血满草质量标准研究

目的:完善血满草质量标准。方法:根据《云南省中药材标准》(2005年版)中的检测方法,对血满草中熊果酸进行薄层鉴别,对水分、总灰分、酸不溶性灰分、醇溶性浸出物进行测定,用HPLC法对绿原酸进行含量测定。结果:完善了血满草的性状、显微鉴别、确定了熊果酸的薄层鉴别特征、制定了绿原酸的含量测定方法且含量不低于0.25%,修订血满草的水分不高于12.00%,总灰分不高于16.00%,酸不溶性灰分不高于2.16%,醇溶性浸出物不低于20.58%。结论:通过测定不同地区多批血满草水分、灰分、酸不溶性灰分、醇溶性浸出物、绿原酸含量,为完善血满草质量标准提供依据。

血满草酸性多糖的化学修饰及其免疫活性研究

目的 探讨化学修饰对血满草酸性多糖免疫活性的影响。方法 以血满草酸性多糖SPS-1为原料,采用氯磺酸-吡啶法、氢氧化钠-氯乙酸法和乙酸-亚硒酸钠法分别制备了SPS-1硫酸化、羧甲基化和硒化衍生物,通过测定硫酸化、羧甲基化的取代度和硒含量以及红外光谱对衍生物进行验证,采用HPGPC分析其均一性和分子量,采用MTT法测定SPS-1及其衍生物对小鼠单核巨噬细胞RAW264.7细胞增殖的影响,采用Griess法和ELISA技术测定细胞释放NO和细胞因子的水平。结果 SSPS-1和CSPS-1的取代度分别为0.624 4和0.489 8,SeSPS-1的硒含量为1.702 1μg/mg,红外光谱表明3种修饰方法均可用于SPS-1的化学修饰,HPGPC结果显示化学修饰导致多糖分子量降低,但分布仍较均一。SPS-1及其衍生物均可显著促进RAW264.7细胞的增殖及分泌NO、IL-1β、IL-6和TNF-α(P<0.05,P<0.01)。结论 本研究为深入开展多糖结构与功能的关系分析奠定了基础。

血满草多糖介导巨噬细胞M1型极化抑制肺癌的作用机制研究

目的:探讨血满草多糖(SPS-1)调控巨噬细胞极化对小鼠肺癌细胞Lewis细胞迁移、侵袭及凋亡的影响。方法:采用Western blot检测SPS-1对IL-4诱导的M2型巨噬细胞RAW264.7膜表面分子CD206、CD86的表达水平,采用RT-qPCR检测RAW264.7细胞炎性因子TNF-α、IL-10、TGF-β及特异性iNOS和Arg-1 mRNA表达水平的影响。共培养条件下,采用Transwell法检测SPS-1对Lewis细胞迁移与侵袭能力的影响,采用ELISA技术检测Lewis细胞中HIF-1α和VEGF的分泌量,采用流式细胞术检测Lewis细胞的凋亡,采用Western blot检测转移相关蛋白N-Cadherin、E-Cadherin和Vimentin及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达水平。结果:SPS-1可显著增加M2型RAW264.7细胞膜表面分子CD86/CD206的比例,TNF-α和iNOS mRNA显著上调,IL-10、TGF-β和Arg-1 mRNA的表达量显著下调。共培养条件下,SPS-1显著抑制Lewis细胞的侵袭和迁移,并降低HIF-1α和VEGF的分泌及N-cadherin和Vimentin的表达,同时显著上调E-Cadherin的表达。凋亡实验结果显示,SPS-1亦可显著促进Lewis细胞的凋亡。结论:SPS-1可通过调控RAW264.7细胞极化抑制Lewis细胞的转移和凋亡。

血满草叶绿体基因组结构与特征分析

为研究血满草叶绿体基因组结构与特征,以血满草新鲜叶片为材料,提取叶绿体DNA,对叶绿体基因组进行测序、组装,并对其大小、结构、基因组成、简单重复序列(SSR)位点、密码子偏好性以及系统发育进行分析。结果表明,血满草叶绿体基因组长度为158 610 bp,包括大单拷贝区(LSC, 87 345 bp),小单拷贝区(SSC, 18 937 bp)以及两个反向重复序列(IRa和IRb, 26 164 bp),总G+C含量为37.61%;血满草叶绿体基因组共编码到131个基因,包括86个蛋白编码基因,37个转运RNA基因,8个核糖体RNA基因。序列鉴定共发现6种类型的SSR,包括4种单核苷酸、2种二核苷酸;17个基因包含1个或2个内含子,其中11个位于蛋白质编码基因中,6个位于tRNA基因中;86个蛋白编码基因包含80 364 bp,编码26 788个密码子;系统发育分析显示,血满草与接骨木有较近的亲缘关系。

民族药血满草的本草考证

血满草(Sambucus adnata Wall.)最早记载于《植物名实图考》中,是少数民族治疗风湿痹痛、骨关节炎、骨折等常用药物。本文在查阅历代古籍和现代相关记载的基础上,对血满草的名称、性味归经、功效主治、炮制及毒性进行考证。结果表明,现代以“血满草”为正名,来源于忍冬科接骨木属植物,关于性味归经、功能主治、炮制方法与毒性的记载和描述,古今基本一致。本文通过系统考证血满草的名称、性味、功效主治、炮制及毒性,可为血满草的开发及合理利用提供理论支持。

血满草化学成分研究

从傣药血满草(Sambucus adnata Wall)干燥全草的甲醇提取物中分离得到9个化合物,通过分析核磁共振波谱数据及理化性质分别鉴定为7个五环三萜:熊果酸(1)、齐墩果酸(2)、α-香树脂醇(3)、13β-羟基-11-烯-熊果酸(4)、28-羟基-α-香树脂醇(5)、2α,23-二羟基-熊果酸(6)、2α,3α,23-三羟基-熊果酸(7),1个木脂素:4-O-甲基雪松素(8)和1个甾醇苷:β-胡萝卜苷(9)。其中化合物4～9为首次从血满草中分离得到。

血满草化学成分研究

首次对血满草(Sambucus adnataWall)的乙醇提取物的乙酸乙酯,正丁醇溶解部分进行分离纯化,得到4个化合物,经理化方法和光谱分析,分别鉴定为对羟基苯甲酸(-phydroxybenzoic acid,1)、齐墩果酸(oleanolic acid,2)、熊果酸(ursolic acid,3)、3,5-dimethoxy-4-hydroxy-1-O--βD-glucopyranoside(4)。

血满草化学成分的研究

首次对采自峨眉山的接骨木属植物血满草进行了化学成分的研究,从氯仿部分及总浸膏的水悬浮液中分离得到5个化合物:分别是1-(3-羟基-4-甲氧基)乙烷-1′,2′-二醇(1-(3-hydroxy-4-methoxyphenyl)-1′,2′-ethane-diol,1),熊果酸(ursolic acid,2),1-(3,4,5-三甲氧基苯基)乙烷-1′,2′-二醇(1-(3,4,5-trimethoxyphenyl)-1′,2′-ethanediol,3),落叶松脂醇(lariciresinol,4),5,7,3′,4′-四羟基黄酮-3-O-吡喃鼠李糖(1→6)吡喃葡萄糖苷(5,7,3′,4′-tetramethoxyflavone-3-O-rhamnopyranosyl-(1→6)-glucopyranoside,5)。其中1、3、4、5为首次从该植物中分离得到。

云南习用药材血满草的质量标准研究

系统研究了云南习用药材血满草的质量标准,明确其基源植物为忍冬科植物血满草Sambucus adna-ta Wall.,并对药材名称、生药性状、显微及理化鉴别、检查、浸出物等质量标准项目进行了全面的对比研究和归纳,研究结果已为云南省中药材标准采用。

HPLC-DAD法测定血满草中熊果酸和齐墩果酸的含量(英文)

建立了HPLC-DAD法测定血满草中熊果酸和齐墩果酸含量,并进行方法学考察。采用HPLC-DAD进行分析,fusion-RP C18柱(4.6 mm×250 mm,4μm),甲醇-0.2%磷酸水溶液(90∶10)为流动相,检测波长210 nm,体积流量1.0 mL/min。同时采用微波辅助提取、回流提取、索氏提取、冷浸提取、超声提取五种方法对血满草中熊果酸和齐墩果酸含量进行测定并比较不同方法所得结果的差异,还比较了血满草不同部位中熊果酸和齐墩果酸的含量差异。测定结果表明熊果酸进样量在3.6～8.4μg范围内,齐墩果酸进样量在3.2～16μg范围内,呈良好线性关系。血满草中熊果酸和齐墩果酸平均回收率分别为98.3%和101.4%(n=5),相对标准偏差分别为1.13%和0.72%(n=5)。五种方法比较得出索氏提取得熊果酸和齐墩果酸含量最高;血满草花中熊果酸和齐墩果酸含量最高,而根中含量最低。该方法使血满草中熊果酸和齐墩果酸达到基线分离,操作简便,结果稳定可靠。

微波消解-原子吸收光谱法测定血满草中8种微量元素的含量

利用微波消解-原子吸收光谱法测定了血满草药材中8种微量元素钙、铜、铁、锰、锌、镁、铅、镉的含量。结果表明,血满草药材中含有较丰富的镁、钙、铁、锌。该法灵敏度高、快速、准确,所测数据可为血满草药材的合理利用提供可靠依据。

响应面法优化血满草多糖双水相萃取工艺

[目的]优化血满草多糖的双水相萃取工艺。[方法]通过考察K 2HPO 4浓度、PEG6000浓度和多糖浓度对血满草叶多糖萃取率的影响,以单因素试验结果为基础,使用响应面法对血满草多糖的双水相萃取工艺进行优化,模拟得到回归模型。[结果]血满草多糖的最佳双水相萃取工艺为K 2HPO 4浓度29.09%、PEG6000浓度17.07%、多糖浓度26.21 mg/mL。经验证试验,血满草多糖的实际萃取率为85.8025%±0.7393%,与模型预测值接近,两者相对误差为1.37%。[结论]该回归模型可真实反映萃取条件对多糖萃取率的影响,为血满草多糖的开发利用提供了重要的参考数据。

血满草多糖提取工艺优化及其单糖组分分析

为了优化血满草多糖的提取工艺并分析其单糖组成,试验考察了提取温度、提取时间、溶剂用量和提取次数对血满草多糖提取率的影响,以单因素试验结果为基础,使用响应面法对血满草多糖的提取工艺进行优化,模拟得到二次多项式回归模型,并采用气相色谱-质谱联用技术分析其单糖组成。结果表明:血满草多糖的最佳提取工艺为提取温度89.72℃,提取时间114.15 min,溶剂用量26.40 mL/g,提取4.28次。考虑到实际操作,最终将最优提取参数确定为提取温度89℃,提取时间114 min,溶剂用量26 mL/g,提取4次,此时的多糖提取率预测值为2.6885%。经验证试验,血满草多糖的实际提取率可达(2.6113±0.0277)%,与模型预测值接近,两者相对误差为2.96%。血满草多糖主要由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖构成,摩尔比为1.00∶2.43∶0.51∶4.96∶1.82。说明优化工艺合理,得到的回归模型可真实反映提取条件对血满草多糖提取率的影响,并明确了血满草多糖的单糖组分。

傣药血满草研究综述

血满草为我国民间常用药,在傣族民间有着悠久的药用历史,是独具特色的地方中草药。本文从化学成分、质量控制、临床应用等方面,对其研究、应用情况作了简要综述。

血满草的化学成分(英文)

从血满草(Sambucus adnata Wall)全草的95%乙醇提取物中分离到16个化合物,应用波谱方法及与已知品对照的手段,将其鉴定为β-谷甾醇(1)、齐墩果酸(2)、槲皮素(3)、洋芹素(4)、木犀草素(5)、山奈酚(6)、α-香树脂醇乙酸酯(7)、α-香树脂醇(8)、咖啡酸乙酯(9)、棕榈酸甘油酯(10)、2,4-二羟基-3,6-二甲基苯甲酸甲酯(11)、没食子酸乙酯(12)、桦木酸(13)、丁二酸(14)、豆甾醇(15)、3,28,29-三羟基羽扇豆烷(16).其中,化合物3、4、5和9是抑制血管紧张素转化酶的活性成分.

血满草提取物抗炎镇痛作用研究

目的:对云南彝族习用药物血满草水提物及醇提物的抗炎、镇痛作用进行研究。方法:采用最大给药量对血满草两种提取物进行安全性评价;采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法、醋酸致小鼠扭体法、热板致小鼠足痛法进行抗炎镇痛药效学实验研究。结果:血满草两种提取物均能明显抑制二甲苯致小鼠耳廓肿胀;对醋酸致小鼠扭体有明显对抗作用;热板法试验中血满草能明显延长小鼠舔后足时间。结论:小鼠灌服血满草水提物(相当于临床人用量的630倍)及醇提物(相当于临床人用量的600倍)未见明显毒性,且血满草两种提取物均具有较好的抗炎、镇痛作用。

血满草化学成分及生物活性的研究进展

血满草Sambucus adnata wall.为忍冬科接骨木属植物,彝族习用药名斯赤列,含有多种类型的化学成分,包括三萜类、黄酮类、木脂素类、酚酸类、甾醇类等;其提取物具有血管紧张素转换酶抑制活性及抗炎、镇痛等活性。现综述了2006至2017年国内外关于血满草的化学成分和生物活性的研究进展。

彝药血满草中熊果酸的含量测定

用HPLC对云南不同产地彝药血满草中熊果酸的含量进行了测定。熊果酸的线性范围为1.14～5.7μg,r=0.999 8,加样回收率99.8%～101.3%(RSD 1.7%)。实验结果表明建立的方法快速,灵敏度高、重复性好,可用于血满草中熊果酸的含量测定。

血满草酸性多糖分离纯化、硫酸化修饰及抗炎活性研究

采用热水浸提、乙醇沉淀、Savege法脱蛋白、离子交换层析和凝胶过滤层析技术纯化血满草酸性多糖SPS-1,通过氯磺酸-吡啶法进行硫酸化修饰,采用红外光谱技术分析SPS-1及其衍生物SSPS-1的红外光谱特性,采用MTT和ELISA技术分析SPS-1和SSPS-1对RAW264. 7细胞活力和炎性因子的影响。结果表明,SPS-1糖含量为94. 76%,均一性较好。SPS-1具有多糖类的特征吸收峰,主要通过β-型糖苷键连接;SSPS-1含有S=O和C-O-S吸收峰,说明SPS-1的羟基上有硫酸基团。抗炎活性结果显示SPS-1和SSPS-1对RAW264. 7细胞没有明显的细胞毒性,可显著降低LPS诱导的RAW264. 7细胞炎性因子IL-1β,IL-6和TNF-α的分泌,同时可显著增加抗炎因子IL-10的分泌。SPS-1和SSPS-1具有开发成抗炎药物的潜在价值。