补肾益精法对系统性硬皮病血管内皮间质转化的影响

目的:探讨补肾益精法中药复方对系统性硬皮病血管内皮细胞内皮间质转化(endothelial to mesenchymal transition,End MT)的影响及机制。方法:采用博莱霉素建立硬皮病小鼠模型,造模同时补肾益精方软皮汤2号方(中药复方)进行干预,4周后HE染色观察小鼠皮肤组织病理、免疫组化法检测α-SMA表达水平;体外构建TGF-β1诱导的血管内皮细胞End MT模型,用补肾益精法含药血清处理48 h后,采用细胞免疫荧光方法检测血管内皮细胞α-SMA表达,Western Blot方法检测血管内皮细胞CD31、FSP1、Snail-1表达水平。结果:HE染色结果显示,模型组小鼠皮肤纤维化区域中,胶原纤维明显增多、胶原间隙变窄、毛细血管明显少于正常皮肤组织;与模型组比较,中药复方组小鼠皮肤胶原纤维较少、间隙较宽、血管数量较多;免疫组化染色检测结果显示,模型组小鼠皮肤组织中血管内皮细胞α-SMA表达高于正常对照组,中药复方组α-SMA阳性表达明显减少。免疫荧光检测结果显示,经TGF-β1诱导成功建立End MT模型,End MT模型组细胞α-SMA高表达,内皮细胞发生间质转化,经含药血清处理后,α-SMA表达明显减少。Western Blot检测结果显示,End MT模型组中Snail-1、FSP1均明显高于对照血清组,CD31明显低于对照血清组;含药血清处理组Snail-1、FSP1表达明显低于End MT模型组,CD31表达高于End MT模型组(P<0.05)。结论:补肾益精法对系统性硬皮病血管的保护作用,可能与通过某些途径拮抗Snail介导的End MT所参与的纤维增生性闭塞性血管损伤有关。

血管内皮细胞与恶性肿瘤关系的研究进展

肿瘤的发生发展伴随周边环境的变化,恶性肿瘤塑造的微环境不仅有利于其自身生长,也影响着周边各种细胞的功能变化。血管内皮细胞(VECs)通常指心脏、血管及淋巴管内表面的单层扁平上皮,其中存在于外周血中的VECs又称为循环内皮细胞,正常情况下数量极少,其数量变化能反映血管内皮的受损程度。VECs作为肿瘤微环境的主要成分之一,其生物学行为和功能的改变有助于肿瘤的生长、浸润和转移。本文就VECs在肿瘤发生发展中的生物学行为和功能变化作一综述。

基于Akt/GSK-3β通路研究紫檀茋对脑缺血再灌注大鼠脑保护作用及血管内皮间质过度转化的影响

目的研究紫檀茋对脑缺血再灌注大鼠的脑保护作用,并考察其对血管内皮间质过度转化与蛋白激酶B/糖原合成激酶-3β(protein kinase B/glycogen synthesizing kinase-3β,Akt/GSK-3β)通路的影响。方法建立脑缺血再灌注大鼠模型,给予紫檀茋和硫酸氢氯吡格雷片干预6 d后,检测大鼠神经功能缺损程度;采用ELISA法检测各组大鼠血清血小板活化因子(platelet activating factor,PAF)、血小板源性CD40配体(CD40L)和血小板P选择素(P-slelctin,CD62P)水平;采用试剂盒检测各组大鼠脑组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平;采用苏木素-伊红(HE)染色法观察各组大鼠脑皮质病理变化;采用免疫荧光染色法检测各组大鼠脑血管内皮和间质标志物血小板-内皮细胞黏附分子-1(platelet endothelial cell adhesion molecule-1,PECAM-1,又名CD31)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达;采用Western blotting法检测各组大鼠脑血管CD31、α-SMA和脑皮质Akt和GSK-3β蛋白表达情况;采用免疫组化法检测各组大鼠脑皮质Akt和GSK-3β蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠神经功能缺损评分显著升高(P<0.05);血清PAF、CD40L和CD62P水平显著升高(P<0.05);脑组织SOD活性显著降低,MDA水平升高(P<0.05);脑皮质细胞形态破坏,呈空泡样坏死,细胞间隙增大,染色变浅,残存细胞体积缩小,细胞核固缩、深染,细胞边界不清;脑血管CD31表达减弱,α-SMA表达增强;脑血管CD31和脑皮质p-Akt、p-GSK-3β蛋白表达水平显著降低(P<0.05),脑血管α-SMA蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。与模型组比较,各给药组大鼠神经功能缺损评分显著降低(P<0.05);血清PAF、CD40L和CD62P水平降低(P<0.05);脑组织SOD活性升高(P<0.05),MDA水平降低(P<0.05);脑皮质细胞形态、排列、细胞核清晰度以及间质染色均匀度等均改善;脑血管CD31表达增强,α-SMA表达减弱;脑血管CD31和脑皮质p-Akt、p-GSK-3β蛋白表达水平显著升高(P<0.05),脑血管α-SMA蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论紫檀茋对脑缺血再灌注大鼠具有脑保护作用,可抑制血管内皮-间质过度转化,其作用机制可能与激活Akt/GSK-3β通路有关。