大柴胡汤对AS家兔血管壁平滑肌细胞表型的影响

目的 :研究大柴胡汤抗动脉粥样硬化作用及其机制。方法 :用高胆固醇喂饲建立实验性动脉粥样硬化(AS)模型 ,采用电镜技术观察大柴胡汤治疗性给药对血管壁平滑肌细胞表型的影响。结果 :大柴胡汤用药组能显著减轻血管平滑肌细胞的增生 ,与合成功能相关的细胞器明显减少。结论 :大柴胡汤可抑制平滑肌细胞表型的改变 。

大鼠血管壁中膜平滑肌细胞的原代培养及鉴定

目的探讨一种方便、快捷、大量原代培养大鼠血管壁中膜平滑肌细胞的方法,为心血管疾病的体外研究提供可靠的实验材料。方法利用改良的组织贴块法进行血管壁中膜平滑肌细胞原代培养,使用倒置相差显微镜观察细胞形态,并用免疫荧光染色鉴定分离培养的细胞。结果改良的组织贴块法成功培养出大鼠血管壁中膜平滑肌细胞,3 d^5 d可见细胞爬出,7 d^9 d即可传代。镜下见细胞以长梭形为主,呈典型"峰-谷"样生长,免疫荧光染色鉴定阳性细胞率在95%以上。结论本研究介绍的改良组织贴块法技术成熟,具有操作简单、方便等优点,使用该法不仅可以获得纯度高、活性好的血管中膜平滑肌细胞,而且缩短了培养周期。

血流切应力变化对血管壁平滑肌细胞合成胶原的影响

目的:观察血流切应力变化对血管壁胶原含量的影响,以探讨循环血管局部血流环境变化对血管结构的影响。方法:体外培养内皮细胞(EC)和平滑肌细胞(SMC),建立平行平板流动腔模型模拟产生切应力作用于EC,测定不同大小切应力作用后的内皮细胞条件培养液(EC-CM)中SMC的胶原合成量。结果:在0,0.10,0.15,0.25mN/cm2切应力作用后的EC-CM中培养24h后,每103SMC合成2,3-3H-羟脯氨酸的量分别为(1.31±0.123),(0.844±0.081),(0.609±0.099),(0.466±0.067)Bq;分泌的胶原量分别为(0.147±0.015),(0.101±0.026),(0.077±0.010),(0.041±0.004)Bq。结论:在生理范围内,随所受切应力的减小,EC-CM中SMC的胶原合成增加,提示血管局部血流速度的减缓使血管壁胶原沉积增多。

血管平滑肌细胞的分化与血管内壁的构建

血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells，VSMCs）的发育与血管壁的构建是目前相关领域中的重要学科前沿．国内外同行的上作多集中在血管发育初始阶段内皮细胞及其前体细胞在血管新生中的作用、调节因素及生物学机制．VSMCs参与血管壁早期构建，特别是VSMCs的募集与分化机制已经成为血管新生研究中的一个新领域．

血管壁平滑肌细胞在动脉粥样硬化发病机制中的作用

动脉粥样硬化(atherosclerosis)是威胁人类健康最常见的疾病之一,其发生与血管平滑肌细胞(VaS-cular smooth muscle cell,VSMC)密切相关.经研究证明,增生的VSMC通过内弹力膜(internal elasticlamina,IEL),导致冠状动脉内膜的病变,进而发生动脉粥样硬化.

Gax基因调控血管平滑肌细胞研究进展

正常的血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）以收缩型为主,存在于血管壁中膜,并且数目稳定;但是在病理状态下VSMC转化为合成型,

平滑肌细胞凋亡与血管疾病

平滑肌细胞凋亡参与了多种疾病的发生、发展过程。已有许多实验证明平滑肌细胞凋亡与动脉粥样硬化、血 管再狭窄、高血压血管壁重塑、动脉瘤以及冠脉旁路移值术后移植血管的病变均有密切关系。

不同程度的过劳对大鼠动脉血管平滑肌细胞的影响

目的研究不同程度的过劳对大鼠动脉血管中层平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)的影响。方法将清洁级SD大鼠分为对照组(CON)、过劳组(OW)及过劳+睡眠不足组(OW+SD)。OW组采用力竭游泳法建立过劳模型;OW+SD组在力竭游泳的基础上加水中平台法限制睡眠时间。15 d后取出大鼠腹主动脉,行HE染色进行病理学观察并测量中膜厚度,透射电镜观察细胞内超微结构,用TUNEL法检测各组大鼠腹主动脉中层VSMC的凋亡率,用RT-qPCR法检测VSMC中Caspsae-3、Bax、Bcl-2和Ki67的mRNA表达水平,用免疫组化法检测血管中层凋亡蛋白Caspase-3的含量。结果(1)HE染色示:与CON组相比,OW组和OW+SD组大鼠血管壁VSMC排列紊乱,有"空泡"样细胞形成,血管中膜厚度较CON组明显增加(P<0.05);(2)电镜示:OW组和OW+SD组大鼠VSMC细胞中可见凋亡小体形成;(3)TUNEL结果显示:OW组和OW+SD组大鼠VSMC凋亡率明显高于CON组(P<0.05);(4)RT-qPCR结果显示:与CON组相比,OW组和OW+SD组血管中膜Bax、Ki67的mRNA表达明显增加(P<0.05),OW组和OW+SD组血管中膜Caspase-3和Bcl-2的mRNA表达无明显变化(P>0.05);(5)免疫组化结果显示:与CON组相比,OW组和OW+SD组血管中膜Caspase-3的蛋白含量明显增加(P<0.05)。结论过劳可引起大鼠动脉血管中层VSMC凋亡,诱发动脉血管壁中层VSMC异常增殖和修复,可形成动脉病变的早期病理基础;并且在实验时间内,睡眠未能改善过劳对血管平滑肌细胞的损伤。

显示血管壁平滑肌和胶原纤维的染色方法

显示血管壁平滑肌和胶原纤维的染色方法田玉旺，丁华野，邢惠清，邓永江，黄晓南，刘芳龄北京军医总医院病理科、神经内科北京１００７００为了准确而清晰地显示血管壁平滑肌和增生的平滑肌细胞及胶原纤维的形态结构，以利判定病变的性质及发生发展情况，我们设计了一种“...

干扰素诱导蛋白p204在大鼠血管壁成分细胞的表达

目的研究干扰素诱导蛋白p204在鼠血管壁各成分细胞的基础表达及干扰素诱导性。方法通过免疫组织化学染色及Western blot观察p204蛋白在成年昆明小鼠及Wistar大鼠或SD大鼠血管壁的表达;免疫细胞化学法及Western blot观察p204在培养的SD大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)和血管外膜成纤维细胞(VAF)的表达及分布;逆转录-聚合酶链反应观察干扰素诱导VSMC上p204 mRNA(Ifi204)表达特点。结果免疫组织化学染色表明p204抗原在成年昆明小鼠心内小静脉及小动脉血管壁内皮细胞、内膜、中膜及外膜的细胞胞浆中呈阳性反应,p204在成年Wistar大鼠主动脉内皮、VSMC及外膜均染色阳性,弹性纤维膜未着色。Western blot表明p204在SD大鼠主动脉有基础表达,其在VAF的基础表达量明显高于VSMC,免疫细胞化学法表明p204在鼠主动脉VSMC细胞同时表达于细胞质及细胞核。应用干扰素α1.0×106IU/L刺激VSMC细胞8 h即诱导Ifi204大量表达,干扰素α作用24 h时表达更强烈。结论 p204在小鼠及大鼠血管壁全层和培养的VSMC及VAF均存在基础表达,p204在VSMC上表达并不局限于细胞核,且易被干扰素α诱导其mRNA表达上调。p204在鼠血管壁细胞存在表达提示其在血管生理及血管增殖性疾病的发生发展中可能有着潜在的重要作用。

一例犬后肢末端血管平滑肌瘤的病理学诊断

血管平滑肌瘤是一种比较少见的良性肿瘤，来源于小静脉和动脉壁的中层平滑肌，多见于四肢皮下组织，也可发生于身体的任何部位，瘤体由成熟的平滑肌细胞和大量血管组成。笔者在宠物门诊确诊1例犬血管平滑肌瘤病例，现报道如下，供大家参考。

自发性高血压大鼠左室心肌壁内小动脉平滑肌瞬时受体电位通道的表达

目的:探索自发性高血压大鼠(Spontane-ously hypertensive rats,SHR)心肌壁内小动脉重构与瞬时受体电位通道(Transientreceptor po-tential channel,TRPC)蛋白表达的相关性。方法:24周龄雄性SHR(n=8)为实验组,设同周龄同性别正常血压大鼠为对照组(WKY,n=8)。计算大鼠左室质量指数(Left ventficular mass in-dex,LVMI)评价左室肥厚情况。采用HE染色观察管腔直径为10～69μm的左室心肌壁内小动脉结构特点并测定管腔面积(Lumen area,LA)、管壁面积(Wall area,WA)、管壁面积/管腔面积(WA/LA)。α-平滑肌肌动蛋白(Alpha-smooth muscle actin,α-SMA)免疫荧光染色鉴定血管平滑肌细胞(Vascularsmooth muscle cell,VSMC)。免疫荧光染色检测平滑肌细胞TR-PC1、TRPC3、TRPC5、TRPC6蛋白表达强度。结果:SHR组SBP及LVMI均明显高于WKY组[(200±4)vs(118±9)mm Hg,1mm Hg=0.133kPa;(3.11±0.03)vs(2.42±0.10)mg/g,均P<0.05];SHR组WA及WA/LA均比WKY组增加[(2951±224)vs(2654±190)μm2;(2.01±0.04)vs(1.53±0.03),均P<0.05],而LA比WKY组减少[(1469±117)vs(1730±98)μm2,P<0.05],α-SMA免疫荧光染色阳性表明增厚的血管中层为平滑肌细胞。SHR组心肌壁内小动脉平滑肌细胞TRPC1、TRPC3蛋白表达均明显高于WKY组(分别为65±8 vs 28±3和60±4 vs 26±8,均P<0.05),TRPC5蛋白表达与WKY组无统计学差异(28±7 vs 28±7,P>0.05);SHR组与WKY组均未表达TRPC6。结论:24周SHR左室心肌壁内小动脉平滑肌表达TRPC1、TRPC3、TRPC5而未表达TRPC6。24周SHR左室心肌壁内小动脉重构与平滑肌TRPC1、TRPC3表达上调相关。

血管壁干细胞与血管重塑相关性疾病

血管重塑是动脉粥样硬化等多种心血管疾病的病理生理学基础,血管壁中多种细胞均在该过程中发挥重要作用。其中血管壁干细胞作为一类存在于血管壁中的成体干细胞,既在机体生长发育及成年早期阶段参与血管新生,也可在成年后受致病因素影响,从休眠状态中激活,向内皮细胞、平滑肌细胞等方向分化,参与血管损伤后重塑,从而影响相关疾病的进程。文章对血管壁干细胞在血管重塑相关性疾病的最新进展进行综述,为进一步展示血管壁干细胞可能具有治疗潜力提供依据。

复方丹参滴丸对自发性高血压大鼠血管壁重建的干预及可能机制

目的研究早期、长期辅助运用复方丹参滴丸对自发性高血压大鼠血管壁重建的干预及可能机制。方法10周龄自发性高血压大鼠48只随机分成6组:治疗前对照组、阴性对照组、络活喜治疗组、复方丹参滴丸后期治疗组、复方丹参滴丸早期治疗组和复方丹参滴丸长期治疗组,检测胸主动脉壁厚度和血管壁平滑肌细胞增长率,以及基质金属蛋白酶2、内皮素1和层粘连蛋白相对表达水平。结果与复方丹参滴丸早期治疗组比,复方丹参滴丸长期治疗组血管平滑肌细胞增长率明显减少,而复方丹参滴丸后期治疗组则明显增加。在降压治疗(络活喜)基础上加用复方丹参组其内皮素1、基质金属蛋白酶2表达均有不同程度减少,而层粘连蛋白增加,且出现时间在血管平滑肌细胞增长率变化之前。结论在有效降压治疗基础上早期、长期联合运用复方丹参滴丸可能通过产生生物学效应(基质金属蛋白酶2和内皮素1表达减少,层粘连蛋白表达增加)来遏制因此而产生的力学效应(血管平滑肌细胞增长率),从而改善血管壁的重建和增厚。

FK506对损伤血管壁影响的电镜观察

目的观察FK506对损伤动脉壁增生的影响。方法SD大鼠54只,用血管夹造成动脉损伤模型,然后分为3组,每组18只,分别给予生理盐水、肝素(5mg·kg-1.d-1)、FK506(0.1mg·kg-1.d-1)干预,于干预后7d、14d、28d每组分别处死6只大鼠,切取两侧颈总动脉,于电镜观察损伤处动脉壁的变化。结果生理盐水组颈动脉损伤处血管壁增厚明显,中膜平滑肌细胞及胶原纤维明显增生,28d后最明显;肝素组和FK506组损伤处动脉壁内膜增生程度明显减轻,中膜胶原纤维及平滑肌细胞明显减少,且以FK506组显著,28d后最明显。结论本研究提示FK506可抑制夹压大鼠颈总动脉损伤后的血管壁组织增生。

动脉粥样硬化可以视为血管壁的癌症吗?

心血管疾病在工业化国家的发病率和死亡率中位居首位,中国亦呈增长趋势.诸多的心血管疾病如心肌梗死和中风为动脉粥样硬化的主要合并症.后者是以血管平滑肌细胞、内皮细胞和炎症细胞的过量增生并以血管阻塞为特征的一种慢性进展性炎症状态.据世界卫生组织统计,因动脉粥样硬化引发的心血管疾病造成美国每年近1,000,000人口死亡.尽管我们已经认识到动脉粥样硬化是与遗传、环境和其他因素有关的多因素疾病,但对其发病机制和特点的认识仍有待完善 [1].

低切应力对体外培养动脉壁细胞PDGF表达的影响

为了研究切应力对完整血管的生物学作用 ,探讨应力引起血管重建过程中生长因子的变化 ,用血管应力培养系统体外培养猪颈总动脉 ,通过免疫组织化学、抗体夹心法酶联免疫吸附测定实验 (EL ISA)和计算机图像分析等方法 ,观察了低切应力作用下动脉壁细胞 PDGF- A、PDGF- B表达变化情况。结果显示 ,低切应力作用下体外培养动脉 EC中 PDGF- B及 VSMC中 PDGF- A的合成与分泌皆增加。PDGF表达上升 ,促进了 VSMC表型转换与增殖。在低切应力引起的血管重建中 ,这一机制可能起着重要作用。

兔髂动脉球囊成形及支架术后血管壁超微结构的观察

目的 :比较兔髂动脉球囊成形及支架术后血管壁超微结构的变化 ,探讨支架内再狭窄与球囊血管成形术后再狭窄的不同机制。方法 :10支兔 ,分别于左髂动脉行 NIR支架置入术 (S组 ) ,右髂动脉行球囊成形术 (B组 )。术前3d始予阿司匹林 2 5 mg· d- 1 ,直至处死动物。术后皮下注射肝素 2 5 0 0 U· d- 1 ,连续 7d。术后 7d和 30 d处死动物。用光镜、透射电镜及免疫组化染色技术观察损伤部位血管壁变化。结果 :术后 30 d光镜检查发现 S组新生内膜平滑肌细胞 (SMC)的增生程度明显高于 B组 (P<0 .0 5 )。电镜检查 ,术后 7d,S组较 B组可见较多从外膜向中膜及内膜迁移的肌纤维母细胞 ,中膜及内膜大量以合成型为主的 SMC,细胞外基质 (ECM)以胶原及弹性纤维为主。30 d时 B组内膜下 SMC已转化为收缩型 ,ECM以胶原及弹性纤维为主 ;而 S组内膜下大量 SMC仍为典型合成型表现 ,周围 ECM以氨基聚糖及糖蛋白为主。结论 :球囊成形术及支架术后 ,新生内膜组成成分不同 ,支架术后新生内膜增生以 SMC增生为主 ,ECM以氨基聚糖及糖蛋白为主而球囊成形术后新生内膜增生 SMC较少 。

IS导管血管壁内局部导入c-myc反义寡核苷酸预防PTCA术后再狭窄的实验研究

目的 探讨IS导管局部导入c myc反义寡核苷酸及c myc反义寡核苷酸对血管平滑肌细胞的抑制作用。方法 2 1只家兔 ,对照组 6只 ,反义寡核苷酸治疗组 15只。用IS导管导入c myc反义寡核苷酸 (1mg)于球囊损伤的髂动脉后 ,动脉血管造影。病理切片 ,图象分析测定新生内膜、中膜、面积和厚度 ,c myc蛋白免疫组化染色。 结果 动脉造影对照组 5 0 %～ 80 %局限狭窄 ,给药组 10 %～ 30 %局限狭窄。光镜观察结果显示 :血管内膜增生面积给药组为 (4.0 4± 1.0 2 )× 10 5μm2 ,对照组为 (7.6 6± 3.7)× 10 5μm ,(P <0 .0 5 ) ;对照组c myc免疫组织化学染色阳性 ,给药组血管c myc免疫组织化学染色显示弱阳性或阴性。结论 IS导管可在体局部导入反义寡核苷酸于动脉损伤靶点 ;c myc反义寡核苷酸可抑制SMCs迁移。