伊曲康唑对人血管瘤内皮细胞增殖和凋亡的体外研究

目的 检测不同浓度的伊曲康唑对人血管瘤内皮细胞凋亡的影响,为伊曲康唑治疗血管瘤的机制研究提供依据。方法 体外培养的人血管瘤内皮细胞(HemECs)经不同浓度伊曲康唑干预不同时间后,倒置显微镜观察HemECs形态学变化;CCK-8法检测HemECs细胞抑制率;流式细胞术检测伊曲康唑诱导HemECs的凋亡率。结果 当伊曲康唑浓度≥30μg/mL时,作用效果逐渐显著,浓度与细胞凋亡呈正相关性,各浓度的抑制率和空白组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。伊曲康唑干预时间与对HemECs细胞增殖的抑制和凋亡呈正相关。结论伊曲康唑能抑制HemECs增值有抑制作用,并促进其凋亡。浓度越高,干预时间越长对HemECs的细胞增殖的抑制作用和细胞凋亡的促进作用会越显著。浓度≥30μg/mL时,效果会逐渐显著,与细胞凋亡和抑制细胞增殖呈正相关性,24 h为较为适宜的干预时间。

藁本内酯通过降低VEGF的水平抑制人血管瘤内皮细胞的血管新生和上皮-间充质转化

目的:探讨藁本内酯对人血管瘤内皮细胞(HemECs)的影响,并分析其机制。方法:CCK-8法检测不同浓度的藁本内酯对HemECs活力的影响;设立对照组及10、25和50μmol/L的藁本内酯处理组,EdU染色检测HemECs增殖的变化,微管形成实验检测HemECs血管新生的变化,Western blot法检测HemECs中血管内皮生长因子(VEGF)及上皮-间充质转化(EMT)相关标志物表达的变化。结果:0.1~50μmol/L的藁本内酯处理对细胞活力的影响并不明显。与对照组相比,25和50μmol/L藁本内酯处理组的Edu阳性细胞明显减少(P<0.05),微管样结构的数量明显减少(P<0.05),VEGF蛋白表达显著下调(P<0.05),E-cadherin蛋白表达显著上调(P<0.05),vimentin和β-catenin蛋白表达显著下调(P<0.05)。与对照组相比,VEGF转染组的VEGF和vimentin蛋白表达显著上调(P<0.05),E-cadherin蛋白表达显著下调(P<0.05);与VEGF转染组相比,50μmol/L藁本内酯处理VEGF转染细胞后,VEGF和vimentin蛋白表达显著下调(P<0.05),E-cadherin的蛋白表白显著上调(P<0.05)。结论:藁本内酯可抑制HemECs的增殖,还可通过降低VEGF的水平,抑制HemECs的血管新生与EMT过程。

平阳霉素诱导人血管瘤内皮细胞凋亡过程中PARP-1和Cyt-C的表达及意义

目的:探讨平阳霉素诱导人血管瘤内皮细胞凋亡过程中PARP-1、Cyt-C的表达及可能机制。方法:在体外培养人血管瘤内皮细胞,设立两组:A组为平阳霉素组,其中加入平阳霉素(200μg/ml),诱导血管瘤内皮细胞凋亡,B组为空白对照组。对两组血管瘤内皮细胞通过倒置显微镜、电镜观察其形态学变化,采用流式细胞仪检测平阳霉素诱导血管瘤内皮细胞的凋亡率。利用基因芯片技术筛选出差异表达的基因,从中选定PARP-1及Cyt-C表达基因,对其进行RT-PCR验证。结果:平阳霉素(200μg/ml)可以诱导体外培养的人血管瘤内皮细胞凋亡,加药24h后,在倒置显微镜和电镜下观察到明显的细胞凋亡的形态学改变,流式细胞仪检测凋亡率可达13.11%。空白对照组血管瘤内皮细胞倒置显微镜下观察无明显形态学变化,流式细胞仪检测凋亡率为3.56%。利用基因芯片技术筛选出两组差异基因4752个,其中2543个上调,2209个下调。应用DAVI D软件对鉴定出来的差异基因进行生物信息学分析,从中选出与线粒体凋亡途径直接相关的蛋白表达基因:PARP-1、Cyt-C。对其进行RT-PCR检测得到的CT值显示:平阳霉素药物组相对于空白组PARP-1及Cyt-C蛋白基因呈高表达状态。结论:平阳霉素在体外可以通过多种途径诱导血管瘤内皮细胞发生凋亡,其中PARP-1及Cyt-C参与了线粒体途径调控的凋亡。

肿瘤抑素影响血管瘤内皮细胞凋亡的相关机制分析

目的研究肿瘤抑素对血管瘤内皮细胞的增殖与凋亡过程的调节作用,为临床婴幼儿血管瘤的治疗提供参考。方法血管瘤内皮细胞培养后随机分为5组:对照组、PD98059组、肿瘤抑制素低剂量、中剂量和高剂量组。除对照组给予生理盐水外,其余各组给予PD98059(10μM)处理2 h,肿瘤抑制素低剂量、中剂量和高剂量组分别给予1μM、10μM、100μM的肿瘤抑制素处理2 h。免疫印迹法或荧光定量法分析各组细胞凋亡相关蛋白Caspase3/9、ERK信号通路关键蛋白ERK1/2和MEK及氧化应激蛋白NOX4的表达,DHE染色法分析各组细胞的氧化应激状态。结果与对照组相比,PD98059组血管瘤内皮细胞内ROS水平明显降低、细胞凋亡蛋白Caspase3/9的表达明显升高;同时ERK信号通路关键蛋白的表达明显增强,而肿瘤抑制素低剂量、中剂量和高剂量组作用与PD98059作用一致,且具有剂量依从性。结论肿瘤抑制素通过激活氧化应激状态、ERK信号及抑制细胞凋亡蛋白通过发挥对血管瘤内皮细胞增殖的抑制作用。

三种阳离子转染试剂对小鼠血管瘤内皮细胞转染效率及细胞毒性的影响

目的从三种常用的阳离子转染试剂中筛选出对小鼠血管瘤内皮细胞(EOMA)有较高转染效率和较低细胞毒性的转染试剂。方法以含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的真核表达载体pEGFP-N1为报告基因,以阳离子脂质体LipofectamineTM2000、LipofectamineTM PLUS和阳离子聚合物JetPEITM为转染试剂,按照转染试剂盒的说明优化其转染条件,分别转染EOMA细胞,24h后在荧光显微镜下计数阳性细胞率、MTT法检测各转染条件下对EOMA的细胞毒性。结果经优化转染条件,LipofectamineTMPLUS和JetPEITM转染的细胞中阳性细胞的最高比例分别为45%和47%,LipofectamineTM2000转染的细胞中荧光蛋白表达的比例最高(>80%),Lipofecta-mineTM2000试剂在最高转染效率的剂量下仍然保证了80%的细胞存活率。结论阳离子脂质体LipofectamineTM2000对小鼠EOMA细胞有较高的转染效率和较低的细胞毒作用。

免疫脂质体鱼肝油酸钠作用于人血管瘤内皮细胞的实验研究

目的:探讨免疫脂质体鱼肝油酸钠的制备方法及其对人增殖期血管瘤内皮细胞的作用。方法:以N-琥珀酰-3-2-联硫基吡啶-丙酸盐((N-Succinimidyl-3-(2-pyridyldithio))propionate,SPDP)作为耦联剂,将针对血管内皮生长因子受体2(VEGFR2/KDR)的单克隆抗体耦联到脂质体表面,运用吹膜挤压法制备免疫脂质体鱼肝油酸钠,通过激光共聚焦显微镜和倒置显微镜观察、Giemsa染色、透射电镜观察、MTT以及流式细胞仪检测,探讨其对人增殖期血管瘤内皮细胞的作用。结果:制备的免疫脂质体鱼肝油酸钠平均粒径为122.9nm,具有良好的稳定性;与普通脂质体制剂相比,其与人血管瘤内皮细胞结合能力更强、更早,促凋亡作用更为明显,而对人血管瘤内皮细胞的毒性作用与普通脂质体制剂类似,作用较为缓和。结论:成功制备免疫脂质体鱼肝油酸钠,其在体外具有良好的特异性主动靶向能力,可以诱导人增殖期血管瘤内皮细胞发生较为普遍的凋亡。

miR-378-3p靶向调控EZH2表达对血管瘤内皮细胞侵袭和迁移能力的影响

目的:研究miR-378-3p靶向调控果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)表达影响血管瘤内皮细胞侵袭和迁移能力的机制。方法:分离培养人血管瘤内皮细胞,分成空白对照组、miR-NC组(转染模拟物阴性对照)、miR-378-3p组(转染miR-378-3p模拟物)3组,或miR-378-3p+pcDNA3.1组(共转染pcDNA3.1、miR-378-3p模拟物)、miR-378-3p+pcDNA3.1-EZH2组(共转染pcDNA3.1-EZH2、miR-378-3p模拟物)2组,MTT法测定增殖活性,克隆形成实验检测克隆形成数,Transwell小室检测侵袭细胞数和迁移细胞数。生物信息学数据库预测miR-378-3p与EZH2有互补结合位点,双荧光素酶报告系统鉴定靶向关系。结果:miR-378-3p组与空白对照组、miR-NC组相比,细胞增殖活性、克隆形成数、侵袭细胞数和迁移细胞数降低(P<0.05)。miR-378-3p+pcDNA3.1-EZH2组与miR-378-3p+pcDNA3.1组比较,细胞增殖活性、克隆形成数、侵袭细胞数和迁移细胞数升高(P<0.05)。双荧光素酶报告系统鉴定结果证实miR-378-3p和EZH2存在靶向关系。结论:miR-378-3p靶向下调EZH2表达可抑制血管瘤内皮细胞的增殖、侵袭和迁移能力。

利用RNAi技术下调VEGF表达对血管瘤内皮细胞的影响

目的:培养人血管瘤内皮细胞(HemECs),利用RNA干扰技术下调HemECs中VEGF的表达,观察其对血管瘤内皮细胞的影响。方法:利用组织块法培养HemECs,鉴定、筛选和纯化后,分为A、B、C三组,分别为转染组、空脂质体组和对照组。利用脂质体法将pGCsi U6/Neo/dsRED-VEGF真核表达质粒转染到内皮细胞中。通过荧光显微镜大体观察转染效率和细胞生长情况、ELISA法检测细胞分泌VEGF蛋白和MTT法检测质粒转染对HemECs的影响。结果:转染组第五天转染细胞达到总细胞80%以上,但是细胞凋亡逐渐增加。第七天细胞稀少,漂浮死细胞增多。转染阳性细胞减少,细胞整体状态差。转染组培养上清中VEGF蛋白浓度在转染的第1、3、5、7天分别为141.3±7.82、92.34±5.71、68.07±5.95及40.65±6.71pg/ml。MTT法检测各组490nm的OD值在1、3、5、7天均有统计学差异(P<0.05)。结论:转染后的细胞活性降低,通过对其分泌的VEGF蛋白的测量发现,转染组VEGF蛋白明显下降,同时,细胞活力受到影响,漂浮的死细胞增多。这些都可以说明,VEGF在血管瘤内皮细胞生长、增殖之中起着非常重要的作用,这也为我们治疗血管瘤提供一个新的靶点。

尿素免疫脂质体对人血管瘤内皮细胞影响的实验研究

观察作者自制的尿素免疫脂质体对体外培养的人血管瘤内皮细胞(HVEC)的作用和影响。通过尿素免疫脂质体对体外培养的HVEC形态学影响的观察、细胞毒测定、和对群体倍增时间的影响研究。结果表明:加入尿素免疫脂质体后,HVEC细胞状态差,细胞有皱缩且随浓度的增高抑制明显增强,大于400mg/ml,细胞即刻固定,死亡;随着尿素免疫脂质体终浓度的逐渐升高和作用时间的延长,HVEC细胞存活率逐渐降低,与对照组相比有显著性差异,呈明显的剂量和时间依赖性。HVEC细胞存活率与尿素免疫脂质体终浓度呈显著负相关,相关系数为-0.97315,(P<0.01);2.6%尿素组的细胞杀伤率为27.94%。2.6%尿素脂质体组的细胞杀伤率为84.01%。2.6%尿素免疫脂质体组的细胞杀伤率为99.91%。说明尿素免疫脂质体对体外培养的HVEC具有明显的抑制和杀伤作用。

消痔灵注射液促进血管瘤内皮细胞凋亡作用的研究

目的:检测不同浓度的消痔灵注射液(Hemorrhoid Injection)对血管瘤内皮细胞(hemangioma endothelial cells)凋亡的影响。方法:设立对照组和不同浓度的消痔灵注射液3个实验组,采用细胞培养MTT法流式细胞术等方法检测不同浓度消痔灵注射液对血管瘤内皮细胞凋亡的作用的影响。结果:对照组及实验组HECS均呈现生长状态,随着药物浓度的增加及时间的延长,细胞形态呈现凋亡改变。消痔灵注射液对血管瘤内皮细胞凋亡的干预与给药剂量及处理时间呈正相关,其能使血管瘤内皮细胞停滞在G0/G1期,从而使血管瘤内皮细胞的死亡率显著增加(P<0.05)。流式分析结果表明给药后血管瘤内皮细胞凋亡率显著增加,差异显著(P<0.05)。结论:消痔灵注射液促进血管瘤内皮细胞凋亡,其凋亡率与药物浓度密切相关。

普萘洛尔对血管瘤内皮细胞的抑制作用

目的:探讨不同浓度普萘洛尔在不同时间段内对血管瘤内皮细胞的抑制作用。方法:收集手术切除的新鲜婴幼儿血管瘤标本,采用组织块法培养内皮细胞,免疫荧光法对培养的细胞进行鉴定;通过绘制生长曲线和流式细胞仪检测普萘洛尔(propranolol)对血管瘤内皮细胞增殖影响。结果:伴随普诺洛尔浓度增大(0μg/ml,20μg/ml,40μg/ml,60μg/ml,80μg/ml,100μg/ml,120μg/ml)及作用时间的增加(24h,48h,72h)对血管瘤内皮细胞的抑制作用明显增强;流式细胞仪测定不同浓度普萘洛尔作用不同时段后血管瘤内皮细胞凋亡明显。结论:普萘洛尔能抑制血管瘤内皮细胞的增殖并促进其凋亡,抑制血管瘤的生长。

柠檬苦素调控Tiam1基因表达影响人体血管瘤内皮细胞VEGF/VEGFR2通路及诱导其凋亡的机制研究

目的:研究柠檬苦素Toonaciliatin A对血管瘤内皮细胞(HemEC)增殖、凋亡的影响及潜在作用机制。方法:胶原蛋白酶A分离HemEC细胞,MTT法测定不同浓度Toonaciliatin A对HemEC细胞生存率的影响,流式细胞术测定HemEC细胞凋亡率,Western blot检测蛋白表达,qRT-PCR检测RNA的表达。结果:Toonaciliatin A能够抑制HemEC增殖,促进HemEC细胞凋亡;Toonaciliatin A抑制Tiam1蛋白表达,过表达Tiam1逆转了Toonaciliatin A对HemEC的抑制作用;Toonaciliatin A能够抑制VEGF和VEGFR2蛋白表达,过表达Tiam1逆转了Toonaciliatin A对VEGF和VEGFR2蛋白表达的抑制作用。结论:柠檬苦素类似物Toonaciliatin A通过靶向Tiam1基因抑制VEGF/VEGFR2通路抑制HemEC细胞增殖,促进细胞凋亡。

siRNA沉默Rac1表达促进增生期血管瘤内皮细胞内质网应激和抑制细胞增殖的作用与机制研究

目的:研究慢病毒介导Rac1沉默对增生期血管瘤内皮细胞内质网应激及Caspase-12活化水平的影响。方法:用Rac1 siRNA慢病毒载体和阴性对照慢病毒载体感染人增生期血管瘤内皮细胞,用Realtime PCR和Western blot检测细胞中Rac1表达变化。MTT法测定细胞增殖能力,PI单染法检测细胞周期变化,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡变化,Western blot检测细胞中周期蛋白p21、细胞周期蛋白D1(Cy-clin D1)和凋亡蛋白活化的Caspase-3 (C-Caspase-3)表达水平,同时检测细胞中内质网应激相关蛋白CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、活化的Caspase-12(C-Caspase-12)表达水平。结果:Rac1 si R-NA慢病毒载体感染后的血管瘤内皮细胞中Rac1表达水平明显降低,阴性对照慢病毒对细胞中Rac1表达水平没有影响。沉默Rac1后的增生期血管瘤内皮细胞增殖能力下降,细胞G_0/G_1比例升高,p21蛋白水平升高,Cyclin D1蛋白水平下降,凋亡率升高,C-Caspase-3蛋白水平升高,CHOP、C-Caspase-12蛋白水平也升高,与没有感染慢病毒的细胞比较,差异有统计学意义(P <0.05)。阴性对照慢病毒感染对血管瘤内皮细胞增殖、凋亡、细胞周期及细胞中p21、Cyclin D1、C-Caspase-3、CHOP、C-Caspase-12蛋白水平没有影响。结论:慢病毒介导Rac1沉默诱导增生期血管瘤内皮细胞凋亡,阻滞细胞周期,诱导内质网应激发生,诱导Caspase-12活化。

LINC00152通过调节VEGFR2的表达对血管瘤内皮细胞生长、增殖、迁移和侵袭的影响

目的研究长链非编码RNA(lncRNA)LINC00152通过调节血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)对血管瘤内皮细胞(HemEC)在体外生长、增殖、迁移和侵袭的影响。方法采用荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRTPCR)检测不同组织中LINC00152的表达情况,采用EdU技术检测细胞的增殖情况,采用CCK-8法检测细胞活力,采用Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力,应用生物信息学软件预测LINC00152作用靶点,通过双荧光素报告基因实验验证LINC00152与miRNA-200c-5p和miRNA-195-5p的相互作用,通过qRT-PCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测VEGFR2 mRNA和蛋白的表达水平,通过SKLB1002和miRNA-200c-5p agomir及miRNA-195-5p agomir处理后,采用同样的方法检测LINC00152对HemEC增殖、迁移和侵袭的影响。结果qRT-PCR检测结果显示,LINC00152在血管瘤增生期组织和血管瘤退化期组织中的相对表达量均明显高于癌旁正常皮肤组织(P﹤0.01)。与sh-NC组相比,sh-Linc1组和sh-Linc2组细胞中LINC00152的相对表达量均降低(P﹤0.05)。与OE-NC组相比,OE-Linc1组和OE-Linc2组细胞中LINC00152的相对表达量均明显升高(P﹤0.01)。OE-Linc1组和OELinc2组细胞的侵袭和迁移比例均明显高于OE-NC组(P﹤0.01)。与癌旁正常皮肤组织相比,血管瘤增生期组织中VEGFR2 mRNA的表达水平明显升高(P﹤0.01)。与NC组相比,miRNA-200c-5p组、miRNA-195-5p组和SKLB1002组细胞在72 h时的光密度值均降低(P﹤0.05)。与NC组相比,miRNA-200c-5p组、miRNA-195-5p组和SKLB1002组HemEC在体外的迁移和侵袭能力均明显降低(P﹤0.01)。结论LINC00152可通过调节VEGFR2促进HemEC的增殖、迁移和侵袭,其作用机制可能与LINC00152竞争性结合miRNA,从而提高VEGFR2的表达水平有关。

小白菊内酯对小儿血管瘤内皮细胞凋亡的影响实验研究

目的:探究小白菊内酯(PTL)对小儿血管瘤内皮细胞凋亡的影响。方法:MTS法筛选PTL促进小儿血管瘤内皮细胞凋亡的适宜浓度,细胞凋亡流式细胞法检测PTL对小儿血管瘤内皮细胞凋亡的影响,实时荧光定量PCR (qPCR)和Western blot法检测PTL对小儿血管瘤内皮细胞凋亡相关蛋白表达的影响。结果:20、40μmol/L PTL可显著降低小儿血管瘤内皮细胞活性(均P<0.01),20、40μmol/L PTL可显著促进小儿血管瘤内皮细胞凋亡;选择20μmol/L PTL用于后续实验,Tunel实验结果表明PTL显著促进小儿血管瘤内皮细胞凋亡(P<0.01),qPCR和Western blot表明PTL显著促进小儿血管瘤内皮细胞Bax和Cleaved-Caspase 3蛋白表达,抑制Bcl-2 mRNA和蛋白表达(均P<0.01)。结论:PTL通过抑制Bcl-2,促进Bax和Cleaved-Caspase 3等凋亡相关蛋白表达进而诱导小儿血管瘤内皮细胞凋亡。

姜黄素对血管瘤内皮细胞凋亡的诱导作用及对Bcl-2和Bax蛋白表达的调控

目的:研究姜黄素对血管瘤内皮细胞凋亡的影响。方法:在培养液体系中加入不同浓度的姜黄素进行不同时间长度的诱导,以MTT法检测细胞增殖,流式细胞术,TUNEL法检测细胞凋亡情况,Western blotting分析Bcl-2和Caspase-9蛋白表达。结果:1～50μmol/姜黄素均能抑制血管瘤内皮细胞增殖。5、10、50μmol/L姜黄素作用细胞4天后的凋亡率分别为(11.98±2.13)%、(17.96±1.25)%、(26.86±2.08)%,与对照组(4.03±1.16)%比较差异均有显著性意义(均P<0.05)。姜黄素浓度越高,诱导凋亡作用越明显,呈明显的剂量依赖效应。50μmol/L姜黄素作用细胞1、2、3、4天后的凋亡率分别为(6.93±1.06)%、(10.15±1.35)%、(17.21±2.06)%、(26.83±2.02)%,与对照组(3.98±1.03)%比较差异均有显著性意义(均P<0.05)。姜黄素作用时间越长,抑制血管瘤内皮细胞增殖作用和诱导凋亡的作用也越明显,呈明显的时间依赖效应。同时姜黄素浓度越大、作用时间越长,血管瘤内皮细胞细胞中Bcl-2蛋白的表达明显减少,而Caspase-9蛋白的表达明显增加。结论:姜黄素能够抑制血管瘤内皮细胞增殖、诱导血管瘤内皮细胞发生凋亡,并呈时间和剂量依赖效应,可能是通过下调凋亡抑制基因bcl-2表达,上调Caspase-9表达而实现的。

姜黄素对婴儿血管瘤内皮细胞增殖、凋亡的影响及机制

目的:探讨姜黄素对婴儿血管瘤内皮细胞(HemECs)增殖、凋亡的影响及机制。方法:分离培养HemECs,给予不同浓度姜黄素,CCK-8法检测HemECs增殖,台盼蓝法检测HemECs死亡率;流式细胞仪检测细胞凋亡;RT-qPCR法检测HIF-1αmRNA表达,电镜观察细胞凋亡;免疫荧光检测HIF-1α和VEGF表达,Western blot检测MCL-1、cl-Caspase-3和cl-PARP蛋白表达。结果:48 h后不同浓度姜黄素均可抑制HemECs增殖,且呈剂量依赖性。对照组和姜黄素组HemECs凋亡率差异有统计学意义(P<0.05);姜黄素处理后HemECs超微结构出现核碎裂、染色质浓缩以及核膜消失等特征;姜黄素处理48 h后,HIF-1α和VEGF蛋白表达下调,HIF-1αmRNA表达下调(P<0.05);姜黄素组MCL-1蛋白表达水平明显低于对照组,而cl-Caspase-3和cl-PARP蛋白表达升高。结论:姜黄素可抑制HemECs增殖,诱导其凋亡,且呈剂量依赖性,其机制可能是下调MCL-1和HIF-1α表达,上调cl-Caspase-3和cl-PARP表达。

上调miR-378a-3p对血管瘤内皮细胞生长和侵袭能力的影响

目的探讨微小RNA-378a-3p(miR-378a-3p)对血管瘤内皮细胞(HemECs)增殖、侵袭、迁移的影响以及可能的作用机制。方法HemECs细胞随机分为对照组、miR-NC组及miR-378a-3p组;对照组为常规培养HemECs细胞,miR-NC组和miR-378a-3p组HemECs细胞分别在脂质体(Lipofectamine RNAIMAX)的介导下转染阴性对照以及miR-378a-3p模拟物。荧光定量PCR(qPCR)检测miR-378a-3p的表达量,细胞计数(CCK-8)检测各组细胞的增殖,Transwell实验检测细胞的侵袭、迁移;在线数据库TargetScan预测以及双荧光素酶报告基因验证miR-378a-3p与驱动蛋白超家族2A(KIF2A)的靶向关系。结果与对照组相比,miR-378a-3p模拟物能明显上调HemECs细胞中miR-378a-3p的表达量(P<0.05);上调miR-378a-3p的表达量抑制HemECs细胞增殖,降低其侵袭、迁移的能力(P<0.05);KIF2A是miR-378a-3p下游靶基因之一。结论miR-378a-3p可能通过靶向KIF2A抑制HemECs细胞的增殖、侵袭及迁移。

穗花杉双黄酮抑制小儿血管瘤内皮细胞体外增殖实验研究

目的:探究穗花杉双黄酮(AF)对小儿血管瘤内皮细胞体外增殖的影响。方法:MTS法筛选AF抑制小儿血管瘤内皮细胞体外增殖的适宜浓度,流式细胞法检测AF对小儿血管瘤内皮细胞细胞周期G 1期和S期分布的影响,荧光定量PCR和Western blot法检测AF对小儿血管瘤内皮细胞增殖相关蛋白表达的影响。结果:75、125μmol/L AF显著降低小儿血管瘤内皮细胞活性(P<0.05),75μmol/L AF用于后续细胞周期实验、荧光定量PCR和Western blot实验,结果显示75μmol/L AF抑制小儿血管瘤内皮细胞从G 1期进入S期(P<0.05),但对G 2其细胞分布无明显作用,与对照组相比较,AF显著抑制小儿血管瘤内皮细胞β-catenin和Cyclin D1 mRNA和蛋白表达,促进p21 mRNA和蛋白表达(均P<0.05)。结论:AF通过抑制β-catenin和Cyclin D1,促进p21等增殖相关蛋白表达进而抑制小儿血管瘤内皮细胞体外增殖。

紫草素对血管瘤内皮细胞增殖、凋亡、迁移及成血管的影响

目的:探讨紫草素(shikonin,SKN)对血管瘤内皮细胞(hemangioma endothelial cell,HemEC)增殖、凋亡、迁移和血管生成的影响。方法:采用CCK-8及EdU实验,检测SKN对HemEC细胞增殖的影响。流式细胞术检测SKN对HemEC细胞凋亡的影响,采用细胞划痕实验检测SKN对HemEC细胞迁移能力的影响,通过管腔形成实验检测SKN对HemEC细胞血管生成能力的影响。采用SPSS 22.0软件包对数据进行统计学分析。结果:SKN抑制HemEC细胞增殖(P<0.001),促进其凋亡(P<0.001),呈浓度依赖性。SKN抑制HemEC细胞迁移(P<0.01)和血管生成能力(P<0.001)。结论:SKN抑制HemEC细胞增殖、迁移和血管生成,并促进其凋亡。