氯吡格雷对冠心病患者血清血管扩张刺激磷蛋白磷酸化水平的影响

目的通过检测血管扩张刺激磷蛋白(VASP)磷酸化水平,评价冠心病患者抗血小板聚集治疗前后血小板活性的变化和对氯吡格雷的反应性。方法选取正常对照组28例,不予药物干预;慢性稳定型心绞痛(CSA)95例,将其随机分为A(48例)、B(47例)组,分别给予氯吡格雷75 mg/d、150 mg/d;非ST段抬高型急性冠脉综合征(NST-ACS)67例,首次均给予300 mg负荷量氯吡格雷,此后随机分为C(33例)、D(34例)组,分别序贯给予氯吡格雷75 mg/d、150 mg/d。分别于服用氯吡格雷前、服用负荷剂量氯吡格雷24 h、服用氯吡格雷第5天,取肘静脉血用ELISA法测定血清VASP磷酸化水平。结果服药前,A、B、C、D组血清VASP磷酸化水平均低于正常对照组(P<0.05)。服药后5 d:(1)A、B组血清VASP磷酸化水平较服药前无明显变化(P>0.05);(2)C、D组服用负荷量氯吡格雷24 h及服用维持量第5天血清VASP磷酸化水平均较服药前明显升高(均P<0.05),C、D组服药后两组间血清VASP磷酸化水平变化差异无统计学意义。结论冠心病患者血清VASP磷酸化水平低于正常对照组,氯吡格雷可提高非ST段抬高型急性冠脉综合征患者血清VASP磷酸化水平。

血管扩张刺激磷蛋白在细胞骨架调节中的作用

细胞骨架动力学的调节在细胞粘附、细胞变形、细胞移动等生理过程中是必需的。血管扩张刺激磷蛋白(vasod ilator-stimulated phosphoprotein,VASP)是一种肌动蛋白结合蛋白。该蛋白包含以下结构域:EVH1(Ena/VASP homolog 1)区、EVH2(Ena/VASP homolog 2)区及PRR(proline-rich re-gions)区。近年来,研究发现VASP在与细胞骨架调节有关的各种细胞行为中起着重要作用,如神经细胞轴索的延伸、T细胞的移动、成纤维细胞的迁移等。VASP的磷酸化受PKG(cGMP-dependentprotein kinase)和PKA(cAMP-dependent protein kinase)的调控。在粘附斑的形成与脱落过程中,该磷酸化起着一个“开关”的作用。本文将就近20年来VASP的研究成果,特别是近年来的进展情况做一综述。

血管扩张刺激磷蛋白的表达与前列腺癌转移的关系

目的:研究血管扩张刺激磷蛋白(VASP)与前列腺癌侵袭转移及预后的关系。方法:将VASP shRNA慢病毒和对照shRNA慢病毒分别感染前列腺癌PC3细胞,采用跨膜迁移实验检测PC3细胞的侵袭能力;采用免疫组化法检测56例前列腺癌患者癌组织中VASP的表达,并根据VASP表达差异及患者前列腺癌根治术后随访结果进行生存分析比较。结果:与shRNA慢病毒对照组及空白对照组相比,VASP shRNA慢病毒可抑制前列腺癌PC3细胞VASP的表达,并且显著降低PC3细胞的侵袭能力(P<0.05);对56例前列腺癌患者的生存分析表明,与VASP阴性表达组相比,VASP阳性表达组及VASP强阳性表达组患者生化复发时间显著缩短(P<0.05),后两者之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:VASP参与调控前列腺癌PC3细胞的侵袭能力;VASP蛋白表达差异与前列腺癌患者的预后相关。

血管扩张刺激磷蛋白调节失血性休克大鼠小肠屏障功能与闭锁连接蛋白1的关系

目的观察血管扩张刺激磷蛋白(vasodilator stimulated phosphoprotein,VASP)调节失血性休克大鼠小肠屏障功能与闭锁连接蛋白1(ZO-1)的关系。方法采用失血性休克大鼠模型,以血浆D-乳酸含量反映肠屏障功能,观察失血性休克后大鼠小肠上皮黏膜VASP表达和磷酸化的变化、ZO-1的表达变化以及肠屏障功能变化,比较变化趋势,并观察失血性休克加入VASP磷酸化激动剂后对上述分子表达和肠屏障功能的影响。结果①与正常对照组相比,失血性休克后大鼠小肠黏膜VASP蛋白表达明显降低(P<0.01),VASP蛋白磷酸化在正常时表达量低,休克1h时增高,2～4h迅速降低(P<0.01);ZO-1表达随着休克时间的延长显著降低,在休克2h时降低明显(P<0.01);血浆D-乳酸含量在休克1h改变不明显,2～4h显著增高(P<0.01)。②VASP磷酸化激动剂cAMP可明显增强失血性休克2h大鼠小肠上皮VASP蛋白表达和VASP磷酸化、ZO-1的表达,降低失血性休克2h大鼠血浆D-乳酸含量增高幅度(P<0.01)。结论ZO-1可能与VASP对失血性休克大鼠肠屏障功能的调节作用有关。

胃癌和癌旁组织血管扩张刺激磷蛋白表达差异的研究

目的:观察血管扩张刺激磷蛋白(Vasodilator-stimulated Phosphoprotein,VASP)在胃癌组织和癌旁组织中表达的差异,探讨其在胃癌形成和转移中的作用。方法:收集胃癌组织42例和癌旁胃粘膜组织16例。癌组织按病理学和组织学分期分度。用免疫组化方法观察其VASP表达和分布。结果:癌旁正常胃粘膜组织中,胃粘膜上皮细胞及腺上皮细胞未见VASP阳性表达,而巨噬细胞和淋巴细胞有很强的VASP阳性表达。VASP在癌组织(粘膜上皮细胞、腺上皮细胞、血管内皮细胞、血管平滑肌细胞)有很强的表达,高于癌旁正常胃粘膜的表达;VASP表达在高、中、低分化腺癌中平均免疫印记指数分别为0.757、1.152、1.457,高分化腺癌组与中、低分化腺癌组间差别均有统计学意义(P<0.05);VASP表达在TNMⅠ、Ⅱ期组和TNMⅢ、Ⅳ期组中平均免疫印记指数分别为0.685和1.476,差异有统计学意义(P<0.01);VASP在无淋巴转移和有淋巴转移组中平均免疫印记指数为1.753、0.673,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:VASP在正常的胃组织和胃癌中分布和表达差异表明VASP参与了正常的胃粘膜上皮细胞向癌细胞分化的过程;VASP表达增加与其病理分级是平行的,这也说明VASP可能是调控胃癌侵袭特性的重要分子。

血小板血管扩张剂刺激磷酸蛋白磷酸化与光学比浊法检测氯吡格雷抵抗的相关性研究

目的探讨血小板血管扩张剂刺激磷酸蛋白(VASP)磷酸化和光学比浊法(LTA)检测氯吡格雷抵抗。方法纳入心内科冠状动脉粥样硬化性心脏病(稳定型心绞痛)患者200例。使用流式细胞学方法检测血小板VASP磷酸化水平即血小板反应指数(VASP-PRI),同时使用LTA检测血小板聚集率。根据两种检测结果,将患者分为血小板高反应性(HPR)组和非高反应性组(nHPR)。分析两组患者的VASP-PRI和血小板聚集率相关性。结果 LTA法与VASP-P法显示HPR组的血小板聚集率分别为78.4±9.8%,82.7±10.1%,nHPR组分别为28.0±11.9%,29.7±12.1%,两者之间的相关性在HPR组显示R^2=0.869,P<0.01,n HPR组为R^2=0.905,P<0.01。结论两种方法较一致的鉴别出600 mg氯吡格雷负荷量后的血小板反应性,VASP-PRI可以为氯吡格雷的药物疗效提供一定的参考。

血管扩张刺激磷蛋白缓解脓毒症小鼠心肌细胞受损

目的:验证二丁酰环磷腺苷(Bucladesine)介导的血管扩张刺激磷蛋白(VASP)变化与脓毒症小鼠心肌细胞作用关系。方法:盲肠结扎穿孔术构建脓毒症小鼠模型,实验分为:对照组(Con)、假手术组(Sham)、模型组(Mod)和Bucladesine干预组(Buc)。生化检测血清和心肌组织中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量。流式细胞术检测心肌组织中活性氧(ROS)含量和细胞中线粒体膜电位。TUNEL染色检测心肌细胞凋亡。苏木精-伊红(HE)染色观察心肌组织病变。Western blot检测心肌组织中血管扩张刺激磷蛋白磷酸化表达水平。结果:盲肠结扎穿孔成功诱导脓毒症小鼠模型,与对照组和假手术组相比,模型组血清和心肌组织中MDA含量显著升高(P<0.05),SOD含量显著降低(P<0.05),ROS含量显著升高(P<0.05),p-VASP和VASP蛋白表达水平显著升高(P<0.05),心肌纤维断裂,疏松,间隙增大,TUNEL棕色面积着色增加。与模型组相比,Buc组血清和心肌组织中MDA含量显著降低(P<0.05),SOD含量显著升高(P<0.05),ROS含量显著降低(P<0.05),p-VASP和VASP蛋白表达水平显著降低(P<0.05),心肌纤维紧密,TUNEL棕色面积着色减少。结论:Bucladesine抑制p-VASP能够缓解脓毒症导致的心肌功能抑制,其作用机理与调节心肌细胞线粒体活性和增强细胞抗氧化能力相关。

血管扩张剂刺激磷蛋白及其对抗凝疗效的评价

血管扩张剂刺激磷蛋白（VASP）是一种肌动蛋白结合蛋白，该蛋白包含以下结构域：EVH1（Ena／VASP homolog1）区、EVH2（Ena／VASP homolog2）区及PRR（proline-rich regions）区。

血管扩张刺激磷蛋白对抵抗素促进冠状动脉内皮细胞增殖和迁移的影响

目的抵抗素可通过导致内皮细胞功能的失调,参与动脉粥样硬化的发生和发展,然而其作用机制研究较少。文中旨在研究抵抗素对冠状动脉内皮细胞功能的影响,探讨影响抵抗素作用的可能机制。方法构建针对人血管扩张刺激磷蛋白(VASP)的慢病毒表达载体的VASP mRNA的shRNA干扰序列(LV-si VASP组)和阴性对照载体(LV-sicntr组),并将其感染高表达VASP的人冠状动脉内皮细胞,RT-PCR检测VASP mRNA的表达,Western blot测定蛋白的表达。用不同浓度的抵抗素(0、10、50、100、200 ng/m L)体外作用于人冠状动脉内皮细胞系(HCAECs),MTT法检测抵抗素对细胞增殖的作用,Transwell小室实验检测细胞迁移能力的改变。在相同抵抗素浓度100 ng/m L下,检测2组对内皮细胞增殖、迁移影响。免疫荧光法分析2组细胞表面受体血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)表达情况。采用pull-down法分析2组细胞Rho A活性。结果LV-si VASP组RNA表达抑制率[(68.1±0.8)%]、VASP蛋白表达抑制率[(59.3±1.7)%]较LV-sicntr组(100%)明显降低(P<0.05)。与0 ng/m L比较,50~200 ng/m L抵抗素作用48 h后,可以显著促进细胞的增殖(P<0.05)。50~200 ng/m L抵抗素处理24 h后,HCAEC呈剂量依赖性促进细胞迁移(P<0.05)。沉默VASP后,抑制了抵抗素对细胞增殖和迁移的作用(P<0.05)。荧光显微镜观察结果显示,与LV-sicntr组比较,LV-si VASP组VEGFR2表达未见明显变化,而LV-si VASP组Rho A活性较LV-sicntr组减弱[(41.3±3.1)%vs 100%],差异有统计学意义(P<0.05)。结论抵抗素呈浓度依赖性的促进冠状动脉内皮细胞增殖、迁移,敲除VASP对抵抗素功能的影响与减弱的Rho A活性有关。

血管扩张刺激磷蛋白与动脉硬化危险因素的关系研究进展

越来越多的证据表明,c GMP在动脉粥样硬化的发生发展中起着重要作用,血管扩张刺激磷蛋白(vasodilatorstimulated-phosphoprotein,VASP)作为c GMP信号通路的下游底物,是一种肌动蛋白结合蛋白,具有调节细胞黏附、细胞变形、细胞移动、细胞增殖的功能。研究表明,VASP与多种影响动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的因子有着密切的关系,在AS的发生发展中起着重要作用。文中就VASP和AS危险因素如高血压、高血脂、高血糖的关系进行综述。

血管扩张刺激磷蛋白的磷酸化位点突变对PDGF-BB诱导细胞迁移的影响

目的:探讨血管扩张刺激磷蛋白(VASP)Ser157、Ser239位点的磷酸化对血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)诱导细胞迁移的影响及其作用差异。方法:构建VASPSer157和Ser239位点突变的真核表达质粒pcDNA3.1(+)/VASP-S157A和pcDNA3.1(+)/VASP-S239A,分别转染ECV304细胞,并筛选出它们的稳定表达细胞株,通过Transwell小室跨膜迁移实验检测2种细胞株的迁移速度。结果:经PDGF-BB作用后,2种稳定表达细胞株的跨膜迁移数量明显少于对照组(P<0.05),而2种细胞株之间无显著差异(P>0.05)。结论:VASPSer157和Ser239磷酸化位点突变减弱了PDGF-BB诱导的细胞迁移,Ser157和Ser239磷酸化位点对VASP的功能均具有重要影响。

血小板血管扩张剂刺激磷蛋白的研究进展及在心血管领域的应用

血小板血管扩张剂刺激磷蛋白(VASP)属于Ena/VASP蛋白家族的主要成员,通常为环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷蛋白激酶的作用底物。它参与了各细胞多种功能的调节。近年来,VASP的基础结构研究有了进一步的进展,这一进展促进了其在心血管领域的应用研究,包括VASP检测氯吡格雷抵抗系列研究、VASP评估和干预炎症及应激损伤、VASP对病态心肌细胞功能的保护作用等。而VASP的新近基础研究进展将进一步促进其向实用领域的拓展,并逐步转向临床干预研究及对中、远期预后的评估。

肺鳞状细胞癌组织中血管扩张刺激磷蛋白的临床意义及生物学功能研究

目的探讨肺鳞状细胞癌(LSCC)组织中血管扩张刺激磷蛋白(VASP)的临床意义及对肺癌细胞迁移侵袭的影响。方法检测50例LSCC及其癌旁组织中VASP的表达,分析肿瘤组织VASP表达与患者临床特征及预后间的相关性。通过si RNA沉默肺癌细胞中VASP的表达,采用划痕愈合试验及Transwell小室模型检测沉默VASP后肺癌细胞迁移及侵袭能力的变化。结果肺癌组织中VASP的阳性表达率(χ2=7.853,P=0.005)及阳性表达程度(t=4.318,P=0.000)均高于对应癌旁组织,并与肿瘤淋巴结转移(χ~2=6.455,P=0.011)及高TNM分期呈正相关(χ~2=6.455,P=0.011);肺癌组织VASP蛋白表达阳性患者3年总生存率(χ~2=8.311,P=0.004)及无病生存率(χ~2=9.969,P=0.002)均低于VASP蛋白表达阴性患者。在体外,沉默VASP的表达能够抑制肺癌细胞的迁移(t=9.021,P=0.011)及侵袭(t=4.609,P=0.041)能力。结论肺鳞癌组织中VASP表达升高并与肿瘤患者较差的生存获益有关,沉默VASP表达在体外能够实现一定的抗肿瘤转移效应。

血管扩张刺激磷酸蛋白:抗P2Y12药物特异性监测

在出、凝血这个天平的两端，一侧是出血风险，一侧是血栓风险。在抗栓治疗的过程中，有效地预防出血风险也是十分必要的。就连美国专家在评价抗栓治疗时也慨叹出现出血情况时的压力：Thrombosis is the fault of nature; bleeding is the fault of doctors.在防止矫枉过正的探索中，抗栓药物的监测被提高到了一个很高的地位。

评价氯吡格雷对冠心病患者血清血管扩张刺激磷蛋白磷酸化水平的影响价值

目的:探讨氯吡格雷与VASP磷酸化的关系,评估临床价值。方法:60例慢性稳定性心绞痛病例,随机分成观察A组、B组各30例。同期选取70例非ST段抬高性急性冠脉综合征病例,随机分成观察C组、D组。采用ELISA法测定受试者血清VASP水平。结果:受试四组用药前血清VASP磷酸化水平均明显高于正常对照组(P<0.05)。观察C组和观察D组负荷剂量后24h及常规剂量后5d血清VASP磷酸化水平均明显低于用药前(P<0.05)。结论:氯吡格雷有助于提高非ST段抬高性急性冠脉综合征患者磷酸化水平,这对改善冠心病症状有积极的影响,可作为切入点深入研究。

人血管扩张刺激磷蛋白、对氧磷酶1联合检测对氯吡格雷疗效监测的诊断价值研究

目的:探讨人血管扩张刺激磷蛋白(VASP)、对氧磷酶1(PON-1)联合检测对氯吡格雷疗效监测的诊断价值。方法:随机选择2021年10月-2022年9月佛山复星禅诚医院就诊的服用氯吡格雷患者130例为研究对象,采用影像学、临床症状作为氯吡格雷有效性的确认标准,分为反应较差组、反应良好组2组。所有研究对象均检测人血管扩张刺激磷蛋白(VASP)、对氧磷酶1(PON-1)。采用SPSS25.0进行统计处理,采用二元Logistic回归分析检验模型似然比和模型系数,同时构建人血管扩张刺激磷蛋白(VASP)、对氧磷酶1(PON-1)检测及联合检测对结石诊断价值评价的ROC曲线。结果:反应较差组的人血管扩张刺激磷蛋白(VASP)RPI值明显高于反应良好组(χ^(2)=99.526,P<0.01);两组对氧磷酶1无统计学显著差异。ROC曲线表明,人血管扩张刺激磷蛋白(VASP)、对氧磷酶1联合检测ROC曲线下面积(the area under the ROC curve,AUC)为0.951。结论:人血管扩张刺激磷蛋白(VASP)可以作为氯吡格雷疗效监测很好的指标,但对氧磷酶1与氯吡格雷有效性不存在明显相关性,但人血管扩张刺激磷蛋白(VASP)、对氧磷酶1(PON-1)联合检测对氯吡格雷的疗效监测具有很好的诊断价值。

血浆肿瘤坏死因子α刺激基因6蛋白及左心室球形指数与老年扩张型心肌病患者主要不良心血管事件的关系

目的 探讨血浆肿瘤坏死因子α刺激基因6(TSG-6)蛋白及左心室球形指数(LVSI)与老年扩张型心肌病(DCM)患者主要不良心血管事件(MACE)的关系。方法 选取2020年1月至2022年1月海南医学院第二附属医院收治的135例老年DCM患者(DCM组),根据是否发生MACE分为MACE组(32例)和无MACE组(103例),另选取同期53名体检健康老年人为对照组。采用酶联免疫吸附试验法检测2组血浆TSG-6蛋白水平,超声心动图检查记录LVSI。采用多因素Logistic回归方法分析老年DCM患者发生MACE的影响因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析血浆TSG-6蛋白和LVSI对老年DCM患者发生MACE的预测价值。结果 DCM组血浆TSG-6蛋白水平和LVSI均高于对照组(均P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,左心室射血分数(比值比=0.810,95%置信区间:0.716~0.917)、左心室短轴缩短率(比值比=0.801,95%置信区间:0.659~0.974)为老年DCM患者发生MACE的独立保护因素,N末端B型脑钠肽前体(比值比=1.031,95%置信区间:1.018~1.044)、TSG-6蛋白(比值比=1.043,95%置信区间:1.020~1.066)、LVSI(比值比=1.445,95%置信区间:1.182~1.768)为独立危险因素(均P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血浆TSG-6蛋白、LVSI单独与联合预测老年DCM患者发生MACE的曲线下面积(AUC)分别为0.836、0.816、0.917,敏感度分别为75.00%、84.37%、90.62%,特异度分别为84.47%、66.02%、80.58%。血浆TSG-6蛋白联合LVSI预测老年DCM患者发生MACE的AUC大于二者单独评估(均P<0.05)。结论 老年DCM患者血浆TSG-6蛋白、LVSI升高,是患者发生MACE的独立危险因素,二者联合对患者发生MACE的预测价值较高。

血清血管紧张素2和生长刺激表达基因2蛋白及末端脑利钠肽前体表达水平与扩张型心肌病患者预后的相关性分析

目的探究血清血管紧张素2(Ang2)、生长刺激表达基因2蛋白(ST2)及末端脑利钠肽前体(NT-proBNP)表达水平与扩张型心肌病(DCM)患者预后的相关性。方法选取2015年3月至2019年3月于本院接受治疗的90例DCM患者作为研究组,另选取同期40名健康体检者作为对照组,比较两组Ang2、ST2、NT-proBNP表达水平。对研究组随访15个月,按照随访结果分为死亡组(n=13)、再入院组(n=28)和无再发事件组(n=49),比较3组Ang2、ST2、NT-proBNP表达水平,评估Ang2、ST2、NT-proBNP水平对DCM患者预后评估的灵敏度、特异度和一致性。采用ROC分析3种因子对DCM患者预后的临床意义。结果研究组血清Ang2、ST2、NT-proBNP水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。死亡组、再入院组血清Ang2、ST2、NT-proBNP水平均高于无再发事件组,且死亡组高于再入院组,差异有统计学意义(P<0.05)。Ang2评估预后一致性为0.86,灵敏度为90.24%,特异度为81.63%;ST2评估预后一致性为0.81,灵敏度为82.93%,特异度为79.59%;NT-proBNP评估预后一致性为0.84,灵敏度为87.80%,特异度为81.63%。血清Ang2、ST2、NT-proBNP均对扩张型心肌病患者预后具有较好的预测价值(P<0.05)。结论血清Ang2、ST2、NT-proBNP表达水平与DCM患者的预后密切相关,在心脏事件再发的评估中具有较高的临床价值,值得临床推广应用。