血清miR-141-3p、IL-35、IL-10联合诊断前列腺癌的价值

目的研究血清miR-141-3p、白细胞介素-35(IL-35)、IL-10联合诊断前列腺癌的价值。方法选取2017年9月至2020年9月上海中医药大学附属上海市中西医结合医院(下称本院)疑似前列腺癌患者181例作为实验组,以细胞穿刺活检病理结果作为金标准,其中前列腺癌82例(前列腺癌组),良性前列腺病变99例(良性前列腺病变组),选取本院同期体检的健康人群91例作为对照组。对比3组患者血清miR-141-3p、IL-35、IL-10;检测前列腺癌组血清miR-141-3p、IL-35、IL-10阳性检出率,绘制曲线下面积(AUC)分析血清miR-141-3p、IL-35、IL-10定量联合前列腺癌与良性前列腺病变检测的诊断价值。结果与对照组比较,前列腺癌组和良性前列腺病变组血清miR-141-3p、IL-35、IL-10水平显著更高;与良性前列腺病变组比较,前列腺癌组血清miR-141-3p、IL-35、IL-10显著更高,差异均有统计学意义(P<0.05)。miR-141-3p诊断前列腺癌阳性率为91.46%(75/82)。IL-35诊断前列腺癌阳性率为87.80%(72/82);IL-10诊断前列腺癌阳性率为85.36%(70/82);从各个指标的检测结果分析,3个指标联合检测明显优于单个指标检测的检出率,3个指标联合检测前列腺癌的灵敏度为96.3%、特异度为95.3%,AUC 0.975,AUC显著大于3个指标单独检查。联合检测对良性前列腺病变的灵敏度为41.4%、特异度为87.9%,AUC为0.620。结论血清miR-141-3p、IL-35、IL-10联合诊断前列腺癌的灵敏度、特异度均较高,适合临床上对于前列腺癌的早期诊断。

高血压性脑出血患者血清miR-141-3p、miR-29a-3p水平变化及临床意义

目的观察高血压性脑出血(HICH)患者血清miR-141-3p、miR-29a-3p水平变化,并探讨其与病情以及预后的关系。方法选择167例HICH患者(HICH组),根据斯堪纳维亚卒中量表(SSS)评分将患者分为轻型组(0~15分,42例)、中型组(16~30分,67例)和重型组(31~45分,58例),根据出院3个月后格拉斯哥预后(GOS)评分分为预后良好组(>4分,87例),预后不良组(≤4分,80例),另选择同期于我院体检的64例健康志愿者(对照组)。比较组间血清miR-141-3p、miR-29a-3p和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β和IL-6水平。采用Pearson相关分析miR-141-3p、miR-29a-3p与炎性因子的相关性,多因素Logistic回归分析HICH患者预后不良的危险因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-141-3p、miR-29a-3p预测HICH患者预后不良的价值。结果HICH组血清miR-141-3p、miR-29a-3p水平低于对照组,血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平高于对照组(P均<0.01)。重型组血清miR-141-3p、miR-29a-3p水平低于中型组和轻型组,血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平高于中型组和轻型组(P均<0.01);中型组血清miR-141-3p、miR-29a-3p水平低于轻型组,血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平高于轻型组(P均<0.01)。HICH组血清miR-141-3p、miR-29a-3p水平与TNF-α、IL-1β、IL-6水平均呈负相关(P均<0.01)。高水平miR-141-3p(OR=0.656,95%CI:0.500~0.862,P<0.01)、miR-29a-3p(OR=0.733,95%CI:0.581~0.926,P<0.01)是HICH预后的保护因素。miR-141-3p、miR-29a-3p预测HICH预后不良的曲线下面积为0.675、0.688,联合预测曲线下面积为0.898,高于单独指标预测(Z分别为4.950、5.325,P均<0.05)。结论HICH患者血清miR-141-3p、miR-29a-3p水平均降低,且与神经损伤程度加重以及预后不良有关。

双参数MRI纹理分析参数及血清miR-141-3p水平与早期前列腺癌患者腹腔镜根治术后骨转移的关系

目的分析双参数MRI(bpMRI)纹理分析参数及血清miR-141-3p水平与早期前列腺癌患者腹腔镜根治术后骨转移的关系。方法回顾性分析82例行腹腔镜根治术的早期前列腺癌患者的临床资料,根据术后3年内发生骨转移情况将其分为转移组与未转移组各41例。比较两组患者的基线资料,以及术前血清前列腺特异性抗原(PSA)水平、血清miR-141-3p表达水平、bpMRI纹理分析参数。采用Logistic回归模型分析术前血清PSA水平、血清miR-141-3p表达水平与前列腺癌根治术后骨转移的关系。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析术前血清miR-141-3p表达水平、bpMRI纹理分析参数预测前列腺癌根治术后骨转移的价值。结果转移组患者术前血清miR-141-3p表达水平、血清PSA水平,以及表观弥散系数(ADC)熵、T_(2)WI熵、ADC偏度、T_(2)WI偏度均高于未转移组(均P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,术前血清miR-141-3p表达水平、血清PSA水平升高可能与前列腺癌根治术后骨转移有关(均P<0.05)。ROC曲线分析显示,用于预测前列腺癌根治术后骨转移时,术前血清miR-141-3p表达水平、ADC熵、ADC偏度、T_(2)WI熵、T_(2)WI偏度的曲线下面积在0.785~0.882之间;而术前bpMRI纹理分析参数(ADC熵、ADC偏度、T_(2)WI熵、T_(2)WI偏度)联合血清miR-141-3p表达水平的曲线下面积高达0.976。结论早期前列腺癌患者术前bpMRI纹理分析参数、血清miR-141-3p水平可能与其腹腔镜根治术后骨转移有关,二者对术后骨转移的发生均具有一定的预测价值,而二者联合应用时更进一步提高预测效能。

血清miR-141-3p、sE-cadherin、COX-2水平在乳腺癌中的表达及意义

目的探讨血清miR-141-3p、可溶性上皮钙黏蛋白(s E-cadherin)、环氧合酶-2(COX-2)水平在乳腺癌中的表达及与临床病理、细胞免疫的关系。方法选择2020年4月至2021年12月南阳市第二人民医院收治的乳腺癌患者50例进行研究,设为病例组;并选取同期入院的乳腺良性疾病患者50例设为对照组。采用酶联免疫分析两组患者miR-141-3p、sE-cadherin、COX-2表达及与临床病理、细胞免疫之间的关系。结果病例组血清miR-141-3p、sE-cadherin、COX-2水平显著高于对照组,差异均有统计学意义(t=24.400,8.229,26.195,P<0.01);病例组CD4+、CD4+/CD8+水平显著低于对照组,CD8+显著高于对照组,差异均有统计学意义(t=19.419,170.271,203.192,P<0.01);所有患者不同年龄、病理组织学类型与血清miR-141-3p、sE-cadherin、COX-2表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05);肿瘤最大径>4 cm、病理分级Ⅲ级~Ⅳ级、分化程度高分化程度、淋巴结转移血清miR-141-3p、sE-cadherin、COX-2水平均明显高于肿瘤最大径≤4 cm、病理分级Ⅰ~Ⅱ级级、中低分化程度、淋巴结未转移患者,差异有统计学意义(P<0.05);相关性分析显示,血清miR-141-3p、sE-cadherin、COX-2与乳腺癌患者肿瘤最大径、病理分级、分化程度、淋巴结转移及CD8+之间均呈正相关,血清miR-141-3p、sE-cadherin、COX-2与乳腺癌患者CD4+、CD4+/CD8+之间均呈负相关(P<0.05)。结论乳腺癌患者中血清miR-141-3p、sE-cadherin、COX-2水平表达明显升高,与临床病理、细胞免疫之间关系密切,可能协同参与了乳腺癌的发生、发展,对乳腺癌患者预后的评估具有重要意义。

miR-483-3p在妊娠期糖尿病患者血清中的表达及临床意义

目的研究miR-483-3p在妊娠期糖尿病(GDM)患者血清中的表达及临床意义。方法选取在安丘市人民医院妇产科常规产检的24~32孕周的GDM患者100例,作为GDM组,并选取同年龄段24~32孕周的98例健康孕妇作为糖耐量正常(NGT)组。通过RT-qPCR检测miR-483-3p的表达水平;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-483-3p对GDM的诊断价值;卡方检验分析GDM组miR-483-3p的表达量与临床指标的相关性;采用Logistic回归分析GDM的风险因素。双荧光素酶报告基因实验验证miR-483-3p和人自噬相关蛋白7(ATG7)的靶向关系。利用CCK-8法,流式细胞测量术和Transwell小室法分别检测高糖培养的HTR-8/SVneo细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭能力。结果GDM组患者血清中miR-483-3p的表达水平比NGT组增高,miR-483-3p的表达对GDM具有诊断价值。孕前身体质量指数(BMI)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和三酰甘油(TG)与血清miR-483-3p的表达有显著相关性(P<0.05),并且孕前BMI和TG是导致妊娠期糖尿病的风险因素。miR-483-3p通过靶向调控ATG7调节细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭(P<0.05)。结论miR-483-3p参与GDM的疾病进展,可能作为GDM的诊断生物标志物。

肺癌患者血清中miR-141-3p,NRSN2表达水平与骨转移的相关性研究

目的探讨微小RNA-141-3p(miR-141-3p)和神经膜蛋白-2(NRSN2)表达水平与肺癌患者骨转移的相关性。方法选取2021年6月~2023年6月在我院就诊的76例肺癌骨转移患者(肺癌骨转移组)和43例肺癌未发生骨转移患者(肺癌未转移组)作为研究对象,另纳入52例体检健康者作为对照组,收集整理其临床基本资料和病理资料。采用qRT-PCR法检测三组血清中miR-141-3p、NRSN2表达水平;TargetScanHuman网站预测miR-141-3p与NRSN2的靶向关系;肺癌骨转移患者血清miR-141-3p与NRSN2表达水平相关性采用Pearson相关分析;Logistic回归分析探讨影响肺癌患者发生骨转移的因素;受试者工作特征(ROC)曲线评价血清miR-141-3p、NRSN2水平诊断肺癌患者是否发生骨转移的临床效能。结果与肺癌未转移组、对照组相比,肺癌骨转移组血清miR-141-3p水平显著降低(P<0.05),与对照组miR-141-3p水平相比,肺癌未转移组显著降低(P<0.05);肺癌骨转移组血清NRSN2水平显著高于未转移组、对照组(P<0.05),未转移组血清NRSN2水平比对照组高(P<0.05)。肺癌骨转移患者血清中miR-141-3p表达水平与肿瘤直径、病理类型、骨转移数目、临床分期和合并其他脏器转移有关(P<0.05),NRSN2水平与肿瘤直径、骨转移数目、临床分期、合并其他脏器转移相关(P<0.05)。Pearson相关分析显示,肺癌骨转移患者血清miR-141-3p与NRSN2表达水平呈现负相关(r=-0.517,P<0.05)。Logistic回归结果显示,NRSN2表达水平、病理类型、临床分期以及合并其他脏器转移均是肺癌患者发生骨转移的独立危险因素(P<0.05);血清miR-141-3p水平是独立保护因素(P<0.05)。血清miR-141-3p、NRSN2水平以及二者联合应用诊断肺癌发生骨转移的曲线下面积(AUC)分别为0.866、0.879、0.941,95%CI分别为0.791~0.921、0.807~0.932、0.882~0.976,二者联合应用诊断肺癌患者发生骨转移的临床价值优于miR-141-3p、NRSN2单独检测(Z二者联合-miR-141-3p=2.937、Z_(二者联合-NRSN2)=2.303,P=0.003、0.021)。结论miR-141-3p、NRSN2水平与肺癌骨转移患者肿瘤直径、骨转移数目、临床分期有关,且miR-141-3p、NRSN2联合应用对诊断肺癌患者是否发生骨转移具有较高的临床价值。

多囊卵巢综合征患者血清miR-335-5p、miR-141-3p水平变化及其诊断价值

目的探究多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清微小RNA-335-5p(miR-335-5p)、miR-141-3p水平变化及其诊断价值。方法选择2019年2月—2022年6月南通市中医院妇科治疗PCOS患者145例为PCOS组,根据胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)分为IR亚组和非IR亚组;根据体质量指数(BMI)分为肥胖亚组和非肥胖亚组;根据睾酮水平分为高雄激素亚组和非高雄激素亚组;另选取同时期女性健康体检者110例为健康对照组。荧光定量PCR检测并比较2组血清miR-335-5p、miR-141-3p水平,以及2指标在不同临床/病情特点中的差异;Pearson相关或Spearman秩相关系数描述血清miR-335-5p、miR-141-3p与临床指标之间相关性;多因素Logistic分析影响PCOS发生的因素;ROC曲线分析血清miR-335-5p、miR-141-3p水平对PCOS的诊断价值。结果PCOS组患者的BMI、空腹胰岛素(FINS)、黄体生成素(LH)、睾酮(T)水平及HOMA-IR显著高于健康对照组(t/P=4.881/<0.001、16.326/<0.001、37.901/<0.001、43.690/<0.001、15.395/<0.001);与健康对照组比较,PCOS组患者血清miR-335-5p、miR-141-3p水平均下降(t/P=10.516/<0.001、8.767/<0.001);IR亚组、肥胖亚组、高雄激素亚组血清miR-335-5p、miR-141-3p水平均低于非IR亚组、非肥胖亚组、非高雄激素亚组(t/P=2.882/0.005、3.783/<0.001,5.196/<0.001、4.515/<0.001,5.069/<0.001、4.296/<0.001);相关性分析显示,血清miR-335-5p、miR-141-3p水平均与IR、BMI、睾酮呈负相关(P均<0.01);血清miR-335-5p低、miR-141-3p低、BMI高、FINS高、LH高、睾酮高、HOMA-IR高均为影响PCOS发生的危险因素[OR(95%CI)=1.812(1.348~2.436)、2.536(1.647~3.842)、2.913(1.523~5.573)、1.293(1.207~1.385)、1.692(1.180~2.427)、3.452(2.518~4.733)、4.620(1.916~11.139)];血清miR-335-5p、miR-141-3p及二者联合诊断PCOS患者的曲线下面积(AUC)分别为0.818、0.733、0.873,二者联合检测较血清miR-335-5p、miR-141-3p单独检测更具诊断效能(Z=2.882、4.767,P均<0.001)。结论血清miR-335-5p、miR-141-3p在PCOS患者中低表达,可能参与了PCOS患者IR、肥胖及高雄激素分泌,二者联合诊断对PCOS更具诊断效能。

急性胰腺炎患者血清miR-455-3p,miR-141-3p水平表达与病情严重程度的关系研究

目的 探讨急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)患者血清miR-455-3p,miR-141-3p水平表达与病情严重程度的关系。方法 选取2021年11月~2023年11月于都江堰市人民医院就诊的AP患者133例(AP组)作为研究对象;根据病情程度将AP患者分为重症组(n=43)和轻症组(n=90)。同期选取于该院体检健康者135例作为对照组。实时荧光定量PCR(RT-q RCR)法检测血清miR-455-3p和miR-141-3p水平。Spearman相关性分析血清miR-455-3p,miR-141-3p水平与急性生理与慢性健康评分Ⅱ(acute physiology and chronic health evaluation Ⅱ,APACHE Ⅱ)、Ranson评分的相关性;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-455-3p,miR-141-3p水平对重症AP的诊断价值;多因素Logistics回归分析影响重症AP的发生因素。结果 AP组血清miR-455-3p(0.61±0.13)低于对照组(1.12±0.21),miR-141-3p水平(1.37±0.11)高于对照组(1.04±0.15),差异具有统计学意义(t=23.863,20.513,均P<0.05)。重症组患者血清miR-455-3p水平(0.53±0.10)低于轻症组(0.64±0.12),miR-141-3p水平(1.51±0.14)高于轻症组(1.30±0.15),差异具有统计学意义(t=6.056,7.713,均P<0.05)。重症组患者血清淀粉酶(serum amylase,AMS)、脂肪酶(lipase,LPS)水平及APACHEⅡ,Ranson评分高于轻症组,差异具有统计学意义(t=2.227,2.290,18.267,11.259,均P <0.05)。Spearman相关性分析结果表明,AP患者血清miR-455-3p与APACHEⅡ,Ranson评分呈负相关(r=-0.702,-0.783,均P <0.05),miR-141-3p与APACHEⅡ,Ranson评分呈正相关(r=0.787,0.734,均P <0.05)。ROC曲线结果表明血清miR-455-3p,miR-141-3p水平单独及联合诊断重症AP的AUC分别为0.848,0.822和0.919,且二者联合诊断优于单独诊断(Z=3.081,2.524,均P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示miR-455-3p是影响重症AP的保护因素,miR-141-3p是影响重症AP的危险因素(P<0.05)。结论 AP患者血清miR-455-3p下降和miR-141-3p升高与病情严重程度密切相关。

miR-141-3p对腰椎间盘突出症大鼠背根神经节炎症及下肢疼痛的抑制和改善作用

背景:研究表明,胰岛素样生长因子1/血小板源性生长因子有抑制纤维环细胞凋亡的作用。miR-141-3p微小RNA在骨髓基质细胞中随着年龄的增加而增加,且与炎症信号通路的活化存在一定关系,提示其可能成为腰椎间盘突出症的治疗靶点。目的:探究miR-141-3p通过调控胰岛素样生长因子1/血小板源性生长因子对腰椎间盘突出症大鼠背根神经节炎症及下肢疼痛的影响。方法:选取50只SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常组、模型组、miR-NC组、miR-141-3p inhibitor组、miR-141-3p mimics组,每组10只。除正常组外,其余大鼠采用自体髓核移植法进行腰椎间盘突出症建模。建模成功后,对miR-NC组、miR-141-3p inhibitor组和miR-141-3p mimics组大鼠鞘内分别注射10μL 20μmol/L miR-NC,miR-141-3p inhibitor,miR-141-3p mimics,均每天注射1次,连续注射28 d;正常组、模型组同期同位置注射同体积生理盐水。采用热缩足潜伏期阈值评价大鼠下肢疼痛,实时荧光定量PCR检测背根神经节组织miR-141-3p mRNA表达,ELISA法检测背根神经节组织炎症因子,免疫印迹法检测背根神经节组织胰岛素样生长因子1/血小板源性生长因子蛋白表达,并分析miR-141-3p与胰岛素样生长因子1/血小板源性生长因子的相关性。结果与结论:miR-NC组各项指标与模型组比较,差异均无显著性意义。①大鼠热缩足潜伏期阈值:模型组明显低于正常组(P<0.05),miR-141-3p inhibitor组明显低于miR-NC组(P<0.05),miR-141-3p mimics组明显高于miR-141-3p inhibitor组(P<0.05)。②背根神经节组织miR-141-3p mRNA表达:模型组明显低于正常组(P<0.05),miR-141-3p inhibitor组明显低于miR-NC组(P<0.05),miR-141-3p mimics组明显高于miR-141-3p inhibitor组(P<0.05)。③背根神经节组织肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素1含量:模型组明显高于正常组(P<0.05),miR-141-3p inhibitor组明显高于miR-NC组(P<0.05),miR-141-3p mimics组明显低于miR-141-3p inhibitor组(P<0.05)。④背根神经节组织胰岛素样生长因子1、血小板源性生长因子蛋白表达:模型组明显低于正常组(P<0.05),miR-141-3p inhibitor组明显低于miR-NC组(P<0.05),miR-141-3p mimics组明显高于miR-141-3p inhibitor组(P<0.05)。⑤胰岛素样生长因子1与miR-141-3p呈正相关(r=0.904,P<0.001),血小板源性生长因子与miR-141-3p呈正相关(r=0.879,P<0.001)。⑥结论:miR-141-3p可显著改善腰椎间盘突出症大鼠下肢疼痛,抑制背根神经节炎症,其机制可能与促进胰岛素样生长因子1/血小板源性生长因子表达有关。

miR-141-3p靶向调控HMGB1对LPS诱导的A549细胞损伤的影响

目的探讨miR-141-3p通过靶向调控高迁移率族蛋白1(HMGB1)对脂多糖(LPS)诱导的A549细胞损伤的影响。方法以Ⅱ型肺泡上皮细胞来源的A549细胞作为研究对象,将miR-141-3p mimics、mimics NC、HMGB1基因过表达质粒(pcDNA3.1-HMGB1)和空载质粒(Vector)分别或共转染至A549细胞中,再采用10μg/ml LPS处理24 h。细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测各组细胞增殖活性;比色法检测各组细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性;流式细胞术检测各组细胞凋亡水平;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组细胞中白介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;双荧光素酶报告基因实验验证miR-141-3p与HMGB1之间的靶向调控关系。结果LPS干预后,A549细胞增殖活性及细胞中miR-141-3p表达水平降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),细胞中IL-1β、IL-6、TNF-α水平及上清液中LDH活性升高(P<0.05)。过表达miR-141-3p可增强LPS处理后的A549细胞增殖活性(P<0.05),降低细胞凋亡率及细胞中IL-1β、IL-6、TNF-α水平和上清液中LDH活性(P<0.05)。然而,HMGB1基因过表达可逆转miR-141-3p对LPS诱导A549细胞损伤的改善作用。双荧光素酶报告基因实验证实,HMGB1是miR-141-3p下游靶基因。结论miR-141-3p可抑制LPS诱导的A549细胞凋亡,降低炎症因子表达水平,改善A549细胞损伤,其作用机制可能与靶向调控HMGB1表达有关。

电刺激诱导miR-741-3p调控Radil促进施万细胞的迁移

背景:越来越多的动物实验和临床研究证实电刺激可以促进周围神经损伤修复,具体的机制尚未完全明确。目的:探讨电刺激诱导miR-741-3p调控Radil对施万细胞迁移的影响。方法:①12只雄性SD大鼠,随机分为电刺激组和对照组,电刺激组在坐骨神经挤压伤后连续电刺激7 d,对照组在坐骨神经挤压后不做任何处理。术后第7天取损伤处神经,利用荧光原位杂交技术检测两组miR-741-3p的表达差异。②通过miRDB、TargetScan和miRWalk数据库预测miR-741-3p靶基因。③将miR-741-3p模拟物及其对照、miR-741-3p抑制物及其对照、Radil siRNA及其对照、miR-741-3p抑制物+Radil siRNA及miR-741-3p抑制物+siRNA对照对施万细胞进行转染,采用RT-PCR检测转染效率,Transwell小室检测施万细胞的迁移能力。结果与结论:①电刺激组神经残端miR-741-3p荧光强度低于对照组;②数据库预测结果显示有69个基因可能是miR-741-3p靶基因,Radil是预测靶基因之一,主要参与细胞黏附和迁移;③与miR-741-3p抑制物对照组相比,miR-741-3p抑制物组施万细胞迁移数增多(P<0.05);与miR-741-3p模拟物对照组相比,miR-741-3p模拟物组施万细胞迁移数减少(P<0.05);与siRNA对照组相比,Radil siRNA组施万细胞迁移数减少(P<0.05);④与miR-741-3p抑制物对照组相比,miR-741-3p抑制物组Radil的表达水平升高;与miR-741-3p模拟物对照组相比,miR-741-3p模拟物组Radil的表达水平降低;⑤与miR-741-3p抑制物+siRNA对照组相比,miR-741-3p抑制物+Radil siRNA组施万细胞迁移数减少(P<0.05)。结果表明,电刺激通过下调miR-741-3p调控Radi的表达来促进施万细胞迁移。

冠心病患者血清miR-3129-5p和miR-6870-3p表达与疾病严重程度的关系研究

目的探究冠心病(CHD)患者血清miR-3129-5p和miR-6870-3p表达与疾病严重程度的关系。方法以2021年3月至2023年7月在青岛大学附属心血管病医院进行治疗的80例CHD患者为研究对象(CHD组),根据Gensini评分将CHD患者分为轻度组(n=27)、中度组(n=33)和重度组(n=20),另选取同期在本院进行体检的健康者80例为对照组。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法测定血清miR-3129-5p、miR-6870-3p水平;血清miR-3129-5p、miR-6870-3p水平与Gensini评分之间的关系采用Spearman相关性分析;发生CHD的影响因素采用Logistic多因素模型分析;血清miR-3129-5p、miR-6870-3p水平对CHD的诊断价值采用受试者工作特征(ROC)曲线分析。结果CHD组患者血清miR-3129-5p、miR-6870-3p水平均高于对照组(P<0.05),且随着病情程度的增加,CHD患者血清miR-3129-5p、miR-6870-3p水平逐渐升高(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,血清miR-3129-5p、miR-6870-3p水平与Gensini评分均呈正相关(r_(1)=0.411,r_(2)=0.431,P<0.001)。Logistic回归分析结果显示,总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、甘油三酯(TG)、miR-3129-5p、miR-6870-3p升高均为发生CHD的危险因素(P<0.05),高密度脂蛋白(HDL-C)升高为发生CHD的保护因素(P<0.05)。ROC曲线结果显示,血清miR-3129-5p、miR-6870-3p诊断CHD的曲线下面积(AUC)分别为0.855、0.852,敏感度分别为78.8%、83.8%,特异度分别为65.1%、56.3%,二者联合预测CHD的AUC为0.927,敏感度为77.5%、特异度为73.8%。结论CHD患者血清miR-3129-5p、miR-6870-3p水平均升高,且血清miR-3129-5p、miR-6870-3p与CHD患者疾病严重程度密切相关。miR-3129-5p、miR-6870-3p联合检测可作为诊断CHD的重要辅助参考指标。

miR-483-3p增强胰腺癌对吉西他滨敏感性及分子机制研究

吉西他滨耐药限制了其对胰腺癌的治疗效果,而传统化学药物无法有效克服吉西他滨对胰腺癌的耐药.研究表明,microRNA(miRNA)的异常表达与肿瘤发生、发展和化疗耐药性有关.对miR-483-3p在胰腺癌吉西他滨耐药中的作用和潜在机制进行了研究.qPCR结果显示miR-483-3p在胰腺癌耐药细胞中显著下调.miR-483-3p minics瞬时转染显著提高了耐药细胞内miR-483-3p的表达水平,显著减弱了耐药细胞的增殖、迁移、转移和侵袭能力,恢复了吉西他滨的反应性.Western blot结果显示miR-483-3p抑制PI3K和p-AKT蛋白的表达水平,抑制Bcl2蛋白表达,促进Bax、Bad和cleaved-Caspase-3蛋白表达,促进细胞凋亡进程.总之,研究结果表明miR-483-3p通过抑制PI3K/AKT信号通路促进细胞凋亡,增加胰腺癌对吉西他滨的敏感性,miR-483-3p可能是吉西他滨耐药胰腺癌患者的潜在治疗策略.

miR-212-3p靶向MAPK3调控骨髓间充质干细胞的衰老

背景:骨质疏松症患者的骨髓间充质干细胞表现出明显衰老状态,并且细胞活性及成骨分化水平显著降低。miR-212-3p能够抑制人骨髓间充质干细胞的成骨分化,但其对骨髓间充质干细胞衰老调控的作用及机制尚不明确。目的:研究miR-212-3p通过靶向丝裂原活化蛋白激酶3(mitogen-activated protein kinase 3,MAPK3)对骨髓间充质干细胞衰老的影响及其机制。方法:体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,收集第3代进行以下实验:①分2组培养:对照组加入完全培养基,造模组加入含H_(2)O_(2)的完全培养基培养,培养72 h后,检测细胞中β-半乳糖苷酶活性、miR-212-3p和MAPK3 mRNA表达,以及MAPK3、p16和p21蛋白表达。②分3组培养:对照组、抑制物对照组、miR-212-3p抑制物组,转染24 h后,检测细胞中miR-212-3p、MAPK3 mRNA表达及MAPK3蛋白表达。③采用双荧光素酶报告基因联合qRT-PCR和Western blot验证miR-212-3p与MAPK3靶向调控作用。④分组培养:分为对照抑制物组、miR-212-3p抑制物组、miR-212-3p抑制物+干扰对照组、miR-212-3p抑制物+MAPK3干扰组,转染24 h后,检测细胞中MAPK蛋白与mRNA表达。分为对照组、H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+对照抑制物组、H_(2)O_(2)+miR-212-3p抑制物组、H_(2)O_(2)+miR-212-3p抑制物+干扰对照组、H_(2)O_(2)+miR-212-3p抑制物+MAPK3干扰组,细胞转染24 h后再加入H_(2)O_(2)培养72 h,检测细胞中衰老相关β-半乳糖苷酶活性、p16和p21蛋白表达。结果与结论:①与对照组比较,造模组β-半乳糖苷酶活性、miR-212-3p mRNA表达及p16、p21蛋白表达升高(P<0.05),MAPK3 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05)。②与对照组比较,miR-212-3p抑制物组细胞中miR-212-3p mRNA表达降低(P<0.05),MAPK3 mRNA与蛋白表达升高(P<0.05)。③双荧光素酶报告基因实验证实,MAPK3是miR-212-3p下游靶基因。④与对照抑制物组比较,miR-212-3p抑制物组细胞中MAPK3 mRNA和蛋白表达升高(P<0.05);与miR-212-3p抑制物组比较,miR-212-3p抑制物+MAPK3干扰组细胞中MAPK3 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05)。与H_(2)O_(2)+对照抑制物组比较,H_(2)O_(2)+miR-212-3p抑制物组β-半乳糖苷酶活性降低(P<0.05);与H_(2)O_(2)+miR-212-3p抑制物组比较,H_(2)O_(2)+miR-212-3p抑制物+MAPK3干扰组β-半乳糖苷酶活性升高(P<0.05)。与H_(2)O_(2)+对照抑制物组比较,H_(2)O_(2)+miR-212-3p抑制物组细胞中p16和p21蛋白表达降低(P<0.05);与H_(2)O_(2)+miR-212-3p抑制物组比较,H_(2)O_(2)+miR-212-3p抑制物+MAPK3干扰组细胞中p16和p21蛋白表达升高(P<0.05)。⑤结果表明,下调miR-212-3p可抑制大鼠骨髓间充质干细胞衰老,其作用机制可能是通过靶向上调MAPK3表达实现的。

酸枣仁提取物调控miR-7b-3p/5-羟色胺1A受体表达促进骨生长

背景:前期研究发现,酸枣仁提取物通过提高脑组织5-羟色胺1A受体(serotonin 1A receptor,5-HT1AR)表达,使之与5-羟色胺结合,延长小鼠慢波睡眠,促进生长激素的分泌,从而使骨生长。5-HT1AR作为一种蛋白质,其表达丰度受到miRNA的调控。作者推测酸枣仁提取物可能通过miRNA调控5-HT1AR的表达从而发挥药物作用。目的:观察酸枣仁提取物通过干预小鼠脑组织中miR-7b-3p/5-HT1AR通路对骨骼生长的影响。方法:①将昆明种小鼠分为正常对照组、用药组(灌胃酸枣仁提取物0.320 mg/g),阳性对照组(灌胃酸枣仁皂甙0.013 mg/g)和酸枣仁提取物+5-HT1AR抑制剂组(灌胃酸枣仁提取物最后3 d同时每天侧脑室注射5-HT1AR选择性抑制剂P-MPPF 8μg),25 d后观察酸枣仁提取物对小鼠骨生长、血清生长激素水平及脑组织5-HT1AR表达的影响;②基因芯片法筛选由酸枣仁提取物引起的骨生长小鼠与普通小鼠脑组织差异表达的miRNAs,并通过PCR验证和双荧光素酶报告基因实验证实筛选的miR-7b-3p与5-HT1AR的调控关系;③体外培养小鼠脑皮质细胞并鉴定,利用Western blot法观察酸枣仁提取物对脑皮质细胞中5-HT1AR表达的影响;④将昆明种小鼠分为正常对照组、用药组、miR-7b-3p inhibitor组、用药+miR-7b-3p mimics组、阳性对照组,观察各组小鼠脑组织5-HT1AR表达及5-羟色胺与5-HT1AR结合活性;⑤将SD大鼠分为正常对照组、用药组、miR-7b-3p inhibitor组、用药+miR-7b-3p mimics组、阳性对照组,观察各组大鼠慢波睡眠的变化。结果与结论:①酸枣仁提取物可以促进小鼠体长、胫骨增长,促进生长激素分泌,提高脑组织5-HT1AR含量;②基因芯片筛选出差异表达的miRNAs个数为16个,其中上调有13个,下调有3个;生物信息学预测下调miR-7b-3p可以调控5-HT1AR表达,且双荧光素酶报告基因实验证实二者有直接调控关系;③酸枣仁提取物和沉默脑皮质细胞中miR-7b-3p表达可以引起5-HT1AR高表达;沉默miR-7b-3p后小鼠脑组织5-HT1AR表达、5-羟色胺与5-HT1AR结合活性及生长激素分泌均升高;过表达miR-7b-3p后小鼠脑组织5-HT1AR表达、5-羟色胺与5-HT1AR结合活性及生长激素分泌均降低;大鼠慢波睡眠期也相应延长或缩短。结果表明,酸枣仁提取物能够降低脑组织的miR-7b-3p水平,同时增加5-HT1AR的表达量。这种机制有助于延长慢波睡眠周期,并且促进生长激素的生成,对骨骼生长有积极影响,为使用酸枣仁提取物作为促进骨骼生长的潜在手段提供了科学依据。

川芎嗪通过miR-143-3p靶向调节LIMK1/cofilin通路减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤

目的 探究川芎嗪(TMP)通过miR-143-3p靶向调节LIM激酶1/丝切蛋白(LIMK1/cofilin)信号通路对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)的影响。方法 将C57BL/6小鼠随机分为对照组(CON组)、模型组(LPS组)、TMP组、空载病毒组(GFP组)、过表达miR-143-3p组、敲低miR-143-3p组,每组10只。HE染色观察肺组织病理变化情况;ELISA检测肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;肺湿/干比(肺W/D)、BALF中白细胞数量、蛋白浓度以及埃文斯蓝(Evans Blue)染料检测肺血管通透性;Western Blot检测p-LIMK1、p-cofilin的表达情况。结果 与CON组相比,LPS组肺组织病理损伤加重,肺损伤评分、肺W/D、BALF白细胞数量、蛋白浓度和炎症因子、Evans Blue渗漏、p-LIMK1、p-cofilin表达水平增加(P均<0.01);与LPS组相比,过表达miR-143-3p组肺组织病理损伤减轻,肺损伤评分、BALF白细胞数量、蛋白浓度和炎症因子、Evans Blue渗漏降低(P均<0.01),肺W/D降低(P<0.05),p-LIMK1、p-cofilin表达水平降低(P<0.01,P<0.05);与LPS组相比,TMP组肺组织病理损伤减轻,肺损伤评分、肺W/D、BALF白细胞数量、蛋白浓度和炎症因子、Evans Blue渗漏降低(P均<0.01),p-LIMK1、p-cofilin表达水平降低(P<0.01,P<0.05);与TMP组相比,敲低miR-143-3p组逆转了TMP对LPS诱导的小鼠ALI的改善作用(P均<0.01)。双荧光素酶实验证实miR-143-3p可靶向调控LIMK1表达(P<0.001)。结论 TMP通过上调miR-143-3p来抑制LIMK1/cofilin信号通路,从而减轻LPS诱导的小鼠ALI。

耐药肺结核患者血清miR-129-3p、miR-144-3p检测的临床价值

目的探讨血清miR-129-3p和miR-144-3p检测在耐药肺结核中的临床价值。方法收集2021年1月—2022年6月川北医学院附属三台医院行新辅助放化疗的140例耐药肺结核患者(耐药肺结核组),根据治疗6个月的疗效,分为有效组(92例)和无效组(48例);另选取同期与耐药肺结核患者一般资料相匹配的140名体检健康者作为对照组。比较各组血清miR-129-3p、miR-144-3p表达的差异。采用多因素Logistic回归分析评估耐药肺结核患者疗效的影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析治疗2个月后血清miR-129-3p、miR-144-3p水平和白蛋白、白细胞计数预测耐药肺结核患者疗效的效能。结果与对照组比较,耐药肺结核组血清miR-129-3p、miR-144-3p水平显著降低(P<0.05)。治疗2个月,无效组血清miR-129-3p、miR-144-3p水平均显著低于有效组(P<0.05)。血清miR-129-3p、miR-144-3p、白蛋白和白细胞计数是耐药肺结核患者疗效的影响因素(P<0.05)。治疗2个月后血清miR-129-3p、miR-144-3p、白蛋白、白细胞计数联合预测耐药肺结核患者疗效的曲线下面积为0.956,敏感性为87.50%,特异性为92.39%,优于4项指标单独检测(P<0.05)。结论耐药肺结核患者血清miR-129-3p、miR-144-3p水平显著降低。miR-129-3p、miR-144-3p联合白蛋白、白细胞计数对预测耐药肺结核患者疗效有较高的参考价值。

miR-338-3p靶向核因子κB受体活化因子配体影响牙槽骨成骨细胞增殖及凋亡

背景:miR-338-3p能够抑制破骨细胞分化,下调核因子κB受体活化因子配体水平能够促进骨形成。然而miR-338-3p是否通过调控核因子κB受体活化因子配体表达影响牙槽骨成骨细胞增殖、凋亡尚不清楚。目的:探究miR-338-3p靶向核因子κB受体活化因子配体对牙槽骨成骨细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法:分离人牙槽骨成骨细胞,对其进行细胞转染及Wnt-C59(Wnt/β-catenin通路抑制剂)处理,分为转染对照组、miR-338-3p组、miR-338-3p+对照组、miR-338-3p+核因子κB受体活化因子配体组和miR-338-3p+Wnt-C59组。双荧光素酶实验验证miR-338-3p对核因子κB受体活化因子配体的调控作用;CCK-8、EdU染色检测细胞增殖水平;流式细胞术检测细胞周期和凋亡水平;RT-qPCR检测细胞miR-338-3p、核因子κB受体活化因子配体、Wnt-3a、β-catenin、糖原合酶激酶3βmRNA表达水平;Western Blot检测细胞核因子κB受体活化因子配体、增殖细胞核抗原、Ki67、细胞周期蛋白D1、Bcl-2、Bax、天冬氨酸半胱氨酸蛋白酶3、Wnt-3a、β-catenin、糖原合酶激酶3β蛋白表达水平。结果与结论:①miR-338-3p靶向调控核因子κB受体活化因子配体;②过表达miR-338-3p后,细胞存活率、EdU阳性细胞率、S期细胞比例升高,细胞凋亡率降低,miR-338-3p、增殖细胞核抗原、Ki67、细胞周期蛋白D1、Bcl-2、Wnt-3a、β-catenin mRNA和蛋白水平升高,Bax、天冬氨酸半胱氨酸蛋白酶3、核因子κB受体活化因子配体、糖原合酶激酶3βmRNA和蛋白水平降低(均P<0.05);③过表达核因子κB受体活化因子配体或Wnt-C59处理能够减弱过表达miR-338-3p对细胞增殖、凋亡的影响(均P<0.05);④结果表明,miR-338-3p靶向核因子κB受体活化因子配体表达可促进牙槽骨成骨细胞增殖,并抑制细胞凋亡,其可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路发挥作用。

变应性鼻炎患者血清miR-124-3p和miR-202-5p的表达及临床意义

目的探讨血清miR-124-3p和miR-202-5p水平在变应性鼻炎(AR)患者中的表达水平及其临床意义。方法选取2022年1~12月间荆州市中心医院收治的173例AR患者作为观察组,另外选取同期在本院进行体检的63名健康者作为对照组。结果在对照组、轻度AR组、中重度AR组中,血清miR-124-3p水平逐渐降低,分别为1.02±0.29、0.79±0.21、0.63±0.18,miR-202-5p水平逐渐升高,分别为1.01±0.25、1.39±0.29、1.62±0.33,两两比较差异具有统计学意义(P<0.05)。AR患者血清miR-124-3p水平与miR-202-5p水平呈负相关(r=-0.437,P<0.001)。血清miR-124-3p水平[OR(95%CI)=0.651(0.508~0.835)]、症状发作时间[OR(95%CI)=1.671(1.088~2.567)]、哮喘[OR(95%CI)=1.571(1.029~2.399)]、血清miR-202-5p[OR(95%CI)=2.053(1.020~4.133)]水平是中重度AR患者的影响因素(P<0.05)。血清miR-124-3p和miR-202-5p二者联合预测优于血清miR-124-3p(Z=2.385,P=0.017)或miR-202-5p(Z=2.466,P=0.014)单独预测。结论AR患者血清中,miR-124-3p低表达、miR-202-5p高表达,与患者病情严重程度密切相关,有望成为潜在的生物标志物。

类风湿关节炎血清miR-410-3p表达与膝关节软组织病变的关系

目的探究类风湿关节炎(RA)患者血清miR-410-3p的表达及其与膝关节软组织病变的关系。方法选取我院收治的RA患者89例,根据28个关节疾病活动度评分(DAS28)将其分为活动组(42例)、缓解组(47例);另选取同期体检健康志愿者52例为健康组。RT-PCR法检测血清miR-410-3p的表达水平;超声检查膝关节软组织病变情况;采用Pearson法分析血清miR-410-3p表达与膝关节软组织病变的关系。结果活动组和缓解组患者血清miR-410-3p表达水平均低于健康组(P<0.05),活动组患者血清miR-410-3p表达水平低于缓解组(P<0.05)。活动组和缓解组患者股骨内、外侧踝软骨厚度均小于健康组(P<0.05),且活动组患者上述指标小于缓解组(P<0.05);活动组和缓解组患者髌上囊液体深度、滑膜厚度大于健康组(P<0.05),且活动组患者髌上囊液体深度、滑膜厚度大于缓解组(P<0.05)。RA患者血清miR-410-3p水平与髌上囊液体深度和滑膜厚度呈正相关(P<0.05),与股骨内、外侧踝软骨厚度呈负相关(P<0.05)。结论RA患者血清miR-410-3p表达水平降低,且与膝关节软组织病变密切相关,检测血清miR-410-3p水平变化可为评估膝关节软组织病变提供参考。