辛伐他汀对高胆固醇血症小鼠血管内皮粘附单核细胞的抑制作用

目的 :观察辛伐他汀对高胆固醇血症小鼠离体胸主动脉内皮粘附单核细胞的抑制效应。方法 :用不同剂量 (1,5 ,2 0mg·kg- 1)的辛伐他汀每日1次给高胆固醇血症小鼠皮下注射共 2wk或 6wk ,届时剪取小鼠胸主动脉 ,用于单核细胞粘附试验。结果 :(1)只有 2 0mg·kg- 1× 6wk组小鼠血浆胆固醇水平显著降低 ,从 6 .6± 0 .7mmol·L- 1降为 4 .6± 0 .7mmol·L- 1,(P <0 .0 5 ) ;(2 )高胆固醇血症小鼠胸主动脉内皮对单核细胞的粘附率明显高于正常小鼠 ,辛伐他汀 2 0mg·kg- 12个组对高胆固醇血症小鼠胸主动脉内皮粘附单核细胞有明显的抑制作用 ,粘附率 (4.1± 2 .5 ) %vs (1.9± 0 .1) % (和 )或(1.4± 0 .3) %均 (P <0 .0 5 )。结论 :高胆固醇血症小鼠胸主动脉内皮对单核细胞粘附增强 。

Adiporedoxin抑制TNF-α诱导的血管内皮细胞与单核细胞粘附

脂过氧化物酶(adiporedoxin,Adrx)是过氧化物酶-2(peroxiredoxin-2)家族的新成员,目前对其生物学功能知之甚少。Adrx分子结构与过氧化物酶(peroxiredoxins,PRDXs)和硫氧还蛋白家族(thioredoxins,TRXs)相似[1]。PRDXs和TRXs调节血管内皮细胞炎症反应,抑制动脉粥样硬化斑块进展[2-3]。本实验研究Adrx对TNF-α诱导内皮细胞粘附分子表达的影响,证实它在调节血管内皮细胞与单核细胞粘附中的作用。

补肾宁心方对人单核-血管内皮细胞粘附的影响

目的 :探讨补肾宁心方对人单核 -血管内皮细胞粘附的影响及机理。方法 :以培养人脐静脉内皮细胞 (HUVECs)作为靶细胞 ,在内皮细胞培养基中加入氧化的低密度脂蛋白 (ox -LDL)或在试验体系中加入灌服补肾宁心方的兔血清 ,以孟加拉玫瑰红活细胞染色法测定人单核细胞系U937与HUVECs的粘附 ,并用流式细胞仪检测内皮细胞表面粘附分子细胞间粘附分子 - 1(ICAM - 1)、血管细胞粘附分子 - 1(VCAM - 1)以及E -选择素的表达。结果 :ox -LDL显著增强单核U937细胞与内皮细胞之间的相互粘附 ,如在试验体系中加入灌服补肾宁心方的动物血清 ,则粘附率明显降低 (P <0 0 1)。流式细胞仪分析结果显示ox -LDL能明显促进内皮细胞表面ICAM - 1、VCAM -1以及E -选择素的表达 ,补肾宁心方中药灌服血清可显著下调内皮细胞表面ICAM - 1、VCAM - 1以及E -选择素的表达 (P <0 0 1)。结论 :补肾宁心方含药血清可能通过下调内皮细胞表面粘附分子的表达抑制单核 -血管内皮细胞粘附 ,从而发挥对血管内皮细胞的保护作用。

欧芹素乙和已酮可可碱对白细胞介素-1_β诱导脑血管内皮细胞与单核细胞粘附和迁移的抑制作用

目的：研究白细胞介素－１β（ＩＬ－ １β） 对培养的牛脑微血管内皮细胞（ＢＣＭＥＣ） 与单核细胞（ＭＮＣ） 粘附、迁移的影响及药物的保护作用。方法：通过测定粘附于内皮细胞单层上的ＭＮＣ及胶原层中的ＭＮＣ，计算ＭＮＣ的粘附率及迁移率。结果：ＩＬ－ １β（５００ｋＵ·Ｌ－ １） 可促进单核细胞与脑微血管内皮细胞的粘附与迁移，其促粘附与迁移作用具明显的时效关系。ＩＬ－ １β促粘附达最大效应时间为２ｈ，较对照组提高４６．１％ ；促迁移作用２ｈ 达最大值，较对照提高１１８ ．１ ％ 。欧芹素乙、己酮可可碱在浓度１ ～１００μｍｏｌ·Ｌ－１ 范围时，可剂量依赖性地拮抗ＩＬ－ １β诱导的粘附及迁移，药物浓度最高（１００μｍｏｌ·Ｌ－１） 时，抑制率达最大。

肺微血管内皮细胞的分离及其在单核细胞粘附中的应用

目的 :研究肺微血管内皮细胞的分离和纯化方法 ,探讨内皮细胞的透明质酸对于单核细胞粘附的作用。方法 :用两次植块法分离狗和大鼠的肺微血管内皮细胞。通过粘附实验 ,观察单核细胞在内皮细胞单层上的粘附。结果 :第二次植块 3天后 ,内皮细胞自肺组织块边缘迁出 ,2周后内皮细胞生长形成单层。在扫描电镜下 ,内皮细胞表面有许多微绒毛和小凹。用透明质酸酶消化内皮细胞表面的透明质酸后 ,粘附的单核细胞数显著减少。结论 :两次植块法是一种理想的肺微血管内皮细胞的分离和纯化方法。

高压培养促进人血管内皮细胞和人单核细胞的粘附

目的探讨体外高压培养对人血管内皮细胞粘附功能的影响,为高血压和血管动脉粥样硬化的发病关系提供实验依据。方法体外培养血管内皮细胞,分别以不同的压力(0、120、150、180、210 mmHg)培养细胞,细胞计数法测定内皮细胞与单核细胞的粘附率。结果高压培养明显增加内皮细胞和单核细胞的粘附率,180 mmHg高压培养细胞较大气压力(0 mmHg)培养24 h粘附率增加约3.6倍;但MG132预处理抑制了180 mmHg高压培养诱导的内皮细胞与单核细胞的粘附率。结论高压培养促进血管内皮细胞的粘附功能。

几种中药提取物对血管内皮细胞与单核细胞粘附的抑制作用

白细胞粘附于血管内皮细胞是炎症反应的关键步骤,进而白细胞穿越血管壁向炎症部位游走引起炎细胞浸润。急性炎症以中性粒细胞浸润为主,而慢性炎症则以单核细胞浸润为主。本实验观察了几种清热类中药的提取物对血管内皮细胞与单核细胞粘附的影响。用呈融合状的单层人脐静脉内皮细胞(二、三代),其中加入中药提取物,对照加培养液,作用4h后洗去中药,再加入PHA活化的人外周血单核细胞,37℃作用1h。

血清血管内皮生长因子及单核细胞趋化蛋白-1水平与慢性肾衰竭患者血液透析治疗预后的相关性

目的探讨血清血管内皮生长因子(VEGF)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)与慢性肾衰竭(CRF)患者血液透析治疗预后的相关性。方法回顾性分析2016年1月至2020年8月本院收治的80例血液透析治疗预后不良CRF患者的临床资料,观察预后不良患者与预后良好患者血液透析治疗前血清VEGF、MCP-1水平,并分析血清VEGF、MCP-1水平与CRF患者血液透析治疗预后的相关性。结果预后不良患者血清VEGF、MCP-1水平均高于预后良好患者,差异有统计学意义(P<0.05);经Logistic回归分析结果显示,血清VEGF、MCP-1水平高可能是CRF患者血液透析预后不良的影响因素(OR>1,P<0.05)。结论血清VEGF、MCP-1水平与CRF患者血液透析治疗预后密切相关,血清VEGF、MCP-1水平越高,CRF血液透析治疗预后不良风险越高。

清开灵对白细胞-血管内皮细胞粘附的影响

目的:研究清开灵对白细胞与血管内皮细胞粘附的作用。方法:以TNF处理体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)为实验模型,用不同浓度的清开灵作用HUVEC 2、12h后,用虎红染色法检测人外用血中性粒细胞(PMN)、淋巴细胞与HUVEC粘附的情况;并用Cell-ELISA检测HUVEC表面粘附分子E-selectin的表达。结果:TNF作用HUVEC 2、12h后,能明显增强PMN、淋巴细胞与HUVEC的粘附,不同浓度的清开灵能降低PMN、淋巴细胞与HUVEC的粘附;TNF作用HUVEC 2h后,能促进HUVEC表面E-selectin的表达,清开灵能抑制E-selectin的表达,TNF作用HUVEC 12h后,不能促进HUVEC表面E-selectin的表达,不同浓度的清开灵对E-selectin的表达没有作用。结论:清开灵能降低白细胞与HUVEC的粘附,抑制E-selectin的表达是其抗白细胞粘附的分子机制之一。

丹酚酸B对缺氧损伤心脏微血管内皮细胞细胞间粘附分子表达的影响

目的 :探讨丹参有效成分丹酚酸B在心脏微血管内皮细胞 (CMEC)缺氧 /复氧损伤中的保护作用。方法 :通过心脏微血管内皮细胞体外培养技术 ,建立缺氧预适应 (HPC)模型并给予丹酚酸B ,应用酶联免疫方法检测细胞间粘附分子 1(ICAM 1)表达。结果 :在CMEC缺氧 3h ,复氧 6h后ICAM 1表达升高 ;缺氧预适应和应用丹酚酸B对CMEC进行预处理则能有效降低CMECICAM 1的表达。结论 :丹酚酸B在CMEC缺氧 /复氧损伤中可产生与缺氧预适应类似的保护效果。

柚皮苷抑制高糖诱导的脐静脉内皮细胞与单核细胞的粘附作用

目的研究柚皮苷对高糖诱导的脐静脉内皮细胞(HUVECs)与单核细胞的粘附的抑制作用及机制。方法分离培养HUVECs后,采用不同剂量的柚皮苷预处理HUVECs,然后高糖诱导HUVECs;加入荧光染料标记单核细胞系THP-1细胞与HUVECs共同孵育,荧光显微镜下观察HUVECs与单核细胞的粘附作用并拍照,比较粘附密度;提取总蛋白后,Western blotting检测处理后HUVECs粘附分子的表达;荧光染料结合法检测处理后HUVECs活性氧的产生;提取处理的脐静脉内皮细胞核蛋白后,Western blotting检测核因子-κB在核内的量。结果高糖诱导HUVECs与单核细胞的粘附,柚皮苷可显著抑制高糖诱导的HUVECs与单核细胞的粘附。柚皮苷抑制高糖诱导的HUVECs细胞间粘附分子和血管内皮细胞粘附分子的表达,柚皮苷抑制高糖诱导的HUVECs活性氧产生,柚皮苷抑制高糖诱导的HUVECs核因子-κBp65活化。结论柚皮苷可能通过抑制高糖诱导的HUVECs活性氧产生,从而抑制核因子-κB的活化,进一步抑制细胞间粘附分子和血管内皮细胞粘附分子的表达,影响HUVECs与THP-1细胞的粘附,从而抑制高糖诱导的血管炎症。

小檗碱对淋巴细胞与血管内皮细胞粘附及粘附分子的影响

目的：通过研究小檗碱对淋巴细胞与血管内皮细胞粘附及粘附分子的影响，探讨小檗碱免疫抑制作用机制。方法：以小檗碱处理人淋巴细胞或人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ） 后，用蛋白染料染色法研究对淋巴细胞与内皮细胞粘附的作用，用细胞ＥＬＩＳＡ、免疫细胞化学染色法研究对细胞表面粘附分子表达的影响。结果：小檗碱能抑制静息的及ＩＬ１、ＴＮＦ激活的内皮细胞与淋巴细胞间的粘附，其主要分子机制为下调内皮细胞表面粘附分子ＩＣＡＭ１ 的表达；小檗碱能抑制ＩＬ１ 激活的淋巴细胞与内皮细胞的粘附，对淋巴细胞表面粘附分子ＣＤ１８ 的表达无影响。结论：通过抑制细胞表面粘附分子的表达而抑制淋巴细胞与内皮细胞的粘附，从而抑制淋巴细胞再循环可能是小檗碱发挥免疫抑制作用的机制之一。

复圣散对血管内皮细胞活性及其与中性粒细胞粘附率的影响

目的 :探讨中性粒细胞 (PMN)与血管内皮细胞 (VEC)的粘附特性和影响因素 ,以及中药复圣散的干预作用。方法 :以培养人脐静脉内皮细胞作为靶细胞 ,观察在高脂、高糖、肿瘤坏死因子 (TNF -α)及缺氧再氧化条件下 ,对培养的VEC活性以及PMN与VEC相互粘附的影响。结果 :高脂、高糖、TNF -α和缺氧再氧化等均可抑制VEC活性 ,并显著增强PMN与VEC的相互粘附作用 ,其粘附率正常对照组为 1 0 0 % ,高脂组则为 1 67 7% ,缺氧再氧化组为1 5 1 4% ,TNF -α组为 1 3 6 7% ,高糖组为 1 2 9 6% (均P <0 0 1 )。如事先在试验体系中加入不同浓度的中药血清 ,则粘附率明显降低 ,大、小剂量均呈现有抑制粘附效应 ,并有统计学差异。结论 :中药复圣散有良好的保护VEC和抗粘附作用 ,这可能是该方防治缺血性心脑血管疾病的机制之一。

血管内皮生长因子对肝癌细胞侵袭能力和同质性粘附作用影响

目的 观察血管内皮细胞生长因子 (VascularEndothelialGrowthFactorVEGF)诱导肝癌HepG2 细胞转移及其对细胞同质性粘附作用的影响。方法 采用3 H -TdR掺入及鼠尾胶粘附试验测定VEGF对肝癌HepG2 细胞同质性粘附作用以及Bodyen -Chamber观察VEGF诱导肝癌细胞转移作用。 结果 1ng/ml、5ng/mlVEGF诱导HepG2 细胞 6 0min、90min、12 0min3 H -TdR掺入实验 (dpm/min)分别为 175 8.6 7± 2 89.4 6、1380 .0 3± 32 8.5 5、2 6 5 7.4 3± 310 .31和 312 4 .3± 2 2 6 2 .14、2 2 4 5 .6±2 73.2 4、2 0 91.5 2± 2 13.84 ,10ng/mlVEGF诱导HepG2 细胞 6 0min、90min、12 0min ,3 H -TdR掺入实验 (dpm/min)分别为12 32 .32± 2 0 1.0 4、2 337.5± 333.0 4、2 2 36 .99± 2 37.0 7,显著低于对照组 6 0、90、12 0min的 2 184 .4 9± 336 .0 3、35 6 0± 2 5 5 .17、4 337.4± 377.35 ,(P <0 .0 5或 0 .0 1) ;用VEGF 1ng/ml、5ng/ml、10ng/ml培养肝癌细胞 2h ,下室浸润的肝癌细胞数分别为5 .75± 1.0 0、17.17± 2 .38、10 .33± 0 .88× 10 4/ml,分别高于对照组 1.5 8± 0 .38× 10 4/ml,(P <0 .0 5或 0 .0 1)。结论 VEGF可以促进肝癌HepG2 细胞转移 ,与VEGF降低肝癌细胞的同质性粘附作用有关。

黄芪多糖对淋巴细胞与血管内皮细胞粘附的影响及其分子机制

目的从影响淋巴细胞与血管内皮细胞粘附的角度探讨黄芪多糖免疫增强作用的机制。方法以体外培养的人脐静脉内皮细胞 ( HU VEC)为模型 ,应用蛋白染料染色、细胞 EL ISA、免疫细胞化学等方法 ,研究黄芪多糖对淋巴细胞与血管内皮细胞粘附的影响及其分子机制。结果黄芪多糖作用于 HUVEC,能促进 HUVEC与淋巴细胞粘附 ,并与 IL - 1、TNF有协同增强作用 ,其主要分子机制为促进 HU VEC表面粘附分子 ICAM- 1的表达 ;黄芪多糖作用于淋巴细胞 ,不增强淋巴细胞与HUVEC粘附 ,同时也不提高淋巴细胞表面粘附分子 CD18的表达。结论通过提高细胞表面粘附分子的表达而促进淋巴细胞与内皮细胞的粘附 。

壳聚糖抑制高糖诱导的脂质过氧化及血管内皮细胞与单核细胞黏附

目的研究壳聚糖(chitosan)对高糖诱导细胞产生脂质过氧化及血管内皮细胞与单核细胞黏附的抑制作用。方法建立人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)高糖培养模型,实验分空白对照组、高糖模型组、高糖+壳聚糖组,测定细胞产生羟自由基(OH.)及脂质过氧化产物丙二醛(MDA)量;同时取单核巨噬细胞系Raw264.7,以荧光染料Rhodamin123孵育后加入以上各组,荧光摄像及比色检测单核细胞黏附数量;RT-PCR法检测血管细胞黏附分子(VCAM-1)mRNA变化。结果与空白对照组比较,高糖引起HUVEC产生OH.及MDA含量增加,黏附于HUVEC的Raw264.7数量以及VCAM-1表达升高;壳聚糖可呈浓度依赖性地抑制上述现象,但对细胞存活无明显影响。结论壳聚糖可能通过减轻自由基与脂质过氧化损伤,下调血管内皮细胞VCAM-1的表达,从而抑制高糖诱导的单核细胞与内皮细胞黏附。

茶黄素对Ox-LDL诱导单核内皮细胞粘附作用影响的研究

采用硫酸铜诱导低密度脂蛋白(LDL)氧化,细胞粘附实验,细胞ELISA方法测定内皮细胞间粘附因子(ICAM- 1)和血管内皮细胞粘附因子(VCAM -1)表达水平,研究了茶黄素(TFs)对氧化型低密度脂蛋白(Ox- LDL)损伤血管内皮细胞导致单核细胞粘附的影响。结果显示,茶黄素(TFs)能显著抑制由Ox- LDL诱导的单核细胞血管内皮细胞粘附效应以及细胞间粘附因子(ICAM -1)和血管内皮细胞粘附因子(VCAM- 1)的表达,并呈现浓度剂量正相关性。提示,TFs抑制ICAM -1和VCAM -1的表达是其抑制单核内皮细胞粘附和抗动脉粥样硬化的作用机制之一。

PI3K信号通路介导apelin-13促进单核细胞-血管内皮细胞黏附的研究(英文)

本室以前已经报道G蛋白偶联受体APJ的内源性配体多肽apelin-13促进单核细胞-血管内皮细胞黏附,本文研究PI3K信号途径是否参与apelin-13促进单核细胞-血管内皮细胞黏附,探讨apelin/APJ系统的细胞信号转导机制.MPO方法检测细胞黏附;Western blot方法检测PI3K、VCAM-1的表达.Western blot方法结果显示,apelin-13(0、0.5、1、2、4μmol/L)浓度依赖性刺激血管内皮细胞PI3K磷酸化,以1μmol/L最为明显;1μmol/L apelin-13时间依赖性促进血管内皮细胞PI3K磷酸化,在30 min增加最为显著;PI3K抑制剂LY294002明显抑制apelin-13诱导的VCAM-1表达和单核细胞-血管内皮细胞黏附.上述结果表明,PI3K信号途径介导apelin-13促进单核细胞-血管内皮细胞黏附.

晚期糖基化终产物修饰蛋白刺激人血管内皮细胞表达粘附分子的研究

为探讨透析相关性淀粉样变 (DRA)时血管内皮细胞粘附分子表达上调的机制 ,采取分离正常人脐静脉内皮细胞 (HUVEC) ,将晚期糖基化终产物 (AGE)修饰的人血清白蛋白 (AGE HSA)、人血清白蛋白 (HSA)与HUVEC在体外共同培养的方法 ,并用荧光单克隆抗体染色 ,流式细胞仪定量检测内皮细胞表面细胞间粘附分子 1(ICAM 1)、血管细胞间粘附分子 1(VCAM 1)、E 选择素 (E selectin)的表达。结果显示 ,正常人脐静脉内皮细胞表达ICAM 1和VCAM 1,但无E selectin的基础表达。AGE HSA能以时间和剂量依赖的方式上调血管内皮细胞粘附分子ICAM 1、VCAM 1、E selectin的表达 (P <0 .0 5 ) ,而HSA对血管内皮细胞上述粘附分子的表达均无影响。提示AGE能上调血管内皮细胞粘附分子的表达 ,从而促进DRA时单核 /巨噬细胞的浸润。