rAAV-PR39-ADM防治大鼠脑缺血/再灌注损伤的研究

目的探讨重组腺相关病毒协同表达双基因:抗菌肽(PR39)和肾上腺髓质素(adrenomedullin,ADM),即r AAVPR39-ADM对大鼠脑缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤的治疗作用。方法离体实验:人脐静脉内皮细胞培养,行血管成型实验。在体实验:建立大鼠脑I/R模型(脑缺血2 h后再灌注)。SD大鼠随机分为:Sham组、生理盐水组(I/R+NS)、空病毒组(I/R+AAV)及治疗组(I/R+r AAV-PR39-ADM组)。I/R组,再灌注24 h后股静脉分别给予等量生理盐水、空病毒及r AAV-PR39-ADM。术后1、2、3、4周,行头颅MRI、神经功能缺损评分、TTC染色及HE染色等方法评价r AAV-PR39-ADM对脑I/R损伤的疗效。结果离体实验中,r AAV-PR39-ADM同对照及空病毒组相比,有明显的促血管成型作用。在体实验中,头颅MRI检查证实模型制备成功。与Sham组相比,各时间点I/R组的神经功能缺损评分及脑组织梗塞的体积均明显增高(P<0.01),I/R组术后即刻神经功能缺损评分差异无统计学意义(P>0.05)。与生理盐水组及空病毒组相比,治疗组各时间点神经功能缺损评分及梗塞体积均明显减小(P<0.01),空病毒组与生理盐水组比较,梗塞面积及神经功能缺损评分差异无统计学意义(P>0.05)。HE染色显示,治疗组的神经元细胞数目与生理盐水组和空病毒组相比明显丰富,缺血区新生血管明显增多。结论 r AAV-PR39-ADM可能通过促进血管新生,改善脑I/R后局部供血及侧枝循环,保护神经元,促进血管再生,减轻I/R脑损伤。

共载体AAV-PR39-ADM治疗缺血性心脏病

目的:探讨共载体AAV-PR39-ADM分泌表达血管生成肽(PR39)与血管扩张肽(ADM)对SD大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用。方法:选健康成年雄性SD大鼠36只,体重平均为280 g±20 g,随机分为假手术组(SO)、治疗组(TR)与对照组(I/R),每组各12只。治疗组大鼠心肌注射共载体AAV-PR39-ADM感染心肌7天后行B超检查,测量记录左室壁厚度及射血分数(EF%),左室收缩末压(LVSP),左室内压最大上升下降速率(±dp/dt max)评价作为心脏功能指标。对照组建立缺血再灌注损伤模型,假手术组只穿线不结扎且两组行相同检测。速取处死大鼠心肌行masson染色测量心肌梗死面积。结果:治疗组明显高于对照组,其射血分数、左室内收缩末压、最大上升速率,最大下降速率、梗死面积分别为:EF%(50.4±6.3),(29.8±10.5),P<0.05;LVSP:(116±4.2),(101±3.7),P<0.05;+dp/dt max:(2859±365),(2137±191),P<0.05;-dp/dtmax:(2186±107),(1886±124),P<0.05;IS%:(29.3±4.6),(24.6±2.2),P<0.05。结论:共载体AAV-PR39-ADM能够显著恢复心肌缺血损伤引起的左室内压下降,提高心肌收缩能力,提高射血分数并明显缩小心肌梗死范围。