多模态MRI联合血清miR-125b对乳腺癌新辅助化疗疗效的预测价值

目的:探讨乳腺癌治疗前多模态MRI联合血清miR-125b水平预测新辅助化疗疗效的价值。方法:研究对象为于我院首次接受全程新辅助化疗并行手术切除治疗的90例女性乳腺癌患者。治疗前对患者进行乳腺MRI检查,记录病灶直径、边缘、形状、平扫T_(2)WI图像上病灶内是否高信号和时间信号强度曲线(TIC)类型、表观扩散系数(ADC)、单纯扩散系数(D)、伪扩散系数(D*)及灌注分数(f)。依据Miller-Payne分级标准对病理学反应进行评估,分为病理反应不佳(NR)组和病理反应良好(R)组。结果:乳腺癌患者新辅助化疗后R组52例(57.78%),NR组38例(42.22%),两组的年龄、临床分期、病理类型、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和人表皮生长因子受体2(HER2)表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。R组中Ki-67>14%的比例显著高于NR组(P<0.05)。R组与NR组的肿瘤直径、边缘、形状、T_(2)WI信号、D值和D*值差异均无统计学意义(P>0.05)。R组的TIC类型为Ⅲ型的比例显著高于NR组,ADC值显著低于NR组,f值显著高于NR组(P<0.05)。R组的血清miR-125b相对表达量显著低于NR组(t=-11.007,P<0.001)。二元Logistic回归分析结果显示,较高的ADC值、血清miR-125b水平和较低的f值是乳腺癌新辅助化疗后疗效为NR的独立危险因素(P<0.05)。ADC值、f值、血清miR-125b水平及三者联合预测乳腺癌新辅助化疗疗效的AUC分别为0.863(95%CI:0.799~0.927,P<0.001)、0.819(95%CI:0.744~0.893,P<0.001)、0.832(95%CI:0.755~0.908,P<0.001)和0.958(95%CI:0.929~0.988,P<0.001)。结论:治疗前多模态MRI联合血清miR-125b水平对乳腺癌患者新辅助化疗疗效具有一定的预测价值。

早期2型糖尿病患者血清miR-125b表达与颈动脉内-中膜厚度的相关性

目的探讨早期2型糖尿病(T2DM)患者血清中miR-125b表达水平与颈动脉内-中膜厚度(CIMT)的相关性。方法选取230例早期T2DM患者为研究对象,根据颈动脉内-中膜厚度将早期T2DM患者分为CIMT正常组(CIMT<0.9 mm)与CIMT增厚组(CIMT≥0.9 mm),同期选择78例参加体检的正常人作为对照组。收集受试者临床资料,利用全自动生化分析仪测定测定糖脂代谢指标,采用qRT-PCR检测血清miR-125b表达水平,采用高频彩色多普勒超声技术测定CIMT。采用Pearson相关性分析方法分析CIMT与糖脂代谢指标及miR-125b的关系,采用多元线性回归分析方法分析早期T2DM患者CIMT的影响因素。结果与对照组相比,CIMT正常组、CIMT增厚组T2DM患者体质指数(BMI)、腰臀比(WHR)、空腹胰岛素(FINS)、空腹血糖(FPG)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、糖化血红蛋白(HbA1C)显著升高(P<0.05);CIMT增厚组T2DM患者WHR、FINS、FPG、HOMA-IR、HbA1C显著高于CIMT正常组(P<0.05)。与对照组相比,CIMT正常组、CIMT增厚组T2DM患者血清中miR-125b表达水平显著升高(P<0.05);CIMT增厚组患者血清中miR-125b表达水平显著高于CIMT正常组(P<0.05)。Pearson相关分析显示,CIMT与WHR、FPG、HOMA-IR、HbA1C、miR-125b呈正相关(P<0.05);多元线性回归分析结果显示,WHR、FPG、HOMA-IR、miR-125b是T2DM患者CIMT的影响因素。结论早期T2DM患者血清中miR-125b表达上调,且其表达水平与患者CIMT正相关,是影响T2DM患者CIMT的因素,可能参与早期T2DM患者动脉粥样硬化过程。

急性心梗患者心室重构患者血清miR-125b表达与心脏超声指标的相关性分析

目的:研究急性心梗患者心室重构患者血清miR-125b表达与心脏超声指标的相关性。方法:选取我院2015年1月-2017年1月确诊的急性心肌梗死患者70例。根据随访结果分为两组:观察组心梗后发生心室重构的患者,对照组为心梗后未发生心室重构的患者。对比两组患者的一般资料、心脏超声指标、miR-125b相对表达量。分析miR-125b相对表达量与心室重构的相关性。结果:观察组患者miR-125b相对表达量为(1.394±0.494),对照组患者患者miR-125b相对表达量为(0.974±0.423),观察组明显高于对照组(P<0.01)。以LVEDV为因变量,miR-125b为自变量,回归显示LVEDV与miR-125b程正相关(r=0.893,P<0.05)。结论:miR-125b表达量在心梗后心室重构组患者明显高于非心室重构组的患者,miR-125b表达量与心室重构指标呈正相关性。

孕早期血清miR-125b、miR-124检测在唐氏综合征产前筛查中的价值分析

目的:目的:分析孕早期血清miR-125b、miR-124检测在唐氏综合征(DS)产前筛查中的价值。方法:选取70例孕早期(10~14周)接受二联血清学唐筛检查及胎儿颈项透明层(NT)检查至少一项结果提示DS胎儿高风险的孕妇。经羊水穿刺取羊水细胞培养和染色体核型分析,35例确诊为DS胎儿孕妇作为病例组;35名为正常妊娠孕妇作为对照组。对比两组孕妇的基线资料及孕早期血清miR-125b、miR-124相对表达量,并分析血清miR-125b、miR-124水平检测在DS辅助诊断中的价值。结果:病例组中孕妇有害物质接触史、吸烟史及服用叶酸时间短于3个月比例高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。病例组孕妇的血清学筛查阳性率及血清miR-124相对表达量高于对照组孕妇,血清miR-125b表达量低于对照组孕妇(P<0.05)。两组孕妇胎儿NT筛查阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析结果显示,孕早期血清学筛查及血清miR-125b、miR-124水平诊断DS的ROC曲线下面积(AUC)均有统计学意义(P<0.05),其中以血清miR-124a水平的AUC最高,为0.906,在Cut-off值下灵敏度和特异度分别为0.657、0.971,而孕早期胎儿NT筛查诊断DS的AUC无统计学意义(P>0.05)。结论:DS胎儿母体在孕早期可出现血清miR-125b表达下调和血清miR-124表达上调,两种血清指标在筛查诊断DS中具有较高的特异度。

中枢性性早熟女童血清miR-125b与维生素D联合检测的临床意义研究

背景下丘脑-垂体-性腺轴过早激活是中枢性性早熟(CPP)的主要发生机制,但其激活的机制尚不明确。微小核糖核酸可能参与了性早熟的发生发展。目的分析CPP女童血清miR-125b与维生素D、激素指标的关系,并分析血清miR-125b与维生素D联合检测的临床意义。方法收集2013—2016年每年的7—9月在南方医科大学附属中山博爱医院就诊的102例CPP女童(CPP女童组)及同时期年龄匹配的体检健康女童102例(健康女童组),记录两组的临床指标[年龄、身高、体质量、体质指数(BMI)、乳房发育年龄、卵巢体积、骨龄、骨龄与年龄差、体质量标准差分数(WSDS)、身高标准差分数(HSDS)、体质指数标准差分数(BMI SDS)]、乳腺Tanner分期;采用实时荧光定量PCR检测血清miR-125b;采用化学发光法检测血清25-羟基维生素D(25-OH-D)及激素指标(游离甲状腺素、促甲状腺素、雌二醇、泌乳素、黄体生成素、卵泡刺激素)。结果 CPP女童组血清miR-125b高于健康女童组(P<0.05)。CPP女童组血清miR-125b与25-OH-D呈负相关(r=-0.809 5,P<0.01)。将CPP女童分为miR-125b高表达亚组(54例)和miR-125b中/低表达亚组(48例)。miR-125b高表达亚组与miR-125b中/低表达亚组年龄、卵巢体积、骨龄、骨龄与年龄差、WSDS、HSDS、BMI SDS比较,差异无统计学意义(P>0.05);miR-125b高表达亚组与miR-125b中/低表达亚组乳房发育年龄和乳腺Tanner分期比较,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-125b高表达亚组雌二醇高于miR-125b中/低表达亚组(P<0.05)。经促性腺激素释放激素类似物(GnRHa)治疗后,miR-125b高表达亚组中维生素D正常者乳房发育消退比例高于维生素D缺乏者(P<0.05);miR-125b高表达亚组中维生素D正常者与维生素D缺乏者生长速率恢复、骨龄减速比例比较,差异无统计学意义(P>0.05)。miR-125b中/低表达亚组中维生素D正常者与维生素D缺乏者乳房发育消退、生长速率恢复、骨龄减速比例比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论血清miR-125b在CPP女童中升高,与维生素D呈负相关,影响乳腺发育年龄,这可能与雌二醇的升高相关。血清miR-125b与维生素D联合检测可判定GnRHa治疗对CPP女童乳房发育消退的疗效。

血清miR-125b、miR-410水平与视网膜静脉阻塞患者预后的关系

目的通过检测视网膜静脉阻塞(RVO)患者血清中miR-125b、miR-410水平,探究二者表达水平与RVO患者预后关系。方法选取2016年3月至2019年3月视网膜静脉阻塞患者103例作为研究对象,另选取同期体检显示健康者103例作为对照组。实时荧光定量(qRT-PCR)法检测RVO患者血清miR-125b、miR-410表达水平,分析二者表达水平与RVO患者临床病理特征及预后关系。结果RVO患病组血清中miR-125b、miR-410表达水平均明显低于对照组(P均<0.05)。治疗前视力>0.4、0.1~0.4、<0.1RVO患者miR-125b和miR-410水平依次显著降低(P均<0.05);缺血型RVO组血清miR-125b、miR-410表达水平均明显低于非缺血型RVO组(P均<0.05);合并高血压、高血脂RVO患者血清miR-125b和miR-410水平明显低于未合并高血压、高血脂RVO患者(P均<0.05);有并发症RVO患者miR-125b、miR-410表达水平显著低于无并发症RVO患者(P<0.05)。治疗3个月后,预后不良组RVO患者血清miR-125b、miR-410表达水平及预后视力显著低于预后良好组RVO患者(P均<0.05)。合并患有高血压、出现并发症、治疗前视力<0.1、miR-125b低表达、miR-410低表达是RVO患者发生不良预后危险因素(P<0.05)。结论miR-125b、miR-410在RVO患者血清中明显降低,与RVO患者不良预后有关。

Linc-smad7通过靶向miR-125b/SIRT1轴促进胰腺癌细胞迁移和侵袭

目的探讨长链非编码RNA smad7(long non-coding RNA smad7,Linc-smad7)对胰腺癌(pancreatic cancer,PC)细胞侵袭、迁移的作用及其作用机制。方法qRT-PCR检测PC组织及细胞系中Linc-smad7的表达;Transwell小室观察过表达Linc-smad7对PaCa-2细胞迁移、侵袭能力的影响;荧光素酶报告基因检测Linc-smad7对miR-125b,以及miR-125b对沉默调节蛋白1(Sirtuin1,SIRT1)的结合作用;qRT-PCR检测Linc-smad7在PaCa-2细胞中对miR-125b表达的调控作用,qRT-PCR、Western blotting检测miR-125b对SIRT1表达的调控作用。结果Linc-smad7在PC组织及细胞系中明显升高;Linc-smad7表达上调的PaCa-2细胞迁移、侵袭能力增强,miR-125b表达下降;miR-125b表达上调后,SIRT1表达显著下降;荧光素酶报告基因结果提示Linc-smad7直接靶向结合miR-125b,miR-125b直接结合SIRT1;过表达Linc-smad7或是下调miR-125b表达可逆转SIRT1沉默对PaCa-2细胞侵袭、迁移能力的影响。结论Linc-smad7通过miR-125b/SIRT1轴促进PaCa-2细胞侵袭和迁移。

肺癌患者miR-125b、miR-145、miR-146a表达与肺部感染的关系探讨

目的:探讨肺癌患者miR-125b、miR-145、miR-146a表达与肺部感染的关系。方法:选取2021年1月-2023年4月于我院进行手术治疗的163例肺癌患者为研究对象,根据术后3d是否发生肺部感染将患者分为感染组(28例)和未感染组(135例)。比较2组术后24h血清miR-125b、miR-145、miR-146a水平,分析术后24h血清各指标水平与临床有差异指标的相关性,Logistic回归分析术后发生肺部感染的危险因素,ROC分析术后24h血清各指标联合检测对术后发生肺部感染的预测价值。结果:2组合并糖尿病、合并慢性阻塞性肺疾病(COPD)、手术时间、术后24hAPACHEⅡ评分比较,差异显著(P<0.05);术后24h感染组血清miR-125b、miR-145、miR-146a表达水平高于未感染组,且各指标水平与合并糖尿病、合并COPD、手术时间、术后24hAPACHEⅡ评分均呈正相关(P<0.05);合并糖尿病、合并COPD、手术时间、术后24hAPACHEⅡ评分、术后24h血清miR-125b、miR-145、miR-146a表达水平为肺癌患者术后发生肺部感染的危险因素,且血清各指标联合预测术后发生肺部感染的AUC为0.817,大于各单项指标(P<0.05)。结论:肺癌患者术后并发肺部感染人群血清miR-125b、miR-145、miR-146a表达上调,其联合检测可作为早期预测术后是否发生肺部感染的有效指标。

脓毒症患者外周血miR-125b、miR-150表达及其临床意义

目的 探讨脓毒症患者外周血微小核糖核酸-125b(miR-125b)、微小核糖核酸-150(miR-150)表达及其临床意义。方法 选取邢台市中心医院收治的103例脓毒症患者为研究组,另选取体检健康者82例为健康组,均测定外周血miR-125b、miR-150表达及血清白细胞介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)水平。对比研究组、健康组各指标水平,采用Pearson相关性分析法分析脓毒症患者miR-125b、miR-150表达与IL-6、CRP、PCT水平的关系;比较不同严重程度脓毒症患者及不同预后患者的miR-125b、miR-150表达;采用多因素Logistic回归分析法分析miR-125b、miR-150表达与预后的关系;通过受试者工作特征曲线分析miR-125b、miR-150表达对脓毒症预后的预测价值。结果 研究组外周血miR-125b表达与IL-6、CRP、PCT水平分别为(2.43±0.35)、(159.42±26.81)pg/mL、(115.47±20.38)mg/L、(10.57±2.03)ng/mL,均高于健康组(t=31.012、52.149、48.978、46.945,均P=0.000),miR-150表达(0.21±0.04)低于健康组(t=52.008,P=0.000);经Pearson相关性分析,脓毒症患者外周血miR-125b表达与IL-6(r=0.706,P=0.016)、CRP(r=0.711,P=0.013)、PCT(r=0.759,P=0.001)水平均呈正相关,miR-150与IL-6(r=-0.702,P=0.018)、CRP(r=-0.709,P=0.015)、PCT(r=-0.728,P=0.006)水平均呈负相关;脓毒症者外周血miR-125b表达(2.16±0.43)低于严重脓毒症者(2.82±0.27)(t=8.815,P=0.000),脓毒症者外周血miR-150表达(0.24±0.02)高于严重脓毒症者(0.16±0.03)(t=16.248,P=0.000);入院28 d生存者外周血miR-125b表达(2.25±0.41)低于死亡者(3.13±0.36)(t=8.982,P=0.000),生存者外周血miR-150表达(0.23±0.04)高于死亡者(0.13±0.02)(t=11.078,P=0.000);年龄、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、疾病严重程度及外周血miR-125b表达均是脓毒症患者预后的危险因素(OR=2.438、2.689、2.866、2.824,P=0.036、0.012、0.000、0.005),miR-150表达是其保护因素(OR=0.390,P=0.003);外周血miR-125b、miR-150表达预测脓毒症预后的最佳截断点分别为2.854、0.179,灵敏度分别为76.19%、80.95%,特异度分别为79.27%、75.61%,曲线下面积分别为0.861、0.843。结论 与健康人群比较,脓毒症患者外周血miR-125b表达升高,而miR-150表达降低,且miR-125b、miR-150表达均与炎症因子水平、疾病严重程度及预后相关,并对预后具有一定的预测价值,可作为临床判断病情严重程度及预后的指标。

膀胱癌患者血清miR-125b和miR-1276的表达及其临床意义

目的:探讨膀胱癌(BC)患者血清中miR-125b、miR-1276的表达水平及其临床意义。方法:以2017年5月至2019年5月收治的114例BC患者为研究对象(BC组),同时选取同期在开滦总医院林西医院进行健康体检者108例为对照组。比较BC组与对照组及不同临床特征BC患者血清miR-125b、miR-1276表达水平。分析BC患者血清miR-125b与miR-1276之间的关系。分析血清miR-125b、miR-1276对BC发生的预测价值及其与预后生存情况的关系;探究BC患者生存状况的影响因素。结果:BC组患者血清miR-125b、miR-1276水平显著低于对照组(P<0.05)。不同年龄、性别及肿瘤大小BC患者miR-125b、miR-1276水平无显著性差异(P>0.05),不同TNM分期、淋巴结转移、病理分级、浸润深度患者血清miR-125b、miR-1276水平有显著性差异(P<0.05)。Pearson相关性分析表明,BC患者miR-125b与miR-1276呈正相关(r=0.683,P<0.001)。血清miR-125b、miR-1276水平诊断BC的曲线下面积(AUC)分别为0.909、0.911,其灵敏度分别为90.4%、85.1%,特异度分别为74.7%、81.4%;两者联合诊断BC的AUC为0.963,其灵敏度、特异度分别为94.7%、83.6%。Logistic回归分析得出,血清miR-125b、miR-1276是影响BC患者生存状况的独立危险因素(P<0.01)。血清miR-125b及miR-1276高表达患者生存率均显著高于低表达组(χ_(1)^(2)=17.384,χ_(2)^(2)=19.859,P<0.01)。结论:BC患者血清miR-125b、miR-1276水平异常降低,且血清miR-125b、miR-1276水平较低者生存状况较差,因此血清miR-125b、miR-1276在BC患者血清中的表达水平可判定患者生存状况。

miR-125b调控动物肌肉生长发育的研究进展

miR-125b属于miR-125家族,是一种小的、高度保守的ncRNA,在多种生物学功能中发挥关键作用。miR-125b对动物肌肉组织(包括骨骼肌、心肌和平滑肌)发育的调控受到广泛关注。对miR-125b的生物起源和生物学功能以及在动物肌肉组织发育的调控进行了总结,并着重关注其对动物骨骼肌、心肌、平滑肌细胞发育过程及疾病的分子机制研究,为miR-125b在肌肉疾病的治疗和畜禽产肉性能的分子改良提供新的参考依据。

血清miR-27b、Hcy评估老年重症心力衰竭患者随访1年预后的临床价值

目的 探讨血清miR-27b、同型半胱氨酸(Hcy)评估老年重症心力衰竭患者随访1年预后的临床价值。方法 前瞻性纳入86例老年重症心力衰竭患者,检测患者血清miR-27b、Hcy水平,并收集患者年龄、性别、饮酒吸烟史、既往病史、体质量指数及相关实验室检查资料。所有患者接受为期1年的跟踪随访,根据其预后情况分为预后不良组(n=23)和预后良好组(n=63),通过单因素分析对影响患者疾病预后的风险因素筛选,采用Logistic回归分析明确危险因素,并通过受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)分别评价血清miR-27b、Hcy水平及联合检测对老年重症心力衰竭患者预后风险的预测价值。结果 随访1年后,23例(26.74%)预后不良。预后不良组左室射血分数(LVEF)、血清Hcy及miR-27b水平均较预后良好组明显偏高(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,LVEF数值偏低、血清Hcy水平及miR-27b水平偏高均是影响老年重症心力衰患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线显示,血清Hcy、miR-27b及两项指标联合检测的AUC分别为0.838(95%CI为0.721~0.955)、0.823(95%CI为0.694~0.952)、0.968(95%CI为0.925~0.999),联合诊断的AUC较各项指标单因子预测价值较高(P<0.05)。结论 血清Hcy、miR-27b水平均是影响老年重症心力衰竭患者预后不良的独立危险因素,且两项指标均对患者发生不良预后结局的预测效能较高,联合检测的预测价值更高。

子痫前期患者血清及尿液中miR-125a/b-5p的表达及相关临床研究

目的了解miR-125a/b-5p在子痫前期患者外周血血清、尿液中的表达,探讨外周循环miR-125a/b-5p在子痫前期发病中的作用。方法收集子痫前期患者(n=20)及正常妊娠组(n=20)的外周血血清及尿液,miR-125a/b-5p的表达采用基于茎环的qRT-PCR检测,同时结合临床资料进行分析。结果血清miR-125b-5p在子痫前期组中的表达与正常妊娠组比较显著降低,差异有统计学意义(Z=-2.272,P=0.023);血清miR-125a-5p在两组间比较,差异无统计学意义(Z=-0.622,P=0.547);尿液miR-125a/b-5p在两组间比较,差异均无统计学意义(Z=-0.663,-0.189,P>0.05);在子痫前期患者中,舒张压与尿miR-125b-5p存在负相关(r=-0.513,P=0.021);正常妊娠者中,尿素氮与血清miR-125b-5p呈正相关(r=0.472,P=0.036);收缩压与尿液miR-125b-5p,尿液miR-125a-5p呈正相关(r=0.526,0.502,P=0.017,0.024)。结论血清miR-125b-5p的降低与子痫前期的发病相关。

miR-125b通过靶向B7-H4对再生障碍性贫血T细胞活化的影响

目的:探讨miR-125b在再生障碍性贫血(AA)患者T细胞活化中的作用及分子机制。方法:纳入山东省滨州医学院附属医院从2018年1月至2021年10月30例AA患者,15名健康个体作为健康对照(HC)组,分离外周血单个核细胞(PBMC),RT-q PCR检测PBMC中miR-125b、B7-H4 mRNA的水平。免疫磁珠分选AA患者和健康对照者naive T细胞和non-naive T细胞,检测miR-125b、B7-H4 mRNA的水平。转染慢病毒LV-NC inhibitor、LV-miR-125b inhibitor至细胞中,流式细胞术检测T细胞活化。双荧光素酶报告基因实验检测miR-125b和B7-H4之间的靶向关系。RT-q PCR和Western blot检测miR-125b、CD40L、ICOS、IL-10 mRNA和B7-H4蛋白的水平。结果:与HC组比较,AA患者PBMC中miR-125b表达上调(P<0.05),B7-H4 mRNA表达下调(P<0.05),CD4+CD69+T细胞和CD8+CD69+T细胞比例较高(P<0.05)。AA患者的naive T细胞和non-naive T细胞中miR-125b的表达均显著上调,B7-H4 mRNA表达下调(P<0.05),且non-naive T细胞较naive T细胞更明显(P<0.05)。与NC inhibitor组比较,miR-125b inhibitor组中miR-125b的表达显著降低(P<0.05),PBMC中CD4+和CD8+T细胞上CD69的表达水平显著降低(P<0.05),miR-125b inhibitor和B7-H4-3′UTR-WT共转染后荧光素酶活性显著升高(P<0.05)。与NC inhibitor组比较,miR-125b inhibitor组细胞中B7-H4 mRNA和蛋白水平显著升高(P<0.05)。与miR-125b inhibitor+shRNA组比较,miR-125b inhibitor+sh-B7-H4组CD4+和CD8+T细胞上的CD69表达水平显著升高(P<0.05),CD40L、ICOS和IL-10mRNA水平亦显著升高(P<0.05)。结论:miR-125b可能通过靶向B7-H4促进AA患者T细胞活化。

circVAPA通过miR-125b/HOXA7轴逆转口腔癌细胞化疗耐药的机制研究

目的:探究circVAPA通过miR-125b/HOXA7轴逆转口腔癌细胞化疗耐药的机制研究。方法:将SCC9/DDP细胞分为SCC9/DDP组、si-NC组、si-VAPA组、miR-125b组、miR-NC组、pcDNA-VAPA组、miR-HOXA7组。qRT-PCR检测细胞中circVAPA和miR-125b表达,MTT法、Transwell小室法和流式细胞术检测细胞耐药、增殖、侵袭和凋亡,蛋白质印迹法检测细胞中HOXA7蛋白表达,双荧光素酶报告基因实验验证VAPA、miR-125b和HOXA7的靶向关系。结果:和HOK相比,SCC9和SCC9/DDP细胞中circVAPA表达明显升高,miR-125b表达明显降低(P<0.05);且SCC9/DDP细胞中circVAPA表达明显高于SCC9细胞,miR-125b表达明显低于SCC9细胞(P<0.05)。和SCC9/DDP组相比,si-VAPA组细胞IC 50浓度、细胞耐药指数、细胞侵袭能力和细胞中HOXA7蛋白表达明显降低,细胞凋亡能力明显增加(P<0.05)。和miR-NC组相比,miR-125b组细胞IC 50浓度、细胞耐药指数、细胞侵袭能力和细胞中HOXA7蛋白表达明显降低,细胞凋亡能力明显增加(P<0.05)。靶向关系结果显示,miR-125b组荧光素酶活性明显低于miR-NC组(P<0.05);si-VAPA组细胞中miR-125b表达明显高于si-NC组(P<0.05),miR-125b组细胞中HOXA7表达明显低于miR-NC组(P<0.05)。和miR-125b组相比,pcDNA-VAPA组和miR-HOXA7组细胞IC 50浓度、细胞耐药指数、细胞侵袭能力和细胞中HOXA7蛋白表达明显升高,细胞凋亡能力明显降低(P<0.05)。结论:低表达circVAPA可通过调控miR-125b/HOXA7轴来逆转口腔癌细胞化疗耐药,抑制口腔癌化疗耐药细胞增殖、侵袭并诱导凋亡。

miR-125b对肝脏血管新生调控作用的实验研究

目的探讨miR-125b对肝脏血管新生的调控作用,为肝纤维化的防治提供新的靶点。方法用miR-125b模拟物和抑制物对人肝窦内皮细胞进行转染,而后使用qRT-PCR和ELISA检测血管内皮生长因子(VEGF)、分化抗原簇31(CD31)、血管性血友病因子(vWF)、Ⅳ型胶原(CollagenⅣ)、层粘连蛋白(LN)的mRNA和蛋白表达,荧光探针检测一氧化氮(NO)的表达;扫描电镜检测人肝窦内皮细胞表面窗孔的改变;血管形成实验观察各组血管新生情况;双荧光素酶报告基因实验验证miR-125b与VEGF的靶向关系。结果qRT-PCR和ELISA检测显示与阴性对照组相比,miR-125b模拟物转染后VEGF、CD31、vWF、CollagenⅣ、LN的mRNA和蛋白表达下降(P<0.05),而miR-125b抑制物转染后VEGF、CD31、vWF、CollagenⅣ、LN的mRNA和蛋白表达增加(P<0.05);荧光探针检测显示与阴性对照组相比,miR-125b模拟物转染后NO平均荧光强度表达下降(P<0.05),而miR-125b抑制物转染后NO平均荧光强度表达增加(P<0.05);电镜检测发现与阴性对照组相比,miR-125b模拟物转染后人肝窦内皮细胞表面窗孔数量增加(P<0.05),而miR-125b抑制物转染后人肝窦内皮细胞表面窗孔数量下降(P<0.05);血管形成实验检测显示与阴性对照组相比,miR-125b模拟物转染后血管新生数量下降(P<0.05),而miR-125b抑制物转染后血管新生数量增加(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验显示与阴性对照组相比,VEGF野生型转染miR-125b模拟物相对荧光强度表达降低(P<0.05),而VEGF突变型转染miR-125b模拟物相对荧光强度表达降低(P>0.05)。结论miR-125b能够抑制肝脏血管新生,从而发挥抗肝纤维化的作用,为慢性肝病防治和新药研发提供新的参考。

甲状腺癌患者NF-κB mRNA、miR-125a-5p与临床病理特征及预后的关系

目的探究甲状腺癌患者核转录因子-κB(NF-κB)mRNA、miR-125a-5p与临床病理特征及预后的关系。方法选取2017年5月—2020年4月240例甲状腺癌手术患者作为观察组,另选取同期体检健康者60例作为对照组。比较2组NF-κB mRNA、miR-125a-5p水平,分析甲状腺癌患者NF-κB mRNA、miR-125a-5p水平与临床病理特征的关系,比较复发与未复发患者临床资料,分析NF-κB mRNA、miR-125a-5p水平与甲状腺癌术后复发的关系及NF-κB mRNA、miR-125a-5p间的相关性,采用受试者工作特征曲线评价NF-κB mRNA、miR-125a-5p检测对甲状腺癌术后复发的预测价值。结果观察组NF-κB mRNA水平高于对照组,miR-125a-5p水平低于对照组(P<0.05)。甲状腺癌患者NF-κB mRNA、miR-125a-5p水平在肿瘤大小、临床分期、血管间隙浸润及淋巴结转移方面比较差异有统计学意义(P<0.01)。甲状腺癌术后复发患者肿瘤大小>5 cm、临床分期Ⅲ~Ⅳ期、血管间隙浸润及淋巴结转移比例和术后1周NF-κB mRNA水平均高于未复发患者,术后1周miR-125a-5p水平及NF-κB mRNA、miR-125a-5p手术前后差值绝对值均低于未复发患者(P<0.05,P<0.01)。NF-κB mRNA、miR-125a-5p手术前后差值绝对值是甲状腺癌术后复发的影响因素(P<0.01)。NF-κB mRNA、miR-125a-5p手术前后差值绝对值联合预测甲状腺癌术后复发的曲线下面积为0.927,高于各指标单独预测的曲线下面积(0.831、0.775)(P<0.05)。相关性分析可知,甲状腺癌患者NF-κB mRNA与miR-125a-5p呈负相关(r=-0.765,P<0.01)。结论甲状腺癌患者NF-κB mRNA水平上调,miR-125a-5p水平下调,临床检测手术前后差值绝对值,可预测其术后复发情况,便于术后早期制订辅助治疗方案。

母体血清miR-125b-2直接检测应用于无创产前诊断的相关研究

目的通过孕妇血清miR-125b-2直接检测,探讨其应用于无创产前诊断的可能性。方法应用茎环RT-PCR技术直接检测96例正常孕妇和46例异常孕妇血清miR-125b-2水平,通过比较平均Cq值观察各组间miR-125b-2水平的差异。结果 96例正常孕妇血清miR-125b-2平均Cq值为34.11,妊娠早期、中期、晚期平均Cq值分别为34.70,33.64,33.97。妊娠中、晚期平均Cq值低于妊娠早期,miR-125b-2在妊娠中、晚期的水平高于妊娠早期(P<0.05),而妊娠中、晚期之间没有明显差异(P>0.05);唐氏筛查高危孕妇平均Cq值(32.61)低于正常妊娠中期孕妇平均Cq值(33.64),其miR-125b-2水平高于正常妊娠中期孕妇(P<0.05);最终确诊为异常的孕妇平均Cq值(31.90)低于正常孕妇(34.11),其血清miR-125b-2水平明显高于正常孕妇(P<0.05);此外,异位妊娠孕妇平均Cq值(30.56)低于正常孕妇(34.11),其血清miR-125b-2的水平也明显高于正常孕妇(P<0.05)。结论母体外周循环的miRNAs可能成为无创产前诊断的另一类新的生物标记物。

An Investigation of the Effects of B7-H4 Gene rs10754339 and miR-125a Gene rs12976445 on Cancer Susceptibility

Objective To investigate the effects of the B7-H4 gene rs10754339 and miR-125a gene rs12976445 on cancer susceptibility through a case-control study and meta-analysis.Methods A total of 1,490 cancer patients(lung/gastric/liver/:550/460/480)and 800 controls were recruited in this case-control study.The meta-analysis was performed by pooling the data from previous related studies and the present study.Results The results of this study showed that in the Hubei Han Chinese population,the rs10754339gene was significantly associated with the risk of lung and gastric cancer but not liver cancer,and the rs12976445 gene was significantly associated with the risk of lung cancer but not liver or gastric cancer.The meta-analysis results indicated that rs10754339 and rs12976445 contributed to cancer susceptibility in the Chinese population and also revealed a significant association between rs10754339and breast cancer risk,as well as between rs12976445 and lung cancer risk.Conclusion The B7-H4 gene rs10754339 and miR-125a gene rs12976445 may be the potential genetic markers for cancer susceptibility in the Chinese population,which should be validated in future studies with larger sample sizes in other ethnic populations.

BMSCs分泌的miR-125b通过外泌体途径对体外成骨分化的影响

目的研究骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)分泌的miR-125b是否通过外泌体途径抑制其体外成骨分化。方法提取BMSCs原代,通过流式细胞仪进行其表面抗原(CD45、CD90)的鉴定来确定纯度,分别进行成骨诱导,茜素红染色检测成骨效果;成脂诱导,油红染色检测成脂效果。检测P3代上清液外泌体标志性蛋白CD9、CD63的表达量,电镜下观察确定外泌体提取成功。成骨诱导后的第0、7、14、21天进行qRT-PCR测定外泌体内miR-125b及细胞内碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、Runx2的mRNA的表达量。BMSCs侵染miR-125b模拟物及模拟物阴性对照剂,miR-125b抑制剂及其抑制物阴性对照剂,转染后验证转染效率。转染后五组(前四组+生理盐水空白对照组)细胞上清液外泌体提取,提取后与BMSCs共培养,继续成骨诱导48 h,qPCR及蛋白质免疫印迹(Western Blot)分别测定BMSCs细胞ALP、Runx2、miR-125b的表达量。结果(1)成功分离的BMSCs向成脂、成骨分化。(2)成骨诱导分化期间,P3代BMSCs的成骨标志基因ALP mRNA表达量明显增加,Runx2基因的表达趋势与其相同,而在上清液所提取的外泌体中,miR-125b趋势相反,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)转染后共培养组中模拟物组较模拟物阴性对照组其成骨标志基因ALP、Runx2 mRNA和ALP蛋白表达显著下降,而抑制组较抑制剂阴性对照组其成骨基因ALP、Runx2 mRNA和ALP蛋白表达显著上升,差异有统计学意义(P<0.05)。结论BMSCs来源miR-125b能通过外泌体途径抑制其体外成骨分化。