1H11内皮细胞株测定血管形成抑制剂的方法研究

目的建立一种检测血管形成抑制剂的体外实验方法。方法１Ｈ１１内皮细胞株为检测细胞，软骨来源的血管形成抑制剂的部分纯化产品为检测物，采用ＭＴＴ比色分析法。以对内皮细胞的抑制率来反映检测物的作用强度，对可能影响实验结果的因素进行探讨。结果检测方法的条件宜为：１Ｈ１１内皮细胞接种浓度１×１０８／Ｌ，每孔接种０．１ｍｌ；内皮细胞生长因子浓度为５０ｍｇ／Ｌ；血管形成抑制剂作用４８ｈ后，加入ＭＴＴ溶液２０μｌ（５ｇ／Ｌ），作用４ｈ后，以二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）作为甲瓒溶解剂，检测波长５７０ｎｍ。结论以１Ｈ１１内皮细胞株为检测细胞，采用ＭＴＴ比色分析法，在稳定的条件下，是检测血管形成抑制剂并进而对其定量分析的一种较好的体外实验方法。

血管形成抑制剂TNP-470对膀胱癌抑制作用的实验研究

目的 探讨血管形成抑制剂烟曲霉菌衍生物TNP 470抑制膀胱癌生长的作用机制。 方法 采用TNP 470 (6 0mg/kg)皮下注射治疗T739膀胱癌荷瘤鼠 ,观察肿瘤生长情况。 17天后杀鼠 ,观察TNP 470对肿瘤微血管密度 (MVD) ,肿瘤细胞凋亡指数及增生指数的影响。 结果 TNP 470治疗组肿瘤生长明显缓慢 ,肿瘤抑制率为 46 3 %。组织学检查显示 ,治疗组与对照组相比 ,MVD明显减少 (P <0 0 1) ,肿瘤细胞凋亡指数明显增加 (P <0 0 1) ,增生指数无明显变化 (P >0 0 5 )。 结论 TNP 470对膀胱癌生长有明显的抑制作用 ,其机理可能为抑制肿瘤血管形成 ,引起肿瘤组织缺血 。

Bevacizumab抑制高转移性人肝癌原位移植瘤的血管形成

目的：探讨Bevacizumab对人高转移肝癌模型ICI—D20血管形成的抑制作用。方法：分别采用空白对照及Bevaci—zumab治疗LCI—D20,用药28d后处死裸鼠,测量肿瘤质量,检测肿瘤组织微血管密度。结果：对照组肿瘤负荷平均为2．0 g；MVD(microvascular density,微血管密度)平均39．6个/HP；治疗组平均肿瘤负荷为0．1g及平均MVD为4．9个/HP,与对照组比较有显著差异(P＜0．05)。结论：Bevacizumab有抑制肝癌血管形成及肿瘤生长的活性。

Iressa抑制高转移性人肝癌LCI-D20原位移植瘤的血管形成

[目的]探讨Iressa对人高转移肝癌模型LCI-D20血管形成的抑制作用。[方法]12只原位移植LCI-D20肿瘤裸鼠分为采用空白对照组(A组)及Iressa治疗组(B组),用药28d后处死裸鼠,测量肿瘤质量,检测肿瘤组织微血管密度(MVD)。[结果]对照组肿瘤负荷平均为2.01/g,MVD平均为39.57个/HP;治疗组平均肿瘤负荷及平均MVD为1.18g、14.10个/HP,与对照组比较差异有显著性(P<0.05)。[结论]Iressa有抑制肝癌血管形成及肿瘤生长的活性。

TNP－470抑制人结肠癌LoVo细胞生长和微血管形成的实验研究

目的 研究血管形成抑制剂TNP－470对人结肠癌LoVo细胞株裸鼠皮下移植瘤生长和微血管形成的影响。方法 将LoVo细胞接种于BALB/c裸鼠皮下，24只裸鼠随机分为对照组和治疗组，从第2天起，治疗组皮下注射TNP－470（30mg/kg),1次／2d，对照组给于相应溶剂（3％乙醇生理盐水）。30d后处死动物，以鼠抗人CD34单克隆抗体免疫组化及体视学方法检测瘤组织的血管形成。结果 治疗组与对照组皮下移植瘤体积（mm^3）分别为478．57±309．67和1360．42±618．26（P＜0．05）。微血管数（个）分别为9．00±3．03和22．17±8．13（P＜0．05）。微血管体积密度（％）分别为2．61±1．06和4．22±1．72（P＜0．05），微血管表面积密度（mm^-1)分别为2．68±1．12和5．98±2．00（P＜0．05）。治疗组心、肝、肾组织学检查未见病理性变化。结论 血管形成抑制剂TNP－470能显著抑制LoVo细胞皮下移植瘤生长和微血管形成，且无明显毒副作用。

肿瘤血管形成调节剂

血管形成即一个微血管床的发展是许多重要的生理过程所必需的,正常的生长与分化等过程均伴有血管形成。在某些病理性疾病中常发生无控制的血管形成,如实体瘤等组织中血管明显增殖。肿瘤细胞分泌血管形成调节因子,这些因子能够诱导宿主毛细血管新生并长入肿瘤组织。现已分离、克隆、鉴定多种血管形成因子和血管形成抑制剂,其中血管形成因子包括肽类、非肽类和尚未定性的血管形成因子;血管形成抑制剂包括内皮细胞抑制剂、组织来源抑制剂及与血管形成相关的激素类物质。

青蒿素衍生物对宫颈癌细胞血管形成相关分子表达和人脐静脉内皮细胞血管形成能力的影响

目的:探讨两种青蒿素衍生物(双氢青蒿素和青蒿琥酯)对宫颈癌细胞血管形成相关分子表达水平和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)血管形成能力的影响;方法:培养HeLa和Caski细胞,分别给予双氢青蒿素和青蒿琥酯处理。采用ELISA法分别于不同时间点测定上清液中血管内皮细胞生长因子(VEGF)和血小板反应素-1(TSP-1)浓度;72h后留取经双氢青蒿素处理的细胞,提取其总RNA进行RT-PCR,测定VEGF和TSP-1的mRNA水平。原代培养HUVEC,分别给予双氢青蒿素和青蒿琥酯处理,72h后MTT法检测HUVEC的增殖情况;将HUVEC与双氢青蒿素混匀后接种于管样结构形成模型,12h后观察管样结构形成情况。结果:双氢青蒿素和青蒿琥酯对VEGF和TSP-1浓度无影响;双氢青蒿素对宫颈癌细胞VEGF mRNA的表达无影响,但可促进TSP-1 mRNA的表达。两种青蒿素衍生物对HUVEC体外增殖能力均有抑制作用,且存在浓度和时间依赖性;双氢青蒿素对HUVEC管样结构形成能力有抑制作用。结论:青蒿素衍生物可能通过对血管内皮细胞的直接作用而发挥抗肿瘤血管形成效应。

血管基膜衍生多功能肽的表达及其生物活性的鉴定

目的：在毕赤酵母中表达血管基膜衍生多功能肽（vascular basement membrane—derived mulifunctional peptide，VB—MDMP），并鉴定其生物学活性。方法：利用PCR技术获得融合了谷胱甘肽转移酶（GST）的肿瘤抑素（tumstatin）活性成分的GST—VBMDMP基因，克隆到pPIC9K载体；然后原生质体转化法转化毕赤酵母细胞，行多克隆筛选和表型鉴定。获得His’Muts表型的转化子，在MGY培养液中30℃摇床培养，每24h从培养液中转移1ml培养液上清于-70℃保存，并保持培养瓶中培养液的量和培养液中甲醇0．5％的浓度不变，第9天行SDS—PAGE检测表达的蛋白并纯化，然后进行细胞和动物生物活性检测。结果：SDS—PAGE发现阳性重组子在MGY培养液中表达的蛋白量在1～7d逐渐增加，到第8天后开始减少，用Gluta—thioneSepharose4B亲和层析柱纯化获得GST—VBMDMP融合蛋白；GST—VBMDMP能抑制C57BL／6鼠动脉内皮细胞管状结构的形成；同时GST—VBMDMP（2、6、10mg／kg）对小鼠Lewis肺癌原发瘤（瘤重抑制率分别为96．6％、82．1％、61．2％）和自发性肺转移瘤（瘤结节抑制率分别为96．8％、87．9％、75、3％）均具有明显的抑制作用（P〈0.01）。结论：VBMDMP能够抑制鼠动脉内皮细胞管状结构的形成，并对小鼠Lewis肺癌原发瘤和肺转移具有明显的抑制作用。

糖尿病黄斑水肿玻璃体内注射康柏西普的短期疗效和椭圆体带完整性改变的观察

目的评估糖尿病黄斑水肿(diabetic macular edema,DME)患者玻璃体内注射康柏西普的短期疗效并观察椭圆体带(ellipsoid zone,EZ)完整性改变情况。方法 DME患者14例(16眼),所有患眼均行玻璃体内注射康柏西普治疗。在注射后1个月、2个月、3个月时分别复查最佳矫正视力(best corrected visual acuity,BCVA)、光学相干断层扫描(optical coherence tomography,OCT)。比较注射前与注射后1个月、2个月、3个月的log MAR BCVA、黄斑体积和黄斑中心凹视网膜厚度(central foveal thickness,CFT)以及注射前与注射后3个月的中心凹EZ不完整部分的横断面长度。结果患眼注射前log MAR BCVA为0.79±0.08,CFT为(536.44±35.87)μm,黄斑体积为(11.27±0.37)mm^3。注射后1个月患眼log MAR BCVA为(0.65±0.07),CFT为(385.63±22.60)μm,黄斑体积为(10.21±0.22)mm^3。注射后2个月患眼log MAR BCVA为0.56±0.06,CFT为(336.13±21.91)μm,黄斑体积为(9.69±0.17)mm^3。注射后3个月患眼log MAR BCVA为0.52±0.06,CFT为(292.38±22.54)μm,黄斑体积为(9.30±0.20)mm^3。两两比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。所有患者注射前通过黄斑中心凹的EZ不完整部分的横断面长度为(3116.69±385.55)μm,3次注射后为(1784.88±362.39)μm,差异有统计学意义(P<0.05)。结论玻璃体内注射康柏西普可以减轻黄斑水肿,提高患者视力,改善黄斑区椭圆体带完整性。

快速骨骼肌型肌钙蛋白Ⅰ的研究进展

快速骨骼肌型肌钙蛋白I(fastskeletalmuscletroponinI,fsTnI) ,即肌钙蛋白I2 (TNNI2 ) ,是肌钙蛋白 (troponin ,Tn)三元复合物中的抑制亚基存在于快速骨骼肌中的一种组织亚型 ,是调节脊椎动物横纹肌收缩的重要蛋白质。该文着重回顾fsTnI在蛋白质和基因结构等方面的研究 ,对近年来有关fsTnI抑制肿瘤血管生成的研究 ,以及对其可能以核受体辅活化子身份参与基因表达调控的潜质做简要介绍。

反应停对增生性瘢痕细胞超微结构的影响

目的 为探讨血管形成抑制剂反应停对增生性瘢痕的治疗机制提供形态学依据 .方法 通过建立兔耳增生性瘢痕模型 ,观察血管形成抑制剂反应停对增生性瘢痕超微结构的影响 .结果 血管形成抑制剂反应停作用后增生性瘢痕组织中的毛细血管基膜不完整 ,内皮细胞变性 ,血管形成过程受损 ,成纤维细胞发生变性 ,内质网等细胞器减少 ,细胞外基质也相应减少 .结论 反应停可能是通过影响血管形成而致增生性瘢痕组织中的成纤维细胞变性 .因而血管抑制剂可抑制瘢痕增生 .

肿瘤治疗学

9945458 血清因子对氟尿嘧啶抗肿瘤效果的作用[日,英摘]/三轮雅彦//癌化疗.-1998,25(10).-1591～1594 冀医情9945459 细胞抑制剂化疗的迟发性呕吐[德]/M(?)nstedt K//Dtsch Med Wochen-schr.-1998,123(9).-255～258 同医图9945460 治疗对肿瘤组织像的修饰[日]/石川雄一//日病理会志.-1998,87(2).-14

肿瘤的转移与扩散

0013959 纤连蛋白粘连领域和并用血管形成抑制剂 TNP-470抑制癌转移的研究[日]/斋藤登//日消外会志.-1998,31(2).-325 冀医情0013960

恶性肿瘤研究动态

基因表达对Ⅰ期非小细胞肺癌生存期的预测价值;颈部食管胃吻合术中应用吻合器进行侧侧吻合的中期结果;对比血管形成抑制剂Cilengitide（EMD121974）联合吉西他滨与单用吉西他滨治疗未手术切除的进展期胰腺癌的随机Ⅱ期多中心临床研究;随机临床试验对比联合应用多西他赛、顺铂及5-FU与联合应用表阿霉素。