广叶绣球菌乙醇提取物及蛋白体外抗氧化对血管紧张素Ⅰ转化酶活性的抑制作用

目的研究广叶绣球菌Sparassis latifolia的乙醇提取物及蛋白的体外抗氧化和对血管紧张素Ⅰ转换酶(ACE)活性的抑制作用。方法通过95%乙醇和0.15 mol/mL NaCl溶液制备广叶绣球菌乙醇提取物和蛋白,蛋白质定量(BCA)法测定广叶绣球菌蛋白的总蛋白含量;采用体外DPPH、·OH和ABTS+自由基清除法测定广叶绣球菌乙醇提取物及蛋白的体外抗氧化活性;高效液相色谱法测定广叶绣球菌乙醇提取物及蛋白对ACE活性的抑制率。结果广叶绣球菌的总蛋白含量为(43.56±2.24)%。当广叶绣球菌乙醇提取物和蛋白浓度均为4.0 mg/mL时,对DPPH、·OH、ABTS+自由基清除率均达到最高,其中广叶绣球菌乙醇提取物对DPPH、·OH、ABTS+自由基清除率分别为89.58%、60.44%、13.93%,广叶绣球菌蛋白对DPPH、·OH、ABTS+自由基清除率分别为25.69%、40.09%、13.60%。广叶绣球菌乙醇提取物和蛋白在4.0 mg/mL浓度时,对ACE活性的抑制率均达到最高,分别为24.82%、61.25%。结论广叶绣球菌乙醇提取物和蛋白均具有一定的体外抗氧化作用,并对ACE活性具有一定的抑制作用,其中广叶绣球菌乙醇提取物的体外抗氧化活性高于蛋白,广叶绣球菌蛋白对ACE活性的抑制作用强于乙醇提取物,这为广叶绣球菌的开发利用提供初步的实验参考。

中国人妊娠高血压综合征患者血管紧张素原及血管紧张素Ⅰ转化酶基因变异的研究

目的 探讨血管紧张素原 (AGT)和血管紧张素 I转化酶 (ACE)基因变异是否与妊娠高血压综合征 (简称妊高征 )有关联。方法 采用 ACE基因 PCR扩增片断长度多态性及 AGT基因限制性片断长度多态性方法 ,对成都地区 81例汉族妊高征及 2 0 5例正常孕妇对照进行了检测。结果 妊高征及正常孕妇等位基因的频率分别为 :AGT2 3 5T为 0 .85 6、0 .846 ;ACE D为 0 .333、0 .36 4。两组之间各等位基因频率分布无显著差异 ;与白种人相比 ,白种人 ACE D等位基因频率均高于中国人 (P<0 .0 0 1) ,而 AGT2 3 5T等位基因频率白种人 (0 .35 0～ 0 .482 )及其它非白种人 (0 .6 2 0～ 0 .739)均较中国人 (0 .846 )为低 (P<0 .0 1,P<0 .0 0 1)。结论 本研究未发现 AGT及 ACE基因的变异与中国人 (成都地区 )

血管紧张素Ⅰ转化酶基因多态性与妊娠期高血压关系的Meta分析

目的探讨血管紧张素Ⅰ转化酶基因多态性与妊娠期高血压易感性的关系。方法全面检索血管紧张素Ⅰ转化酶基因多态性与妊娠高血压关系的病例对照研究,剔除不符合标准的文献,并采用RevMan4.2软件对结果进行统计分析。结果共纳入14篇文献,累计病例985例,对照1065例。各研究间经齐性检验后未发现发表偏倚和明显异质性,ACE基因纯合子缺失型(DD)、ACE基因杂合子插入/缺失型(ID)和ACE基因纯合子插入型(II)合并OR值分别为1.90(95%CI:1.55～2.31)、1.31(95%CI:1.09～1.59)和0.39(95%CI:0.32～0.47)。结论妊娠期高血压疾病的发病与ACE基因I/D多态性有相关性。

血管紧张素Ⅰ转化酶基因多态和2型糖尿病视网膜病变相关性研究

目的 :研究血管紧张素Ⅰ转化酶 (ACE)基因插入 /缺失 (I/D)多态和中国汉族 2型糖尿病患者视网膜病变 (DR)的相关性。方法 :用PCR技术检测 10 2例 2型糖尿病患者ACE基因I/D多态基因型。结果 :DR组与无DR组、病程 <5年合并DR者 (n =10 )与病程 >5年无DR者 (n =19)相比 ,D型等位基因和DD基因型的频率均无显著增高 (P >0 .0 5)。但增生DR组 (n =17)较单纯DR组 (n =2 0 )D型等位基因和DD基因型的频率增高 (χ2 分别为 6 15、4 38,P <0 .0 5)。结论 :ACE基因I/D多态与 2型糖尿病视网膜病变无相关性 ,与某些患者早期发展为DR无关 ,与增生性视网膜病变有关。

2型糖尿病合并冠心病与血管紧张素转化酶I基因多态性的相关性及脂质代谢的研究

目的 :探讨 2型糖尿病 (DM)合并冠心病 (CHD)与血管紧张素转化酶 I(ACE)基因插入 /缺失 (I/ D)多态性的相关性及其各基因型血脂代谢情况。方法 :采用多聚酶链反应 (PCR)技术 ,对 32例广西地区汉族 2型 DM合并 CHD患者 ,88例 2型DM无合并 CHD患者及 10 0名汉族正常对照的 ACE基因 I/ D多态性及血脂进行检测。结果 :2型 DM合并 CHD组 ACE基因 D等位基因及 ID基因型发生频率高于正常对照组及无合并 CHD组 (P <0 .0 5 ) ;I等位基因及 II基因型频率低于正常对照组及无合并 CHD(P <0 .0 5 )。 2型 DM合并 CHD组 ID基因型组甘油三酯 (TG)及总胆固醇 (TC)高于正常对照组、DD基因型组及 II基因型组 ,高密度脂蛋白胆固醇 (HDL- C)低于正常对照组 ,低密度脂蛋白胆固醇 (L DL- C)高于正常对照组 (P <0 .0 5 ) ;2型 DM合并 CHD DD基因型组 TG、L DL- C及 TC高于正常对照组 (P <0 .0 5 )。结论 :1广西地区汉族 2型 DM合并 CHD与 ACE基因 I/ D多态性有关。 2 D等位基因及 ID基因型可能为 2型 DM合并 CHD的易感基因 ,I等位基因及 II基因型可能为 2型 DM合并 CHD的保护基因。 3广西地区汉族 2型 DM合并 CHD的 ID基因型者及

模拟胃液条件下广叶绣球菌多糖抗氧化及对血管紧张素Ⅰ转化酶抑制活性

测定广叶绣球菌(Sparassis latifolia)多糖(SLPs)的总糖含量和单糖组成,SLPs通过体外模拟胃液处理不同时间(0.5、1、2、4、6和8 h)的还原糖含量、相对分子质量、体外抗氧化活性和对血管紧张素Ⅰ转化酶(ACE)抑制率。结果表明:SLPs总糖含量为(59.66±0.80)%;单糖组成为甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖(摩尔比为1∶0.7∶10.9∶3.6)。与对照(0 h)比较,SLPs模拟胃液处理2 h后开始发生水解,随时间延长其还原糖含量显著增加。SLPs通过模拟胃液处理不同时间的色谱洗脱峰具有差异,0 h处理样品具有2个峰,0.5、1 h处理样品具有4个峰,处理2 h后的样品具有5个峰;在20~35 min均存在相对分子质量大于2.0×10^(6)多糖组分。与对照(0 h)比较,模拟胃液处理6、8 h的0.50、1.00 mg·mL^(-1) SLPs溶液,处理4、6、8 h的2.00、4.00 mg·mL^(-1) SLPs溶液对DPPH自由基清除率显著增加;处理4、6、8 h的0.50 mg·mL^(-1) SLPs溶液,处理2、4、6、8 h的1.00 mg·mL^(-1) SLPs溶液,处理6、8 h的2.00 mg·mL^(-1) SLPs溶液,处理4、6、8 h的4.00 mg·mL^(-1) SLPs溶液对·OH自由基清除率显著增加;处理4 h的0.25 mg·mL^(-1) SLPs溶液、处理2 h的0.50 mg·mL^(-1) SLPs溶液和处理8 h的2.00 mg·mL^(-1) SLPs溶液对ABTS+自由基清除率显著增加。与对照比较,处理1、2、6、8 h的0.25、0.50 mg·mL^(-1) SLPs溶液,处理2、4、6、8 h的1.00、2.00 mg·mL^(-1) SLPs溶液对ACE抑制率显著增加。研究结果可为SLPs体内代谢规律研究提供参考。

血管紧张素Ⅰ转化酶及血管紧张素Ⅱ受体1型基因多态性与糖尿病肾病的关联研究

目的探讨血管紧张素I转化酶（angiotensin converting enzyme，AcE）基因I／D多态性及血管紧张素Ⅱ受体1型（angiotensinⅡ type 1 receptor，AT1R）基因A1166C多态性与糖尿病肾病的关系。方法选择2013年4月至2015年10月在广东医科大学附属医院、东莞市塘厦医院和东莞市大朗医院住院2型糖尿病患者，研究对象分为2型糖尿病组（T2DM组）97例和正常对照组50例，其中T2DM组根据有无肾病分为52例糖尿病肾病（DN）组和45例糖尿病非肾病（非DN）组；采用标准的酚一氯仿一蛋白酶K法提取外周血DNA；分别用聚合酶链反应（PCR）技术、PCR-限制性片段长度多态性技术（PCR-RFLP5对ACEI／D、AT1RA1166C多态性进行检测。遗传平衡吻合度检验用Hardy-Weinberg平衡法。采用Y。检验分析基因多态性与DN的相关性。结果DN组和非DN组基线资料无统计学差异（P〉0．05）。经，检验，DN组DD基因型频率32．6％（17／52）明显高于非DN组DD基因型频率20．0％（9／45）（x^2=6．62，P〈0．05）；DN组D等位基因频率58．7％（61／104）明显高于非DN组D基因型频率41．1％（37／90）（x^2=5．94，P〈0．05）。DN组与非DN组AT1RA1166C各基因型分布频率无显著性差异（x^2=0．22，P〉0．05）；各等位基因频率分布亦无明显差异（x^2=0．21，P〉0．05）。对照组与T2DM组ACEI／D和AT1RA1166C基因多态的基因型分布和等位基因频率均无显著性差异（P〉0．05）。结论ACE基因I／D多态性与DN有关，携带DD基因型和D等位基因的T2DM患者是DN的易感人群。AT1R基因A1166C多态性与T2DM并发DN无关。

血管紧张素Ⅰ转化酶基因多态性与妊高征发生的相关研究

目的 探讨血管紧张素Ⅰ转化酶 (ACE)基因第 16内含子的插入 /缺失多态性与妊高征发生的关系。方法应用聚合酶链式反应 (PCR)技术 ,检测中国江西地区 10 0例汉族妊高征患者及对照组 10 0例正常孕妇ACE基因的第 16内含子是否有Alu重复序列存在。结果 妊高征组及对照组正常孕妇ACE基因的第 16内含子均有插入 /缺失多态性 ,分为II、ID、DD三种形态。两组中DD型、ID型Ⅱ型基因频率分别比较 ,D型、I型等位基因分别比较 ,均无显著性差异。结论 中国江西孕妇妊高征的发生可能与ACE基因中第 16内含子是否有Alu重复序列 (2 87bp)的插入

矽肺合并肺心病病人血管紧张素转化酶的变化及其临床意义

为探讨矽肺合并肺心病病人血管紧张素Ⅰ转化酶(ACE)的变化及其意义,我们测定了37例矽肺合并肺心病、32例慢性支气管炎、23例支气管哮喘(哮喘)病人的血清中ACE值,并与60例健康人比较,结果表明,矽肺合并肺心病组ACE为(18.86±10.93)U,慢性支气管炎组为(20.97±5.92)U,哮喘组为(23.96±9.67)U。这3组的测定值均低于对照组(29.31±7.31)U,差异有统计学意义(P<0.01)。矽肺合并肺心病PaO2<60 mmHg组,其ACE值明显低于PaO2>60 mmHg组,而PaCO2高于或低于50 mmHg组ACE值的差异无统计学意义。提示,ACE降低主要与缺氧有关,与二氧化碳潴留关系不大。肺心病合并多器官衰竭者ACE明显低于无多器官衰竭者,ACE可作为反映器官功能状态的非特异性生化指标。

肾素-血管紧张素系统基因多态性与老年人2型糖尿病冠心病的关系

目的 研究肾素 -血管紧张素系统 (RAS)中的Ⅰ型血管紧张素Ⅱ受体 (AT1R)基因A116 6C多态及血管紧张素Ⅰ转化酶 (ACE)基因插入 /缺失 (I/D)多态与中国汉族 2型糖尿病 (DM 2 )患者合并冠心病(CHD)的关系。方法 分别用PCR技术及PCR -Dde1酶切法检测 15 2例DM 2患者的ACE基因型及AT1R基因型。其中DM2合并CHD组 6 6例 ,无CHD组 86例。结果 DM2 -CHD组与无CHD组相比 ,AT1R基因型频率及等位基因频率均无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;DM 2 -CHD组ACEDD基因型频率 (5 1.5 %vs32 .2 % )和D型等位基因频率 (6 8.2 %vs 5 6 .3% )均显著升高 (P均 <0 .0 5 )。Logistic回归分析显示 :ACEDD基因型、BMI及血清总胆固醇水平升高是DM 2 -CHD发病的独立性危险因素 (P <0 .0 5 )。结论 AT1R基因A116 6C多态不参与DM2 -CHD的发病 ;ACE基因I/D多态与DM2 -CHD有关 ,在DM2患者中检测ACE基因I/D多态 ,可筛选CHD易感人群 ,进行发病前诊断和治疗。

海南黎族高血压人群血管紧张素Ⅰ转化酶基因多态性与血脂的关系

目的:观察血管紧张素Ⅰ转化酶(ACE)基因16内含子插入/缺失(I/D)多态性与海南黎族高血压人群血脂的关系。方法:根据血压的的正常与否,将研究对象分为对照组与高血压组;采血检测血脂水平,检测血中ACE基因16内含子I/D多态标记,分析各基因型与血脂关系。结果:2组之间DD、DI、II基因型频率及D、I等位基因频率均差异无统计学意义。高血压组各基因型之间血脂水平差异亦无统计学意义。结论:ACE基因I/D多态性与黎族高血压无显著关联;与黎族高血压患者血脂水平无明显相关。

膜法制备血红蛋白血管紧张素Ⅰ转化酶抑制肽

研究了猪血粉酶解及超滤法制备血管紧张素Ⅰ转化酶(ACE)抑制肽的工艺条件。首先将胃蛋白酶的猪血粉水解产物,依次通过30、10 ku和6 ku 3个截留分子质量(MWCO)的超滤膜,获得4组不同分子质量段(P-Ⅰ、P-Ⅱ、P-Ⅲ和P-Ⅳ)的血红蛋白多肽组分,质量浓度为1 mg/m L时,4个组分对ACE的抑制率分别为16.5%、21.7%、24.3%和55.6%。其次对抑制活性较低的3组分,分别用胰蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶进行二次酶解,底物浓度均为2.0%,酶与底物质量比1.0%,根据ACE抑制率,分别确定各组分的二次酶解条件,结果显示P-Ⅰ、P-Ⅱ使用碱性蛋白酶酶解1 h时活性最强,P-Ⅲ使用中性蛋白酶酶解5 h时活性最强,得出结论血红蛋白二次酶解使水解产物的活性增强,且蛋白酶水解与膜分离的工艺适合于工业化生产。

铜蓝蛋白与脂质过氧化产物和血管紧张素Ⅰ转化酶与矽肺的关系研究

目的探讨矽肺患者血清铜蓝蛋白(ceruloplasmin,CP)、脂质过氧化产物(lipid peroxide,LPO)和血管紧张素Ⅰ转化酶(angiotensin Ⅰ converting enzyme,ACE)水平及意义。方法回顾性分析2016年1月至2018年12月浙江省医疗健康集团长兴医院治疗的矽肺患者72例(观察组),其中矽肺Ⅰ期20例,Ⅱ期36例,Ⅲ期16例,同时选取与观察组相同接尘条件的工人60例(对照组),非接尘健康体检者60例(健康组),检测各组血清CP、LPO和ACE水平。结果观察组血清CP(3087.55±542.31)U/L,高于对照组和健康组,差异有统计学意义(t=8.121、10.124,P<0.05),而ACE(17.42±3.11)U,低于对照组和健康组,差异有统计学意义(t=6.511、8.124,P<0.05);观察组血清LPO(7.80±1.20)mol/L,高于健康组,差异有统计学意义(t=6.031,P<0.05),与对照组比较差异无统计学意义(t=1.541,P>0.05);Ⅲ期患者血清LPO高于Ⅰ期、Ⅱ期患者,差异有统计学意义(t=5.154、8.122,P<0.05),而ACE低于Ⅰ期、Ⅱ期患者,差异有统计学意义(t=6.031、9.151,P<0.05);Ⅲ期患者血清CP高于Ⅰ期患者,差异有统计学意义(t=4.551,P<0.05),而与Ⅱ期患者比较差异无统计学意义(t=1.034,P>0.05);Ⅱ期患者血清LPO高于Ⅰ期,差异有统计学意义(t=5.021,P<0.05),而ACE低于Ⅰ期患者(t=4.811,P<0.05);LPO与病情分期呈正相关(rs=0.341,P<0.05),ACE与病情分期呈负相关(rs=-0.315,P<0.05)。结论矽肺患者血清CP、LPO水平升高,而ACE水平降低,其中LPO、ACE与患者病情分期有一定相关性。

丹参抑制异丙肾上腺素引起的小鼠心肌肥厚和纤维化及其作用机制

目的 :探讨丹参对心肌肥厚和纤维化的影响及作用机制 ;方法 :异丙肾上腺素皮下注射致小鼠心肌肥厚和纤维化模型 ,并观察经依那普利 (10mg/kg·d-1 )和丹参 (5,10g/kg·d-1 )治疗后 ,对小鼠的左心室重量 ,组织形态 ,血清、心、肾组织中的血管紧张素Ⅰ转化酶 (ACE)活性、一氧化氮 (NO)含量及羟脯氨酸 (Hyp)含量的影响 ;结果 :与对照组比较 ,模型组心脏重量增加 ,出现纤维化病变 ,心、肾中的ACE活性增高 ,NO含量减少 ,而依那普利组和丹参高低剂量组与模型组相比 ,心肌肥厚和纤维化病变减轻 ,心、肾中的ACE含量降低 ,丹参高低剂量组在血清中的NO含量显著增高 ;结论 :丹参有良好的抗心脏纤维化作用 ,该作用可能与其抑制ACE和增加NO含量有关。

川崎病冠状动脉损害高危因素的研究

目的从Kobayashi评分体系及血管紧张素Ⅰ转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)基因多态性两方面探讨川崎病(Kawasaki Disease,KD)患儿的冠状动脉损害的高危因素。方法住院川崎病患儿137例,其中无冠脉损害120例,有冠脉损害为17例。根据Kobayashi等提出的最新的川崎病并发冠状动脉损害的高危评分指标对患儿的临床资料进行统计学分析;选取其中的37例川崎病患儿(其中8例有冠状动脉损害)和37名健康儿童,用PCR方法检测其外周血ACE基因多态性,并进行统计学分析。结果Kobayashi评分体系各单项临床指标在冠脉损害组和无冠脉损害组比较差异无统计学意义(P>0.05);冠脉损害组Kobayashi总评分为1.75±1.65,无冠脉损害组为1.66±1.55,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。ACE各基因型(II、DD、ID)在冠脉损害组和无冠脉损害组、川崎病组和对照组之间比较差异无统计学意义(P>0.05);Ⅰ等位基因频率在冠脉损害组中明显高于无冠脉损害组(75.0%比44.8%),差异有统计学意义(P<0.05)。Kobayashi各单项指标在ACE各基因型之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论川崎病冠脉损害组和无冠脉损害组Kobayashi各单项指标及总评分差异相似;ACE的Ⅰ/D基因多态性可能与川崎病并发冠脉损害有关。

ACE基因多态性在心血管疾病中的作用

血管紧张素Ⅰ转化酶（ACE）是肾素血管紧张素醛固酮系统（RAAS）的重要成分,在血管张力的调节和血管平滑肌细胞的增生中起重要作用,直接影响动脉粥样硬化过程[1].血液中ACE水平与ACE基因有密切关系,ACE基因多态性可能是冠心病、心肌病、高血压等多种心血管疾病发病的独立危险因素.

荞麦花叶总黄酮对去甲肾上腺素所致大鼠心肌肥厚的保护作用

目的研究荞麦花叶总黄酮(TFBFL)对去甲肾上腺素(NE)所致大鼠心肌肥厚的保护作用并探讨其可能机制。方法腹腔注射NE建立大鼠心肌肥厚模型,以TFBFL100,200,400mg/(kg·d)和阳性药物卡托普利(CAP)50mg/(kg·d)灌胃给药15d。计算左心室肥厚指数(LVWI:LVW/BW),和心重指数(HWI:HW/BW,LVW/HW)。采用HE染色法,观察心肌组织及其间质的组织形态学变化。并取大鼠左室心肌上清液用分光光度法检测血管紧张素Ⅰ转化酶(ACE)含量。结果与肥厚模型组比,TFBFL能降低LVWI和HWI,改善心肌病理变化。且可不同程度的降低压力负荷后左室心肌ACE的含量,400mg/(kg·d)组与阳性药物CAP组治疗效果相近。结论TFBFL对NE所致大鼠心肌肥厚具有逆转保护作用,其机制可能是拮抗了ACE。

心血管活性肽Apelin生物学功能研究进展

G蛋白偶联受体是指一大类与G蛋白偶联并参与和介导细胞外信号传递的跨膜蛋白,信号传导过程中与受体偶联的物质称为配体,对于不清楚内源性配体物质的G蛋白偶联受体称为孤儿G蛋白偶联受体。血管紧张素受体样受体是一种孤儿G蛋白偶联受体。其内源性配体Apelin新近从牛胃抽提液中被分离出来,现发现apelin的功能涉及心血管系统,中枢神经系统,免疫系统等。Apelin在血管紧张素Ⅰ转化酶的同源酶血管紧张素Ⅰ转化酶2的作用下有活性形式转变成无活性的形式。现对apelin在心血管系统以及以其它众多生物学功能研究进展作一综述。

肾血管性高血压大鼠血管和肾脏组织中RSA组分蛋白表达的性别差异性研究

目的研究性别对肾血管性高血压大鼠血管及肾脏组织中血管紧张素Ⅰ转化酶(ACE_1)、ACE_2、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的1型受体(AT_1)、2型受体(AT_2)蛋白表达的影响。方法取80只10周龄健康无特定病原级(SPF)Sprague-Dawley(SD)大鼠,雌雄各半,随机分为4组,分别为雄性假手术(2K1C-sham-M)组、雄性手术(2K1C-M)组、雌性手术(2K1C-F)组和雌性去势手术(2K1C-OVX)组,每组20只。狭窄一侧肾动脉制备肾血管性高血压模型(2K1C),20只雌性大鼠完成2K1C手术后,摘除双侧卵巢建立雌激素低下模型(OVX),常规喂养32 w。麻醉状态下颈动脉插管测定大鼠血压,经血压测定符合要求的者,迅速取胸主动脉和肾脏组织置液氮速冻,组织提取蛋白质,用蛋白质印迹法(Western blot法)检测组织中ACE_1、ACE_2、AT_1和AT_2的蛋白表达。结果在血管组织中,与2K1C-sham-M组比较,2K1C-M组和2K1C-F组ACE的蛋白表达升高(P<0.05);2K1C-F组ACE的蛋白表达高于2K1C-M组(P<0.05)。2K1C-OVX组和2K1C-F组ACE_2蛋白表达升高(P<0.05);与2K1C-M组比较,2K1C-F组和2K1C-OVX组AT_1受体的蛋白表达则减少(P<0.05)。2K1C组中AT_2受体的蛋白表增加(P<0.05)。在肾组织中,与2K1C-sham-M组比较,2K1C-F组ACE蛋白的表达升高(P<0.05);2K1C-F组AT_1受体的蛋白表达减少(P<0.05);2K1C-F组AT_2受体的蛋白表达减少(P<0.05)。结论肾血管性高血压大鼠血管及肾脏组织中RAS蛋白表达存在性别差异性,2K1C-F组大鼠的血管及肾脏组织中ACE蛋白升高,AT_1受体蛋白表达低于2K1CM组。