云南四种按蚊胃血血源鉴定研究报告

１９８９～１９９３年，采用环状沉淀试验法，对云南省８个地州市２０个县的４种重要按蚊进行胃血血源鉴定。结果：采自人房胃血标本平均人血阳性率中华按蚊Ａｎ．ｓｉｎｅｎｓｉｓ为７．４１％，微小按蚊Ａｎ．ｍｉｎｉｍｕｓ为１２．７７％，嗜人按蚊Ａｎ．ａｎｔｈｒｏｐｏｐｈａｇｕｓ为１００％，多斑按蚊Ａｎ．ｍａｃｕｌａｔｕｓ为３５．７１％。

吸血库蠓胃血血源分子鉴定及吸血习性多样性研究

目的运用PCR技术检测吸血库蠓胃血来源,研究其吸血习性的多样性。方法 2017年8月,在南昌市郊区一村庄运用诱蚊灯法在与人类活动关系密切的生境调查吸血库蠓的组成,捕捉饱血库蠓,根据调查吸血库蠓可能的吸血对象的线粒体DNA细胞色素b序列的差异,设计特异性引物,建立PCR反应体系,设立动物血源的阳性对照和阴性对照鉴定蠓胃血来源。结果农户中以荒川库蠓和尖喙库蠓为主,分别占37.01%和33.85%;鸡圈主要以荒川库蠓为主,占81.40%;猪圈以尖喙库蠓为主,占57.66%。PCR检测库蠓胃血血源结果显示,该方法可以从已知动物血样和吸血库蠓提取的DNA中分别扩增到宿主动物的特异性条带。荒川库蠓、尖喙库蠓、刺鳌库蠓和原野库蠓均吸食人血或动物血,且4种库蠓同时具有兼吸2~4种动物血液的习性。4种不同吸血库蠓吸食人血指数荒川库蠓为0.13,尖喙库蠓为0.63,刺鳌库蠓为0.33,原野库蠓为1.00。结论建立的PCR检测方法可鉴定吸血库蠓蠓胃血来源,结果灵敏、稳定可靠;4种吸血库蠓均兼吸人、畜血液,吸血对象广泛,吸血习性多样。

用PCR技术测定按蚊人血指数的研究

目的建立一种能替代传统免疫学方法用于按蚊人血指数测定的分子生物学检测技术。方法根据人核糖体DNA序列设计1对特异性引物,建立聚合酶链反应(PCR)鉴定按蚊胃内人血的方法。同时,对猪血、牛血、羊血、小鼠血以及未吸血按蚊中提取的DNA进行检测,验证该检测方法的特异性,并对吸饲人血后不同时间(1、6、12、18、24、27、30、33、36、40、44、48h)的按蚊进行检测,测试该方法的检测敏感性。结果该方法可从人血提取的DNA中扩增得到519bp大小的特异性条带,对其他动物血样及未吸血按蚊中所提取的DNA均未能扩增出特异性条带;所有吸人血24h内的中华按蚊均能扩增出特异性条带,在吸人血后27、30、33、36h的各5只中华按蚊中,分别有4、4、2、1只能扩出特异性条带,吸血40h后的中华按蚊均不能扩增出特异性条带。Logistic回归分析表明,吸血后24～40h,PCR检测阳性按蚊数与吸血后的时间呈负相关关系(P<0.01)。结论本研究所建立的PCR方法可准确鉴定吸血24h内的中华按蚊胃内的人血液来源,可替代传统免疫学方法用于按蚊人血指数的测定。