血管生成拟态在胃癌研究和治疗中的研究进展

血管生成拟态(VM)是一种独立于内皮细胞的血管样结构,通常存在于需要血管生长的实体肿瘤中。VM与肿瘤细胞的增殖、侵袭、转移及胃癌患者的不良预后密切相关。VM的存在可能是胃癌患者抗血管生成药物耐药的原因之一,抗血管生成同时靶向VM治疗将有望成为胃癌治疗的新方向。

扁蒴藤素调节Shh/Gli1信号通路对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡和血管生成拟态的影响

目的:探讨扁蒴藤素(Pris)调节Shh/Gli1信号通路对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡和血管生成拟态(VM)的影响及其机制。方法:采用MTT法检测不同浓度Pris对宫颈癌HeLa细胞增殖的抑制作用,以选取合适的干预浓度。将HeLa细胞分为对照组、环巴胺组、Pris组、Pris+pc-NC组和Pris+pc-Shh组。采用MTT法、EdU法检测各组细胞的增殖能力,Transwell小室法、流式细胞术检测各组细胞的迁移及侵袭能力和细胞凋亡率,体外血管生成实验观察VM形成情况,qPCR法检测各组细胞中Shh和Gli1 mRNA表达水平,WB法检测细胞中血管内皮生长因子A(VEGF-A)、血管内皮钙黏素(VE-cadherin)、Ki-67、caspase-3及与Shh/Gli1信号通路相关蛋白表达水平。结果:0.25~2.5μmol/L的Pris对HeLa细胞增殖均有显著抑制作用,选择1.5μmol/L的Pris进行后续实验。对照组细胞形成良好的管腔结构,与对照组相比,环巴胺组、Pris组和Pris+pc-NC组HeLa细胞管腔结构被明显破坏,细胞增殖活力和增殖率、迁移及侵袭细胞数目、Shh和Gli1 mRNA、VEGF-A、VE-cadherin、Ki-67、Shh、Gli1蛋白表达均显著降低(均P<0.05),细胞凋亡率和caspase-3表达均显著升高(均P<0.05);环巴胺组与Pris组HeLa细胞各项检测指标比较差异均无统计学意义(均P>0.05);与Pris+pc-NC组相比,Pris+pc-Shh组细胞管腔结构形成明显改善,细胞增殖活力和增殖率、迁移及侵袭细胞数、Shh和Gli1 mRNA、VEGF-A、VE-cadherin、Ki-67、Shh、Gli1蛋白表达均显著升高(均P<0.05),细胞凋亡率和caspase-3表达均显著降低(均P<0.05)。结论:Pris抑制宫颈癌HeLa细胞的增殖、迁移与侵袭和VM的形成并促进细胞凋亡,可能与阻断Shh/Gli1信号通路有关。

青藤碱调节CXCR4-STAT3轴对卵巢癌A2780细胞增殖、迁移和血管生成拟态的影响

目的:探讨青藤碱(Sinomenine)对卵巢癌细胞增殖、迁移和血管生成拟态的影响及作用机制。方法:使用不同浓度(0、0.25、0.50、1.0、2.0、4.0、8.0 mmol/L)的青藤碱分别处理A2780细胞24、48 h, CCK-8法检测细胞存活率。将A2780细胞随机分为对照(Control)组、CXCR4激活剂基质细胞衍生因子-1(SDF-1)(SDF-1,100 ng/mL)组、CXCR4抑制剂普乐沙福(Plerixafor, 500 ng/mL)组、青藤碱(Sinomenine, 1.0 mmol/L)组、Sinomenine+SDF-1(1.0 mmol/L Sinomenine+100 ng/mL SDF-1)组,分别检测A2780细胞增殖、迁移与侵袭,体外血管生成拟态形成实验检测青藤碱对血管生成拟态的影响,Western blot法检测血管内皮生长因子(VEGF)、上皮细胞激酶(EphA2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、MMP-2、CXC趋化因子受体4(CXCR4)、信号转导与转录激活因子3(STAT3)、磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白表达。结果:青藤碱可有效抑制A2780细胞增殖,且呈浓度依赖性;青藤碱可显著抑制A2780细胞迁移、侵袭及血管生成拟态形成,并下调血管生成拟态标志蛋白VEGF、EphA2、MMP-9、MMP-2表达,抑制CXCR4、p-STAT3表达(P<0.05),青藤碱的这一抑制作用可被CXCR4激活剂减弱。结论:青藤碱可能通过抑制CXCR4-STAT3轴,抑制卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭及血管生成拟态形成。

前列腺癌组织中Wnt5a的表达与血管生成拟态的相关性

目的分析前列腺癌Wnt5a与血管生成拟态(VM)的相关性,并评估其与肿瘤干细胞特性和上皮间质转化的关系。方法免疫组织化学法检测50例前列腺癌和50例前列腺增生组织中Wnt5a的表达及前列腺癌组织中CD133、Vimentin和E-cadherin的表达;CD34/PAS双染检测VM的形成。分析组间Wnt5a的表达差异、Wnt5a和VM的临床意义、Wnt5a与VM的相关性及Wnt5a和VM与CD133、Vimentin、E-cadherin的相关性。结果Wnt5a在前列腺癌组织中的表达明显高于前列腺增生组织(P<0.05),Wnt5a的表达与VM正相关(P<0.05),Wnt5a及VM的表达与CD133及Vimentin的表达正相关(P<0.05)。Wnt5a及VM的表达与前列腺癌Gleason评分、输精管侵犯及淋巴转移均正相关(P<0.05),VM与前列腺癌T分期呈正相关(P<0.05)。结论Wnt5a在前列腺癌高表达,并与VM呈正相关,Wnt5a及VM与肿瘤干细胞特性和上皮向间充质转化的标志蛋白的表达具有相关性。

落新妇苷通过调节HIF-1α/VEGF轴抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和血管生成拟态形成

目的:探究落新妇苷(AST)调节低氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)轴对乳腺癌细胞增殖、迁移和血管生成拟态(VM)的影响。方法:用不同浓度的AST(0、5、25、50、100、150、200、300μmol/L)处理乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231,采用CKK-8法检测细胞活力。将MCF-7、MDA-MB-231细胞分为对照组、AST低剂量(AST-L)组、AST中剂量(AST-M)、AST高剂量(AST-H)组、AST-H+DMOG(HIF-1α/VEGF通路激活剂)组,EdU法检测AST处理对乳腺癌细胞增殖的影响,流式细胞术检测其对细胞凋亡的影响,Transwell小室实验检测其对细胞迁移、侵袭能力的影响,Matrigel管型形成实验检测其对细胞VM形成的影响,WB法检测对细胞中HIF-1α、VEGF、VE-cadherin、E-cadherin、N-cadherin、MMP-2表达的影响。结果:与0μmol/L AST相比,5、25、50、100、150、200、300μmol/L AST处理的细胞活力显著下降,呈剂量依赖性(P<0.05)。与对照组相比,AST-L、AST-M、AST-H组细胞EdU阳性率、细胞迁移数、细胞侵袭数、VM管腔数目、HIF-1α、VEGF、VE-cadherin、N-cadherin、MMP-2表达均显著下降,而细胞凋亡率、E-cadherin蛋白表达显著升高(均P<0.05);与AST-H组相比,AST-H+DMOG组细胞EdU阳性率、细胞迁移数、细胞侵袭数、VM管腔数目、HIF-1α、VEGF、VE-cadherin、N-cadherin、MMP-2表达均显著升高,而细胞凋亡率、E-cadherin蛋白表达均显著下降(均P<0.05)。结论:AST能抑制乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和VM形成,促进凋亡,其作用机制可能与抑制HIF-1α/VEGF信号通路有关。

沉默lncRNA-MALAT1对胶质瘤血管生成拟态的影响

目的 探讨沉默长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录本1(Metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT1)对胶质瘤血管生成拟态的影响。方法 实时荧光定量(qPCR)法检测人胶质瘤细胞U251、U87和正常人星形胶质细胞NHA中lncRNA-MALAT1的表达量。京都基因与基因组百科全书(KEGG)和基因本体论(GO)分析lncRNA-MALAT1的信号通路及生物学功能。qPCR法检测沉默效率,将沉默效率最高的片段序列作为实验组(LV-MALAT1组),携带无意义片段的重组慢病毒感染人胶质瘤细胞U251、U87作为阴性对照组(LV-NC组),未干预的人胶质瘤细胞U251、U87作为空白对照组(BLANK组),并检测分析3组中lncRNA-MALAT1的表达量。细胞三维培养法观察分析U251、U87细胞的体外血管生成拟态(Vasculogenic mimicry, VM)形成能力。CCK-8实验和划痕实验评估细胞的增殖和迁移能力。Transwell实验观察细胞的迁移和侵袭能力。Western-blot检测VM相关蛋白VE-cadherin、MMP2、VEGF以及PI3K/AKT/FOXO1信号转导通路蛋白及其磷酸化蛋白表达量。结果 与NHA细胞比较,lncRNA-MALAT1在胶质瘤细胞U251、U87中高表达(P<0.000 1);KEGG和GO富集分析结果显示,lncRNA-MALAT1参与肿瘤细胞信号通路PI3K/AKT途径、细胞黏附、迁移及细胞外基质生成等细胞分子生物学过程;体外VM形成能力实验结果显示,与U251及U87细胞LV-NC组比较,LV-MALAT1组VM形成数量和长度明显减少,差异有统计学意义(P<0.01);Western-blot结果显示,与U251及U87细胞LV-NC组比较,LV-MALAT1组VM相关蛋白VE-cadherin、MMP2、VEGF表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);CCK-8实验结果显示,在细胞培养48 h后,与U251及U87细胞LV-NC组比较,LV-MALAT1组的细胞增长速率明显降低(P<0.000 1);划痕实验结果显示,与U251及U87细胞LV-NC组比较,LV-MALAT1组在24 h、48 h后划痕愈合面积明显减小(P<0.000 1);Transwell实验结果显示,与U251及U87细胞LV-NC组比较,LV-MALAT1组的细胞迁移和侵袭数量显著减少(P<0.001);与U251及U87细胞LV-NC组比较,LV-MALAT1组的PI3K、Phospho-PI3K、AKT、Phospho-AKT表达量显著下降,FOXO1、Phospho-FOXO1表达量显著升高(P<0.05)。结论 沉默lncRNA-MALAT1既能抑制胶质瘤细胞U251、U87血管生成拟态的能力,又可使其增殖、迁移及侵袭能力明显降低,其机制可能与PI3K/AKT/FOXO1通路表达水平变化相关。

层黏连蛋白基质在肿瘤细胞行为及血管生成拟态形成中的机制研究

血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)描述了肿瘤细胞在无内皮细胞参与下形成新的微循环模式的过程。临床上,VM与侵袭性表型和较差的患者生存率有关。以前的许多研究都集中在血管生成因子方面;最近的研究发现,肿瘤细胞周围的细胞外基质对肿瘤发展具有显著调控作用。细胞外基质蛋白质可能授予肿瘤细胞形成血管生成拟态的能力。在本研究中,我们研究了层黏连蛋白(laminin,LN)基质在黑色素瘤和骨肉瘤的肿瘤进程和VM形成中的作用。相较于Control组,高浓度LN基质培养下,肿瘤细胞的黏附、增殖、迁移、干性表达和VM形成能力显著增强;利用免疫荧光染色和实时定量PCR分析其内在的分子机制,结果显示:与对照组相比,层黏连蛋白基质可以显著促进肿瘤细胞CD133的表达,同时E-钙黏着蛋白I的mRNA表达下调(P<0.05),而Integrin、N-cadherin、Vimentin以及Snail、Twist的mRNA表达上调(P<0.05)。以上研究结果表明,层黏连蛋白促进肿瘤细胞的黏附、增殖、迁移和VM形成能力,并揭示了VM形成的潜在机制,为后期抗血管生成拟态的诊疗提供了新的思路。

血小板促进肺腺癌细胞H460生成血管拟态的作用与机制研究

目的 探讨血小板(Platelet, PLT)促进肺腺癌细胞H460生成血管拟态(vasculogenic mimicry, VM)的作用。方法 设立H460、PLT+H460,PLT+H460+Bev(贝伐单抗)3个组,采用三维细胞培养检测PLT对H460的VM生成作用,CCK8实验、划痕实验进一步检测细胞增殖和细胞迁移力的变化,ELISA法检测上清中的VEGF含量,Western Blot检测VM相关蛋白(VE-Cadherin、EphA2)的表达水平。结果 相较于H460组,PLT+H460组管道结构明显增多,增殖率增高,迁移力增强,PLT+H460+Bev组的管道结构、增殖率和迁移力均低于PLT+H460组。PLT+H460组的VEGF、VE-Cadherin、EphA2表达量均较H460组多,而PLT+H460+Bev组上述蛋白表达水平则低于PLT+H460组。结论 PLT可能促进H460细胞形成VM。

补中益气汤含药血清抑制肺癌细胞活性及血管生成拟态的机制研究

目的探讨补中益气汤含药血清对肺癌细胞活性及血管生成拟态(VM)的影响及机制。方法通过SD大鼠灌胃法制备低剂量(BZ-L组)、中等剂量(BZ-M组)、高剂量(BZ-H组)补中益气汤含药血清,进行肺癌细胞干预。通过CCK-8实验、Edu细胞增殖实验、细胞克隆形成实验及细胞划痕实验、Transwell实验检测补中益气汤对肺癌A549、HCC827细胞增殖及迁移的影响。采用流式细胞术检测补中益气汤对肺癌细胞凋亡和细胞周期的影响,通过体外VM实验检测补中益气汤对肺癌细胞血管生成的影响。通过RNA-seq测序检测对照组细胞与药物干预细胞的差异表达基因。构建小鼠皮下移植瘤,检测补中益气汤灌胃治疗对肺癌细胞体内生长的抑制作用。结果补中益气汤可呈剂量依赖性地抑制A549、HCC827细胞的活力和增殖活性,并可呈剂量依赖性地促进肺癌细胞凋亡,诱导细胞发生G_2/M期阻滞。经补中益气汤干预后,A549、HCC827细胞的迁移能力显著减弱。随着补中益气汤干预浓度的提高,A549细胞及HCC827细胞的VM逐渐减少。与对照组细胞相比,补中益气汤组细胞有765个差异表达基因,其中p-JNK和p-ERK1/2基因表达显著下调。Western blot检测结果显示,随着补中益气汤浓度的升高,A549、HCC827细胞中JNK/ERK1/2信号通路的磷酸化水平被逐渐抑制。补中益气汤可使小鼠肿瘤的体积和质量均显著减小,使肿瘤组织中细胞凋亡率升高,并使肿瘤组织中p-JNK、p-ERK1、p-ERK2表达降低和E-cadherin表达升高。结论补中益气汤可能通过抑制JNK/ERK1/2信号通路活性,抑制肺癌细胞活性和血管生成。

桃叶珊瑚苷调控RhoA/ROCK信号通路对胃癌MGC803细胞上皮间质转化和血管生成拟态的影响

目的:探究桃叶珊瑚苷(AU)调控RhoA/ROCK信号通路对胃癌MGC803细胞上皮间质转化(EMT)进程和血管生成拟态(VM)形成的影响。方法:常规培养人胃癌MGC803细胞,将其随机分为对照组、AU-L组(20μmol/L AU)、AU-M组(40μmol/L AU)、AU-H组(80μmol/L AU)、AU-H+RhoA激活剂水仙环素(Nar)组(AU-H+Nar组,80μmol/L AU+30μmol/L Nar)。采用CCK-8法、Transwell实验、细胞划痕实验分别检测不同浓度AU对细胞增殖、迁移和侵袭的影响,三维细胞培养法观察不同浓度AU对细胞体外VM管腔结构形成的影响,WB法检测AU对各组细胞RhoA、ROCK、VM与EMT相关蛋白表达的影响。结果:与对照组相比,AU-M组、AU-H组MGC803细胞增殖率(48、72 h时)、细胞迁移率、细胞侵袭数目、VM管腔结构数,以及RhoA、ROCK1、N-cadherin、vimentin、VE-cadherin的蛋白表达均显著降低(均P<0.05),E-cadherin表达显著升高(P<0.05);同时,使用Nar处理显著减弱了AU对MGC803细胞EMT和VM形成的抑制作用(均P<0.05)。结论:AU通过下调RhoA/ROCK信号通路抑制胃癌MGC803细胞的增殖、迁移、侵袭、EMT和VM形成过程。

基于DCE-MRI影像组学列线图预测三阴性乳腺癌血管生成拟态表达状态的研究

目的:探讨基于动态对比增强磁共振成像(DCE-MRI)影像组学联合临床特征构建的列线图在预测三阴性乳腺癌(TNBC)病人血管生成拟态(VM)表达状态中的价值。方法:回顾性分析术前经DCE-MRI检查且经病理证实的94例乳腺癌病人,以7∶3的比例随机分配训练集(n=65)和测试集(n=29)。选择DCE-MRI第2期勾画病灶最大层面。通过f-calssif函数、最小绝对收缩和选择算子回归筛选最优特征,通过支持向量机(SVM)构建DCE-MRI影像组学模型。通过单因素、多因素logistic回归筛选临床独立预测因子构建临床模型,选择DCE-MRI模型Rad-score联合临床独立预测因素建立列线图模型。结果:训练集中,VM表达阳性和阴性病人的有无腋窝淋巴结(ALN)转移、MRI最大径差异、肿瘤边缘状态均有统计学意义(P<0.05~P<0.01)。列线图模型其训练集AUC、敏感度、特异度及准确度分别为0.880、82.4%、89.6%及98.5%;测试集分别为0.869、87.5%、81.0%及82.8%。列线图模型在判断训练集、测试ALN转移结果与理想模型的一致性较好(P<0.05)。结论:基于DCE-MRI影像组学列线图可作为一种准确、无创方法用于预测术前TNBC病人VM表达水平。

胶质母细胞瘤中血管生成拟态形成机制的研究进展

血管生成拟态(VM)是一种类似血管的结构,存在于依赖血管的实体肿瘤中,是由高侵袭性肿瘤细胞通过自身变形和细胞外基质重塑形成的,是高侵袭性肿瘤进展的特殊供血来源。VM有两种类型:管状型和基质型,其中管状型是由肿瘤细胞构成的,而不是内皮细胞;基质型是由细胞外基质而不是细胞构成。VM在包括胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)在内的多种人类恶性肿瘤中都有存在,与肿瘤的增殖、侵袭及复发都有很大的关系。本文就VM的概念、VM与GBM的关系、GBM中VM形成机制及针对VM治疗GBM的前景进行综述。

卵巢癌患者血清LncRNA SNHG11和HIF-1α水平表达与癌组织血管生成拟态的关系研究

目的探究卵巢癌(ovarian cancer)患者血清长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)小核仁RNA宿主基因11(small nucleolar RNA host gene 11,SNHG11)和缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)表达与组织血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)的关系。方法以2019年10月~2023年1月于唐山市妇幼保健院收治的116例卵巢癌患者为研究对象,根据是否形成VM将卵巢癌患者分为VM组(n=51)和无VM组(n=65),另选取同期进行健康体检者50例为对照组。采用实时荧光定量PCR法(real-time quantitative PCR,qPCR)检测卵巢癌患者及对照组血清LncRNA SNHG11和HIF-1α表达水平;Spearman相关性分析LncRNA SNHG11,HIF-1α与VM形成之间的关系;通过受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析LncRNA SNHG11,HIF-1α及联合检测对卵巢癌患者形成VM的诊断价值。结果与对照组相比,卵巢癌患者VM组和无VM组血清LncRNA SNHG11(3.01±0.88,2.21±0.68 vs 12±0.35),HIF-1α(2.16±0.67,1.60±0.44 vs 1.01±0.31)水平均显著升高(t=12.136,9.006;19.890,16.591),且VM组患者血清LncRNA SNHG11,HIF-1α水平均显著高于无VM组(t=8.957,8.595),差异有统计学意义(均P<0.05);LncRNA SNHG11,HIF-1α表达及VM的形成与年龄、组织类型无关(t=1.036,0.976,0.218;1.254,1.390,0.368,均P>0.05),而与肿瘤大小、FIGO分期、淋巴结转移及病理分级有关(t=5.351,5.186,13.264;5.465,5.227,10.898;6.063,6.016,5.374;4.030,5.871,5.509,均P<0.05);Spearman相关性分析显示,LncRNA SNHG11,HIF-1α与VM的生成均呈显著正相关(r=0.560,0.494,均P<0.05);ROC曲线结果显示,血清LncRNA SNHG11,HIF-1α单独诊断卵巢癌患者形成VM的曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.860,0.824,其敏感度分别为80.4%,75.6%,特异度分别为58.9%,51.9%;两者联合诊断卵巢癌患者形成VM的AUC为0.941,其敏感度、特异度分别为92.2%,79.9%。结论LncRNA SNHG11和HIF-1α的异常表达与卵巢癌患者形成VM密切相关,两者可作为潜在判断VM的生物学指标。

血管生成拟态、Cripto-1在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义

目的筛查预测非小细胞肺癌(NSCLC)侵袭、转移及预后的生物因子。方法采用免疫组织化学方法检测145例NSCLC患者血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)的形成和Cripto-1的表达水平。结果Cripto-1在NSCLC中的表达率(56.6%)显著高于正常组织(36.6%)(P<0.001)。37.2%的NSCLC组织中存在VM,但在正常肺组织中未发现VM(P<0.05)。Cripto-1表达与VM形成显著相关(P<0.001)。高水平的Cripto-1和VM形成会导致总生存期(overall survival,OS)降低(P<0.001)。多因素分析表明,Cripto-1上调、VM形成、淋巴结转移和TNM分期是反映NSCLC预后的重要指标。结论Cripto-1和VM水平在NSCLC中显著升高,可能作为免疫标志物来预测该肿瘤的侵袭、转移和预后。

IDH突变促进胶质瘤血管生成拟态形成的研究

目的:观察IDH1突变胶质瘤血管生成拟态的形成特点。方法:实验分为:突变IDH表达组(dox+组),野生IDH表达组(dox−组)。Western blot检测dox+组胶质瘤U87细胞内突变IDH1蛋白表达,HE染色观察两组细胞形态变化;管形成实验检测血管生成拟态形成;6周龄裸鼠皮下注射建立移植瘤模型,观察胶质瘤裸鼠移植瘤中的血管生成拟态,通过HE染色、免疫组化检测mutIDH1、CD34表达,高碘酸雪夫(PAS)染色观察基底膜样物形成。结果:胶质瘤U87细胞形态饱满,血管生成拟态显示,dox+组细胞管形成数量明显多于对照组(*P < 0.05);dox+组胶质瘤U87细胞内表达mutIDH1蛋白。成功构建IDH1突变(mutIDH1)人胶质瘤U87细胞移植瘤模型。HE染色显示瘤细胞生长密集,可见多量血管增生。免疫组化显示,dox+组mutIDH1表达明显,dox−组不表达mutIDH1蛋白;CD34的表达在dox−组明显多于dox+组;PAS染色发现,dox+组较dox−有更多血管生成拟态形成。结论:IDH1突变促进血管生成拟态形成。

基于非小细胞肺癌双能CT表现及影像组学列线图模型预测其血管生成拟态

目的基于非小细胞肺癌(NSCLC)双能CT(DECT)表现及影像组学构建联合列线图模型,分析其预测NSCLC血管生成拟态(VM)的价值。方法回顾性分析137例经手术病理证实的单发NSCLC患者,以7∶3比例将其分为训练集[n=95,37例VM(+)、58例VM(-)]和验证集[n=42,19例VM(+)、23例VM(-)]。基于肺窗CT提取及筛选最优影像组学特征,计算影像组学评分。以单因素分析及多因素logistic回归分析筛选NSCLC表达VM的独立预测因素,分别以之构建临床、能谱及影像组学模型;基于独立预测因素构建联合列线图模型。采用受试者工作特征曲线评估各模型预测NSCLC VM的效能,以校准曲线分析模型的拟合度,以决策曲线分析评估模型的临床获益。结果最终筛选出6个最优影像组学特征。病灶最大径、毛刺征、CT_(140 keV)及影像组学评分为NSCLC VM的独立预测因素(OR=2.25、9.69、0.99、-14.44,P均<0.05)。临床、能谱及影像组学模型预测验证集NSCLC VM的曲线下面积(AUC)分别为0.83、0.85、0.87,均低于联合列线图模型(AUC=0.95,Z=2.14、2.10、2.07,P均<0.05)。联合列线图模型预测结果与实际结果的一致性较好,且其临床获益较高。结论基于DECT及影像组学构建的联合列线图模型能可有效预测NSCLC VM。

高密度肿瘤相关中性粒细胞浸润与血管生成拟态是乳腺癌预后不良的危险因素

目的观察乳腺癌组织中肿瘤相关中性粒细胞(tumor-associated neutrophils,TANs)的浸润和血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)现象,探讨其相互关系及临床病理意义。方法收集224例行根治切除术的乳腺非特殊型浸润性癌患者的临床病理资料,采用CD34免疫组织化学/高碘酸-雪夫双重染色检测VM的形成,CD66b免疫组织化学标记TANs,分析两者的关系及其与乳腺癌临床病理特征的关系。结果在60名(26.8%)患者中观察到VM现象。VM与乳腺癌组织学分级、肿瘤大小、TNM分期及HER-2过表达呈正相关,与ER和PR表达呈负相关。乳腺癌组织中性粒细胞浸润密度为0~29.0/HFP,中位数为1.2/HFP。TANs浸润密度与组织学分级和Ki-67指数呈正相关,与ER和PR表达呈负相关。VM与高密度TANs呈正相关。VM和高密度TANs与无进展生存(progression-free survival,PFS)呈负相关。多因素分析显示VM是较差的PFS独立危险因素。结论乳腺癌组织中VM现象和高密度TANs浸润关系密切,可作为预测乳腺癌进展和预后的潜在指标。

食管鳞癌患者血清中lncRNA-TUSC7、lncRNA-UCA1表达与血管生成拟态的关系及意义

目的探讨食管鳞状细胞癌(ESCC)患者血清长链非编码肿瘤抑制候选基因-7(lncRNA-TUSC7)、长链非编码尿路上皮癌相关基因1(lncRNA-UCA1)表达与血管生成拟态(VM)的关系及意义。方法回顾性分析2020年3月至2021年12月经该院确诊为ESCC的133例患者,按照是否形成VM将其分为有VM组76例及无VM组57例,实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测两组患者血清lncRNA-TUSC7、lncRNA-UCA1表达;分析lncRNA-TUSC7、lncRNA-UCA1表达与ESCC患者不同临床参数之间的关系;Spearman相关系数分析lncRNA-TUSC7、lncRNA-UCA1表达与VM生成之间的相关性;受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析联合lncRNA-TUSC7、lncRNA-UCA1检测对ESCC患者形成VM的预测效能。结果相比于无VM组,VM组患者lncRNA-TUSC7表达显著降低,而lncRNA-UCA1表达显著增高,差异有统计学意义(P<0.05);lncRNA-TUSC7与ESCC患者肿瘤分化程度、临床分期、淋巴结转移情况及是否发生VM具有密切联系(均P<0.05);lncRNA-UCA1与ESCC患者肿瘤分化程度、临床分期、淋巴结转移情况、浸润程度及是否发生VM具有密切联系(均P<0.05);Spearman相关系数显示,lncRNA-TUSC7与VM生成之间呈负相关(r=-0.782,P<0.001),而lncRNA-UCA1与VM生成之间呈正相关(r=0.766,P<0.001)。ROC曲线显示lncRNA-TUSC7、lncRNA-UCA1联合检测的曲线下面积显著高于单一检测(Z=2.428,P<0.05),灵敏度为89.40%,特异度为83.20%,对ESCC发生VM具有较高的诊断效能。结论通过定时监测ESCC患者lncRNA-TUSC7、lncRNA-UCA1表达能够对其是否合并VM做出有效评估,并对及时采取治疗措施预防奠定了可信的生物标志物基础,同时也为日后靶向治疗ESCC合并VM患者提供了可能的治疗靶点,具有较为深远的临床意义。

乳腺癌中KAI1与血管生成拟态的临床意义探讨

目的:了解乳腺癌组织中KAI1的表达情况和血管生成拟态(VM)的情况,探讨两者间的关系及其临床意义。方法:存档乳腺癌石蜡标本94例,对照为乳腺良性增生性病变20例。采用免疫组织化学方法检测KAI1的失表达情况及特殊组织化学法染色检测VM。分析两者之间及其与临床病理参数间的关系。结果:乳腺癌组织中KAI1的表达率远低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),KAI1的表达与淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05);乳腺癌组织中VM的阳性率为39.29%,对照组未检出VM,两组间差异有统计学意义(P<0.05);VM的表达与各临床病理指标间均无相关性;但KAI1蛋白的表达与乳腺癌组织中VM呈负相关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,KAI1阳性表达组的病例生存率高(P<0.05);而VM检出阳性组生存率低(P<0.05)。结论:KAI1表达可能促进VM发生,进而与乳腺癌的生长和转移有关,在乳腺癌中检测KAI1和VM可能对肿瘤的进展和预后判断有重要意义。

IGF1R/PI3K/Akt通路及其调控对非小细胞肺癌血管生成拟态形成影响的研究

目的为非小细胞肺癌(NSCLC)的治疗探索一个潜在的分子靶标.方法通过qPCR、Western blot、免疫组化检测NSCLC组织和癌旁组织KLF16、IGF1R表达情况;通过抑制IGF1R/PI3K/Akt通路活化,检测相关靶标MMP2和MMP9的表达;通过IGF1R/PI3K/Akt通路抑制剂LY294002干预血管生成拟态(VM)形成.结果与癌旁组织相比,免疫组化、Western blot和qPCR提示,KLF16在NSCLC组织中表达降低,且随着NSCLC级别提高,表达量递减.NSCLC组织中存在明显IGF1R阳性,且IGF1R阳性表达量随着NSCLC级别增高而递增.同时,Western blot和Matrigel三维细胞培养结果表明,随着IGF1R/PI3K/Akt通路抑制剂浓度增加,IGF1R/PI3K/Akt通路相关蛋白质、MMP2、MMP9表达水平也随之降低,肿瘤VM形成随之减少.结论NSCLC VM的形成与IGF1R/PI3K/Akt信号通路有关,KLF16在NSCLC中的表达趋势与IGF1R表达相反,两者之间是否存在调控关系需进一步验证.