超声微血管成像联合血管内皮生长因子诊断胎儿生长受限

目的观察超声微血管成像(MV-Flow)联合孕妇血清血管内皮生长因子(VEGF)表达水平诊断胎儿生长受限(FGR)的价值。方法前瞻性纳入87例胎儿生长受限[FGR组,包括43例孕周<28周(<28周亚组)及44例孕周≥28周(≥28周亚组)]孕妇及112名正常孕妇[对照组,55名孕周<28周(对照组1)、57名孕周≥28周(对照组1)],以MV-Flow技术测量胎盘微血管指数(MVI),于同期检测孕妇血清VEGF表达水平,于分娩后即刻检测胎盘母体面VEGF表达水平;绘制受试者工作特征曲线,评价胎盘MVI、母体血清VEGF及二者联合诊断FGR的价值。结果FGR组2亚组胎盘MVI、孕妇血清VEGF表达水平及胎盘组织VEGF表达水平均明显低于对照组(P<0.01)。胎盘MVI、母体血清VEGF及二者联合诊断<28周FGR的曲线下面积(AUC)分别为0.981、0.870和0.997,诊断≥28周FGR的AUC分别为0.991、0.867和0.993。以单一孕妇血清VEGF诊断2亚组FGR的AUC均低于胎盘MVI及其联合孕妇血清VEGF(P均<0.05),而后二者AUC差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论胎盘MVI和孕妇血清VEGF可用于筛查FGR,而前者更具价值。

胚胎培养液中表皮生长因子、转化生长因子、血管内皮生长因子与胚胎发育、妊娠结局的关系

目的分析胚胎培养液中表皮生长因子(EGF)、转化生长因子(TGF)、血管内皮生长因子(VEGF)与胚胎发育及体外受精-胚胎移植(IVF-ET)后妊娠结局的关系。方法选取2020年2月至2021年6月在唐山市妇幼保健院就诊并接受IVF-ET的92例病人为研究对象,根据妊娠结局将其分为妊娠组54例和非妊娠组38例;采用Wetzels胚胎评分系统进行胚胎评级,根据评分将胚胎分为Ⅰ级组、Ⅱ级组、Ⅲ级+Ⅳ级组。留取胚胎培养液,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测胚胎培养液中EGF、TGF-β1、VEGF表达水平;采用受试者操作特征(ROC)曲线分析胚胎培养液EGF、TGF-β1、VEGF水平对妊娠结局的预测价值;采用logistic回归分析影响IVF-ET后妊娠结局的因素。结果Ⅲ级+Ⅳ级组、Ⅱ级组、Ⅰ级组EGF[(0.46±0.19)、(1.14±0.21)、(2.68±0.81)μg/L]、TGF-β1[(58.72±15.13)、(80.68±19.12)、(98.74±23.75)ng/L]表达水平依次升高,VEGF[(39.66±12.71)、(22.85±4.79)、(13.86±3.32)ng/L]表达水平依次降低(P<0.05)。与妊娠组[(2.54±0.73)μg/L、(85.44±19.87)ng/L、(15.94±3.61)ng/L]相比,非妊娠组EGF[(1.49±0.43)μg/L]、TGF-β1[(60.42±15.76)ng/L]表达水平较低,VEGF[(24.75±7.94)ng/L]表达水平较高(P<0.05)。EGF、TGF-β1、VEGF水平及三者联合预测妊娠结局的曲线下面积(AUC)分别为0.88[95%CI:(0.78,0.97)]、0.88[95%CI:(0.78,0.98)]、0.81[95%CI:(0.68,0.95)]、0.96[95%CI:(0.90,1.00)],特异度分别为82.4%、82.4%、94.1%、88.2%,灵敏度分别为83.3%、94.4%、66.7%、96.4%。VEGF是IVF-ET后妊娠失败的独立危险因素(P<0.05),TGF-β1是IVF-ET后妊娠失败的保护因素(P<0.05)。结论胚胎培养液中EGF、TGF-β1、VEGF表达水平可能对评估胚胎质量及预测妊娠结局有重要价值。

雷公藤甲素对类风湿关节炎滑膜新生血管中血管内皮生长因子、白细胞介素-6抑制机理的探讨

目的:了解雷公藤甲素对类风湿关节炎中血管内皮生长因子、白细胞介素-6的影响,探讨雷公藤对类风湿关节炎患者滑膜新生血管的抑制机理。方法:应用免疫组化技术检测血管内皮生长因子、白细胞介素-6在AA大鼠踝关节滑膜组织中的表达,并观察了雷公藤对其的影响。结果:雷公藤组可见少量的血管内皮生长因子阳性细胞,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。大鼠滑膜关节腔滑液中白细胞介素-6水平检测中,实验显示对照组滑膜组织中白细胞介素-6的水平明显高于空白组和雷公藤组(P<0.01)。结论:雷公藤甲素能降低滑膜组织血管内皮生长因子、白细胞介素-6的表达水平,抑制血管生成。

不同类型环氧化酶2抑制剂对椎间盘退变模型大鼠缺氧诱导因子1α和血管内皮生长因子表达的影响研究

目的探讨不同类型环氧化酶2(COX-2)抑制剂对椎间盘退变模型大鼠缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,为椎间盘退变的治疗提供参考。方法选择12月龄SPF级SD大鼠60只,建立椎间盘退变模型后采用简单随机法分为4组,每组15只:对照组采用安慰剂10 mg.kg-1.d-1灌胃给药;塞来昔布组采用塞来昔布胶囊10 mg.kg-1.d-1灌胃给药,尼美舒利组采用尼美舒利颗粒10 mg.kg-1.d-1灌胃给药,双药组采用塞来昔布胶囊5 mg.kg-1.d-1和尼美舒利颗粒5 mg.kg-1.d-1灌胃给药;共饲喂8周。检测各组大鼠HIF-1α和VEGF表达情况,椎间盘组织蛋白多糖的水平,计算软骨细胞凋亡指数(AI)。结果对照组大鼠HIF-1α和VEGF均呈阴性表达,其他各组均呈阳性表达;各组大鼠HIF-1α、VEGF阳性表达情况比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。各组大鼠蛋白多糖水平、AI比较,差异亦均有统计学意义(P<0.05)。结论不同类型COX-2抑制剂塞来昔布和尼美舒利可抑制HIF-1α和VEGF的表达,增加椎间盘组织蛋白多糖水平,降低AI,联合应用效果更明显,可能在椎间盘退变过程中发挥着重要作用。

急性白血病类胰蛋白酶与血管内皮生长因子的相关性研究

为了探讨类胰蛋白酶在急性白血病血管新生中的作用,应用免疫细胞化学方法检测了61例急性白血病患者白血病细胞的类胰蛋白酶及血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况,并对二者之间的关系进行了分析。结果表明:51例急性髓细胞白血病中(M13例,M215例,M320例,M45例,M58例)有15例患者的白血病细胞类胰蛋白酶表达为阳性,阳性率为29.4%,其中包括M11例,M27例,M35例,M52例。10例急性淋巴细胞白血病患者类胰蛋白酶表达均为阴性。急性髓细胞白血病患者类胰蛋白酶阳性的细胞数与其年龄、外周血白细胞数、外周血和骨髓原始细胞数以及中性粒细胞过氧化物酶之间没有相关性。急性髓细胞白血病患者中有41例VEGF表达阳性(80.4%);急性淋巴白血病患者有3例VEGF表达阳性(30%)。急性髓细胞白血病M2亚型的患者中,类胰蛋白酶与VEGF的表达均明显增高且二者之间具有显著相关性(r=0.65,P<0.05)。结论:类胰蛋白酶可以作为急性髓系白血病的特异性标记物,它可能参与了急性髓细胞白血病M2亚型的血管新生。

血管内皮生长因子与急性冠状动脉综合征的关系及他汀类药物对其的影响

血管内皮生长因子具有多种生物学活性,是反映急性冠状动脉综合征过程中血管新生、侧枝循环和粥样斑块稳定性的重要指标,监测血管内皮生长因子的变化对急性冠状动脉综合征的诊治具有一定的临床价值。他汀类药物具有一定的急性冠状动脉综合征防治作用,而其对血管内皮生长因子及粥样斑块稳定性的影响可能是这种作用的重要机制。

基质金属蛋白酶9、血管内皮生长因子与肺癌病理类型和TNM分期的关系及临床意义

目的探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)在肺癌患者血清中含量与病理类型及TNM分期的关系及临床意义。方法采用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测腺癌、鳞癌及不同TNM分期中肺癌患者血清MMP-9及VEGF的含量;并进行相关统计学处理。结果①肺腺癌患者血清中MMP-9的含量明显高于鳞癌(856.70±85.10)μg/L vs(623.20±75.20)μg/L(P<0.05);VEGF的含量在肺腺癌和鳞癌患者之间差异无统计学意义(334.20±47.20)ng/L vs(324.50±42.43)ng/L(P>0.05)。②Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期肺癌患者血清中MMP-9含量不同(602.80±78.40)μg/L vs(714.50±79.30)μg/L vs(880.50±72.90)μg/L vs(934.50±73.80)μg/L(P<0.05),随着分期的进展MMP-9含量逐渐增高,TNM分期与血清中MMP-9含量呈正相关(rs=0.520,P<0.01);VEGF各期间含量(251.10±72.43)ng/L vs(261.30±67.21)ng/L vs(279.10±74.67)ng/L vs(313.20±75.23)ng/L,差异有统计学意义(P<0.05),随着分期的进展VEGF逐渐增高,TNM分期与血清中VEGF含量呈正相关(rs=0.620,P<0.01)。③MMP-9与VEGF呈高度的正相关(rs=0.740,P<0.01)。结论MMP-9及VEGF参与了肺癌的发生发展,与病理类型及TNM分期密切相关。

扶中清痹通络汤联合益赛普对活动期类风湿关节炎患者肿瘤坏死因子-α及血管内皮生长因子血清含量的影响

目的:观察扶中清痹通络汤联合益赛普对活动期类风湿关节炎患者血清肿瘤坏死因子-α及血管内皮生长因子含量的影响。方法:将纳入研究的69例活动期类风湿关节炎患者随机分为2组,治疗组35例采用口服扶中清痹通络汤联合皮下注射益赛普治疗,对照组34例采用皮下注射益赛普治疗。分别于治疗前和治疗3个月后抽取静脉血测定患者血清中肿瘤坏死因子-α及血管内皮生长因子的含量。结果:①肿瘤坏死因子-α血清含量。治疗前2组患者血清肿瘤坏死因子-α含量比较,差异无统计学意义(t=0.374,P=0.710);治疗后2组患者血清肿瘤坏死因子-α含量均降低[(97.25±18.73)pg.mL-1,(58.98±12.34)pg.mL-1,t=10.094,P=0.000;(95.61±17.66)pg.mL-1,(65.23±10.37)pg.mL-1,t=8.650,P=0.000];治疗组的降低值大于对照组[(38.96±10.21)pg.mL-1,(31.15±8.43)pg.mL-1,t=3.459,P=0.001]。②血管内皮生长因子血清含量。治疗前2组患者血清血管内皮生长因子含量比较,差异无统计学意义(t=1.006,P=0.318);治疗后2组患者血管内皮生长因子含量均降低[(85.12±16.56)pg.mL-1,(57.73±12.27)pg.mL-1,t=7.862,P=0.000;(81.42±13.83)pg.mL-1,(69.42±13.12)pg.mL-1,t=3.671,P=0.001];治疗组的降低值大于对照组[(29.54±8.78)pg.mL-1,(10.63±6.54)pg.mL-1,t=10.123,P=0.000]。结论:扶中清痹通络汤联合益赛普可降低活动期类风湿关节炎患者血清中肿瘤坏死因子-α和血管内皮生长因子的含量,其效果优于单独使用益赛普。

孕中期肌酸激酶、血管内皮生长因子与瘢痕子宫孕妇发生胎盘植入性疾病的关系及对胎盘植入程度的预测研究

目的探讨孕中期肌酸激酶(CK)、血管内皮生长因子(VEGF)与瘢痕子宫孕妇发生胎盘植入性疾病的关系及对胎盘植入程度的预测价值。方法回顾性选取2019年7月至2022年7月柳州市妇幼保健院收治的70例瘢痕子宫伴胎盘植入性疾病孕妇作为观察组,其中粘连型52例,植入型或穿透型18例;另选70例瘢痕子宫不伴胎盘植入性疾病孕妇作为对照组。比较两组孕中期CK、VEGF表达水平;采用多因素Logistic回归分析分析瘢痕子宫孕妇发生胎盘植入性疾病的独立预测因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析孕中期CK联合VEGF对瘢痕子宫孕妇发生胎盘植入性疾病的预测效能;分析孕中期CK、VEGF在不同胎盘植入程度孕妇中的差异性;采用Pearson相关性分析分析孕中期CK、VEGF与胎盘植入超声评分量表评分的关系。结果观察组孕中期CK、VEGF水平分别为(138.42±25.69)U/L、(198.42±46.13)pg/mL,均高于对照组[(72.32±10.48)U/L、(121.23±23.47)pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。经多因素Logistic回归分析,孕中期CK、VEGF均是瘢痕子宫孕妇发生胎盘植入性疾病的独立预测因素(OR=2.562,95.0%CI:1.441~6.059;OR=0.356,95.0%CI:0.128~0.832;P<0.05)。经ROC曲线分析,孕中期CK联合VEGF预测瘢痕子宫孕妇发生胎盘植入性疾病的曲线下面积(AUC)为0.903。在观察组70例瘢痕子宫伴胎盘植入性疾病孕妇中,植入型或穿透型孕妇孕中期CK、VEGF水平分别为(157.84±36.72)U/L、(253.16±58.74)pg/mL,均高于粘连型[(112.43±18.74)U/L、(154.75±35.81)pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。经Pearson相关性分析,瘢痕子宫伴胎盘植入性疾病孕妇孕中期CK、VEGF水平与胎盘植入超声评分量表评分均呈正相关(P<0.05)。结论孕中期CK联合VEGF预测瘢痕子宫孕妇发生胎盘植入性疾病的效能较好,有助于评估胎盘植入程度。

应用液相色谱串联质谱检测抗血管内皮生长因子药物浓度的研究

目的 建立液相色谱串联质谱测定雷珠单抗、阿柏西普和康柏西普3种抗血管内皮生长因子(VEGF)药物浓度的方法。方法 用固相萃取法对样本进行前处理。色谱柱:Thermo scientific EASY column(2 cm×100μm,5μm),柱温:30℃,流动相:乙腈(B)-水(含0.1%的甲酸,A),梯度洗脱,流速:300 nl/min,进样量:1μl。用电喷雾电离源,正离子模式,多反应监测。考察该方法的回收率与精密度。结果 雷珠单抗、阿柏西普和康柏西普的实测浓度均值分别为9.58 mg/ml、18.36 mg/ml和5.74 mg/ml;回收率分别为95.8%、45.9%和57.4%;精密度分别为3.41%、5.20%和5.12%。结论 本方法具有高灵敏度、高通量和高质量的优势,适用于雷珠单抗、阿柏西普和康柏西普3种抗VEGF药物的检测,为疾病条件下组织,体液中不同抗VEGF药物药代动力学研究提供一种方法,有利于临床药物选择。

血清血管内皮细胞生长因子、糖类抗原125在胆囊癌中的变化及其意义

【目的】探讨血清血管内皮细胞生长因子(VEGF)、糖类抗原125(CA125)在胆囊癌患者中的变化及其意义。【方法】选取在本院确诊的胆囊癌患者76例作为胆囊癌组、80例胆囊息肉患者作为对照组,检测比较两组患者的血清VEGF、CA125水平,分析不同淋巴结转移、肿瘤分化程度、TNM分期、病灶大小的胆囊癌患者血清VEGF、CA125水平的差异。【结果】胆囊癌组患者的血清VEGF-C、VEGF-D、CA125水平显著高于对照组,且差异均有显著性(P<0.05);不同淋巴结转移、不同TNM分期的胆囊癌组患者的血清VEGFC、VEGF-D水平组间比较差异具有显著性(P<0.05);不同淋巴结转移、不同TNM分期、不同分化程度的胆囊癌组患者的血清CA125水平组间比较差异具有显著性(P<0.05)。【结论】在胆囊癌患者血清中,VEGFC、VEGF-D或者CA125的表达水平均明显上升,同时VEGF-C、VEGF-D或者CA125的表达与胆囊癌患者的临床分期、淋巴结转移等特征有关。

血管内皮生长因子、Tpo肽类作用剂、SCF、Flt—3L对于脐血CD34+细胞在LTC—IC和报导的基因转导中的增强作用

背景 业已证实造血前体细胞可导致内皮细胞及造血干细胞(HPCs)增加,提示也许存在着公共的生长因子。研究设计与方法 研究血管内皮生长因子结合Tpo肽类作用剂(TPOA)、Flt-3L(F)、SCF(S)在长期培养起始细胞(LTC-IC)、CFU、分化、以及脐血(CB)CD34+细胞转导在4周的培养期间作用。结果 第4周,培养物内包含有T/F/S和VEGF,在10,000个细胞里以3.4的周期频率LTC-IC上升1,000倍(从37±8升到37,012±14,329)。而当培养物也含有T/F/S无VEGF时,在10。

益气活血类中药及骨髓间充质干细胞对脑血管新生相关血管内皮生长因子及其受体影响的研究进展

缺血性脑血管疾病是临床常见病,多发病,其致残率、致死率较高。益气活血类中药最在临床应用广泛,近年来,骨髓间充质干细胞输注治疗脑缺血的临床与实验研究成为热点。益气活血类中药及骨髓间充质干细胞输注能够促进血管新生是目前研究的又一机制,血管内皮生长因子(Vascular Endothelialgrowth Factor,VEGF)及血管内皮生长因子受体(Vascular Endothelialgrowth Factor,VEGFR)是血管新生中两个重要相关因子。我们课题组在查阅文献及进行研究的基础上,就益气活血类中药及骨髓间充质干细胞对脑血管新生相关VEGF及其VEGFR影响的研究进展进行综述,益气活血类中药及骨髓间充质干细胞单用或联合使用,能够上调脑缺血动物模型血清及脑组织中VEGF的水平,下调脑缺血动物模型血清及脑组织中VEGFR的含量。

血清淀粉样蛋白A、血管内皮生长因子与类风湿关节炎相关性研究

目的探讨类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者血清淀粉样蛋白A(serum amyloid A,SAA)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达水平及其在不同疾病活动RA患者的作用。方法收集我院诊治的RA患者98例及体检健康对照组45例,根据类风湿关节炎病情活动度评分(disease activity score 28,DAS28)将RA患者分为高度活动组43例,中度活动组34例,低缓组(低度活动+疾病缓解)21例,分析各组间SAA和VEGF水平,采用Spearman相关性分析血清SAA和VEGF与临床指标的相关性,采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析SAA和VEGF对中高活动度RA患者的诊断价值。结果RA组的SAA表达水平、VEGF表达水平明显高于对照组;随着疾病活动度增加,SAA和VEGF表达水平明显增加趋势,高度活动组的SAA和VEGF表达水平明显高于健康对照组和低中度活动组(P<0.05);Spearman相关性分析,SAA和VEGF表达水平与关节压痛数、关节肿胀数、红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)和DAS28评分呈正相关性(P值均<0.05);ROC曲线显示,SAA和VEGF对中高活动度RA患者有预测价值(P<0.05),其中SAA和VEGF联合诊断对中高活动度RA患者预测价值最高,曲线下面积(area under curve,AUC)为0.871。结论血清SAA和VEGF水平参与RA发病的免疫炎症调节,可作为评估RA疾病活动的潜在生物标志物,有助于RA疾病的监测和评估。

眼内注射抗血管内皮生长因子(VEGF)类药物——治疗湿性年龄相关性黄斑变性(wAMD)的创新突破

2016年10月19日,在北京召开的老年性黄斑变性媒体圆桌会上,多位临床、药学及药物经济学领域权威专家介绍了我国湿性年龄相关性黄斑变性（w AMD）的治疗现状和治疗规范。年龄相关性黄斑变性（AMD）是50岁以上人群主要的致盲眼病之一,其中w AMD对患者的视力危害极大。2006年首个抗血管内皮生长因子（VEGF）类药物的问世为全球w AMD患者带来了曙光,与传统疗法相比,

多囊卵巢综合征患者血清血管内皮生长因子、内皮抑素水平及对卵巢间质血流的影响研究

目的探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清血管内皮生长因子(VEGF)、内皮抑素(ES)水平及对卵巢间质血流的影响。方法选取2014年7月—2015年9月在哈尔滨医科大学附属第二医院生殖中心就诊的PCOS患者96例作为PCOS组;选取同期因男方因素不孕而就诊于本院生殖中心的健康女性72例作为对照组。PCOS组根据稳态模型评价的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),分为PCOS胰岛素抵抗组(PCOS-IR组,n=47)和PCOS非胰岛素抵抗组(PCOS-NIR组,n=49)。采用酶联免疫吸附法测定所有受试者血清中的VEGF、ES水平。同时所有患者于卵泡早期应用经阴道彩色多普勒超声监测双侧卵巢间质血流,并计算出血流动力学参数:搏动指数(PI)和阻力指数(RI)。结果 PCOS-NIR、PCOS-IR组VEGF、ES水平高于对照组,PI、RI低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);PCOS-IR组VEGF、ES水平高于PCOS-NIR组,PI、RI低于PCOS-NIR组,差异有统计学意义(P<0.05)。PCOS患者VEGF水平与黄体生成素(LH)、睾酮(T)水平及LH/促卵泡刺激素(FSH)、HOMA-IR呈直线正相关(P<0.05),与PI、RI呈直线负相关(P<0.05);ES水平与LH、T水平及LH/FSH无直线相关性(P>0.05),而与PI、RI呈直线负相关(P<0.05),与HOMA-IR及VEGF水平呈直线正相关(P<0.05)。PCOS患者PI、RI与LH、T水平及LH/FSH、HOMA-IR均呈直线负相关(P<0.05)。多元线性回归分析结果显示,T、VEGF水平及HOMA-IR是PCOS患者PI的影响因素(P<0.05);LH、T、VEGF水平及HOMA-IR是PCOS患者RI的影响因素(P<0.05)。结论 VEGF、ES在PCOS患者血清中呈高表达,二者之间呈直线正相关且均与PCOS患者的HOMA-IR密切相关,同时VEGF的表达水平还与血清LH、T水平密切相关;VEGF与ES的表达失衡及HOMA-IR在PCOS卵巢间质血流异常增多中起主要作用。

血管内皮细胞生长因子和碱性成纤维细胞生长因子体外联合诱导外周血单个核细胞定向分化为血管内皮细胞

目的:在体外培养的条件下,应用血管内皮细胞生长因子和碱性成纤维细胞生长因子联合诱导人外周血单个核细胞向血管内皮细胞分化,解决组织工程血管化的种子细胞来源问题。方法:实验于2005-11/2006-05在安徽省立医院中心实验室完成。①血管内皮细胞生长因子(Pepro Tech公司,批号090310);碱性成纤维细胞生长因子(Pepro Tech公司,批号0704CY081);人淋巴细胞分离液Ficoll-paque(天津灏洋生物制品科技有限公司);PE标记的CD31,鼠抗人vWF单克隆抗体(BD Biosciences公司);FITC标记的兔抗鼠IgG(北京中杉金桥公司)。②无菌条件下取健康人外周血20mL,肝素抗凝,Hanks液双倍稀释,按1∶2置于淋巴细胞分离液上层,离心后提取分液层与上层交界部位呈混浊的灰白色层,即为单个核细胞层。③取离心后的细胞,向DMEM-F12培养基中分别加入含体积分数为0.2的胎牛血清、10μg/L血管内皮细胞生长因子、10μg/L碱性成纤维细胞生长因子。以不含血管内皮细胞生长因子和碱性成纤维细胞生长因子诱导剂的DMEM-F12培养基作为空白对照。吹打均匀并计数,按1×1010L-1接种于25cm2培养瓶中,于37℃、体积分数为0.05的CO2饱和湿度培养箱中培养,第3天更换培养基,去除未贴壁的细胞,以后每2d换液1次。④倒置相差显微镜下观察细胞单层排列是否呈"铺路石"样结构。运用流式细胞术检测诱导后的细胞表达CD31和vWF情况。透射电镜观察细胞的超微结构。结果:①诱导分化后细胞形态学变化:经血管内皮细胞生长因子和碱性成纤维细胞生长因子诱导后的细胞形态上呈典型的"铺路石"样外观,经历从小圆→梭形→扁平细胞的过程,符合内皮细胞的演变过程。②诱导分化后细胞的表面标志鉴定:诱导分化20d,贴壁细胞中62.5%表达CD31,58.2%表达vWF,54.3%表达CD31/vWF。③培养细胞的超微结构观察:透射电镜下细胞胞浆内可见特征性W-P小体。结论:外周血单个核细胞在血管内皮细胞生长因子和碱性成纤维细胞生长因子体外联合诱导下,可分化为血管内皮细胞。

高压氧预处理超长皮瓣组织血管内皮生长因子、转化生长因子β的表达

背景:高压氧治疗能促进皮瓣内微循环再生,增加血管内血流量与血氧含量,对皮瓣淤血改善效果明显。但高压氧预处理在皮瓣移植中的应用研究还未得到足够重视。目的:建立大鼠背部超长皮瓣模型,观察高压氧预处理在皮瓣淤血形成早期可能发挥的作用。方法:SD大鼠36只随机分3组,每组12只。3组均在背部设计随意皮瓣9 cm×2.5 cm制成淤血模型。高压氧预处理组在移植前接受4 d的高压氧治疗,1次/d;移植后高压氧治疗组在移植后接受4 d高压氧治疗,1次/d;对照组皮瓣移植后于常压空气中。移植后第3,5天,用苏木精-伊红染色观察组织浸润,免疫组织化学方法分析组织血管内皮生长因子和转化生长因子β表达,第5天计算皮瓣存活率。结果与结论:移植后5 d对照组皮瓣存活面积较其他两组少(P<0.05),高压氧预处理组和移植后高压氧治疗组差别不明显(P>0.05)。移植后3 d和5 d时,对照组皮瓣血管内皮生长因子和转化生长因子β阳性细胞数均低于高压氧预处理组和移植后高压氧治疗组(P<0.05),而高压氧预处理组和移植后高压氧治疗组之间差异无显著性意义(P>0.05)。结果说明,高压氧预处理可促进随意皮瓣血管内皮生长因子和转化生长因子β的表达,有利于新生血管的生成,能提高随意皮瓣的成活率。

基于网络药理学和动物实验探讨青蒿鳖甲汤抗血管新生的作用机制

目的:基于网络药理学预测青蒿鳖甲汤抗血管新生的潜在分子机制,并用Lewis肺癌小鼠移植瘤模型对STAT3/VEGF信号通路进行实验验证。方法:使用TCMSP、BATMAN-TCM数据库及文献筛选青蒿鳖甲汤的有效成分,利用Swiss Target Prediction平台预测成分靶点基因。GeneCards、OMIM、TTD等3个数据库检索血管新生靶点基因,与中药成分靶点基因匹配后,使用STRING数据库和Cytoscape 3.7.1软件进行蛋白质间相互作用(protein-protein interaction,PPI)分析,筛选关键靶点基因;Metascape平台对关键靶点基因进行基因本体(gene ontology,GO)功能富集分析及京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析。在动物实验中,C57BL/6J雄性小鼠接种Lewis肺癌细胞,建立皮下移植瘤模型,分为模型组,青蒿鳖甲汤高(16.0 g/kg)、中(8.0 g/kg)、低(4.0 g/kg)剂量组,贝伐株单抗组(15 mg/kg),分别给予相应剂量青蒿鳖甲汤灌胃或贝伐株单抗腹腔注射。14天后处死,取皮下瘤组织,称量瘤重,计算瘤体积和抑瘤率。免疫组化法检测血管标志物CD31表达情况,计算微血管密度(microvascular density,MVD);HE染色法观察瘤组织病理形态;Western blot法检测pSTAT3、STAT3及VEGF蛋白表达水平。结果:获取青蒿鳖甲汤有效成分61个及靶点基因523个,血管新生相关靶点基因1229个,交集靶点基因176个,关键靶点基因22个,其中VEGF是青蒿鳖甲汤发挥抗血管新生作用的首位关键靶点基因,信号通路以癌症相关信号通路为主,如HIF-1、VEGF、JAK-STAT等。动物实验结果表明,与模型组相比,青蒿鳖甲汤中、高剂量组瘤重、瘤体积均显著降低(P<0.05或P<0.01),高剂量组MVD降低(P<0.01);各给药组肿瘤细胞体积缩小,核固缩、碎裂现象多见,可见不同程度的坏死区及出血;高剂量组VEGF、pSTAT3蛋白表达水平及pSTAT3/STAT3水平均显著降低(P<0.05),中、低剂量组VEGF、pSTAT3蛋白水平虽有降低趋势,但差异无统计学意义。结论:青蒿鳖甲汤可以通过多成分-靶点-通路抑制血管新生,其作用机制可能与抑制STAT3/VEGF信号通路有关。