血小板糖蛋白Ⅰbα上血管性血友病因子结合域的研究进展

血小板糖蛋白 (GP)Ⅰb Ⅸ Ⅴ复合物与其配体、血管性血友病因子 (vWf)的结合是止血和血栓形成的始动环节。GPⅠb Ⅸ Ⅴ复合物的vWf结合域存在于GPⅠb的α亚单位的N端。至少有三个区域对vWf的结合有着重要的影响 :富含亮氨酸重复序列、阴离子化的酪氨酸硫酸化序列和由Cys2 0 9和Cys2 4 8形成的二硫键环。了解vWf结合域对血小板代用品和抗血栓药的研究有着重要的意义 ,本文综述了此方面的研究进展。

血管性血友病因子在ABO血型个体中质和量差异的实验研究

目的比较血管性血友病因子在ABO血型中质和量的差异。方法运用ELISA法同时测定A血型、B血型、AB血型及O血型四组正常人的vWF抗原水平(vWF:Ag)、VWF瑞斯托霉素辅因子活性(vWF:Rcof)及vWF胶原结合试验(vWF:CBA),并应用统计方法比较不同血型之间结果的差异。结果O型血个体其vWF:Ag、vWF:Rcof及vWF:CBA均低于非O型血,差异有显著统计学意义(P<0.001);同时,vWF:CBA下降水平大于vWF:Rcof,使得vWF:CBA/Ag(P<0.001)小于vWF:Rcof/Ag(P值为0.84)。结论O型血较非O型血个体有更高的出血危险,在临床诊断vWD的过程中要充分考虑ABO血型系统对血浆vWF水平的影响。

血栓性微血管病患者血管性血友病因子裂解酶的检测及意义

目的：探讨血管性血友病因子裂解酶（vWF—CP）及其抗体在血栓性微血管病的意义。方法：用ELISA法胶原结合试验测定vWF—CP活性，并进行vWF—CP抗体的检测。统计学分析采用SPSS17．0统计软件包，结果以均数±标准差（X±s）表示。组问比较采用非配对t检验。结果：30例健康成人血清wF—CP活性水平均值为105．34-15．7％，正常范围为74％～156．7％。9例血栓性微血管病患者vWF—CP活性为59．3±27％，与正常对照组相比，有显著差异（P〈0．001）。其中有5例vWF—cp活性水平明显低于正常范围。所有病人均未检测到抗体。结论：血栓性微血管病患者血浆yWF—cp活性明显低于正常对照组。血栓性微血管病患者vWF—cp活性与临床及病理表现密切相关，有重要意义。vWF—cp活性下降常提示血栓性微血管病，应引起足够重视。

慢性肾脏病患者血浆血管性血友病因子裂解酶活性测定

目的检测慢性肾脏病（CKD）患者血浆血管性血友病因子裂解酶（vWF-CP）活性及血浆血管性血友病因子（vWF）水平，探讨其在慢性肾脏病的意义。方法将139例CKD患者根据不同种类肾病及不同肾功能状态分组，其中狼疮肾炎（LN）31例，原发性肾病综合征（NS）25例，糖尿病肾病（DN）45例及慢性肾炎（CGN）38例；CKDⅠ期38例，CKDⅡ期30例，CKDⅢ期39例，CKDⅣ期19例，CKDⅤ期13例。采用残余胶原结合实验法及ELISA法对患者血浆vWF-CP活性及vWF水平进行检测，观察不同组患者血浆vWF-CP活性及vWF水平，并与正常对照组（40名）比较。结果LN、NS、DN及CGN患者血浆vWF-CP活性显著低于对照组，且以LN、NS组下降最明显，vWF水平均显著高于正常对照组，血浆vWF含量均与血浆vWF-CP活性呈负相关。CKDⅡ期、Ⅲ期血浆vWF-CP活性显著低于Ⅰ、Ⅳ、Ⅴ期．而Ⅰ、Ⅳ、Ⅴ期之间无显著区别，vWF含量各期之间无显著差别。结论CKD患者血浆vWF-CP活性明显降低，其低下程度与肾病的病种有关。内皮损伤、自身抗体可能是致CKD患者vWF-CP活性低下的原因之一。它参与了CKD的发生发展，可能是CKD血栓形成的机理之一。

胶原结合分析试验在血管性白友病检测中的应用

目的 探讨胶原结合分析试验在血管性血友病 (v WD)检测中的应用前景。方法 应用 EL ISA法作v WF胶原结合分析 (v WF:CBA) ,对该方法的敏感性、重复性作检测 ,并同时使用四种检测 v WD的方法检测正常献血员、v WD患者、及其它出血性疾病患者的血浆 v WF功能。结果 v WD患者血浆 v WF:CBA水平明显低于正常人及其它出血性疾病患者 (P<0 .0 0 1) ;四种检测血管性血友病的试验其结果在 v WD患者组与正常献血员组和其它出血性疾病组比较均有显著差异 (P<0 .0 1) ;正常献血员组与其它出血性疾病组比较无统计学差异 (P>0 .0 5 )。四种检测方法与各型 v WD患者诊断总的符合率分别为 v WF:Ag85 .7% ,v WF:Rcof76 .2 % ,RIPA80 .9% ,v WF:CBA95 .2 %。结论 EL ISA法检测 v WF:CBA操作简便 ,方法特异性、敏感性和重复性均较好 ,应用该方法可为 v WD的诊断和分型能提供依据 ,在常规 v WD的诊断分型中可替代 v WF:Rcof和 RIPA,值得临床推广应用。

血管性血友病因子与血小板结合活性检测的性能验证方法和评价指标分析

目的探讨适合临床实验室使用的血管性血友病因子(VWF)与血小板结合活性(VWF:GPIbM)检测的性能验证方法和指标。方法参考美国临床和实验室标准协会(CLSI)系列文件和我国卫生行业标准,使用Sysmex CS-5100仪器及配套试剂,设计方案并验证其检测VWF:GPIbM的性能。(1)精密度验证:使用正常值、低值质控品和3种不同活性的混合血浆(活性范围为5.0%~150.0%),每天重复检测各样品5次,连续5 d,计算批内和批间变异系数(CV),依据产品说明书标示的性能要求设定精密度评价标准;(2)正确度验证:将配套校准物稀释成活性参考值分别为5.2%、31.2%、62.4%、104.0%和138.7%的样品,各样品重复检测次数与精密度实验相同,计算检测均值与参考值的偏倚,依据允许总误差设定正确度评价标准;(3)线性验证:配制10种不同活性的混合血浆(活性理论值范围为3.6%~160.4%),用于低活性水平和正常活性水平校准曲线的线性验证,重复检测各样品3次,计算检测均值和理论值的线性回归方程的斜率、R2以及偏差,依据行业标准和产品说明书的要求设定线性评价标准;(4)定量限验证:将配套校准物稀释成活性为3.3%和2.7%的样品,重复检测各样品12次,依据CLSI文件设定评价标准。结果精密度验证的批内和批间CV分别为1.0%~2.5%和1.1%~2.6%;正确度验证结果的偏倚分别为-0.4%、1.0%、-2.6%、0.3%和-2.7%;低活性水平(3.6%~31.8%)和正常活性水平(28.4%~160.4%)线性验证结果显示,回归方程的斜率分别为1.0217和0.9962,R2分别为0.9935和0.9939,各样品检测结果的偏差为0~1.8%、-10.1%~0,均符合要求;定量限验证检测结果的偏差为-0.4%~0.3%,均符合要求。结论VWF:GPIbM方法的精密度、正确度、线性和定量限验证结果均满足产品说明书标示的性能要求或本研究设定的评价标准,可为临床实验室的性能验证提供参考。

中西医结合治疗对缺血性脑卒中患者血管内皮功能的影响

目的:观察中西医结合治疗对缺血性脑卒中患者血管内皮功能的影响。方法:将76例缺血性脑卒中患者随机分为西医组与中西医组各38例。西医组给予常规西药治疗,中西医组在西医组治疗基础上加用益气活血通络汤口服。观察2组治疗前后血管性假血友病因子(v WF)、血管内皮细胞钙黏蛋白(VE-cadherin)水平以及脑梗死病灶大小的变化。结果:治疗后,2组v WF、VE-cadherin水平以及脑梗死病灶大小均较治疗前下降或缩小(P<0.01),中西医组3项指标的下降或缩小幅度均大于西医组(P<0.05)。结论:与单纯西医治疗相比,中西医结合治疗气虚血瘀型缺血性脑卒中患者的疗效更佳,能有效降低血清v WF和VE-cadherin水平,保护与修复受损的血管内皮功能,增加易损动脉斑块的稳定性,从而缩小脑梗死病灶。

胶原包被条件对血管性血友病因子胶原结合法测定FⅧ制品中血管性血友病因子的影响

目的通过考察不同胶原包被条件对血管性血友病因子(von willebrand factor,vWF)与胶原结合的影响,建立vWF胶原结合法(vWF collagen binding assay,vWF:CBA)检测FⅧ制品中vWF活性。方法将胶原Ⅲ分别按以下4组条件包被ELISA板:不同pH(2.8、4.0、5.2、6.4、7.4、8.8、9.8)的缓冲液,不同盐浓度(0、0.05、0.1、0.15、0.2、0.3、0.4、0.6 mol/L NaCl)的缓冲液,不同胶原Ⅲ浓度(5、2.5、1、0.5、0.25、0.125μg/ml),不同包被温度(4、25、37℃)。以5个不同稀释度的vWF标准品为样品,进行vWF:CBA法测定,每种包被条件下绘制1条标准曲线,同时检测每种包被条件下方法的重复性。将标准曲线线性和方法重复性较好的几组条件做为最佳包被条件,验证该包被条件下vWF:CBA法的特异性、重复性,获得标准曲线范围。结果当胶原Ⅲ溶解于含0.15 mol/L NaCl,pH 6.4的磷酸缓冲液中,在4℃条件下以2.5μg/ml包被时,vWF与胶原的结合效率较高。将该包被条件下的vWF:CBA法用于测定冷沉淀上清及FⅧ制品中vWF活性,具有较好的特异性和重复性。结论不同的包被条件对胶原结合法测定vWF活性具有较大的影响,因此,在采用胶原结合法测定FⅧ制品中vWF活性时,应对包被条件进行优化。

血流环境中vWF-A1与NETs-DNA结合的拓扑结构与功能特征

目的中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)在炎症血栓的形成和发展中扮演着重要的角色。血管性血友病因子v WF与NETs中胞外DNA相互作用,进一步促进炎症血栓的发展。研究表明v WF通过其A1结构域与NETs中胞外DNA结合。v WF为力学响应分子,其功能受到流体剪应力的调控。血流环境中,v WF-A1与NETs中胞外DNA如何结合尚未完全清楚。方法应用原子力显微镜技术,扫描分析不同浓度v WF-A1与胞外DNA的结合特征和拓扑结构;使用流动腔技术,加载不同剪应力,测量在v WF-A1预处理,v WF-A1-DNA混合物预处理或DNA预处理中,人源血小板的黏附情况。结果随着v WF-A1浓度的增加,单条DNA上结合更多的v WF-A1,形成“珠串”型或“紧缩”型拓扑结构;DNA长度分析显示,v WF-A1的结合缩短了DNA长度。在流体剪应力环境中,DNA预处理组几乎未有血小板黏附,v WF-A1-DNA混合物预处理组黏附的血小板明显少于v WF-A1预处理组黏附的血小板,提示在流体动力学环境中,胞外DNA与血小板不发生相互作用,胞外DNA和血小板竞争性与v WF-A1结合。结论血管损伤炎症期间,血管内局部v WF-A1浓度增高利于其与胞外DNA结合,进而促进胞外DNA发挥免疫功能;同时,胞外DNA和血小板竞争性与v WF-A1结合,防止血管内血小板大量聚集形成血栓,维持止血与血栓形成之间的稳态。

von Willebrand因子裂解酶活性水平的检测及其临床应用

血管性血友病因子裂解酶 (vWF cp)是新近发现的一个金属蛋白酶 ,其活性在多种生理病理状态下发生改变。为了研究vonWillebrand因子裂解酶活性检测及其临床应用 ,用ELISA法检测了vWF cp酶解前及裂解后血清 (浆 )中血管性血友病因子 (vWF)的胶原结合能力 ,两者之比作为该待测血清 (浆 )的相对vWF cp活性水平。同时观察血栓性血小板减少性紫癜 (TTP)患者与肿瘤患者体内vWF cp活性的改变。结果表明 ,该方法准确测出了87名健康成人和 79例患者血样的残余胶原结合力 (R CBA) ,批内变异和批间变异分别为 3.6 0 % (n =9)和 8.35 %(n =5 )。 5 3名健康成人血清vWF cp活性水平为 (79.4 7± 10 .78) % ,30名健康成人血浆vWF -cp活性水平为(78.79± 9.17) %。 6例TTP患者中 5例血浆vWF cp活性水平显著降低 ,2 5例良性肿瘤患者血清vWF cp水平轻度降低 ,4 9例恶性肿瘤患者则明显下降 (P值分别小于 0 .0 0 1,0 .0 3和 0 .0 0 1)。结论 :以R CBA检测vWF cp活性水平简单易行 ,可应用于临床检验。恶性肿瘤患者 ,尤其是TTP患者血浆 (清 )vWF cp活性水平显著降低。

研究发现血管性血友病因子功能调控的新机制

中科院上海生科院生化与细胞所丁建平研究组博士生周曼昀和董咸池等人通过对血管性血友病因子（VWF）A2结构域三维结构的研究，首次发现了VWF A2结构域中一个金属离子结合位点，并运用生物化学、分子生物学和生物物理学等方法证明该位点为钙离子结合位点。

冷沉淀凝血因子外用及静脉输注联合治疗深二度烧伤创面的效果观察

冷沉淀凝血因子是将新鲜冰冻血浆置于（4±2）℃水浴装置中融化，当血浆基本融化时离心，将大部分上层血浆移至空袋，制成冰冻血浆，留下的20～30mL血浆与沉淀物混合制备而成的。冷沉淀凝血因子中包括因子Ⅷ、血管性血友病因子、纤维结合蛋白（Fn）等成分。凝血因子和纤维蛋白原具有明显的止血作用，同时可促进上皮细胞生长，在细胞上皮化过程中起“支架”作用，是促进创伤愈合的重物质。

中西医结合治疗急性脑梗死的临床疗效及对血vWF、APN水平的影响

目的探讨中西医结合疗法对临床急性脑梗死(ACI)患者的疗效及对血管性血友病因子(vWF)、血清脂联素(APN)水平的影响。方法选取2013年6月至2014年6月本院收治的ACI患者96例,依据随机数字表法分为研究组与对照组各48例。对照组予以西医常规治疗,研究组另给予中药汤剂治疗,比较治疗2周后两组的疗效,治疗前后的血vWF、APN水平及神经功能缺损(NIHSS)评分,分析NIHSS评分与血vWF、APN水平的相关性。结果研究组的总有效率93.75%(45/48)明显高于对照组77.08%(37/48),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后研究组的血vWF水平明显低于对照组,APN水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后NIHSS评分均有改善,但研究组明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。依照Pearson相关分析可知,NIHSS评分与血vWF呈正相关,与APN呈负相关。结论中西医结合治法对ACI患者具有较好的疗效,还可有效改善患者的血vWF、APN指标水平,值得临床推广。

血小板活化因子拮抗剂研究通过鉴定

血小板活化因子拮抗剂研究通过鉴定据有关方面信息，由山东医科大学附属医院血液病研究室承担的血小板活化因子拮抗剂ＡＰ９２１的研究，最近通过鉴定。该研究在筛选３０余种中药后发现ＡＰ９２１在体内外均具有显著抑制血小板活化因子（ＰＡＦ）诱导的血小板聚集作用，对...

视网膜静脉阻塞患者血清FABP4,VWF和LCN-2水平表达与继发黄斑水肿程度及预后的关系研究

目的 探究视网膜静脉阻塞(retinal vein obstruction,RVO)患者血清脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(fatty acid-binding protein 4,FABP4)、血管性假血友病因子(von willebrand factor,VWF)、脂质运载蛋白2(lipocalin-2,LCN-2)水平表达与继发黄斑水肿(macular edema,ME)程度及预后的关系研究。方法 选取2021年1月~2023年8月来西北大学附属第一医院治疗的98例确诊的RVO继发ME患者为观察组,根据黄斑水肿程度分为重度组(n=46)、中度组(n=32)和轻度组(n=20),根据预后情况分为预后不良组(n=36)和预后良好组(n=62);另选取98例单纯RVO患者为对照组。比较各组血清FABP4,VWF,LCN-2水平;多因素Logistic回归分析RVO继发ME患者发生预后不良的影响因素;ROC曲线分析血清FABP4,VWF和LCN-2水平对RVO继发ME患者发生预后不良的预测价值。结果 与对照组相比,观察组血清FABP4(35.24±4.43 ng/ml vs 23.19±3.69 ng/ml),VWF(2.67±0.67 ng/ml vs1.48±0.38 ng/ml),LCN-2(112.53±12.74 mg/L vs 85.49±9.86 mg/L)水平明显升高,差异具有统计学意义(t=20.690,15.294,16.616,均P<0.05);随病情逐渐发展,轻、中、重度组血清FABP4(33.38±4.29 ng/ml,35.79±4.49 ng/ml,38.64±4.65 ng/ml),VWF(2.36±0.59 ng/ml,2.72±0.66 ng/ml,3.29±0.87 ng/ml),LCN-2(105.84±12.24 mg/L,114.61±12.88 mg/L,124.59±13.69 mg/L)水平逐渐升高,差异具有统计学意义(F=10.194,13.294,15.703,均P<0.05);与预后良好组相比,预后不良组血清FABP4(39.64±4.59 ng/ml vs 32.69±4.34 ng/ml),VWF(3.26±0.87ng/ml vs 2.33±0.55 ng/ml),LCN-2(124.56±13.42 mg/L vs 105.54±12.34 mg/L)水平明显升高,差异具有统计学意义(t=7.482,6.487,7.122,均P<0.05));血清FABP4(OR=2.236,95%CI:1.109~4.510),VWF(OR=2.069,95%CI:1.044~4.100),LCN-2(OR=1.875,95%CI:1.015~3.463)为RVO继发ME患者发生预后不良的独立危险因素(均P<0.05);血清FABP4,VWF,LCN-2水平预测患者发生预后不良的AUC(95%CI)分别为0.817(0.726~0.888),0.791(0.697~0.867)和0.798(0.705~0.872),三者联合预测的AUC为0.932(0.863~0.973),三者联合预测优于各因子单独预测(Z=2.034,2.375,2.385,P=0.042,0.018,0.017)。结论 RVO继发ME患者血清FABP4,VWF和LCN-2水平均上调,且均为患者发生预后不良的独立危险因素,三者联合检测对RVO继发ME患者发生预后不良具有更高的预测价值。

热射病器官损伤及预后判断的生物标志物研究进展

近年来,随着全球气候变暖,热射病的发病率在逐年增加。热射病是一种病死率很高的致死性疾病,通常需要紧急抢救,临床上早期识别及诊断对于热射病及其引起的器官功能损伤至关重要。本文就现有研究中可能作为识别热射病器官损伤及判断预后的生物标志物进行综述,以期能够对热射病的临床救治提供一定参考。

大剂量生脉注射液对慢性心功能衰竭患者凝血功能的影响

目的 :研究大剂量生脉注射液对慢性心功能衰竭 (简称心衰 )患者凝血功能的影响。方法 :将 6 0例慢性心衰患者随机分为治疗组 (即生脉注射液组 )和对照组 ,每组各 30例 ,治疗组给予生脉注射液加西药常规治疗 ,对照组仅西药常规治疗 ,观察用药前后心功能改善程度及血浆P 选择素、血管性血友病因子(vWF)和D 二聚体水平的变化。结果 :治疗组临床显效率与总有效率明显高于对照组。心衰患者血浆P 选择素、vWF和D 二聚体水平明显高于健康人 ,治疗后两组患者血浆P 选择素、vWF和D 二聚体水平均下降 ,治疗组优于对照组。结论 :慢性心衰患者 ,体内存在着高凝状态 ,大剂量生脉注射液可改善慢性心衰患者的凝血功能 ,可能在一定程度上减少心衰患者血栓事件的发生和发展。

von Willebrand因子胶原结合试验的建立及其临床应用

目的 建立了一种新的检测vonWillebrand因子 (vWF)功能的方法。 方法 用ELISA法检测血浆中vWF与胶原的结合能力。 结果 该法敏感性为 0 0 0 1U/ml,批内和批间变异为3 34%和 6 70 %。 2 0名正常人血浆的胶原结合试验 (vWF :CBA)值为 (90 2 4± 2 2 87) %。 5 4例初步诊断为血管性血友病 (vWD)患者vWF :CBA值为 (31 94± 2 7 36 ) % ,10例 1型vWD为 (35 2 2± 2 0 0 2 ) % ,10例 2A型vWD为 (8 74± 6 38) % ,6例 3型vWD为 (0 70± 0 5 8) % ,以上各组值均低于正常值 (P <0 0 1) ;2A型vWD患者vWF :CBA值小于 1型vWD(P <0 0 1)。 结论 vWF胶原结合试验是一项简单易行、准确反映vWF功能的实验 ,为研究血管性血友病 (vWD)和血栓性疾病提供了一种新的方法 ,可向临床推广。

ADAMTS13活性及抑制物测定在ITTP诊断中的价值

目的:建立血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13)活性及其抑制物测定方法,研究其在原发性血栓性血小板减少性紫癜(ITTP)患者中的表达情况,鉴别出免疫介导性获得性TTP,为临床免疫抑制治疗提供实验室依据。方法:用残余胶原结合试验(R-CBA)检测患者血浆标本ADAMTS13活性及其抑制物试验。结果:20例ITTP患者中18例ADAMTS13活性低于10%,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);其中15例抑制物试验结果阳性。结论:ITTP患者ADAMTS13活性极度减低或缺乏,且多数检测出ADAMTS13抑制物,通过抑制物试验,方便鉴别出免疫介导性获得性TTP患者,为临床进一步联合免疫抑制剂治疗提供依据。

ADAM28的表达及其介导肿瘤转移的研究进展

解联蛋白-金属蛋白酶28(ADAM28)是ADAM家族的重要成员之一,具有细胞黏附和蛋白水解酶的多种功能,参与体内肺癌、乳腺癌、膀胱癌和慢性淋巴细胞性白血病等多种恶性肿瘤的生长和转移。研究表明,ADAM28在人类多种肿瘤表达增加,且其异常高表达与肿瘤的转移密切关系,其机制可能与裂解血管性血友病因子(vWF)、胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP-3)、结缔组织生长因子(CTGF),促进P选择素/糖蛋白配体复合物(P-selectin/PSGL-1)介导的细胞黏附等相关。本文就ADAM28表达及其介导的肿瘤转移的临床和实验研究进展作一综述,以期促进对ADAM28生物学特性及其靶点底物的更深入的研究。ADAM28可能成为潜在的肿瘤治疗标靶。