活血熄风方对局灶性脑缺血大鼠血管内皮生长因子mRNA表达的影响

目的观察活血熄风方对局灶性脑缺血模型大鼠脑梗塞体积及脑组织中血管内皮生长因子(VEGF mRNA)表达的影响。方法W istar雄性大鼠随机分为假手术组,模型组,活血熄风方高、中、低3个剂量组(剂量分别为20,10,5 g.kg-1)和尼莫地平对照组(0.02 g.kg-1),采用光化学法建立局灶性脑缺血大鼠模型,造模前7d灌胃给药,造模后24 h取材,TTC染色法测脑梗塞体积,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法测VEGF mRNA表达。结果与模型组比较,活血熄风方各剂量组的脑梗塞体积明显减少(P<0.01),VEGF mRNA表达明显升高(P<0.01)。结论活血熄风方可明显减少局灶性脑缺血大鼠脑梗塞体积,具有脑保护作用,其作用机制可能与增强VEGF mRNA表达有关。

血管内皮生长因子mRNA在上皮性卵巢癌中的表达及意义

目的探讨血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)核酸在上皮性卵巢癌组织中的表达及其与临床、病理特性之间的联系。方法上皮性卵巢癌31例,卵巢上皮性良性肿瘤17例及正常卵巢组织5例,采用原位杂交技术显示各类卵巢组织中VEGFmRNA的表达水平。结果上皮性卵巢癌组织的VEGFmRNA阳性表达率为48.39%(15/31),显著高于良性肿瘤(P<0.05)。上皮性卵巢癌中VEGFmRNA阳性表达率与淋巴结转移与否及腹水量密切相关(P<0.05)。上皮性卵巢癌不同组织类型、病理分级及临床分期等指标均与VEGFmRNA阳性表达率无明显相关性(P>0.05)。上皮性卵巢癌的预后与其组织中VEGFmRNA阳性表达率亦无相关性(P>0.05)。结论VEGFmRNA在上皮性卵巢癌中的表达水平显著升高,且与淋巴结转移与否及腹水量密切相关,可作为卵巢癌侵袭性评估的指标之一。

脊髓损伤后毛细血管新生与血管内皮生长因子mRNA的表达

目的探讨脊髓损伤后毛细血管新生与血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达。方法采用改良Allen's重量打击法大鼠急性脊髓损伤模型,用马松三色染色法观察脊髓损伤后毛细血管的新生情况,原位杂交法观察急性损伤后大鼠脊髓VEGF mRNA表达的动态变化。结果脊髓损伤后引起脊髓组织中血管密度和血管分布改变,脊髓急性损伤后损伤局部出现短暂的血管新生过程。同时,原位杂交结果显示VEGFmRNA的表达上调,表达时间与血管变化的时间重叠。除了时间上的相互关联外,脊髓损伤后毛细血管新生与VEGF mRNA的表达在空间分布上是一致的。结论脊髓急性损伤可上调VEGFmRNA在脊髓血管内皮细胞、胶质细胞和巨噬细胞内的表达,有短暂的血管新生过程,损伤组织中VEGFmRNA的表达与其毛细血管新生的调节密切相关。

黄芪丹参复方提取物对一氧化氮合成阻滞孕鼠胎盘血管内皮细胞及滋养细胞血管内皮生长因子mRNA表达影响

目的研究黄芪丹参复方提取物提高胎盘供血的分子机制,为临床有效防治胎盘供血不足所致妊娠并发症提供思路。方法提取分离中药黄芪、丹参复方成分,运用一氧化氮合酶(NOS)阻滞剂L-精氨酸甲酯(L-NAME)建立一氧化氮合成阻滞大鼠模型,核酸原位杂交技术检测妊娠12日胎盘滋养细胞、始基微血管内皮细胞血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达变化。结果一氧化氮合成阻滞模型VEGFmRNA表达较空白组、中药治疗组及硝酸甘油治疗对照组均明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论黄芪丹参复方成分可能对妊娠早期胎盘滋养细胞及血管内皮细胞VEGFmRNA表达具有促进作用,从而有利于胎盘血管网络形成及滋养细胞侵入及母胎循环构建,提高胎盘血液供应,达到防治妊娠高血压综合征等胎盘供血不足疾病的目的。

骨形态发生蛋白2和血管内皮生长因子mRNA在股骨骨不连大鼠损伤区域的动态表达

背景:骨形态发生蛋白2和血管内皮生长因子可以促进新骨的形成,提高骨不连的治愈率。目的:观察大鼠股骨骨不连修复过程中骨缺损区骨形态发生蛋白2与血管内皮生长因子mRNA的表达情况。方法:SD大鼠股骨左建立骨不连模型后,随机分为7组,分别于造模后1,3,7,14,21,28,35d,处死取材。大鼠右股骨不做缺损直接缝合伤口,作为对照。RT-PCR技术检测大鼠股骨骨形态发生蛋白2和血管内皮生长因子mRNA的表达。结果与结论:大鼠股骨骨不连损伤后,损伤周围区骨形态发生蛋白2与血管内皮生长因子mRNA表达上升,至7d时达到顶峰,而后随时间的延长而下降;而在损伤中心区骨形态发生蛋白2与血管内皮生长因子mRNA表达延迟,且表达量低于损伤周围区。提示大鼠股骨骨不连缺损中心区域在修复早期骨形态发生蛋白2与血管内皮生长因子mRNA的低表达及时间滞后可能是其骨不连发生的重要原因,在相应的时期补充外源性骨形态发生蛋白2与血管内皮生长因子可能助于骨不连的修复愈合。

川芎嗪干预早期膝骨关节炎大鼠软骨Ⅱ型胶原纤维α1基因与血管内皮生长因子mRNA及miR20b的表达

背景:课题组前期研究发现川芎嗪能明显降低骨关节炎关节液中NO、前列腺素E2水平,对减轻骨性关节炎的炎症有一定作用,但具体机制还不清楚。目的:观察川芎嗪治疗膝骨关节炎模型关节软骨中Ⅱ型胶原纤维α1基因、血管内皮生长因子mRNA及miR20b表达水平,并探讨川芎嗪治疗早期膝骨关节炎大鼠的作用机制。方法:健康雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、川芎嗪高剂量组、川芎嗪低剂量组、阳性对照组,后4组通过木瓜蛋白酶关节腔注射制作早期膝骨关节炎大鼠模型。造模后川芎嗪高、低剂量组分别灌胃川芎嗪100 mg/kg和50 mg/kg,阳性对照组灌服塞来昔布24 mg/kg;正常组、模型组灌服等量生理盐水。干预6周后取材,分别行鼠软骨大体组织学评分、qR T-PCR检测软骨Ⅱ型胶原纤维α1基因、血管内皮生长因子mRNA及miR20b的表达水平。结果与结论:(1)软骨Mankin评分:川芎嗪高、低剂量组和阳性对照组均较正常组高(P<0.05),较模型组低(P<0.05),且川芎嗪高剂量组<阳性对照组<川芎嗪低剂量组;(2)川芎嗪各剂量组和阳性对照组的Ⅱ型胶原纤维α1基因、血管内皮生长因子mRNA表达较正常组上调(P<0.05),较模型组下调(P<0.05),且川芎嗪高剂量组<阳性对照组<川芎嗪低剂量组;(3)川芎嗪各剂量组、阳性对照组及正常组的miR20b表达均较模型组上调(P<0.05),其中川芎嗪低剂量组<阳性对照组<川芎嗪高剂量组;(4)提示:川芎嗪对早期膝骨关节炎大鼠治疗具有积极作用,可能通过上调软骨中miR20b从而抑制血管内皮生长因子mRNA的表达,促进软骨的修复。

通痹灵对类风湿关节炎滑膜细胞血管内皮生长因子mRNA的影响

目的观察通痹灵对体外培养的类风湿关节炎(RA)滑膜细胞血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达的影响,探讨其可能的作用机制。方法行关节腔镜手术取RA患者膝关节滑膜组织消化分离滑膜细胞进行分组培养。空白对照组:含生理盐水+10%胎牛血清的DMEM培养;通痹灵低剂量组:50mg/L通痹灵+10%胎牛血清的DMEM培养;通痹灵高剂量组:200mg/L通痹灵+10%胎牛血清的DMEM培养。提取总RNA,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组VEGFmRNA的表达。结果通痹灵高、低剂量组VEGFmRNA表达较对照组明显降低(P<0.05)。结论通痹灵可以下调RA患者滑膜细胞VEGFmRNA表达水平,从而可以通过抑制VEGF表达减轻滑膜血管翳增殖。

缺氧条件下视网膜微血管内皮细胞中缺氧诱导因子1和血管内皮生长因子mRNA表达的研究

目的探讨视网膜微血管细胞在缺氧过程中缺氧诱导因子1(HIF1)和血管内皮生长因子(VEGF)基因mRNA水平表达的变化。方法视网膜微血管细胞(RECs)分别在正常氧、缺氧3h不同条件下培养后,应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法半定量测定HIF1α和VEGF基因的mRNA水平的表达。结果缺氧组RECsHIF1基因的mRNA水平表达为对照组的4.6倍。同时缺氧组RECs细胞的VEGF基因的mRNA水平表达为对照组的3倍。结论缺氧能引起视网膜微血管细胞的HIF-1及VEGF基因mRNA水平高表达,提示缺氧可能通过HIF1基因的转录途径来诱发VEGF基因的高表达导致视网膜新生血管形成。

补阳还五汤对脑出血大鼠脑内血管内皮生长因子mRNA表达的影响

目的通过观察补阳还五汤对脑出血大鼠脑内损伤区血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)mRNA表达的影响,探讨补阳还五汤的作用机制。方法以立体定位向脑内苍白球注入Ⅶ型胶原酶0.5U,建立脑出血模型。95只SD大鼠随机分为正常组5只、假手术组、模型组、补阳还五汤(BYHWD)组各30只,BYH-WD组灌服补阳还五汤,运用逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测正常组及其他组造模术后1,4,7,14,21,28d各时间点VEGF mRNA的动态变化。结果正常组及假手术组不同时间点VEGF mRNA未见明显表达;模型组、补阳还五汤组在脑出血术后1d即有表达,其后逐渐增多,模型组在术后21d达到高峰(P<0.01);而补阳还五汤组在术后14d即达到高峰(P<0.01),随后开始下降;从第7天开始补阳还五汤组即高于模型组(P<0.05)。结论补阳还五汤能促进脑出血大鼠脑内VEGF mRNA的表达,从而调整血管新生过程,这可能是其促进组织修复的机制之一。

血管内皮生长因子mRNA在高氧诱导新生鼠视网膜异常新生血管化模型中的表达

目的分析血管内皮生长因子(VEGF)在高氧诱导视网膜异常新生血管化大鼠模型中的表达变化,探讨VEGF在高氧诱导视网膜新生血管化进程中所起的作用。方法150只SD新生大鼠随机分为氧诱导模型组和正常对照组,各75只。氧诱导模型组大鼠吸入浓度(80±2)%7d,随后在正常空气环境。视网膜铺片ADP酶染色了解视网膜血管形态改变;常规苏木精-伊红染色定量反映视网膜血管增生情况,判断建模成功。半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)定量反映视网膜VEGFmRNA转录水平的变化。结果氧诱导模型组7日龄时视网膜血管明显收缩、阻塞,出现大片无灌注区;14日龄见新生血管形成;苏木精-伊红染色见模型组14日龄大鼠视网膜出现较多新生血管内皮细胞核;RT-PCR结果显示,氧诱导模型组7d时VEGFmRNA转录水平明显低于对照组,停氧后逐渐增强。VEGFmRNA的表达在新生血管发生前升高,随新生血管退行逐渐下降。结论未成熟视网膜VEGFmRNA的转录水平与组织氧状态呈密切负性相关关系;停氧后视网膜的相对缺氧导致VEGFmRNA转录上调,促使视网膜血管病理性增生。VEGF的异常表达在ROP的新生血管化进程中起重要作用。

糖基化终产物对人脐静脉内皮细胞血管内皮生长因子mRNA及蛋白表达的影响

目的研究糖基化终产物(AGEs)对人脐静脉内皮细胞血管内皮生长因子(VEGF)mRNA及蛋白表达的影响,探讨AGEs在糖尿病动脉粥样硬化中的作用。方法将人脐静脉内皮细胞株ECV304用BSA及不同浓度的AGEs孵育24 h及400 mg/L的AGEs孵育0、12、24及36 h,采用原位杂交及W estern b lot方法检测VEGFmRNA及蛋白的表达。结果人脐静脉内皮细胞在100、200及400 mg/L AGEs孵育24 h后,VEGF mRNA及蛋白表达均显著高于BSA对照组(P<0.05),在用400 mg/L AGEs分别孵育12、24及36 h后,各组内皮细胞VEGFmRNA及蛋白表达量也明显高于0 h对照组(P<0.05)。结论AGEs可增加人脐静脉内皮细胞VEGFmRNA及蛋白的表达,且与浓度和时间呈正相关。

隐丹参酮对人胃癌SGC-7901细胞增殖及血管内皮生长因子mRNA表达的影响

目的通过测定隐丹参酮对人胃癌SGC-7901细胞增殖及血管内皮生长因子（VEGF）mRNA的影响,探讨其抗肿瘤的作用机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测隐丹参酮对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响,采用Real Time RT-PCR检测隐丹参酮对VEGF m RNA表达的影响。结果 20、40、60、80、100μmol/L的隐丹参酮作用于人胃癌SGC-7901细胞6-48 h,其生长和增殖均受到一定程度的抑制;24 h为隐丹参酮对SGC-7901细胞抑制作用的最佳时间,IC50为59.11μmol/L;选取40、60和80μmol/L 3个剂量作用于人胃癌细胞SGC7901 24 h后,60和80μmol/L的隐丹参酮均可下调VEGF m RNA的表达（均P〈0.01）。结论隐丹参酮可抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖,并能抑制VEGF mRNA的表达,提示这可能是其抗肿瘤的作用机制之一。

电针对脑出血大鼠血管内皮生长因子mRNA表达的影响

目的探寻针刺足三里治疗脑出血的作用机制。方法 96只SD大鼠随机分为假手术组(24只)、假针刺组(24只)、脑出血组(24只)、针刺组(24只),通过立体定位向脑内苍白球注入Ⅶ型胶原酶0.5U建立脑出血模型。针刺组针刺双侧足三里,假针刺组针刺大鼠双侧非经非穴处皮肤。观察脑缺血再灌注3、7、14d血管内皮生长因子(VEGF)表达的空间位置变化;检测各组脑缺血再灌注3、7、14d各时间点VEGFmRNA的动态变化。结果假手术组不同时间点VEGF未见明显表达。脑出血组、假针刺组和针刺组3d时在血肿周围均可观察到大量VEGF阳性微血管,7dVEGF阳性微血管开始深入血肿区,随后出现在血肿区。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)结果显示,VEGFmRNA在假手术组未见明显表达,脑出血后3dVEGFmRNA表达即明显增强,持续到14d,针刺组VEGFmRNA表达水平在各时间点均明显高于脑出血组,而假针刺组与脑出血组则水平接近。结论针刺足三里能促进脑出血大鼠脑内VEGF的表达,其可能参与脑出血损伤区的微血管系统重建,从而实现损伤组织的修复。

血管内皮生长因子mRNA及其蛋白、上皮细胞钙黏蛋白在喉鳞状细胞癌中表达的研究

目的观察血管内皮生长因子(VEGF)mRNA及其蛋白、上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系,并探讨它在喉鳞状细胞癌发生、发展中的作用及其临床应用价值。方法应用原位分子杂交和免疫组织化学SP法,检测VEGF mRNA及其蛋白、E-cadherin在60例喉鳞状细胞癌、30例喉不典型增生和20例慢性喉炎组织中的表达。结果①60例喉鳞状细胞癌组织中,VEGF mRNA及蛋白阳性率为80.0%(48/60)、73.3%(44/60),E-cadherin阳性率为18.3%(11/60)。②VEGF mRNA及蛋白的表达与淋巴结转移、甲状腺软骨累及、T分期、TNM分期有关(P<0.05);VEGF蛋白表达与病理分级有关(P<0.05),而VEGF mRNA表达与病理分级无关(P>0.05),两者与性别、年龄、临床分型、肿瘤大小及部位无关(P>0.05)。E-cadherin的表达与淋巴结转移、病理分级、T分期、TNM分期有关(P<0.05),而与性别、年龄、肿瘤大小、部位及甲状软骨累及无关(P>0.05)。③VEGF mRNA及蛋白在喉鳞状细胞癌组织中的表达呈显著正相关(r=0.358,P<0.05),而VEGF蛋白和E-cadherin在喉鳞状细胞癌组织中的表达呈显著负相关(r=-0.396,P<0.05)。结论①VEGF在喉鳞状细胞癌中过度表达及E-cadherin的下调对喉鳞状细胞癌的发生、发展可能起协同作用。②联合检测VEGF和E-cadherin对预测喉鳞状细胞癌浸润转移有重要意义,并可作为判断喉鳞状细胞癌生物学行为的指标。

兔骨关节炎滑膜组织血管内皮生长因子mRNA表达及透明质酸钠的影响

背景:骨关节炎的发病机制目前还未完全清楚,研究发现血管内皮生长因子参与骨关节炎的发生发展。目的:观察血管内皮生长因子在滑膜组织表达的改变及透明质酸钠对滑膜血管内皮生长因子基因表达的影响。方法:24只大耳白兔随机正常对照组、生理盐水组和透明质酸钠组行单膝前交叉韧带切断术,4周后生理盐水组关节腔注射生理盐水0.3mL,透明质酸钠组注射等量的高分子量10g/L透明质酸钠,1次/周,连续5周。第10周处死动物,比较各组股骨内髁关节软骨的大体变化,采用实时定量聚合酶链反应方法检测滑膜VEGFmRNA的表达水平。结果与结论:大体评分显示生理盐水组软骨退变的程度明显重于正常对照组和透明质酸钠组(P<0.05);生理盐水组滑膜血管内皮生长因子mRNA表达较正常组显著下降(P<0.05),透明质酸钠组滑膜血管内皮生长因子mRNA表达较生理盐水组有升高,但比正常对照组低(P<0.05)。结果表明,滑膜组织血管内皮生长因子表达下降可能参与透明质酸钠的发生发展,关节腔注射透明质酸钠对透明质酸钠滑膜组织血管内皮生长因子表达有上调作用,有利于滑膜组织修复,可能是其治疗透明质酸钠机制之一。

环氧化酶2、血管内皮生长因子mRNA在异位骨化组织中的表达

目的观察环氧化酶2(COX-2)、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA在异位骨化组织中的表达。方法选取2015年5月-2016年5月收治脊髓损伤合并异位骨化的患者11例作为观察组,同期收治的脊髓损伤但未发生异位骨化患者10例作为对照组,比较2组患者COX-2、VEGF的mRNA表达阳性率,并采用Cox回归分析法分析判定COX-2、VEGF是否为脊髓损伤异位骨化的危险因素。结果异位骨化组织中COX-2、VEGF的mRNA表达水平明显高于正常骨组织,差异均有统计学意义(P<0.05);经Cox回归分析,COX-2、VEGF为脊髓损伤异位骨化的危险因素。结论 COX-2、VEGF是脊髓损伤异位骨化的独立危险因素,针对性的使用其抑制剂,可以预防异位骨化发生。

血管内皮生长因子mRNA表达及ARPE-19细胞增生与缺氧的诱导效应

目的:研究缺氧对人视网膜色素上皮细胞-19(ARPE-19)的增生和血管内皮细胞生长因子表达的诱导作用。方法:实验于2004-10/2005-12于南京医科大学生理学实验室完成。实验材料:ARPE-19细胞购自美国American Type Culture Collection。实验方法及分组:ARPE-19细胞被暴露在含体积分数为0.05的CO2和0.95的N2的缺氧培养缸中培养为缺氧组。同代同一培养瓶中传代的细胞在常氧情况下培养,作为正常对照组。实验评估:2,12,24,36h后,光镜下观察ARPE-19细胞形态学变化,采用四甲基偶氮唑盐法检测两组ARPE-19细胞增殖的情况;用半定量反转录聚合酶链反应检测两组ARPE-19细胞血管内皮细胞生长因子mRNA的表达。结果:①缺氧对ARPE-19细胞增殖的影响:ARPE-19细胞缺氧组2,12,24,36hA值均比正常组明显增高,除缺氧2h外,其他各时间点均能明显诱导ARPE-19细胞增殖(P<0.05)。②缺氧对血管内皮生长因子mRNA表达的影响:缺氧组血管内皮生长因子mRNA表达明显增高,缺氧2,12,24,36h血管内皮生长因子mRNA表达均高于正常对照组(1.567±0.080,1.868±0.176,5.061±0.407,1.748±0.277,0.603±0.017,P<0.05,n=8),并且呈时间依赖性,在24h达到表达最高峰。结论:缺氧可以促进ARPE-19细胞增殖和血管内皮生长因子mRNA表达增加,为研究缺血缺氧性视网膜疾病提供了一个新的思路,即控制缺氧造成的视网膜色素上皮细胞增殖和血管内皮细胞增殖对治疗缺血缺氧性视网膜疾病是绝对必要的。

血管内皮生长因子mRNA在慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织中表达水平的动态变化

目的观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠不同时期肺组织中血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达水平的变化及肺血管超微结构的变化,并探讨二者的相关性。方法 48只清洁级健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组24只和COPD模型组24只,COPD模型组又分为COPD 1、2、4周组各8只。采用气管内注入脂多糖及烟熏方法制作COPD模型。分别于第1、2、4周处死大鼠,观察不同时期COPD大鼠肺血管超微结构及肺组织中VEGF mRNA表达水平。结果随着COPD病情进展,电镜下肺血管的超微结构改变越明显,呈现阶梯状逐步加重的趋势,VEGF mRNA的表达也逐渐增高,COPD 1、2、4周组大鼠肺组织VEGF mRNA的表达均高于对照组(P<0.05,0.01);COPD 2周组大鼠肺组织VEGF mRNA的表达高于COPD 1周组(P<0.05);COPD 4周组大鼠肺组织VEGF mRNA的表达高于COPD1、2周组(P<0.01,0.05)。结论不同时期COPD大鼠肺组织中VEGF mRNA表达及肺血管的超微结构改变不同,提示VEGF可能参与了COPD血管内皮细胞损伤。

机械张应力对兔腭中缝血管内皮生长因子mRNA表达的影响

目的 观察在快速扩张兔腭中缝的扩张期和固定期血管内皮因子 (VEGF)mRNA表达情况。方法 用螺旋分裂基托扩大矫治器 (Haas矫正器 )扩张兔上牙弓 ,每 12h 0 .2 5mm ,共扩张牵引 14d ,分别于即刻 ,第 1、2、3、4、6周取材 ,标本常规进行逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR)检测VEGFmRNA的表达。结果 第 1、2、3、4、6周VEGFmRNA表达量实验组均高于对照组。在实验组VEGFmRNA各组间的变化趋势为随着机械应力快速扩张 ,VEGFmRNA的表达量逐渐上升 ,固定 1周达峰值 ,以后逐渐下降 ,到固定 4周表达水平接近正常。结论 机械牵张力刺激可以导致内源性VEGF生成 。