清含抗-B_1的鉴定与输血

ABO抗原的血型变异较多,A抗原中主要为A_1、A_2,其它A亚型少见,B亚型比A亚型少。1990年10月笔者在交叉配血中发现1例红细胞上具有正常A抗原及B_2抗原、血清中存在抗B_1抗体,现报告如下。 患儿 男,8个月,临床诊断为先天性法鲁氏四联症,入我院准备手术。原定血型为A型,术前备血。

特发性膜性肾病患者血清抗PLA2R抗体及肾组织IgG亚型分布的相关性研究

目的:探讨特发性膜性肾病(IMN)患者血清抗PLA2R抗体与肾组织IgG亚型分布的相关性。方法:收集57例特发性膜性肾病患者的临床资料,检测血清抗PLA2R抗体与肾组织IgG亚型表达情况。结果:57例IMN患者抗PLA2R抗体阳性率为91.0%,肾组织IgG4表达阳性率最高为98.2%(56/100);血清抗PLA2R抗体阴性患者肾组织IgG亚型标达率依次为IgG4、IgG1、IgG2、IgG3;血清抗PLA2R抗体阳性与阴性患者的肾组织IgG各亚型表达阳性率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:IMN患者无论血清抗PLA2R抗体阳性与否,其肾组织IgG4和IgG1均具有较高的阳性表达率,提示肾组织IgG4和IgG1亚型表达可以作为血清抗PLA2R抗体阴性患者诊断IMN的依据之一,此外血清抗PLA2R抗体表达与否对IgG亚型无明显相关性。

不同亚型精神分裂症患者的认知损害与精神症状及血清IL-2水平的关系

目的 探讨不同亚型精神分裂症患者认知功能损害与精神症状及血清白介素 - 2 (IL - 2 )水平之间的关系。方法 对 94例精神分裂症患者进行测验 ,评定其认知功能 ,即采用PANSS量表评定阴、阳性症状及分型 ,以数字划销测验 (CT)、修订韦氏成人记忆量表 (WMS -RC)、威斯康星卡片分类测验 (WCST) ,并用酶联免疫吸附法 (ELISA)测定血清IL - 2水平 ,比较认知功能损害与精神症状和血清IL - 2水平之间的差异。结果 阴性亚型、混合型的认知损害程度较阳性亚型重 ;各亚型中认知损害主要与阴性症状相关 ,与阳性症状无关 ;各亚型间血清IL- 2水平差异不显著 ;血清IL - 2水平与认知损害有关 ,但各亚型不同。结论 认知损害与精神症状及血清IL - 2水平之间的关系各亚型间存在差异。

2015～2017年东莞市H 3N 2亚型猪流感血清学调查

为了解本地养猪场H3N2亚型猪流感的流行情况,2015~2017年,在东莞市本地养殖场采集了873份猪血清,采用酶联免疫吸附试验方法检测H3N2亚型猪流感抗体,结果为H3N2亚型猪流感抗体阳性501份,抗体阳性率为57.39%,其中2015~2017年的抗体阳性率分别为24.20%、66.21%、69.66%,抗体阳性率呈上升的趋势。结果表明,东莞市本地养猪场存在H3N2亚型猪流感的流行,2015~2017年抗体阳性率的上升趋势可能与近年来东莞市人流行的H3亚型甲型流感有相关性。

遵义地区H3N2亚型犬流感病毒血清学调查

为了解遵义地区H3N2亚型犬流感病毒(Canine influenza virus,CIV)感染情况,本研究采用酶联免疫吸附试验对遵义市区及周边农村收集的320份血清样本进行了抗体检测。结果显示,遵义地区H3N2亚型CIV抗体整体阳性率为8.44%(27/320);农村田园犬抗体阳性率(9.24%)高于市区宠物犬(7.96%),但差异不具有显著统计学意义(P>0.05);雄性犬的抗体阳性率(8.79%)高于雌性(7.97%),差异不显著,不具有统计学意义(P>0.05);1~3岁的青年犬抗体阳性率最高(9.63%),其次为幼犬(8.62%),3岁以上犬最低(6.25%),差异不显著,不具有统计学意义(P>0.05)。结果表明,遵义地区存在H3N2亚型犬流感病毒感染,相关部门应加强防范。

传染性法氏囊病病毒VP2高表达毒株血清型分析与免疫试验

对 2个传染性法氏囊病病毒 (IBDV) VP2高表达毒株 0 0 ZB和 99TA3的血清亚型进行了分析 ,交叉中和试验表明 ,它们属不同的血清亚型。用这 2个毒株分别制备灭活疫苗进行免疫试验 ,试验保护率为 10 0 %,显示出良好的免疫效力。

抗线粒体抗体M2亚型及生化检查在原发性胆汁性肝硬化诊断中的应用价值

原发性胆汁性肝硬化（PBC）是一种原因未明的慢性胆汁淤积性自身免疫性肝病，常伴有免疫学异常，其中最重要的特征是90％以上的患者血清抗线粒体抗体阳性，尤以M2亚型对PBC诊断最具特异性，在疾病早期即可出现，是PBC最重要的诊断依据。

H9N2亚型禽流感病毒株的分离和鉴定

用非免疫鸡胚从病死鸡的脑组织中分离到禽流感病毒。此病毒能凝集鸡红细胞,而且这种凝集可以被特异性抗血清所抑制。通过对分离株进行血清学试验、最小致死量致死鸡胚平均死亡时间测定、鸡致病力试验、回归试验,证明该分离株为H9N2亚型禽流感病毒。

H9N2亚型禽流感病毒RT-PCR鉴定方法的应用

为了对H9N2亚型禽流感病毒(AIV)进行快速鉴定,试验根据H9N2亚型禽流感病毒的HA和NA基因分别设计引物,初步建立H9N2亚型禽流感病毒的RT-PCR检测方法;同时为了检验该检测方法的可靠性,对送检的264份疑似禽流感病鸡的病料进行处理,接种SPF鸡胚,分别采用RTPCR和血清学试验两种方法检测收集的尿囊液。结果表明:两种方法均检出有14个样品为H9N2亚型禽流感病毒阳性,符合率达100%。说明建立的RT-PCR检测方法可用于鉴定H9N2亚型禽流感病毒。

抗线粒体抗体M2亚型在诊断原发性胆汁性肝硬化中的意义

目的：研究抗线粒体抗体M2亚型（antimitochodrial antibody M2 subtype,AMA-M2)与其它自身抗体对于诊断原发性胆汁性肝硬化（primary biliary cirrhosis,PBC)的意义。方法：选取30名健康献血者和79名门诊及住院病人，其中慢性肝炎50例，肝炎肝硬化17例，PBC12例。用ELISA法定量检测AMA－M2，间接荧光法检测抗线粒体抗体(antimitochodrial antibody,AMA)、抗核抗体（anti-nuclear antibody,ANA)、抗心肌抗体（anti-heart antibody,AHA)，抗胃壁细胞抗体（anti-parietal cell antibody,APCA)。结果：PBC组病人的AMA－M2显著高于正常组、慢性肝炎、肝炎肝硬化组病人（147．0±95．8比1．0±1．6，4．0±13．6，0．5±1．0，P＜0．001），但与病情严重程度没有显著关系。AMA－M2、AMA和ANA对诊断PBC的敏感性和特异性均高，但AMA－M2在三者中最好（敏感性为100％，特异性为80％）。结论ELISA（Enzyme-Linsed immunosorbent assay)法检测AMA－M2是诊断PBC的敏感、特异、简便的临床指标。

新城疫-H9N2亚型禽流感嵌合型病毒样颗粒免疫效果分析

为了测定新城疫-H9N2亚型禽流感嵌合型病毒样颗粒(ND-H9N2 VLPs)作为疫苗候选株的免疫效果,试验将ND-H9N2 VLPs联合铝佐剂制成ND-H9N2 VLPs疫苗,测定ND-H9N2 VLPs疫苗的最小免疫剂量及一次超剂量接种的安全性。选取7日龄非免疫雏鸡30只,随机分为3组,每组10只。第1组为ND-H9N2 VLPs联合佐剂免疫组,以350μL/只的剂量进行皮下注射免疫;第2组为商品疫苗组[鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗(La Sota株+F株)]依照商品说明书进行免疫;第3组为阴性对照组,以相同方式注射同等剂量的生理盐水;初免两周后,以同等剂量和免疫方式进行加强免疫,加强免疫3周后,所有鸡用新城疫强毒TY-1株和H9N2亚型禽流感病毒SX-1株进行滴鼻、点眼攻毒,每周定时进行鸡翅下静脉采血,分离血清,用血凝抑制试验测定每只鸡的抗体效价,攻毒后连续14 d每天定时观察各组鸡群的临床症状,统计死亡数,计算免疫保护率。结果表明:ND-H9N2 VLPs疫苗的最小免疫剂量为30μg蛋白/只,用此疫苗以5倍剂量进行免疫,免疫鸡未出现新城疫、禽流感临床症状,表明此疫苗安全性良好。ND-H9N2 VLPs联合铝佐剂免疫组与商品疫苗组比,两组鸡在临床症状和存活率上表现一致,在抵抗当前流行毒株的感染时,都能够提供100%保护作用;两组鸡免疫后新城疫和H9亚型禽流感抗体效价都是在第5周达到峰值,之后缓慢下降,但是ND-H9N2 VLPs联合铝佐剂疫苗免疫组鸡的血清抗体效价与商品疫苗比要相对高些。说明本试验研制的ND-H9N2 VLPs作为疫苗候选株具有很大的防控优势。

A2B亚型的检验

1980年12月,北京市通县公安局送检一起轮奸案物证,包括受害人裤衩及现场提取的树叶、杂草等物,要求检验精斑,并确定因门齿折断流在衣领上血迹的血型。我们对裤衩和现场提取物作了精斑确证检验。对罪犯衣领上血迹作了种属检验。

血清IL-34表达水平与原发性胆汁性胆管炎的相关性分析

目的:探讨IL-34是否参与原发性胆道胆管炎(PBC)发病机制。方法:将49例PBC患者与50例年龄、性别匹配的健康对照组进行比较,并对治疗前后进行比较。ELISA和化学发光法(CL)检测血清IL-34、抗线粒体抗体M2(AMA-M2)和部分细胞因子IL-1、IL-2、IL-6、IL-8、IL-10和TNF-α浓度。结果:PBC患者血清IL-34水平明显高于健康对照组(P<0.01)。IL-34水平与AMA-M2水平具有一定相关性。治疗有效患者中,血清IL-34水平明显降低。PBC患者血清IL-2、IL-6、TNF-α水平较健康对照组明显升高。结论:本研究为IL-34在PBC发展中的新作用以及作为治疗靶点的潜在用途提供了支持。血清IL-34可能是PBC的候选生物标志物。

自身免疫性肝病患者血清自身抗体检测意义

目的 探讨抗可溶性肝抗原/抗肝胰抗原(SLA/LP)抗体在自身免疫性肝病中的意义。方法 用间接免疫荧光法、免疫印迹法检测抗SLA/LP抗体,并与抗平滑肌抗体(SMA)、抗线粒体抗体(AMA M2)及抗肝肾微粒体(LKM 1)抗体之间的阳性率进行比较。结果 自身免疫性肝炎(AIH)组、原发性胆汁性肝硬化(PBC)组、原发性硬化性胆管炎(PSC)组抗SLA/LP抗体阳性率分别为41. 7%、5. 9%和0. 0%,与SMA、AMA M2及LKM 1抗体之间的阳性率差异有显著性(P<0. 01)。结论 抗SLA/LP抗体在AIH相关抗体中具有较高的诊断价值,可视为AIH新的血清学指标。