抗EB病毒衣壳抗原IgG抗体亲合力诊断儿童传染性单核细胞增多症的价值及患儿免疫状态的变化

目的探讨抗EB病毒衣壳抗原(EBV-CA)IgG抗体亲合力对EB病毒(EBV)感染传染性单核细胞增多症(IM)的诊断价值及患儿免疫状态的变化。方法选取行抗EBV-CAIgG抗体亲合力及抗EBV-CAIgM抗体检测的儿童5882例,其中IM500例、非IM5382例,检测抗EBV-CAIgG抗体亲合力、抗EBV-CAIgM抗体、EBVDNA载量、外周血异型淋巴细胞(简称异淋)比例和外周血淋巴细胞亚群。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价抗EBV-CAIgG抗体亲合力、抗EBV-CAIgM抗体、异淋比例和EBVDNA单项及联合检测诊断IM的效能,并观察IM患儿的免疫状态。另选取临床诊断为IM并检测EBVDNA和淋巴细胞亚群的患儿502例,探讨EBVDNA阳性及阴性IM患儿的细胞免疫状况。结果在5882例儿童中,抗EBV-CAIgG抗体亲合力、抗EBV-CAIgM抗体、EBVDNA和异淋比例4项指标任意1项阳性的患儿为1031例(17.53%),其中IM的发生率最高(38.1%)。ROC曲线分析结果显示,抗EBV-CAIgG抗体亲合力、抗EBV-CAIgM抗体、异淋比例和EBVDNA诊断IM的曲线下面积(AUC)分别为0.883、0.729、0.788和0.664,4项指标联合检测的AUC为0.847。依据年龄将1031例患儿分为婴儿组(<1岁)、幼儿组(1~3岁)、学龄前期组(4~6岁)和学龄期组(7~17岁)。除婴儿组外,其他3组中的IM患儿CD3-CD16+CD56+自然杀伤(NK)细胞比例、CD3-CD19+B细胞比例、CD3+CD4+T细胞比例及CD4+/CD8+比值显著低于非IM患儿(P<0.01),CD3+T细胞比例、CD3+CD8+T细胞比例显著高于非IM患儿(P<0.01)。婴儿组中的IM患儿CD3-CD19+B细胞比例显著低于非IM患儿(P<0.01),CD3+T细胞、CD3+CD8+T细胞比例显著高于非IM患儿(P<0.01),而CD3-CD16+CD56+自然杀伤(NK)细胞比例、CD3+CD4+T细胞比例、CD4+/CD8+比值IM患儿与非IM患儿之间差异无统计学意义(P>0.05)。EBVDNA阳性IM患儿与阴性IM患儿比较,上述变化更明显。结论抗EBV-CAIgG抗体亲合力对IM的诊断价值优于异淋比例、抗EBV-CAIgM抗体和EBVDNA。IM患儿细胞免疫功能明显紊乱,EBVDNA阳性的IM患儿紊乱程度更严重。

血清EB病毒衣壳抗原IgA检测在鼻咽癌辅助诊断中的价值

目的探讨血清EB病毒衣壳抗原IgA(EB-VCA-IgA)对鼻咽癌的辅助诊断价值。方法回顾性分析500例鼻咽部和颈部疾病患者的血清EB-VCA-IgA表达情况,利用χ~2检验分析鼻咽癌组(鼻咽癌患者168例)、良性疾病组(鼻咽颈部良性疾病患者234例)和其他肿瘤组(咽喉颈部恶性肿瘤患者98例)血清EB-VCA-IgA阳性率的差异性,并计算血清EB-VCA-IgA诊断鼻咽癌的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值。结果鼻咽癌组EB-VCA-IgA的阳性率(55.36%)高于良性疾病组(4.70%)和其他肿瘤组(2.04%),差异均有统计学意义(P<0.05);未分化型非角化性癌患者的EB-VCA-IgA阳性检出率(60.47%)明显高于分化型非角化性癌(40.00%),差异有统计学意义(P<0.05);EB-VCA-IgA对鼻咽癌检出的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为55.36%、96.08%、87.74%、80.96%。在以颈部肿物为主要临床症状的就诊患者中,EB-VCA-IgA对鼻咽癌检出的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为59.26%、93.10%、88.89%、71.05%;经电子内镜检查见鼻咽肿物患者中,EBVCA-IgA对鼻咽癌的检出敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为55.36%、92.85%、93.94%、50.98%。结论在鼻咽肿物或颈部肿物的患者中,EB-VCA-IgA对鼻咽癌的诊断有较高的阳性预测值;然而,EB-VCA-IgA对鼻咽癌的检出敏感度和阴性预测值仍较低。

化学发光免疫分析测定EB病毒衣壳抗原IgM抗体的方法学评价

目的 对化学发光免疫分析法 (chemiluminescentimmunoassay ,CLIA)测定EB病毒衣壳抗原的IgM抗体 (EBV VCAIgM)进行方法学评价 ,同时将其对儿童传染性单核细胞增多症 (infectiousmononucleosis,IM)的诊断准确性与传统的ELISA测定相比较。方法 在全自动CLIA仪上测定 88例血清标本 ,同时用ELISA法测定。结果 CLIA测定EBV VCAIgM的灵敏度为 0 .6 4U/ml;低、中、高浓度时的批内CV分别为 4 .1%、1.7%和 1.4 % ,批间CV分别为 4 .9%、2 .8%和 2 .4 % ;回收率为 93%～ 10 7% ,理论值与实测值间的回归方程为Y =0 .0 96 7+1.0 0 93X ,相关系数r =0 .9996 (P <0 .0 0 0 1) ;ROC曲线显示CLIA测定敏感性和特异性均在 90 %以上 ,曲线下面积为 0 .992 ,显著高于ELISA(P <0 .0 5 )。结论 CLIA是目前测定EBV VCAIgM较好的方法 ,适用于临床检测 。

EB病毒衣壳抗原抗体、早期抗原抗体、EB病毒DNA检测对鼻咽癌的诊断、预后评估价值

目的探讨EB病毒衣壳抗原抗体(VAC-IgA)、早期抗原抗体(EA-IgA)、EB病毒DNA(EB-DNA)检测对鼻咽癌的诊断、预后评估价值。方法选择2011年2月至2012年2月医院收治的137例疑似鼻咽癌患者临床资料,采用酶联免疫吸附试验检测患者血清VAC-IgA、EA-IgA抗体滴度,PCR检测血浆EB-DNA拷贝数,并以最终临床病理检查结果作为"金标准",评价VAC-IgA、EA-IgA、EB-DNA检测对鼻咽癌的诊断效率。对确诊为鼻咽癌的患者行根治性放疗,患者随访3年,比较VAC-IgA、EA-IgA、EB-DNA不同表达组患者生存情况。结果 137例患者最终临床确诊为鼻咽癌95例,鼻咽癌确诊率为69.3%,以最终临床病理检查结果作为"金标准",VAC-IgA阳性检出率为37.2%(51/137),EA-IgA阳性检出率为63.5%(87/137),EB-DNA阳性检出率为27.7%(38/137);三者联合检测的特异度为85.7%(36/42),灵敏度为80.0%(76/95),准确度为81.8%(112/137),阳性预测值为92.7%(76/82),阴性预测值为65.5%(36/55),均高于VAC-IgA、EA-IgA、EB-DNA单项检测。VAC-IgA阴性组中位生存期23个月,显著高于VAC-IgA阳性组(17个月)(χ~2=6.117,P=0.045);EA-IgA阴性组中位生存期26个月,显著高于VAC-IgA阳性组(16个月)(χ~2=9.301,P=0.007);EB-DNA阴性组中位生存期24个月,显著高于EB-DNA阳性组(17个月),两组间比较差异具有统计学意义(χ~2=6.860,P=0.031)。结论病理检查是鼻咽癌诊断的"金标准",VAC-IgA、EA-IgA、EB-DNA三者联合检查能够为鼻咽癌的诊断提供一定参考,但不能作为确诊依据;VAC-IgA、EA-IgA、EB-DNA水平能够作为评估患者生存预后的指标之一。

大口黑鲈虹彩病毒主衣壳蛋白单克隆抗体制备与抗原表位鉴定

以大口黑鲈虹彩病毒(Largemouth bass iridovirus,LMBV)主衣壳蛋白(Major capsid protein,MCP)为检测靶蛋白,利用原核表达系统表达MCP重组蛋白并免疫BALB/c小鼠,将免疫小鼠脾B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP/20)融合,经亚克隆筛选、小鼠腹腔接种、收集腹水等过程获得单克隆抗体;利用免疫印迹技术对所制备的单克隆抗体免疫识别的特异性以及其识别的抗原表位进行研究分析,为研制适于养殖现场快速检测LMBV的胶体金检测试纸条奠定基础。结果表明,获得了1株单克隆抗体2C9-6。特异性分析结果显示,单克隆抗体2C9-6可以特异性识别真核表达的LMBV-MCP和LMBV病毒颗粒。抗原表位分析结果表明,单克隆抗体2C9-6识别LMBV-MCP的抗原表位位于LMBV-MCP蛋白N端第1—20位氨基酸。

血清唾液酸和EB病毒壳抗原IgA抗体检测在喉部肿瘤诊断中的临床价值

目的探讨血清唾液酸(SA)和EB病毒壳抗原IgA(VCA-IgA)抗体检测在喉部肿瘤诊断中的临床价值。方法选取2014年2月-2019年1月广元市中心医院的经临床病理检查确诊为喉部恶性肿瘤患者85例设为恶性组,将同期经临床病理检查确诊为喉部良性病变患者85例设为良性组,对所有患者均行SA和VCA-IgA抗体检测,比较两组SA、VCA-IgA抗体水平,以ROC曲线分析SA、VCA-IgA抗体检测及其两者联合对喉部肿瘤良恶性的诊断价值,比较恶性组不同TNM病理分期、不同预后结局患者SA、VCA-IgA抗体水平差异。结果恶性组SA、VCA-IgA抗体水平明显高于良性组(P<0.05);ROC曲线分析结果显示,SA、VCA-IgA抗体检测及其两者联合对喉部肿瘤良恶性均具有一定的诊断价值(P<0.05),且SA联合VCA-IgA抗体检测的AUC大于单一的SA、VCA-IgA抗体检测,差异均具有统计学意义(P<0.05);对恶性组85例患者进行病理TNM分期,其中Ⅰ期25例,Ⅱ期34例,Ⅲ期19例,Ⅳ期7例,结果显示,Ⅰ期SA、VCA-IgA水平低于Ⅱ期,Ⅱ期SA、VCA-IgA水平低于Ⅲ期(P<0.05),Ⅲ期、Ⅳ期SA、VCA-IgA水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);病情进展组SA、VCA-IgA水平均高于无进展组(P<0.05)。结论SA和VCA-IgA抗体检测对鉴别喉部肿瘤良恶性均具有一定的诊断价值,且SA联合VCA-IgA抗体检测的诊断效能大于单一指标检测;不同病理TNM分期患者体内SA、VCA-IgA抗体水平存在差异,SA、VCA-IgA抗体水平检测对患者预后结局具有一定预测价值。

抗毒化浊方对EB病毒感染后衣壳抗原IgA抗体和早期抗原-IgA抗体的影响

目的观察抗毒化浊方治疗EB病毒感染疗效及对衣壳抗原IgA抗体(VCA-IgA)和早期抗原-IgA抗体(EA-IgA)的影响。方法将80例EB病毒感染患者随机分为2组,对照组40例给予更昔洛韦治疗,观察组45例在此基础上加用抗毒化浊方治疗,统计2组患者症状体征缓解时间及近期疗效、VCA-IgA和EA-IgA转阴率,观察2组治疗前后VCA-IgA、EA-IgA、T淋巴细胞亚群、自然杀伤细胞(NK)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)及IL-6水平变化情况。结果观察组退热时间、咽痛缓解时间、扁桃体肿大缓解时间及颈淋巴结肿大缓解时间均显著短于对照组(P均<0. 05);治疗后2组VCA-IgA、EA-IgA、TNF-α及IL-6水平均显著降低(P <0. 05),IL-2水平显著提高(P <0. 05),且观察组以上指标改善情况均显著优于对照组(P均<0. 05);对照组治疗前后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及NK细胞水平比较差异无统计学意义(P均> 0. 05),观察组治疗后以上指标水平均显著高于对照组(P <0. 05);观察组近期治疗总有效率、VCA-IgA和EA-IgA转阴率均显著高于对照组(P <0. 05)。结论抗毒化浊方治疗EB病毒感染患者可有效加快病情康复进程,促进VCA-IgA和EA-IgA转阴,具有抗炎、改善免疫系统功能作用。

PBC患者中医证型、EB病毒壳抗原IgA抗体表达情况与临床特征及病理分期的研究

目的:分析原发性胆汁性胆管炎(PBC)患者中医证型及EB病毒壳抗原IgA抗体(EB VCA-IgA)阳性表达情况,了解不同证型与EB病毒(EBV)感染对PBC患者病情影响及其与病理分期的关系。方法:分析2019年12月至2022年6月于江苏省中医院感染科住院的87例PBC确诊患者的临床资料,采集患者的症状体征等四诊资料进行辨证分型。同时行肝穿刺活组织检查、完善实验室检查包括血清EB VCA-IgA等检测。根据血清EB VCA-IgA是否阳性表达,将患者分为EB VCA IgA(+)组和EB VCA IgA(-)组,比较两组患者临床及病理资料差异。同时分析患者中医证型与血清EB VCA-IgA阳性表达、肝脏病理分期的关系。结果:气阴两虚证组中肝脏病理为进展期的EB VCA IgA(+)患者比例较肝郁脾虚证组显著升高(P<0.05)。与EB VCA IgA(-)组患者比较,EB VCA-IgA(+)组患者血清IgG、IgA水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。肝脏病理为进展期、炎症活动等级较高(G3)EBV VCA-IgA(+)患者比率高,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析提示,中医证型为气阴两虚、肝脏病理分期为进展期、高IgG、高IgA水平是影响PBC患者EB VCA-IgA阳性表达的独立危险因素。结论:气阴两虚证PBC患者存在更严重的肝脏炎症及纤维化,更易合并EBV感染;气阴两虚证、肝脏病理进展期、高IgG、高IgA水平是PBC患者EB VCA-IgA阳性表达的独立危险因素。

抗重组EB病毒抗原双重抗体检测血清学诊断鼻咽癌的研究(英文)

背景与目的:在评估4种EB病毒抗原酶联免疫吸附法的基础上,探讨优化抗重组EB病毒抗原双重抗体检测应用于血清学诊断鼻咽癌。方法:收集广州地区57例治疗前鼻咽癌患者和58例健康成人的血清。应用EB病毒特异抗原(谷胱甘肽转移酶重组融合蛋白)为基础的4种免疫酶联吸附法,即EBNA1-IgA,EBNA1-IgG,Zta-IgA和Zta-IgG检测血清中抗EB病毒的抗体水平。结果:EBNA1-IgA的灵敏度(0.9123)和阴性预测值(0.9074)是单独使用4种ELISA实验中最高的。Zta-IgA具有最高的正确率(л,0.8870)和Youden指数(J,0.7738)。当评估配对的ELISA时,EBNA1-IgA和Zta-IgA双重阳性的所有指标是4种双重阳性实验中最高的。5例EBNA1-IgA阴性的鼻咽癌患者呈Zta-IgA阳性,而7例Zta-IgA阴性的鼻咽癌患者呈EBNA1-IgA阳性。结论:EBNA1-IgA酶联免疫吸附的单独检测在血清学诊断鼻咽癌时优于其他3项(EBNA1-IgG、Zta-IgA和Zta-IgG)单独酶联免疫吸附检测。EBNA1-IgA和Zta-IgA两项的组合应用在血清学诊断鼻咽癌时有互补作用,是血清学检测的合适组合。

两种检测EB病毒衣壳抗原IgA抗体的酶联免疫吸附试验试剂盒性能比较

人体感染EB病毒（EBV）后会产生多种抗体,EBV衣壳抗原IgA抗体（VCA-IgA）是其中一种,使用酶联免疫吸附试验（ELISA）法可以检测出其存在与否[1,2],但市场上检测VCA-IgA的ELISA试剂盒多种多样。临床实验室所选择的试剂盒由于供货、招标或其他因素等有时需要更换试剂盒,

EB病毒衣壳抗原IgA抗体胶体金快速检测法的建立及应用

目的建立了一种快速检测人血清中EB病毒衣壳抗原(VCA)IgA抗体的胶体金免疫层析(GICA)方法。方法预先将EB病毒衣壳抗原(EB-VCA)包被在硝酸纤维素膜上,将鼠抗人IgA抗体免疫金固化在金标垫上。检测时,样本通过层析作用向上流动,样本中的IgA抗体首先被胶体金标记的鼠抗人IgA抗体捕获,其中的EB-VCAIgA抗体再与包被在硝酸纤维素膜上的EB-VCA特异性结合,最后形成包被固相上的EB-VCA与EB-VCAIgA抗体及胶体金标记鼠抗人IgA抗体的三元复合物,通过检测线胶体金沉淀颜色的变化来定性判定样本中是否存在EB-VCAIgA抗体。结果采用自制的GICA试纸条进行了1028份临床标本的盲法检测,并与酶联免疫吸附试验的EB-VCAIgA抗体诊断试剂盒进行比对,结果表明两种试剂检测的总符合率达到94.56%,阳性符合率为93.40%,阴性符合率为95.17%,Kappa值为0.873,两种诊断试剂具备一致的诊断价值。结论用于检测血清中的EB-VCAIgA抗体的GICA试纸条的制备条件已基本建立,其检测结果特异性强、稳定性好、操作方法简便快捷且无需特殊仪器设备。

EB病毒衣壳抗原抗体联合转铁蛋白受体在EB病毒感染所致肝损伤的早期诊断价值

目的探讨EB病毒衣壳抗原抗体联合转铁蛋白受体在EB病毒感染所致肝损伤的早期诊断价值。方法选取EB病毒感染所致肝损伤70例(观察组1)、药物性肝损伤70例(观察组2)、HBV肝损伤患者70例(观察组3),同时选取体检健康者70例(对照组),检测4组血清中EB病毒衣壳抗原抗体和转铁蛋白受体的水平。用受试者工作特征曲线(ROC曲线)下面积(AUC)分析EB病毒衣壳抗原抗体和转铁蛋白受体对EB病毒感染所致肝损伤的早期诊断价值。结果 EB病毒衣壳抗原抗体在观察组1血清中的表达量明显高于观察组2、3和对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。转铁蛋白受体在观察组1血清中的表达量明显高于观察组2、对照组,但是低于观察组3,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组1、2的EB病毒衣壳抗原抗体和转铁蛋白受体的AUC分别为(0.86±0.04)和(0.94±0.02),其灵敏度分别为84%和83%,特异度分别为75%和54%。观察组1与对照组的EB病毒衣壳抗原抗体和转铁蛋白受体的AUC分别为(0.77±0.04)和(0.94±0.02),其灵敏度分别为75%和84%,特异度分别为84%和98%。结论 EB病毒衣壳抗原抗体联合转铁蛋白受体可作为病毒感染所致肝损伤早期诊断的潜在标志物。

化学发光法检测EB病毒衣壳抗原IgA抗体(VCA-IgA)的最佳截断值(肇庆地区)及其在鼻咽癌诊断的价值

目的:本研究旨在探究EB病毒衣壳抗原IgA(VCA-IgA)抗体化学发光法在鼻咽癌高发区(肇庆地区)的最佳截断值.方法:收集2019年1月-2021年12月肇庆市第一人民医院的鼻咽癌患者和正常人血清1583例.根据临床诊断将病例分为正常对照组、鼻咽癌组、鼻咽良性疾病组和其他肿瘤组.采用回顾性分析方法,分别比较不同性别、年龄及组间血清VCA-IgA抗体的水平.并通过绘制ROC曲线,分析EB病毒衣壳抗原IgA(VCA-IgA)抗体化学发光法在肇庆地区的最佳截断值.结果:鼻咽癌患者VCA-IgA水平显著高于正常人组、鼻咽良性疾病组和其他肿瘤组(P<0.05);在正常人群中,男性VCA-IgA水平显著高于女性(P<0.05),年龄大于40岁的人群中,男性的鼻咽癌患病率显著大于女性(p<0.05);VCA-IgA水平随年龄增长而升高,且男性患病率与年龄成正相关(P<0.05);鼻咽癌各分期之间的VCA-IgA水平比较无显著差异;当截断值为4AU/mL时,其诊断的灵敏度为82.35%,特异性为80.96%,当截断值为4.42 AU/ml时,约登指数最大,其诊断的灵敏度为82.35%,特异性为83.12%.结论:NPC患者血清VCA-IgA水平明显升高,VCA-IgA是诊断鼻咽癌的良好指标;肇庆地区大于40岁的中老年男性是鼻咽癌高危人群,应对这类VCA-IgA阳性人群重点关注,增加随访频次.4.42AU/mL应作为肇庆地区VCA-IgA新的截断值,这将提高其对于鼻咽癌的诊断效能.

EB病毒抗体联合检测在鼻咽癌血清学诊断中的价值

目的评价VCA/IgA、EA/IgA、Rta/IgG和EBNA1/IgA等EB病毒抗体联合检测在鼻咽癌血清学诊断中的价值。方法收集211例初治鼻咽癌和203例相似症状的非鼻咽癌病例的血清,采用免疫酶法检测VCA/IgA及EA/IgA,酶联免疫吸附法检测Rta/IgG和EBNA1/IgA。应用ROC曲线分析确定各抗体检测的最佳截断值,采用复合阳性判断方法评价联合检测对鼻咽癌的诊断价值。结果采用复合阳性判断方法,联合检测的敏感度及特异度比单项抗体的指标基本上均有提高。VCA/IgA+Rta/IgG+EBNA1/IgA组合的敏感度(98.1%)较其它3种组合高,特异度、准确度、约登指数及阳性预测值分别为88.7%、93.5%、0.868、90.0%;而EA/IgA+Rta/IgG+EBNA1/IgA组合的特异度(95.1%)、准确度(94.9%)、约登指数(0.899)及阳性预测值(95.2%)最高,敏感度为94.8%,显示其在鼻咽癌血清学诊断中可能具有更高的准确性。四抗体组合有最高的敏感度(98.6%),特异度、准确度、约登指数及阳性预测值分别为88.2%、93.5%、0.868、89.7%。结论抗立即早期抗原Rta/IgG抗体、抗早期抗原EA/IgA抗体、抗晚期抗原VCA/IgA和抗潜伏期抗原EBNA1/IgA抗体联合检测可更大范围地反映EB病毒溶解感染期及潜伏感染期的抗原表达,具有很好的互补作用,是鼻咽癌血清学诊断的合适组合。

EB病毒壳抗原抗体定性检测在鼻咽癌筛查中的作用

目的研究EB病毒壳抗原抗体定性检测在鼻咽癌筛查中的作用。方法选取我院2011年1月具有广州市户籍健康查体者血清2107份,采用酶联免疫法定性检测EB病毒壳抗原抗体表达,对于EB病毒壳抗原抗体阳性者行间接鼻咽镜检查,必要时行鼻内镜下鼻咽活检。结果 EB病毒壳抗原抗体阳性血清601份,阳性率为28.5%;其中男性388份,阳性率为30.3%;女性213份,阳性率为25.8%。189人完成间接鼻咽镜检查,2人经活检证实为鼻咽癌。结论定性检测EB病毒壳抗原抗体诊断价值有限,不适合用于鼻咽癌筛查。

树鼩腺病毒(Ⅰ和Ⅱ型)的生物学性状、抗原关系和血清抗体的研究

树鼩已作为实验动物用于各方面的研究.70年代以来,国内、外先后报道的树鼩病毒有疱疹病毒(THV)、腺病毒(TAV.1个血清型)、逆转录病毒、副流感病毒和弹状病毒等.1981～1985年从云南野生树鼩的咽拭子、肾细胞培养物和粪便分离出2个血清型的TAV(TAV-Ⅰ和TAV-Ⅱ),对其生物学特性、抗原关系和血清抗体进行研究报道如下.

ELISA法检测中国中山市正常人及鼻咽癌患者血清EB病毒抗体水平

目的观察EB病毒抗体 EBNA1/IgA、ZEBRA/IgG、EBNA1/IgG在不同年龄、不同性别的正常人群中的分布,并与鼻咽癌患者进行比较。方法用ELISA法在全自动酶联免疫分析系统上检测468例正常人和16例鼻咽癌患者的血清标本。结果正常人血清各抗体的水平[rD（λ）值]分别为:EBNA1/IgA男性0.726±0.541,女性0.563±0.340,男性高于女性（P<0.001）;ZEBRA/IgG男性0.709±0.480,女性0.829±0.480,女性高于男性（P<0.01）;EBNA1/IgG男性0.781±0.285,女性0.784±0.302,男女之间无显著性差异（P>0.05）。ZEBR/IgG的阳性率随年龄增高而升高,相关系数为0.766（P<0.05）。鼻咽癌患者上述3种抗体的血清水平分别为3.265±1.76、1.408±0.672、1.249±0.317,均明显高于正常人（P<0.01）。结论正常人群中EBNA1/IgA、ZEBRA/IgG、EBNA1/IgG3种抗体的血清水平存在年龄和性别上的差异,但波动在一定范围内;在鼻咽癌的临床诊断和高危人群筛查中有必要根据具体的人群界定不同的阳性临界值;鼻咽癌患者此3种抗体的血清水平均明显升高,对鼻咽癌的诊断有一定意义。

大鲵虹彩病毒主要衣壳蛋白主要抗原表位区的原核表达及抗血清制备

目的表达大鲵虹彩病毒(CGSIV)主要衣壳蛋白(MCP)主要抗原表位区蛋白,并制备兔抗血清。方法以大鲵虹彩病毒略阳株(CGSIV-LY)基因组为模板,PCR扩增MCP基因,然后克隆到p ET-21a(+)表达载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,通过SDS-PAGE和Western blot法检测重组蛋白的表达和免疫活性,用镍柱亲和层析法纯化重组蛋白。以纯化的重组蛋白为免疫原免疫兔制备抗血清,采用Western blot法和ELISA检测抗血清的免疫特异性并测定效价,利用间接免疫荧光法检测鲤鱼上皮瘤(EPC)细胞CGSIV。结果表达了相对分子质量(Mr)为29 000的重组蛋白。制备的兔抗MCP血清具有良好的特异性和高滴度,间接免疫荧光法检测结果显示制备的多抗血清能识别EPC细胞中的CGSIV。结论成功表达了大鲵虹彩病毒MCP主要抗原表位区蛋白,并制备高滴度和良好特异性的兔抗血清。

人冠状病毒SARS-CoV、229E和OC43核衣壳(N)蛋白单克隆抗体的制备及3株人冠状病毒N蛋白的抗原相关性观察

目的通过制备和鉴定人冠状病毒SARS-CoV、229E和OC43核衣壳(N)蛋白单克隆抗体(mAb),观察3株人冠状病毒的N蛋白抗原相关性。方法分别用基因重组SARS-CoV、229E和OC43N蛋白免疫BALB/c小鼠,制备mAb,并采用ELISA间接法、免疫印迹和免疫荧光进行筛选和鉴定,同时用mAb分析3株人冠状病毒N蛋白之间的免疫交叉反应。结果获得多株抗SARS-CoV、229E和OC43 N蛋白mAb杂交瘤细胞株,ELISA间接法、免疫印迹和免疫荧光结果均显示,所有的mAb仅与各自病毒的N蛋白特异性反应,而在3株人冠状病毒N蛋白抗原之间不产生免疫交叉反应。结论获得的特异性抗人冠状病毒N蛋白mAb为进一步研究3株人冠状病毒的抗原决定簇相关性奠定了基础。

鼻咽癌患者血清EB病毒抗体表达及诊断价值研究

目的探讨鼻咽癌患者血清EB病毒抗体表达及诊断价值,为患者临床诊疗提供依据。方法选取2017年6月至2019年6月肇庆市第一人民医院收治的60例确诊为鼻咽癌患者为研究组,选取同期就诊的60例鼻咽部良性疾病患者为对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测两组患者血清EB病毒的VCA-IgA、EA-IgA及EA-IgG抗体表达水平,比较两组患者血清EB病毒抗体检测阳性率,并采用受试者工作特征曲线(ROC)分析3种EB病毒抗体对鼻咽癌患者的诊断价值。结果研究组患者血清EB病毒VCA-IgA、EA-IgA及EA-IgG抗体检测阳性率分别为93.33%、53.33%、73.33%,明显高于对照组的18.33%、3.33%、6.67%,差异均有统计学意义(P<0.05);VCA-IgA、EA-IgA、EA-IgG及其联合检测的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.698、0.514、0.685、0.943;VCA-IgA诊断鼻咽癌患者的灵敏度、特异度、准确度、阳性检测值和阴性检测值为92.91%、86.51%、90.03%、35.83%、99.30%;EA-IgA诊断鼻咽癌患者的灵敏度、特异度、准确度、阳性检测值和阴性检测值为67.62%、95.82%、94.26%、48.48%、96.77%;EA-IgG诊断鼻咽癌患者的灵敏度、特异度、准确度、阳性检测值和阴性检测值为84.35%、93.43%、92.51%、43.27%、98.75%;3种EB病毒抗体联合诊断对鼻咽癌患者的灵敏度、特异度、阳性检测值和阴性检测值分别为95.31%、97.62%、98.59%、82.64%、99.57%,均明显高于VCA-IgA、EA-IgA、EA-IgG单独诊断,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论与鼻咽部良性疾病比较,鼻咽癌患者血清EB病毒VCA-IgA、EA-IgA及EA-IgG抗体检测阳性率均较高,EB病毒的三种抗体可以有效筛查鼻咽癌,而三种EB病毒抗体联合诊断可以有效提高患者诊断的灵敏度、特异度和准确度。