小鼠血瘀合并脑缺血模型的建立

目的:建立小鼠血瘀合并脑缺血模型。方法:在注射地塞米松造成血瘀模型基础上,结扎双侧颈总动脉造成小鼠全脑缺血再灌注模型。结果:模型小鼠的血液粘度、脑能量代谢、脑水肿、Ca2+和脑组织显微结构的变化符合缺血性脑血管病的临床特征。结论:注射地塞米松造成血瘀并通过结扎双侧颈总动脉可成功建立小鼠血瘀合并脑缺血再灌注模型。

毛冬青总黄酮对小鼠血瘀合并脑缺血耐受模型的影响

采用小鼠连续注射地塞米松复制血瘀模型,并给予相应药物,连续灌服15 d后,阻断双侧颈总动脉血流10 min,恢复灌注5 d后,再次阻断双侧颈总动脉30 min。再灌注24 h,复制小鼠脑缺血耐受模型。取血测全血黏度;断头取脑,一半脑置于10%福尔马林溶液中固定,用于HE染色;另一半脑用生理盐水制备脑匀浆,用于测定脑组织匀浆中ATPase活力、GLU含量、脑匀浆中NOS表达;探讨毛冬青总黄酮对小鼠血瘀合并脑缺血耐受模型的保护作用机制。结果显示,与缺血耐受组(模型组)比较,高剂量毛冬青总黄酮组能够显著降低小鼠血流变高、中、低切值(P<0.01),中、低剂量毛冬青总黄酮组能够显著降低小鼠血流变低切值(P<0.01),明显减轻小鼠血流变中切值(P<0.05),中剂量毛冬青总黄酮组能够明显降低小鼠血流变高切值(P<0.05);高剂量毛冬青总黄酮能够显著升高各ATPase活力(P<0.01),中剂量毛冬青总黄酮能够显著增强Na+-K+-ATPase活力(P<0.01),低剂量毛冬青总黄酮能够明显升高Na+-K+-ATPase活力(P<0.05);高剂量毛冬青总黄酮能够显著降低Glu含量(P<0.01),其他给药剂量能够明显降低Glu含量(P<0.05);高剂量毛冬青总黄酮组可显著降低小鼠脑组织中TNOS,i NOS的水平(P<0.01),中剂量毛冬青总黄酮组可明显降低小鼠脑组织中TNOS,i NOS的水平(P<0.05),低剂量毛冬青总黄酮组可明显降低小鼠脑组织中i NOS的水平(P<0.05);各剂量毛冬青总黄酮均可改善脑组织病理改变。提示毛冬青总黄酮可从降低全血黏度、抑制炎症介质NOS的表达、降低Glu含量、升高ATPase活力、改善缺血脑部组织病理方面保护小鼠血瘀合并脑缺血耐受模型的脑损伤。

银杏叶总黄酮对大鼠血瘀合并脑缺血再灌注模型氧化应激的干预作用

目的:探讨银杏叶总黄酮对大鼠血瘀合并脑缺血再灌注模型氧化应激反应的影响。方法:采用连续肌肉注射地塞米松制造血瘀模型,银杏叶总黄酮混悬液大、小剂量(300 mg·kg^-1、150 mg·kg^-1)、阳性药华佗再造丸(2.67 g·kg^-1)连续给药10 d,于第11天给药1 h后,分离双侧颈总动脉夹闭30 min复制脑缺血模型,再灌注1 h后取血,肝素抗凝测全血黏度,断头冰盘剥脑,矢状切取一半置于体积分数10%福尔马林固定,用于HE染色;另一半脑组织称质量加适量冰生理盐水制备体积分数10%脑组织匀浆,测定丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide orgotein dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)水平。结果:血瘀合并脑缺血再灌注模型复制成功。与血瘀缺血组相比,银杏叶总黄酮大剂量可显著降低大鼠全血黏度高、中、低切值(P<0.01),小剂量组高切值、中切值具有明显降低趋势(P<0.05),低切值降低幅度更为显著(P<0.01);银杏叶总黄酮大剂量组可显著降低MDA含量(P<0.01),小剂量组可明显降低大鼠脑组织中MDA含量(P<0.05);银杏叶总黄酮大剂量可显著升高SOD、GSH-Px活性(P<0.01),小剂量可显著升高SOD活性(P<0.01),明显升高GSH-Px活性(P<0.05);银杏叶总黄酮大剂量组可显著改善大鼠脑缺血损伤后脑组织病理改变,趋势明显。结论:银杏叶总黄酮可显著抑制大鼠缺血后脑组织氧化应激反应,改善大鼠血瘀合并脑缺血模型的脑缺血损伤。

毛冬青总皂苷提高血瘀大鼠脑缺血耐受的作用机制

目的:研究毛冬青总皂苷提高血瘀大鼠脑缺血耐受模型的作用机制,为中药毛冬青的新用提供实验依据。方法:采用大鼠连续注射地塞米松复制血瘀模型。给予相应的药物,连续灌服7d,于第7天给药后1h,阻断双侧颈总动脉血流10min,恢复灌注72h后,颈内动脉线栓法致左大脑中动脉栓塞2h,再灌注24h。复制大鼠脑缺血耐受模型。取血测全血黏度;断头取左脑,测定ATP酶、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力,HE染色观察海马区组织病理变化,免疫组化法观察Bcl-2、Bax阳性的表达情况。结果:缺血耐受组及缺血再灌注损伤组大鼠全血黏度明显升高、ATPase及T-SOD活力显著下降(P<0.01)、Bax阳性表达显著增加(P<0.01),大鼠血瘀合并脑缺血耐受模型复制成功。与缺血再灌注损伤组比较,缺血耐受组动物全血流变值升高,T-SOD及ATPase活力增强,动物脑组织的病理损伤程度明显减轻。与缺血耐受组比较,各剂量毛冬青总皂苷能显著或明显改善血瘀大鼠的全血黏度,增强ATPase、T-SOD活力及Bcl-2阳性细胞的表达,降低Bax阳性表达,对脑神经细胞的损伤有明显的保护作用。结论:毛冬青总皂苷能从改善血液循环、改善能量代谢、诱导内源性抗氧化物活性增强、增强抗凋亡效应、减轻神经细胞损伤等方面实现提高脑缺血耐受的作用。